不同产地不同品种棘豆中球松素及2’,4’-二氢查尔酮的分析研究

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定棘豆中的球松素及2’,4’-二氢查尔酮含量,分析不同产地、不同品种棘豆的差异,为棘豆质量评价提供方法和依据。方法:色谱柱:CAPCELL PAK C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min^-1;检测波长284 nm;柱温:30℃。结果:各色谱峰分离度较好,球松素和2’,4’-二氢查尔酮浓度分别在1.60~64.0μg·mL^-1(r=0.9993)、1.30~416μg·mL^-1(r=0.9998)范围内与峰面积线性关系良好,平均回收率分别为96.88%、99.69%。聚类分析结果表明球松素和2’,4’-二氢查尔酮在镰形棘豆和轮叶棘豆中的含量有别于其他几种棘豆;从产区来说,西藏区含量差异最大,青海地区含量差异较大、甘南和四川地区的差异相对较小。结论:该方法简单、快捷、灵敏、准确、可靠,可用于测定棘豆中球松素及2’,4’-二氢查尔酮的含量;对标准收载的镰形棘豆、轮叶棘豆与其他品种棘豆的定性定量鉴别具有较大的意义。     

HPLC测定当归中1-(3',4'-dihydroxycinnamoyl)-cyclopentane-2,3-diol的含量

目的 建立HPLC测定当归中1-（3'',4''-dihydroxycinnamoyl）-cyclopentane-2,3-diol含量的方法。方法 采用Inertsil ODS-3 C₁₈柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.05%三氟乙酸水溶液梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为325 nm,柱温为30℃。结果 1-（3'',4''-dihydroxycinnamoyl）-cyclopentane-2,3-diol进样量在0.023 36~1.168 0 μg（r=1.000 0）内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为95.33%,RSD为1.88%。结论 该方法简便、准确、重复性好,可为当归药材的质量控制提供参考。     

顶空进样气相色谱法；有机溶剂残留；蚕砂提取物

摘 要 目的：建立测定蚕砂提取物中有机溶剂残留量的气相色谱法。方法: 采用顶空进样气相色谱法,色谱柱：DB-5MS石英毛细管色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）;载气：氮气;流速：0.6 ml·min^-1;进样口温度：200℃;检测器类型及温度：氢焰离子化检测器(FID),250℃;柱升温程序：40℃保持10 min,然后以5 ℃·min^-1的速度升至200℃,保持5 min;顶空条件：平衡温度： 95℃;平衡时间：30 min;传输管温度：110℃;进样环温度：125℃。结果: 丙酮,2,3-二甲基戊烷,3-甲基己烷,正庚烷,2,2-二甲基己烷,对二甲苯,间二甲苯,邻二甲苯,2,4,6-三甲基吡啶的线性范围分别为：101~3 034 μg·mL^-1,100~2 995 μg·mL^-1, 107~3 197 μg·mL^-1,101~3 019 μg·mL^-1,99~2 962 μg·mL^-1,45~1 358 μg·mL^-1,44~1 325 μg·mL^-1, 47~1 411 μg·mL^-1 和104~3 130 μg·mL^-1,r值均在0.992以上,回收率符合要求,空白溶剂对样品的测定没有影响,8批样品检验均符合限度要求。结论:顶空进样气相色谱法测定蚕砂提取物中有机溶剂,方法简单,结果准确。     

HPLC同时测定护肝片中5种成分的含量

摘 要 目的：建立HPLC法同时测定护肝片中腺苷、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的含量。方法: 采用Agilent Eclipse XDB色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-0.7%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为0.80 ml·min^-1,0～14 min检测波长为260 nm,14～58 min检测波长为250 nm,柱温为30℃,进样量为10 μl。结果: 腺苷、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的线性范围分别为2.35～47.00 μg·mL^-1（r=0.999 8）、14.90～297.00 μg·mL^-1（r=1.000 0)、3.46～69.20 μg·mL^-1（r=0.999 9）、4.00～80.10 μg·mL^-1（r=1.000 0）、3.42～68.30 μg·mL^-1（r=0.999 9）。5种成分的平均回收率均不低于98％。结论:本方法简便、准确、重复性好,可用于护肝片中腺苷、五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素和五味子乙素的含量测定。     

