CD4+与CD25+调节性T细胞对直肠癌过继免疫治疗效应细胞的影响

①目的 探讨CD4+与CD25+调节性T细胞(Treg)在直肠癌过继免疫治疗中对免疫杀伤细胞的负性调节作用.②方法 利用流式细胞仪分别检测15例直肠癌患者和健康志愿者外周血中CD4+与CD25+调节性T细胞的含量;同时观察各实验组CTL对肿瘤细胞的杀伤效应.③结果 直肠癌患者外周血中CD4+与CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞总数的(11.12±0.57)%,显著高于健康对照组的(8.77±0.66)%(t=2.687,P=0.012);去除Tmg细胞后诱导产生的抗原特异性CTL对靶细胞的杀伤效率为(33.74±4.42)%,显著高于未去除Treg细胞的对照组CTL的杀伤效率(17.39±2.54)%(t=3.206,P=0.0034).④结论 直肠癌患者外周血中调节性T细胞含量明显增高,并且时肿瘤抗原诱导的CTL的免疫杀伤功能具有明显抑制作用.     

慢性乙型肝炎患者外周血CD4+CD25+CD127low/- 调节性T细胞的检测及意义

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血中调节性T细胞(Treg)的比例变化及其与肝损伤的相关性.方法 用流式细胞术检测40例CHB患者和40例健康对照者外周血CD4+T细胞中CD4+CD25+CD127low/- T细胞的比例,同时用全自动生化分析仪测定其血清中ALT水平.结果 CHB患者组外周血Treg细胞比例及血清ALT水平明显高于健康对照组(P均<0.01);且CHB患者组外周血Treg细胞比例与血清ALT水平呈显著正相关(r=0.739,P<0.01).结论 Treg细胞在CHB患者外周血中的比例增高,且与肝脏的损伤程度有关.     

CD4+CD25+调节性T细胞对直肠癌过继免疫治疗效应细胞的影响和作用

目的 探讨CD4+CD25+调节性T细胞（Treg）在直肠癌过继免疫治疗中对免疫杀伤细胞的负性调节作用。方法 利用流式细胞仪分别检测15例直肠癌患者和健康志愿者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的含量；分离提取直肠癌患者外周血CD4+T细胞，免疫磁珠法去除 CD4+CD25+调节性T细胞，同灭活的LOVO直肠癌细胞珠共培养并扩增为肿瘤抗原特异性CTL，以LOVO细胞为靶细胞行肿瘤杀伤实验，观察各实验组CTL对肿瘤细胞的杀伤效应。结果 直肠癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占CD4+T细胞总数的（11.12±0.57）%，显著高于健康对照组（8.77±0.66）%（t=2.687，P＝0.012）；去除Treg细胞后诱导产生的抗原特异性CTL对靶细胞的杀伤效率为（33.74±4.42）%，显著高于未去除Treg细胞的对照组CTL的杀伤效率[(17.39±2.54)%; t=3.206, P=0.0034]。结论　直肠癌患者外周血中调节性T细胞含量明显增高，并且对肿瘤抗原诱导的CTL的免疫杀伤功能具有明显抑制作用。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞及其在肝病的研究进展

调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)是机体内具有免疫抑制功能的一类T细胞亚群。调节性T细胞在包括感染、肿瘤、自身免疫性疾病等在内的多种疾病有密切关系。CD4+CD25+Treg是一群专职Treg,是多种疾病研究的热点之一。本文主要就CD4+CD25+Treg的来源、分类、功能、免疫表型及其在肝病领域的研究进行综述。     

慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎肝硬化患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的水平及意义

目的测定慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎肝硬化患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)的水平并探讨其意义。方法流式细胞术检测12例慢性乙型病毒性肝炎患者,15例乙型病毒性肝炎后肝硬化患者和6例健康对照者外周血中CD4+CD25+Treg的频率。结果 12例慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中CD4+CD25+Treg占CD4+淋巴细胞的比例为(12.21±1.46)%,15例慢性乙型病毒性肝炎后肝硬化患者外周血中CD4+CD25+Treg占CD4+淋巴细胞的比例为(11.36±1.06)%,与6例健康对照组(9.86±1.00)%相比差异有显著性(P<0.05),慢性乙型病毒性肝炎与慢性乙型病毒性肝炎后肝硬化组间比较差异无显著性(P>0.05)。结论 Treg与CHB患者持续HBV感染密切相关,而是否参与乙肝后肝硬化的发病机制有待进一步研究。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞数量与肝脏疾病慢性化进展关系的研究

