白细胞介素-27的基因多态性与大肠癌的遗传易感性之间的相关性研究

目的探讨白细胞介素-27(IL-27)基因单核苷酸多态性及其单倍型与大肠癌易感性之间的关系。方法以170例大肠癌患者和160例健康对照者为研究对象,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法对IL-27基因-964A/G、2905T/G单核苷酸多态性进行基因分型,同时用SHEsis软件分析IL-27基因的连锁不平衡及单倍型频率。结果 IL-27基因2905T/G多态性在大肠癌组和对照组的分布差异无统计学意义(P>0.05),而IL-27基因-964A/G多态性在两组人群中的分布差异有统计学意义(P<0.05),等位基因频率的相对风险分析发现,-964G等位基因携带者患大肠癌的风险是A等位基因的1.640倍(OR=1.640,95%CI:1.194～2.251)。联合基因型分析发现,IL-27基因-964A/G、2905T/G单核苷酸多态性存在着强烈的连锁不平衡(|D′|=0.937),-964G/2905G单倍型频率在大肠癌组中显著高于对照组(P<0.05)。-964G/2905G单倍型携带者显著增加了大肠癌的发病风险(OR=2.100,95%CI:1.176～3.749)。结论 IL-27基因-964A/G多态性和-964G/2905G单倍型与大肠癌的发病具有相关性,其中-964G等位基因可能是大肠癌的遗传易感基因。     

浙江地区汉族人群 IL-27p28基因多态性与克罗恩病的相关性研究

目的探讨IL-27p28基因启动子区g.-964 T＞C、第2外显子区g.2905T＞G和第4外显子区g.4730T＞C 3个位点的多态性与浙江地区人群克罗恩病（CD）的相关性。方法选取75例浙江地区汉族CD患者（病例组）及80例健康体检者（对照组）,采用聚合酶链反应-连接酶检测,分析两组基因型频率及等位基因频率。结果对照组的基因型分布符合Hardy- Weinberg平衡定律。两组g.-964位点的基因型频率及等位基因频率的差异有统计学意义（P＜0.05）,而g.2905和g.4730位点的基因频率及等位基因频率的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 IL-27p28基因多态位点g.-964 T＞C可能与浙江地区汉族人群CD易感性有关, g.2905T＞G和g.4730T＞C多态性与浙江地区汉族人群CD无关。     

IL27p28基因启动子区域-964A＞G位点多态性与中国汉族人群支气管哮喘的相关性

目的检测中国汉族人群IL-27p28基因启动子区域一个单核苷酸多态位点-964A＞G的多态性，探讨该位点多态性与中国汉族人群支气管哮喘易感性的关系。方法采用聚合酶链式反应—限制性片段长度多态性(PCR-RFLP）法检测360例哮喘患者和220例正常对照者IL-27p28基因启动子区域单核苷酸多态位点-964A＞G的基因型，计算基因型频率和等位基因频率，对比分析两组基因频率和基因型频率分布。结果IL-27p28基因启动子区域-964A＞G位点在中国汉族人群中具有多态性，其基因频率与基因型频率分布在病例组和对照组中均符合Hardy-Weinberg平衡，基因型AA、GA和GG的频率在病例组分别为0.4028、0.4205和0.1722，在对照组中分别为0.4318、0.4455和0.1227; 该位点的基因型频率及等位基因频率在病例组和对照组间的差异均无统计学意义(P=0.274)，提示该多态位点与中国汉族人群哮喘无显著相关性。结论IL-27p28基因启动子区域单核苷酸多态-964A＞G与中国汉族人群支气管哮喘易感性没有显著相关性。     

重庆汉族儿童IL-18基因启动子-137G/C多态性及蛋白表达与结核病易感性的关系

目的:探讨重庆汉族儿童白介素-18(Interleukin 18,IL-18)18基因启动子单核苷酸多态性(Single nueleotide polymorphism,SNP)与结核病易感性的关系及其对蛋白表达能力的影响.方法:序列特异性引物-聚合酶反应(Sequence specific pfimers-pdy merase chain reaotion,SSP-PCR)方法分析113名重庆汉族结核病患儿及167名健康儿童IL-18基因启动子(-607C/A和-137G/C)多态性;ELISA检测46例重庆汉族健康儿童PBMCs培养上清中IL-18的表达水平.结果:结核患儿组IL-18-137GG基因型的分布频率(81.4%)显著高于健康对照组(67.7%)(P=0.01),-137GC基因型的分布频率(16.8%)显著低于健康对照组(28.7%)(P=0.02);结核患儿组IL-18-137等位基因C分布频率(10.2%)明显低于健康对照(18.0%)(P=0.01);而结核患儿IL-18-607位各基因型及等位基因频率与健康对照比较无显著性差异.携带IL-18-137GG基因型儿童的PBMCs体外自发或经PMA A23187活化后,表达IL-18蛋白的水平显著低于-137GC基因型者(P＜0.01).结论:IL-18-137位基因多态性可能与重庆儿童结核病易感性有关,等位基因G可能使IL-18蛋白低表达,是结核病的易感基因,而IL-18-607位基因多态性则可能与结核病易感性无关.     