柱前衍生高效液相色谱法检测盐酸莫西沙星中侧链方法研究

目的 建立测定盐酸莫西沙星中侧链的方法。方法 采用柱前衍生反相高效液相色谱（HPLC）法,采用C₁₈ (4.6 mm×250 mm,5 µm) 色谱柱,以0.1%三乙胺溶液(用磷酸调节pH值至7.5)-乙腈(50:50)为流动相,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为245 nm。结果 盐酸莫西沙星侧链在0.210~1.577 µg·mL^-1浓度范围内呈良好的线性关系,检测限为0.013 µg·mL^-1,定量限为0.042 µg·mL^-1,加标回收率为102.8%~106.2%。结论 该方法简单快速,专属性强,准确度好,灵敏度高。     

药用辅料蔗糖中亚硫酸盐检测方法的建立

目的：建立适宜的蔗糖中亚硫酸盐测定法,提高现行药典标准。方法：采用IonPac AS11-HC 阴离子分析柱并配加IonPac AG11-HC保护柱,柱温 25 ℃,以10.0 mmol·L^-1的KOH作为淋洗液,流速1.0 mL·min^-1,检测器为电导检测器,检测器温度30 ℃,抑制器为自动再生抑制模式,抑制电流40 mA,进样量 25 μL。结果：离子色谱法测定亚硫酸钠质量浓度在1~20 μg·mL^-1范围内线性良好, 回归方程为Y=0.0434X-0.0211,r=0.9993,精密度RSD为0.5%,稳定性RSD为1.5%,回收率范围为 93.5%~99.3%,检出限0.1 μg·mL^-1,定量限0.25 μg·mL^-1。8批样品中1号、2号、3号及5号样品结果分别为8.1、9.8、12. 0及10.4 μg·g^-1,其余各批样品均为未检出亚硫酸盐。结论：所建方法可行、准确,可用于测定蔗糖中亚硫酸盐的含量。     

2',4'-二羟基-3'-甲基-3-甲氧基查耳酮上调p21抑制人肝癌HepG2细胞的生长

目的 探讨2'',4''-二羟基-3''-甲基-3-甲氧基查耳酮(C20)对人肝癌HepG2细胞的体外抗肿瘤作用及其潜在的作用机制。方法 通过CCK-8法、集落形成实验、5-乙炔基-2''-脱氧尿苷(EdU)染色法检测C20对人肝癌HepG2细胞增殖的影响;通过彗星实验检测C20(10 μmol·L^-1)对HepG2细胞DNA损伤的影响;通过流式细胞术检测C20(5、10 μmol·L^-1)对HepG2细胞周期阻滞的影响;通过Hoechst染色和流式细胞术检测C20(5、10 μmol·L^-1)对HepG2细胞凋亡的影响。借助Western blotting法检测C20(5、10 μmol·L^-1)处理对HepG2细胞中与凋亡、DNA损伤、细胞周期阻滞相关蛋白表达水平的调控作用。结果 与对照组比较,C20显著抑制HepG2细胞的活力(P<0.001),给药48 h的半数抑制浓度(IC₅₀)为7.937 μmol·L^-1;5 μmol·L^-1 C20能够显著抑制HepG2细胞的集落形成能力(P<0.01);EdU染色结果显示5、10 μmol·L^-1的C20能够抑制人肝癌HepG2细胞的增殖能力;5、10 μmol·L^-1的C20显著诱导HepG2细胞G₂/M期阻滞(P<0.001);5、10 μmol·L^-1的C20显著促进HepG2细胞凋亡(P<0.001),并显著上调Caspas-3、Caspase-9以及PARP的剪切水平(P<0.01);10 μmol·L^-1的C20能够诱导HepG2细胞发生DNA损伤,并且5、10 μmol·L^-1的C20显著上调γH2AX、p21的蛋白水平(P<0.01)。结论 C20能够造成HepG2细胞发生DNA损伤,上调p21蛋白水平,导致细胞G₂/M期阻滞,并进一步诱发凋亡,发挥体外抗肝癌作用。     