目的探讨慢性乙型肝炎患者(chornic hepatitis B,CHB)外周血中CD4+CD 25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)的数量与肝脏慢性疾病进展的关系。方法流式细胞术检测抗病毒治疗后45例CHB患者(根据B超将其分为3组,其中B超提示肝脏无异常改变的单纯CHB组15例,提示慢性肝病改变的CHB慢性肝病组15例,提示肝硬化改变的CHB肝硬化组15例)与B超均提示肝脏无异常改变的15例慢性乙型肝炎病毒携带者(asymptomic HBV carriers,ASCs)以及15例健康成年人(normal control,NC)对照外周血中CD4+CD25+Treg的变化,并分析Treg与患者年龄,HBeAg定量,ALT、AST、TGF-β1水平的相关性。结果外周血中CD4+CD25+Treg占CD4+淋巴细胞的比例在抗病毒治疗后单纯CHB组为(4.03±1.36)%,与NC组(4.02±1.14)%相比差异无显著性(t=0.0223,P>0.05),与ASCs组(5.26±1.25)%相比显著减少(t=-2.2872,P<0.05);CHB慢性肝病组为(5.65±2.01)%,CHB肝硬化组为(5.32±1.47)%,与NC组、单纯CHB组比显著增高(t值分别为3.0351、3.0129、2.4269、2.4046,均P<0.05)与ASCs组相比差异无显著性(t值分别为0.7257、0.1174,均P>0.05);CHB慢性肝病、肝硬化组间相比差异无显著性(t=0.6083,P>0.05)。Treg的数量与年龄、AST、TGF-β1水平呈正相关(r分别为0.327、0.324、0.306,P分别为0.004、0.005、0.008)。结论 Treg在低水平AST时CHB患者外周血中的数量的增高对抗病毒治疗后的CHB患者更能反映其肝脏慢性损伤程度,Treg可能参与了慢性HBV感染后肝脏疾病慢性化进展的过程。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD+4CD+25调节性T细胞与转化生长因子β1水平变化及其意义

目的 探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD+4CD+25调节性T细胞(tregulatory cell,Treg)、转化生长因子β1(transforming growth factor β1, TGF-β1)水平变化及临床意义.方法 选择105例CHB患者为病例组,其中依患者病情分为轻、中、重度组;选择26例健康体检正常者为对照组.用流式细胞仪检测外周血中Treg表达水平;用双抗夹心ELISA法检测血清TGF-β1;用PCR法检测患者HBV-DNA载量.结果 CHB患者组Treg、TGF-β1水平明显高于对照组,差异均有统计学意义.Treg水平与TGF-β1水平呈正相关.结论 CHB患者Treg、TGF-β1表达增加,提示Treg、TGF-β1在CHB中担负着重要的免疫调节作用,可能抑制CHB患者特异性细胞免疫反应,与HBV感染的慢性化及肝病的临床发生、发展有关.     

初发系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25+调节性 T细胞和TGF-β1含量

  【目的】 了解初发系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞和TGF-β1在SLE发病中的作用。 【方法】 流式细胞仪检测25例初发未治疗的SLE患者和15例健康对照者外周血单个核细胞中CD4+CD25+、CD4+CD25+ Foxp3+调节性T细胞占CD4+ T 细胞的百分比,ELISA检测血清中TGF-β1含量。【结果】 SLE患者PBMC中CD4+CD25+ T细胞、CD4+CD25+Foxp3+ T细胞占CD4+ T细胞百分比均较健康对照组明显减少(分别为7.9 ± 2.2 vs 12.5 ± 5.3和2.1 ± 1.1 vs 4.0 ± 1.8,P < 0.05)。SLE患者血清中TGF-β1含量(pg/mL)低于健康对照组(214 ± 48 vs 419 ± 85,P < 0.05)。SLE患者PBMC中CD4+CD25+ T细胞?CD4+CD25+Foxp3+ T细胞占CD4+ T细胞的百分比以及血清TGF-β1的含量均与病情活动指数(DAI)成负相关(r分别 = -0.68?-0.56?-0.53, P < 0.05),但各型T细胞占CD4+ T细胞的百分比与血清TGF-β1的含量之间相关分析均无统计学意义。 【结论】 Treg与TGF-β1参与SLE的发病,两者均可作为病情活动的观察指标。且血清TGF-β1的含量与Treg占CD4+ T细胞的百分比在SLE中的下降趋势一致,提示两者之间存在一定的联系,推测是TGF-β1的不足导致Treg的生成减少。     

