妊娠期高血压疾病妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达分析

目的 分析妊娠期高血压疾病(PIH)妇女外周血调节性T细胞和辅助性T细胞表达变化。方法 连续选择近期住院确诊的PIH 妇女27例(PIH组),入选对象均接受了外周血调节性T细胞(CD+4CD+25 Treg 和CD+4CD+25 Foxp3+Treg)和辅助性T细胞(CD+3、CD+4、CD+8、CD+4/CD+8)检测,并与同期住院正常怀孕产妇 (对照组,20例)相同测试结果进行比较。结果 调节性T细胞数据中,PIH组血清CD+4CD+25 Treg和CD+4CD+25 Foxp3+ Treg水平明显低于对照组(P均<0.05～0.01)。辅助性T细胞中,PIH组血清CD+4/CD+8表达水平明显高于对照组,而CD+8表达水平则显著低于对照组(P均<0.05～0.01)。结论 PIH患者存在明确的外周血调节性T细胞和辅助性T细胞异常表达。     

慢性湿疹患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的检测

目的 研究外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Treg细胞）数量改变所致的细胞免疫抑制效应在慢性湿疹发病机制中的作用.方法 采用免疫荧光标染技术,经流式细胞仪检测30例慢性湿疹患者和33例正常人外周血CD4^＋CD25^＋T细胞数量及胞内转录因子Foxp3（forkhead box p3）表达水平.结果 慢性湿疹患者外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg细胞数量比正常人对照组明显下降（P＜0.001）.结论 慢性湿疹患者外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞数量下降导致参与IV型变态反应的效应性T细胞功能活性增强,这可能是湿疹发病机制之一.     

宫颈癌人乳头瘤病毒感染与CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞的相关性研究

目的探讨宫颈癌人乳头瘤病毒（HPV）感染与T细胞亚群、CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（Treg）的相关性。方法采用HPV核酸扩增分型检测试剂盒及流式细胞术检测宫颈癌组（40例）、正常对照组（20例）的HPV分型和外周血中T细胞亚群及CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg的百分率。结果HPV阳性的患者外周血T细胞亚群与HPV阴性的患者比较,差异无统计学意义（P〉O．05）,但调节性T细胞（Treg）在HPV阳性与阴性组之间比较,差异有统计学意义（P〈O．05）。宫颈癌组外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg的百分率与正常对照组比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。HPV与CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg细胞呈显著正相关（r=0．613,P〈O．05）。结论宫颈癌患者免疫功能与正常人无明显差异,Treg细胞与宫颈癌患者HPV持续感染、肿瘤免疫逃避密切相关。     

维生素A和布地奈德对哮喘大鼠外周血T细胞亚群和调节性T细胞的影响

目的：探讨维生素A（Vit A）和布地奈德对哮喘大鼠外周血T细胞亚群和CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋regulatory Tcell,CD4＋CD25＋Treg）的影响,为其在哮喘防治中的应用提供实验依据。方法：将42只SD大鼠用卵蛋白建立哮喘模型,随机分成布地奈德治疗组、Vit A治疗组和哮喘对照组,每组各14只,各组干预1周,于第4周和第5周取外周血50μl,流式细胞术检测T细胞亚群及Treg细胞变化。结果：激发后第4周,Vit A组CD3＋T细胞、CD4＋CD25＋Treg细胞显著高于布地奈德组（P〈0.05）,CD3＋CD8＋T细胞均低于布地奈德组（P〈0.05）;布地奈德组CD4＋CD25＋Treg细胞显著低于哮喘组（P〈0.01）;激发后第5周,布地奈德组CD4＋CD25＋Treg细胞低于哮喘组（P〈0.05）。结论：雾化吸入Vit A可减轻哮喘大鼠炎症反应,这一作用可能与哮喘大鼠外周血CD3＋T细胞和CD4＋CD25＋Treg细胞升高、CD8＋T细胞降低有关。     