HPLC法测定化妆品原料2-羟乙基脲及杂质尿素的含量

目的 建立化妆品原料2-羟乙基脲的高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC）含量测定方法,并检测其杂质尿素的含量,以实现对2-羟乙基脲的质量控制。方法采用Capcell PAK ADME C_{18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;以水为流动相;柱温30℃;流速为1.0 mL·min^-1;进样量10 μL;检测波长194 nm。结果 2-羟乙基脲和尿素分别在1.168～116.8 μg·mL^-1（r=0.999 7）和1.032～206.5 μg·mL^-1（r=0.9992）范围内浓度与峰面积有良好的线性关系,平均回收率分别为98.0%和97.1%,检出限分别为0.12 μg·mL^-1和0.21 μg·mL^-1,定量限分别为0.36 μg·mL^-1和0.52 μg·mL^-1。结论 本方法准确度高,重复性好,检测灵敏度符合检测要求,可用于化妆品原料2-羟乙基脲及其杂质尿素的含量测定方法。}     

新型苯并噁唑酮衍生物W3D的含量测定及体内抗炎活性研究

目的 建立全新结构化合物4-（5''-二甲氨基）-萘磺酰氧基苯并噁唑酮（W3D）的含量测定方法,并对其进行体内抗炎活性评价。方法 采用Diamonsil C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以甲醇-水（75∶25）为流动相,体积流量1.0 mL·min^-1,检测波长257 nm,柱温28℃,测定W3D的峰面积,建立其含量测定方法;采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型评价化合物W3D（25.000、12.500、6.250、3.125 mg·kg^-1）体内抗炎活性。结果 供试品主峰专属性良好,在1～100 μg·mL^-1线性关系良好（R²＝0.999 9）,精密度、重复性、稳定性的RSD分别为0.61%、0.19%、0.84%,回收率为99.55%（RSD＝0.81%）;与对照组比较,W3D各剂量组耳肿胀率均显著下降（P＜0.05、0.01）,12.5 mg·kg^-1组抑制率可达53.88%,优于阳性药塞来昔布。结论 建立的HPLC法简便、准确,且专属性好,可用于W3D的含量检测;W3D具有较好的体内抗炎活性,作为新结构抗炎小分子化合物具有深入研究的价值。     

HPLC同时测定四季三黄片中芦荟大黄素、黄芩苷、黄柏酮和西红花苷-I的含量

目的 采用HPLC同时测定四季三黄片中芦荟大黄素、黄芩苷、黄柏酮和西红花苷-I的含量。方法 采用welch Topsil-C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,4 μm);流动相：甲醇-0.2%磷酸水溶液;梯度洗脱;检测波长分别为254 nm(芦荟大黄素、黄芩苷、黄柏酮)和440 nm(西红花苷-I);流速：1.0 mL·min^-1;柱温：30 ℃。结果 芦荟大黄素、黄芩苷、黄柏酮和西红花苷-I线性范围分别为0.079 10~1.582 μg·mL^-1(r=0.999 5),0.167 5~3.350 μg·mL^-1(r=0.999 8),0.097 92~1.958 μg·mL^-1(r=0.999 7)和0.033 57~0.671 5 μg·mL^-1(r=0.999 4),平均加样回收率分别为95.9%(RSD=0.7%),97.5%(RSD=0.8),96.4%(RSD=1.0%),95.5%(RSD=1.3%)。结论 该方法简便、准确、专属性强、重复性好,可用于四季三黄片中芦荟大黄素、黄芩苷、黄柏酮和西红花苷-I的定量分析。     