CD4~+CD25~+调节性T细胞在HBV宫内感染的表达及意义

目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)在HBV宫内感染者血液中的表达及意义。方法:流式细胞技术检测157例乙肝大三阳但肝功能正常孕产妇外周血、其分娩新生儿脐血、HBV宫内感染婴幼儿外周血中CD4+CD25+Treg表达水平。结果:HBV宫内感染产妇外周血及新生儿脐血中CD4+CD25+Treg的百分数较未感染组高(P<0.05);HBV持续感染者CD4+CD25+Treg比例较感染转阴组高(P<0.05)。结论:CD4+CD25+Treg抑制体内HBV清除,宫内感染与其表达上调有关。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的表达水平及临床意义

目的：观察抗病毒治疗前的慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血CD4⁺CD25^high调节性T细胞（Treg）和CD4⁺CD25⁺CD127^low/-reg百分比和临床指标的相关性。方法：分离28例CHB患者和24例健康对照的外周血单个核细胞(PBMC),以三色流式分析法分别对CD4⁺CD25^highTreg和CD4⁺CD25⁺CD127^low/-Treg进行分析。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb和HBcAb,实时荧光定量RT-PCR检测血清HBV DNA载量,同时进行肝功能检测。结果：CHB组CD4⁺CD25^highTreg和CD4⁺CD25⁺CD127^low/-Treg占CD4⁺T细胞的百分比分别为 3.36%±2.59% 和 4.05%±1.63% ,均高于正常对照组（1.60%±0.66%和1.75%±0.83%,P<0.01）。ALT大于100 U•L^-1的患者中CD4⁺CD25^highTreg占CD4⁺T淋巴细胞的百分比（4.26%±3.10%）高于ALT小于100U•L^-1的患者（2.52%±2.72% ,P<0.05）。CD4⁺CD25^highTreg占CD4⁺T淋巴细胞的百分比与ALT水平呈正相关（r=0.44,P<0.05）。结论：CHB患者体内CD4⁺CD25⁺Treg的升高可能抑制细胞免疫反应,影响病毒清除。CD25高表达水平易受转氨酶水平的影响,CD127用来作为调节性T细胞的鉴定更为可靠。     

CD4+CD25+调节性T细胞在过敏性哮喘和无症状的过敏者中表达的差异

目的:比较过敏性哮喘患者、无症状的过敏者和不过敏的健康人外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)数量的差异及对特异性过敏原刺激的反应.方法:选取急性发作期的尘螨过敏性哮喘患者20例,无症状的尘螨过敏者24例,不过敏的健康人22例,分离外周血单个核细胞(PBMC)并进行CFSE染色,分别在不刺激和1mg/L尘螨抗...     

Association of T regulatory cells with natural course and response to treatment with interferon-α in patients with chronic hepatitis B infection

Background  Regulatory T cell populations, particularly CD4⁺CD25⁺ T regulatory cells, have been implicated in the persistence of hepatitis B virus (HBV) infection. However, no clear relationship has been established between the frequency of CD4⁺CD25⁺ T regulatory cells in the peripheral blood and either the disease phases in the natural history of chronic HBV infection or in the response to interferon-α therapy.

Methods  In the present study, three different common markers of CD4⁺CD25⁺ T regulatory cells were used to determine the numbers of T regulatory cells in healthy controls and in patients with chronic HBV infection.