慢性乙肝患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞的检测及临床意义

目的 探讨自身抗体阳性慢性乙肝（CHB）患者外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（Treg）的特点.方法 自身抗体阳性的CHB患者20例、自身抗体阴性的CHB 20例、自身免疫性肝炎15例.用斑点免疫层析法检测其抗单链DNA抗体（ss-DNA）、抗双链DNA抗体（ds-DNA）、抗核抗体（ANA）、可提取核抗原抗体谱（ENA）、抗线粒体IgM抗体（AMA）.流式细胞术检测外周血中的CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞比例,并与20例正常人对照组的上述指标进行比较.结果 自身抗体阳性CHB组CD4＋CD25＋T细胞较正常人无减低（P＞0.05）,但CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞显著降低（P＜0.05）;与自身抗体阳性CHB比较,自身抗体阴性CHB组CD4＋CD25＋T细胞和CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞均显著升高（P＜0.05）,而自身免疫性肝炎情况则相反.结论 自身抗体阳性CHB患者Treg细胞功能较正常人显著降低,而且比自身抗体阴性CHB患者的Treg细胞数量及功能均偏低.这可能是自身抗体阳性CHB病情较重、反复发作的原因之一.     

CD4＋CD25＋调节性T细胞及其相关基因Foxp3在非小细胞肺癌患者外周血中的变化

目的:探讨非小细胞肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)数量变化及其相关基因Foxp3 mRNA的表达改变.探讨CD4+CD25+调节性T细胞在诱导肿瘤免疫耐受中的作用.方法:采用流式细胞术检测患者外周血中CD4%D25+调节性T细胞数量变化:采用半定量RT-PCR方法检测肺癌患者外周血PBMC中Foxp3 mRNA的表达水平.选取30名非肿瘤患者作为对照.结果:肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量明显高于正常组(P＜0.05);Foxp3 mRNA在肺鳞癌和肺腺癌患者外周血PBMC中的表达明显增强(P＜0.05).结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能在肺癌免疫耐受中发挥重要作用.     

哈萨克族食管癌外周血CD4＋CD2~＋Foxp3＋调节性T细胞与TGF-β1、IL-10的相关性研究

目的探讨哈萨克族食管癌患者外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Foxp3＋regulatory Tcells,Treg）的变化,及与转化生长因子-β1（TGF-β1）、白细胞介素-10（IL-10）表达水平的相关性。方法采用流式细胞术检测40例食管癌患者及26例健康体检者外周血单个核细胞（PBMCs）中CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞占CD4＋T细胞的比例;采用ELISA法检测血清中TGF-β1、IL-10表达水平。结果哈萨克族食管癌患者外周血中CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比例、TGF-β1和IL-10表达水平分别为（7.50±1.94）%、（46.41±11.12）μg/ml、（48.10±13.49）pg/ml,高于对照组（5.04±0.92）%、（35.21±7.46）μg/ml、（33.78±7.31）pg/ml（P〈0.05）。TNM分期Ⅰ~Ⅱ期者与Ⅲ~Ⅳ期者Treg细胞比例及TGF-β1、IL-10表达水平差异有统计学意义（P〈0.05）;TGF-β1、IL-10表达水平与CD4＋CD25＋Foxp3＋T细胞比例明显相关（P〈0.01）。结论检测CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞比例对于判断食管癌的病期有一定价值。TGF-β1、IL-10的表达水平明显升高,可能参与Treg细胞对机体的免疫负调节机制。     