高效液相色谱法测定人血清和尿中盐酸青藤碱浓度及药代动力学研究

用RP-HPLC法,以三唑仑为内标,反相C₁₈为分析柱,乙腈—0.01mol·L^-1磷酸二氢钠—四甲基乙二胺(46∶54∶0.22v/v)为流动相,磷酸调至pH6.9,检测波长263nm,测定血清和尿中盐酸青藤碱浓度,线性范围分别为6～480ng·mL^-1和0.06～3μg·mL^-1,平均回收率75.88%和91.35%,日内日间误差小于5%,最低检测浓度血清4ng·mL^-1,尿40ng·mL^-1。8名健康男性志愿者单次口服盐酸青藤碱片80mg,测定血清及尿浓度,该药符合二室开放模型,体内消除符合一级动力学消除过程,主要药代动力学参数:T_1/2α0.791±0.491h,T_1/2β9.397±2.425h,T_{max 1.040±0.274h,Cmax246.604±71.165ng·mL^-1,AUC 2651.158±1039.050ng·h·mL^-1,CL 0.033±0.01ng·mL^-1。}     

基于数据库挖掘以血管紧张素转化酶2为靶点治疗新型冠状病毒肺炎的潜在中药成分

目的 利用中药数据库寻找抑制血管紧张素转化酶2（ACE2）治疗新型冠状病毒肺炎（COVID-19）的潜在中药成分。方法 借助SYMMAP、TCMID、ETCM数据库,以ACE2为搜索词,筛选中药成分及中药材,利用GCBI平台来筛选与靶点相关的炎症因子,得到相关疾病及核心网络图。将ACE2输入到STITCH数据库中,查询阳性对照药物。运用Sybyl（2.0）软件处理受体,中药成分与阳性对照药均和ACE2（1R42）及新型冠状病毒（SARS-CoV-2）3CL pro（6LU7）进行对接分析。应用Swiss ADME平台为对接结果较好的中药成分和阳性对照药构建雷达图。结果 从数据库中找到7种具有抑制SARS-CoV-2潜在活性的中药成分和相关中药材。网络分析图中连接基因数最多的是CXCR4基因,它涉及到细胞因子-细胞因子受体相互作用、趋化因子信号通路可能是发挥治疗COVID-19的潜在机制。分子对接的结果表明,2'',4'',3,4-四羟基查尔酮、葛根素与SARS-CoV-2相关蛋白结合最好。结论 2'',4'',3,4-四羟基查尔酮等中药成分可能是治疗COVID-19的潜在成分。     

高效液相色谱法测定尿素中缩二脲和缩三脲的含量

目的： 建立了HPLC法测定尿素中缩二脲和缩三脲的含量方法： 采用Waters Atlantis T3色谱柱 (4.6 mm×250 mm,3.5μm),以超纯水为流动相,流速为0.9 mL·min^-1,测定波长为195 nm结果： 尿素、缩二脲和缩三脲之间的分离度均大于1.5,缩二脲和缩三脲在0.2~10µg·mL^-1范围内线性关系良好 (r=1.000),检测限和定量限分别为0.062µg·mL^-1和0.206µg·mL^-1。缩二脲和缩三脲的平均回收率分别为100.2%和102.2%,RSD分别为1.2%和0.9%(n=9)结论： 本方法准确、可靠、灵敏,可用于尿素中缩二脲和缩三脲的测定,作为2019年国家药典委员会标准提高项目,弥补了目前药典标准中尿素有关物质的研究空白。     