Results  No significant difference was found when samples were gated for CD25^hi and CD25⁺FoxP3⁺ T cells. A significant correlation was found between the number of CD4⁺ Treg cells that gated with CD25⁺FoxP3⁺ and CD25⁺CD127^low/- in healthy controls and in patients with chronic hepatitis B (CHB) (r=0.67, 0.59; P <0.01). The percentages of Treg cells were (8.56±2.01)% in asymptomatic carriers (Asc), (8.74±3.04)% in inactive HBsAg carriers, (10.7±2.93)% in CHB and (7.42±1.28)% in healthy controls (F=11.1, P <0.001). The percentage of Treg cells in patients with CHB was higher than in asymptomatic HBV patients, inactive HBsAg carriers, or healthy controls (P <0.01). The proportion of CD4⁺CD25⁺CD127^low/- T cells in patients who responded to interferon-α was (11.9±3.3)%, (9.1±2.4)% and (9.0±2.9)% at baseline, week 12 and week 24 after treatment, respectively (Z=2.42, P <0.05; Z=2.67, P <0.01).

Conclusions  These results suggest that the proportion of the CD4⁺CD25⁺ regulatory T cells might be affected by the application of different markers in process to detect T regulatory cells. The frequency of Treg cells was increased in patients with CHB, which might be associated with the disease activity of these patients and contribute to prevention of extensive liver damage. A decline in Treg cells at week 12 of treatment might be associated with a better response to treatment with interferon-α.

     

慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎肝硬化患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的水平及意义

目的测定慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎肝硬化患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞（Treg）的水平并探讨其意义。方法流式细胞术检测12例慢性乙型病毒性肝炎患者,15例乙型病毒性肝炎后肝硬化患者和6例缝康对照者外周血巾CD4＋CD25＋Treg的频率。结果12例慢性乙型病毒性肝炎患者外周血中CD4＋CD25＋Treg占CD4＋淋巴细胞的比例为（12．21±1．46）％,15例慢性乙型病毒性肝炎后肝硬化患者外周血中CD4＋CD25＋Treg占CD4＋淋巴细胞的比例为（11．36±1．06）％,与6例健康对照组（9．86±1．00）％相比差异有显著性（P〈0．05）,慢性乙型病毒性肝炎与慢性乙型病毒性肝炎后肝硬化组间比较差异无显著性（P〉0．05）。结论Treg与CHB患者持续HBV感染密切相关,而是否参与乙肝后肝硬化的发病机制有待进一步研究。     

Involvement of CD4^＋CD25^＋ regulatory T cells in the pathogenesis of polycythaemia vera

Background Regulatory T cells （mreg） have been shown to play an important role in the regulation of hematopoietic activity. However, there is no information about the effect of Treg cells in the pathogenesis of polycythaemia vera （PV）. Methods In this study, we investigated the percentage and function of Treg cells in the peripheral blood of 21 PV patients and 25 healthy donors, mreg cells were identified and characterized as CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋ by flow cytometry. The suppressive activity of CD4^＋CD25^＋ Treg cells was assessed by the proliferation and cytokine secretion of the co-cultured CD4^＋CD25^- fractions. Results The results showed that the percentage of Treg cells in the peripheral blood of PV patients significantly increased compared to healthy controls （（10.93±4.02）% vs （5.86±1.99）%, P 〈0.05）. Moreover, the mRNA and protein expression of FOXP3 was higher in CD4^＋CD25^＋ Treg cells. Coordinately, when co-cultured with the activated CD4^＋CD25^- cells, the CD4^＋CD25^＋ Treg cells showed enhanced suppressive function in PV. Yet, the underlying mechanism for the increased frequency and function of CD4^＋CD25^＋ Treg cells is still to be clarified. Conclusion Treg cells expansion might account for the abnormal T cell immunity in PV patients and thus contribute to the pathogenesis of PV.     

胃癌手术前后外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及临床意义

目的：检测CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）在胃癌手术前后外周血中的变化,探讨Treg在肿瘤免疫中的作用。方法：收集初治胃癌患者38例作为研究对象,同时收集20例健康人外周血作为正常对照组。检测手术前3d和手术后14d外周血中CD4^＋CD25^＋Treg比例及T细胞亚群,将各检测结果结合临床、病理指标进行统计学分析。结果：胃癌患者术前外周血中Treg比例显著高于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。胃癌患者术前外周血CD8^＋T细胞比例明显低于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。术前外周血CD8^＋T细胞比例与Treg比例呈负相关（P〈0．05）。胃癌患者术前外周血中Treg比例在不同淋巴结转移情况和TNM分期之间差异具有统计学意义（P〈0．05）,其与淋巴结转移和TNM分期呈正相关（P〈0．01）。胃癌患者手术后Treg比例较术前下降,且下降程度与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、分化程度、病理分型以及手术方式无相关性。结论：Treg可能通过抑制CD8^＋T细胞的增殖及功能,促进肿瘤细胞的生长和发展。Treg与肿瘤的侵袭、淋巴结转移有关,提示Treg在一定程度上可作为检测疾病进展的免疫学指标。     