成人微小病变肾病患者外周血CD4~＋Foxp3~＋调节性T细胞的研究

目的研究CD4＋Foxp3＋调节性T细胞（CD4＋Foxp3＋Treg）及亚群在成人微小病变肾病（MCD）患者外周血CD4＋T细胞中的分布,探讨CD4＋Foxp3＋Treg参与MCD发病的可能机制。方法以27例经肾穿刺活检确诊为MCD的初发成人患者作为研究对象,采用Foxp3-FITC/CD45RA-PE/CD3-ECD/CD4-PC7抗体组合经流式细胞仪检测外周血单个核细胞（PBMCs）中CD4＋Foxp3＋Treg及亚群占CD4＋T细胞的百分比。Real-Time PCR检测PBMCs中Foxp3、Th17转录因子RORc以及细胞因子TGF-β1、IL-6、IL-17A、IL-23mRNA表达。设立正常对照。结果流式细胞检测显示CD4＋Foxp3＋Treg分成3个细胞群体,分别为CD45RA＋Foxp3low（Ⅰ区,静息期Treg）、CD45RA-Foxp3high（Ⅱ区,活化Treg）和CD45RA-Foxp3low（Ⅲ区）。MCD组Ⅰ区＋Ⅱ区细胞和Ⅱ区细胞占CD4＋T细胞的百分比显著低于对照组（P〈0.01）。MCD组PBMCs中Foxp3mRNA表达较对照组下调（P〈0.05）,RORcmRNA表达较对照组上调（P〈0.05）,IL-6、IL-17A、IL-23mRNA表达均显著高于对照组（P〈0.05和P〈0.01）。相关性分析显示,MCD组IL-17A mRNA表达与Ⅱ区细胞占CD4＋T细胞的百分比呈显著负相关（r=-0.81,P〈0.05）。结论成人MCD患者外周血Treg及其活化功能亚群减少,同时伴有Th17转录基因及其相关细胞因子表达的异常升高。提示Treg Foxp3 mRNA表达下调及Treg/Th17细胞比例失衡可能与MCD的发病有关。     

哮喘患儿外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的测定及临床意义

目的：探讨CD4＋CD25＋调节性T细胞在哮喘儿童外周血中的比例改变,并探讨其临床意义。方法150例哮喘患儿按临床表现分为急性发作组（50例）、临床缓解期组（50例）和咳嗽变异性哮喘组（50例）,另选择50名健康儿童为正常对照组。应用流式细胞仪检测上述各组外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞占CD4＋T细胞的百分比。结果急性发作期组患儿外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞水平较缓解组、咳嗽变异性哮喘组及健康对照组明显下降（P〈0.05）,而缓解期组及咳嗽变异性哮喘组与健康对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论CD4＋CD25＋调节性T细胞可能参与了哮喘的发生与发展,哮喘的严重程度可能与CD4＋CD25＋调节性T细胞的水平相关。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞的变化及其与胰岛素抵抗的关系

目的观察慢性阻塞性肺疾病急性加重期（AECOPD）患者外周血单个核细胞CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋调节性T细胞（Treg）的变化,及其与胰岛素抵抗的关系。方法选择79例AECOPD患者,根据肺功能进行疾病严重程度分级（Ⅰ级11例,Ⅱ级31例,Ⅲ级28例,V级9例）。42例健康体检者作为正常对照。检测空腹胰岛素（FINS）及空腹血糖（FBG）,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）;采用流式细胞术检测患者外周血单个核细胞CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg数量,并计算CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg占CD4^＋T淋巴细胞的百分比（CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg／CD4^＋T）;分析CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg与胰岛素抵抗的关系。结果与正常对照组比较,各级AECOPD患者FBG、FINS及HOMA—IR均明显升高（P〈0．01,P〈0．05）,外周血单个核细胞CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg／CD4^＋T及CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg绝对值均明显下降（P〈0．01,P〈0．05）。Ⅲ级和Ⅴ级AECOPD患者较Ⅰ级和Ⅱ级HOMA-IR升高更为明显（P〈0．01,P〈0．05）;而外周血单个核细胞CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg／CD4^＋T及CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg绝对值逐渐减少,其中Ⅲ级和V级较Ⅰ级和Ⅱ级明显减少（P〈0．01,P〈0．05）。相关分析表明CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg／CD4^＋T及CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg绝对数均与HOMA-IR呈明显负相关（r值分别为-0．633和-0．871,P〈0．01）。结论AECOPD患者外周血CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg数目和比例降低,存在胰岛素抵抗,并与疾病的严重程度相关。CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋Treg可能通过调节胰岛素抵抗参与COPD的形成和发展。     

多发性硬化患者外周血γδT细胞与CD_4~+CD_(25)~+Foxp3~+Treg细胞比例的变化

目的探讨多发性硬化(MS)患者外周血γδT细胞与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例的变化。方法采集37例MS患者(MS组)及25例健康对照者(NC组)的外周静脉血,分离外周血单个核淋巴细胞,以流式细胞术检测γδT细胞及CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例。结果 MS组外周血γδT细胞比例较NC组显著升高,且活动性患者较非活动性患者进一步升高;MS组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例较NC组显著降低,而活动性患者较非活动性患者进一步降低。MS组外周血γδT细胞与CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例呈显著负相关(P<0.05)。结论 MS患者外周血γδT细胞比例的升高可下调CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例,从而促进疾病的发生。     