HPLC波长切换联合梯度洗脱法同时测定参苏宣肺丸中的6种成分

目的 建立HPLC波长切换联合梯度洗脱法同时测定参苏宣肺丸中咖啡酸、迷迭香酸、3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、大豆苷的含量。方法 采用ZOBAX SB-C₁₈色谱柱（4.6 mm×250 mm,5 μm）;流动相A为甲醇-乙腈（1：1）,流动相B为0.1%冰醋酸溶液,进行梯度洗脱;流速为1.0 mL·min^-1;咖啡酸和迷迭香酸的检测波长为320 nm,3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素和大豆苷的检测波长为250 nm;进样量为20 μL。结果 咖啡酸、迷迭香酸、3’-羟基葛根素、葛根素、3’-甲氧基葛根素、大豆苷的浓度与峰面积分别在2.32~46.40 μg·mL^-1（r=0.999 8）、3.06~61.20 μg·mL^-1（r=0.999 5）、4.45~89.00 μg·mL^-1（r=0.999 9）、14.48~289.60 μg·mL^-1（r=0.999 9）、4.86~97.20 μg·mL^-1（r=0.999 7）、3.69~73.80 μg·mL^-1（r=0.999 6）内具有较好的线性关系,平均加样回收率和相应的RSD分别为99.0%（1.6%）,97.5%（0.6%）,99.3%（0.9%）,98.6%（1.3%）,97.6%（1.3%）,97.0%（0.9%）。结论 方法操作准确、简便,可用于参苏宣肺丸的质量控制。     

HPLC测定口服液体制剂中防腐剂和甜味剂的含量

目的 建立快速定性定量检测口服液体制剂中违法添加防腐剂和甜味剂的高效液相色谱法。方法 ZORBAX SB-C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相：甲醇-0.02 mol·L^-1乙酸铵溶液,梯度洗脱,流速：1.0 mL·min^-1,检测波长：240 nm,柱温：25 ℃。结果 安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠、脱氢乙酸、羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯、羟苯丁酯在5~100 μg·mL^-1内线性关系良好(r>0.999),检测限分别为0.02,0.04,0.01,0.10,0.06,0.01,0.01,0.01,0.01 μg·mL^-1,平均回收率在90.0%~110.0%内,精密度和重复性均<2.0%(n=6)。结论 该方法简单、可靠、准确,可用于口服液体制剂中防腐剂和甜味剂含量的测定。     

HPLC法同时测定卡非佐米中3种手性异构体含量

摘 要 目的：建立了HPLC法直接检测卡非佐米光学异构体的方法。方法: 采用Chiralpak OX-H手性柱,以正己烷-异丙醇-乙醇(89∶5∶6, v/v/v)为流动相,流速为1.0 ml·min^-1,检测波长为220 nm。结果: 对映异构体、非对映异构体Ⅰ、非对映异构体Ⅱ分别在0.54~2.14μg·mL^-1,0.11~1.80 μg·mL^-1,0.11~1.81 μg·mL^-1范围内线性关系良好(r≥0.998);检出限为0.07~0.27 μg·mL^-1,回收率为99.6%~100.9%,RSD为1.13%~1.59%（n=9）。结论:该方法灵敏、简便、快速、准确、特异性良好,可作为卡非佐米中对映异构体和非对映异构体杂质限量的控制方法。     

HPLC同时测定雪松不同部位中4个黄酮类化合物的含量

目的 建立同时测定雪松不同部位4个黄酮类化合物(杨梅素、槲皮素、山柰酚和异鼠李素)含量的高效液相色谱法。方法 雪松样品用60%甲醇回流提取,提取液加10%盐酸水解。采用Agilent TC-C₁₈(250 mm×4.6 mm,5 μm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长360 nm,柱温30 ℃。结果 雪松不同部位中杨梅素、槲皮素和异鼠李素浓度都在0.5~10 μg·mL^-1、山柰酚浓度在1~24 μg·mL^-1内呈良好线性关系(r≥0.999 6),加样回收率(n=6)分别为98.9%,100.1%,99.5%和101.7%。雪松各部位中4个黄酮类化合物的含量存在明显差异,其中松针中槲皮素和山柰酚的含量最高分别达0.285 mg·g^-1和1.493 mg·g^-1,小枝中杨梅素和异鼠李素的含量最高分别达0.365 mg·g^-1和0.476 mg·g^-1;雪松不同部位中4个黄酮类化合物含量之和依次为松针>小枝>花序>木质>树皮。结论 该方法简单、快速、高效,可用于雪松不同部位中4个黄酮类化合物的含量测定。     