重症肌无力患者外周血CD4+ CD25+调节性T细胞与抗乙酰胆碱受体抗体和转化生长因子β1含量的相关性

目的 探讨重症肌无力(MG)患者外周血CD4+CD25+调节性T(Treg)细胞数量与血清抗乙酰胆碱受体抗体(AChR-Ab)和转化生长因子(TGF)-β1含量的相关性.方法 前瞻性地纳入40例新近发病或加重的MG住院患者和38名年龄、性别匹配的健康对照,应用流式细胞仪检测外周血CD4+ CD25+ Treg细胞数量,酶联免疫法检测血清TGF-β1含量,放免法检测血清AChR-Ab滴度,并对三者进行了相关性分析.结果 MG患者外周血CD4+CD25+Treg细胞百分率(3.0%±2.5%)显著低于健康对照(4.6%±3.7%,P=0.03).发病晚、病程长、抗AChR-Ab阳性、胸腺正常或退化以及未接受胸腺切除治疗等因素与MG患者CD4+CD25+Treg细胞减低有关.在31例非胸腺瘤MG(non-MGT)患者中,血清TGF-β1含量(112 ng/L±83 ng/L)显著低于健康对照(215 ng/L±134 ng/L,P=0.00),但在MG各临床亚型之间差异无统计学意义.虽然MG患者CD4+ CD25+Treg细胞百分率与血清AChR-Ab滴度不呈线性相关,但在非MGT患者中二者呈负相关(r=-0.37,P=0.02).非MGT患者血清AChR-Ab滴度还与Osserman临床分型和MGFA评分之间呈正相关(均r=0.34,P=0.03).非MGT患者血清TGF-β1含量与美国MG协会(MGFA)评分和CD4+CD25+Treg细胞百分率无相关性.结论 MG患者外周血CD4+CD25+Treg细胞百分率和血清TGF-β1含量均明显低于健康对照,可能参与了MG的发病.非MGT患者中Treg细胞百分率与AChR-Ab滴度呈负相关,检测其水平可能对评估MG病情及治疗提供理论依据,但是应用于临床还需要更多的相关研究.     

CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞在系统性红斑狼疮活动期患者中的表达

目的 检测调节性T细胞(Treg)的新旧标志,进一步探讨Treg细胞在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的作用.方法 采用三色直接荧光素标记法和多参数流式细胞术检测29例SLE患者及24例正常对照组外周血CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞、CD4+ CD25highT细胞及CD4+ CD25+FOXP3+T细胞的比例,同时检测外周血抗dsDNA等抗体及免疫球蛋白、补体等水平并进行相关分析.结果 SLE患者外周血CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞与正常对照组差异无统计学意义(P＞0.05),CD4+ CD25+ FOXP3+T细胞[(2.1±1.2)%]及CD4+ CD25highT细胞[(0.8 ±0.4)%]与正常对照组[(1.8±0.8)%及(4.0±1.4)%]比较差异有统计学意义(P＜0.01);SLE组3种细胞占CD4+ CD25+T细胞的比例均明显低于正常对照组(均P＜0.01),CD4+ CD25+ CD127low/-T细胞、CD4+CD25+ FOXP3+T细胞及CD4+ CD25highT细胞分别占CD4+ CD25+T细胞的比例及与年龄、性别和病程,IgG、IgA、IgM、尿蛋白,24 h蛋白尿,抗dsDNA、抗Clq、抗核小体抗体水平均无相关性(均P＞0.05);但其与SLEDAI评分均存在负相关(P＜0.05).仅CD+ CD25+ GD127low/-T细胞/CD+ CD25+T细胞与补体C4存在明显的负相关(P＜0.01).结论 Treg细胞与活化的CD4+T细胞的相对比例可能在SLE的发病中起到重要作用.