强直性脊柱炎患者外周血中调节性T细胞水平研究

目的探讨强直性脊柱炎患者外周血中CD4^＋CD25^＋Treg（调节性T细胞）、CD4^＋CD25^＋CD127low／-Treg细胞表达水平及其意义,并对两种标识方法检测AS患者Treg进行对比分析。方法采用流式细胞术检测9例正常人和20例强直性脊柱炎患者外周血中的CD4^＋T细胞比率及CD4^＋CD25^＋Treg、CD4^＋CD25^＋CD127^lovw／-Treg占CD4^＋T细胞的比率。结果强直性脊柱炎患者外周血中的CD4^＋T细胞比率及CD4^＋CD25^＋Treg、CD4^＋CD25^＋CD127low／-Treg细胞占CD4^＋T细胞的比率均明显高于正常对照组（P〈0．01）。结论强直性脊柱炎患者免疫功能紊乱,外周血中CD4^＋CD25^＋Treg、CD4^＋CD25^＋CD127low／-Treg细胞水平显著增高。两种调节性T细胞标识方法检测强直性脊柱炎患者外周血Treg的结果基本一致。     

非小细胞肺癌患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞的检测及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血CD_4~+CD_(25)~+调节T细胞(Treg)水平的变化特点及其临床意义。方法采用流式细胞仪检测70例NSCLC患者和30例健康人外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平,并进行2组水平比较和分层分析。结果NSCLC组外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平(29±5)%,明显高于健康对照组(11±5)%(P<0.01);外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平与NSCLC病理类型无相关性(P>0.05);与临床分期密切相关,I+II期亚组(16±5)%与健康对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),而与III期亚组(26±6)%、IV期亚组(35±6)%比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论NSCLC患者外周血CD_4~+CD_(25)~+Treg水平明显升高,且与肿瘤的发生发展密切相关,可作为评估肺癌患者预后的一项指标。     

哮喘小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞与气道炎症反应的关系

目的 观察哮喘小鼠外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）数量的改变及其与气道炎症反应的关系。方法健康6周龄SPF级BALB/c小鼠20只,随机分为2组：正常对照组（A组）、哮喘模型组（B组）,B组以卵白蛋白（OVA）致敏激发方法建立小鼠哮喘模型;流式细胞术检测小鼠外周血CD4^＋CD25^＋Treg占淋巴细胞的比例;检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）炎症细胞数;BALF炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞数分别与外周血CD4^＋CD25^＋Treg作相关分析。结果A组、B组小鼠外周血CD4^＋CD25^＋Treg占淋巴细胞比例分别为（5．81±0．76）％、（3．21±0．74）％,差异有统计学意义（P〈0．05）BALF炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞数与外周血CD4^＋CD25^＋Treg呈负相关,相关系数分别为-0．929和-0．920。差异有统计学意义（P〈0．001）结论哮喘小鼠外周血CD4^＋CD25^＋Treg占淋巴细胞比例较正常对照组显著减少。且与哮喘小鼠气道炎症反应密切相关。     

宫颈癌患者外周血中T细胞亚群数量变化及临床意义

[目的]探讨宫颈癌患者外周血中T细胞亚群数量变化及临床意义.[方法]选择2008年10月-2009年10月期间符合纳入及排除标准的CINⅢ患者20例,宫颈浸润癌患者20例,正常宫颈健康妇女20例,流式细胞仪检测外周血中CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+ CD25+ Foxp3+Trregs数量.[结果]宫颈浸润癌患者外周血中CD3+T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞数量及CD4+/CD8+显著低于正常宫颈组和CINⅢ组(P＜0.05),正常宫颈组和CINⅢ组无显著性差异(P＞0.05).宫颈癌浸润组CD4+CD25+Foxp3+Tregs数量显著高于正常宫颈组和CINⅢ组(P＜0.05),正常宫颈组和CINⅢ组差异无统计学意义(P＞0.05).[结论]宫颈浸润癌患者细胞免疫功能低下,存在免疫抑制.     

CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg在慢性阻塞性肺疾病中的表达及意义

目的通过检测COPD患者外周血中Treg细胞的表达水平,探讨COPD患者体内免疫功能的状态及Treg细胞在疾病进展中的临床意义。方法选择AECOPD和COPD稳定期患者各30例,20例健康体检者作为正常对照组,采用流式细胞仪进行检测外周血中CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞、CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg细胞占CD4^＋T淋巴细胞比例。SPSS17．0软件进行统计学分析处理。结果AECOPD组和COPD组外周血中CD4^＋ CD25^＋ Treg细胞比例分别为（9．52±0．95）％和（9．72±0．97）％均低于对照组（10．22±1．10）％,差异无统计学意义（F=2．48,P=0．093）。3组间CD4＋CD25＋CD127^（low/-）Treg细胞比例差异有统计学意义（F=13．57,P=0．0）,AECO．PD组（4．50±0．83）％显著低于COPD稳定期（5．22±0．64）％和对照组（5．61±0．67）％,而COPD稳定期较对照组降低,差异无统计学意义（P〉0．05）。结论COPD患者外周血中CD4^＋ CD25^＋ CD127^（low/-）Treg细胞降低,存在免疫内环境的失衡,Treg细胞可能参与了COPD的发病和急性加重过程。     

左归丸对小鼠CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的影响

目的：观察左归丸制剂对小鼠脾细胞中Treg亚群及其相关细胞因子表达的影响。方法：Balb/c小鼠给予不同剂量左归丸处理后，利用流式细胞术检测小鼠脾细胞中Treg亚群（CD4^＋／CD25^＋）的变化；采用RT-PCR法检测小鼠脾细胞中IL-10、TGF-β、IFN-γ及Foxp3的表达水平；采用ELISA法检测小鼠外周血中IFN-γ的分泌水平。结果：小剂量左归丸对小鼠脾脏Treg亚群及相关细胞因子的表达没有显著影响；中剂量左归丸可明显上调小鼠脾脏Treg亚群比例（P〈0．05），提高Treg特异性胞内信号Foxp3及相关细胞因子IL-10、TGF-β的转录水平，同时抑制，IFN-γ的表达；大剂量左归丸可显著降低Treg细胞亚群比例，对Foxp3、IL-10、TGF-β、IFN-γ的表达均有明显的抑制作用（P〈0．05）。随着中、大剂量左归丸处理小鼠IFN-γ的转录下调，血清中IFN-γ的水平也明显下降（P〈0.05）。结论：左归丸可上调Treg细胞及相关细胞因子的表达水平，抑制IFN-γ的表达，但这种免疫效应有剂量限制性，大剂量应用时显示抑制作用，提示左归丸对Treg亚群有剂量依赖性的双向调节作用。     

冠心病与外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞的关系

目的 探讨不同类型冠心病患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞水平变化,以及CD4＋CD25＋调节性T细胞与冠状动脉粥样硬化严重程度的相关性.方法 选择2012年6月-2012年12月在杭州市第一人民医院心内科住院,经冠状动脉造影术检查及治疗的患者57例,其中造影检查正常对照组13例,稳定型心绞痛组14例,不稳定型心绞痛组15例,急性心肌梗死组15例.采用流式细胞仪检测外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞占CD4＋T细胞比例,评价各组间差异,并对外周血T淋巴细胞亚群与冠状动脉粥样硬化严重程度进行相关性分析.结果 ①外周血CD4＋CD25＋细胞占CD4＋淋巴细胞比例在对照组、稳定型心绞痛组、不稳定型心绞痛组、心肌梗死组分别为（57.51＆#177;12.62）％、（50.19＆#177;9.27）％、（39.85＆#177;11.88）％和（32.37＆#177;9.56）％;②急性心肌梗死组和不稳定型心绞痛组患者外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞比例较稳定型心绞痛组和对照组显著减少（P＜0.05）,但是急性心肌梗死组和不稳定型心绞痛组之间,以及稳定型心绞痛组和对照组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）.③外周血CD4＋CD25＋调节性T细胞与冠状动脉Genisi评分呈显著负相关（r=-0.617,P＜0.01）.结论 CD4＋CD25＋调节性T细胞参与了冠心病的发生发展,是导致动脉粥样斑块不稳定的原因之一,与斑块的不稳定呈显著负相关.