HPLC同时测定黄石感冒片中阿魏酸、芦丁、大黄酸、大黄素和大黄酚的含量

目的 建立HPLC同时测定黄石感冒片中阿魏酸、芦丁、大黄酸、大黄素和大黄酚的含量。方法 采用HPLC,色谱柱为Welch Topsil-C₁₈柱(4.6 mm×250 mm,4 μm);以甲醇-0.1%磷酸溶液(78∶22)为流动相;流速：1.0 mL·min^-1;柱温：30 ℃;检测波长：280 nm。结果 阿魏酸、芦丁、大黄酸、大黄素和大黄酚峰线性范围分别为0.020 82~0.416 3 μg·mL^-1(r=0.999 7),0.011 32~0.278 3 μg·mL^-1(r=0.999 3),0.017 22~0.344 3 μg·mL^-1(r=0.999 5),0.015 79~0.315 8 μg·mL^-1(r=0.999 6)和0.051 34~1.027 μg·mL^-1(r=0.999 9),平均加样回收率分别为97.4%(RSD=1.1%),95.0%(RSD=0.88%),97.5%(RSD=1.3%),97.4%(RSD=1.4%)和96.3%(RSD=0.87%)。结论 新建方法简便、准确,可用于黄石感冒片的定量分析方法。     

HPLC测定利格列汀的有关物质

目的 建立梯度洗脱高效液相色谱法测定利格列汀原料杂质的方法。方法 色谱柱为Agilent C₁₈柱,流动相A为磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钠2.0 g,加水1 000 mL溶解,并用磷酸调节pH值至2.5±0.1),流动相B为甲醇-乙腈(55∶45),以1.0 mL·min^-1流速;检测波长为226 nm;柱温为30 ℃,进样量为10 μL。结果 8-[(3R)-哌啶-3-氨基]-7-(2-丁炔基)-3,7-二氢-3-甲基-1-[(4-甲基-2-喹唑啉基)甲基]-1H-嘌呤-2,6-二酮(杂质A)、8-[(3R)-3-氨基-1-哌啶基]-7-(3-溴-2-丁烯基)-3,7-二氢-3-甲基-1-[(4-甲基-2-喹唑啉基)甲基]-1H-嘌呤-2,6-二酮(杂质B)、8-[(3R)-3-甲酰胺基-1-哌啶基]-(7-(2-丁炔基)-3,7-二氢-3-甲基-1-[(4-甲基-2-喹唑啉基)甲基]-1H-嘌呤-2,6-二酮(杂质C)和利格列汀及其他未知杂质均能达到很好的分离,且杂质A、杂质B、杂质C与利格列汀分别在0.59~5.91 μg·mL^-1(r=0.999 9),0.59~5.86 μg·mL^-1(r=0.999 8)、0.58~5.79 μg·mL^-1(r=0.999?5)和1.32~13.22 μg·mL^-1(r=0.999 7)内具有良好的线性关系。杂质A、杂质B、杂质C平均回收率(n=9)分别为99.12% (RSD=2.9%)、99.35%(RSD=2.4%)和98.52%(RSD=1.1%)。结论 本方法灵敏快速、准确、可靠,专属性强,可作为利格列汀的杂质检查。     

HPLC测定甲磺酸加雷沙星异构体

目的 建立甲磺酸加雷沙星异构体的HPLC检测方法。方法 Chiralpak AD-H色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),柱温：35 ℃,检测波长：278 nm,流速：1.0 mL·min^-1,流动相：正己烷-异丙醇-甲醇-甲磺酸(70∶29∶1∶0.1)。结果 甲雷沙星及其异构体在0.005~0.151 μg·mL^-1内具有良好的线性(r>0.999),定量限浓度为5 ng·mL^-1(相当于0.03%),最低检测限为2.5 ng·mL^-1(相当于0.015%)。结论 该方法简便、准确,具有良好的重现性和专属性。