xCT基因rs13120371位点单核苷酸多态性与肺结核易感性的相关性

目的 通过大样本病例与对照研究明确xCT基因功能性SNP与结核病易感性的相关性,明确其调控结核病发生发展的分子机制。方法 从健康对照和结核患者的全血样本中提取基因组DNA,采用TaqMan探针技术对xCT基因rs13120371位点进行基因分型并对基因频率进行关联性分析,结核菌特异性抗原IFN-γ斑点形成细胞的数量和放射影像学分数反应不同基因型与临床指标的相关性,Real-time PCR方法检测健康对照和结核患者外周血单个核细胞中xCT基因及其相关的CXCL1、CXCL2、IL1B基因的表达水平。结果 等位基因位点基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律(χ²=0.678,P>0.05),选择的样本具有群体代表性。rs13120371位点的单核苷酸多态性与结核病的易感性相关,其中结核患者组等位基因A的基因频率为70.2%,等位基因G的基因频率为29.8%;健康对照组等位基因A的基因频率为66.8%,等位基因G的基因频率为33.2%,两组之间的等率基因频率差异具有统计学意义(P=0.02,OR=0.86)。AA基因型患者的结核菌特异性刺激分泌的IFN-r斑点形成细胞数量及炎症反应指标明显高于基因型GG的患者,基因型AA的细胞xCT基因的表达水平也明显上调。结论 xCT基因rs13120371位点的单核苷酸多态性与汉族人群结核感染的易感性相关,并且rs13120371位点是功能性SNP,等位基因A可能增加结核菌感染的风险。     

珠海地区汉族人群IL-18基因启动子SNP与2型糖尿病的关系

目的 分析珠海地区汉族人群白细胞介素18(interleukin 18,IL-18)基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与2型糖尿病(T2DM)的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术分析T2DM患者(病例组)和健康体检者(对照组)IL-18基因启动子区-137G/C与-607C/A 2个位点的多态性,比较两组人群基因型频率和等位基因频率.结果 (1)IL-18基因启动子区-607C/A位点3种基因型分别为CC型、AA型和A/C型,但基因型和等位基因频率在病例组与对照组之间分布差异无统计学意义(P＞0.05).(2)IL-18基因启动子-137G/C 3种基因型分别为GG型、CC型和G/C型,其基因型分布在病例组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05),病例组-137G等位基因频率高于对照组(2=5.439,P=0.020).等位基因频率的相对风险分析显示G等位基因的携带者患T2DM的风险是C等位基因携带者的2.38倍(OR=2.38,95%CI为1.149～4.938).结论 IL-18基因启动子区-137G/C可能与珠海地区汉族人群T2DM易感性有关,其中G等位基因可能是T2DM发病的危险因素之一.     

贵阳地区224例哮喘儿童 IL-17 A-152 G/A 位点基因多态性及与哮喘易感性的研究

目的：探讨白细胞介素-17A（IL-17A）-152G/A位点单核苷酸多态性（SNP）在贵阳地区支气管哮喘儿童的分布特征。方法：选择224例支气管哮喘患儿作为哮喘组,对照组为同期150例健康体检儿童,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（ PCR-RFLP）方法检测两组IL-17A-152G/A位点单核苷酸多态性,分析两组基因型、等位基因频率及其与哮喘易感性的关系,采用χ2检验分析基因型及等位基因频率。结果：IL-17A基因-152G/A位点 AA、AG、GG 3种基因型频率在哮喘组中分别为21.4％、53.6％、25.0％,对照组中分别为11.3％、54.7％、34.0％,该位点在哮喘组与对照组间基因型频率及等位基因频率分布差异均有统计学意义（χ2=7.832,P＜0.05;χ2=6.635,P＜0.05）,等位基因A与哮喘相关。结论：IL-17A基因-152G/A位点多态性可能是贵阳地区儿童支气管哮喘的候选基因,AA纯合子基因型可能与儿童支气管哮喘发病相关。     

RANTES-403G/A、MCP-1-2518A/G基因多态性与呼吸道合胞病毒毛细支气管炎易感性的相关性

目的：探讨调节激活正常T细胞表达、分泌的细胞因子（RANTES）-403G/A、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）-2518A/G基因多态性与呼吸道合胞病毒（RSV）毛细支气管炎易感性的相关性。方法：应用聚合酶链反应-限制性酶切片段长度多态性技术（PCR-RFLP）检测150例RSV毛细支气管炎患儿和120例正常儿童上述位点单核苷酸多态性（SNPs）。结果：病例组RANTES-403G/A基因型和等位基因型频率分别为GG20.7%、GA63.3%、AA16.0%、G52.3%、A47.7%,对照组为GG37.5%、GA46.7%、AA15.8%、G60.8%、A39.2%,两组基因型频率差异有显著性（P〈0.05）;病例组A等位基因频率高于对照组（P〈0.05）,与G等位基因携带者相比,A等位基因携带者患病风险增加（OR=1.415,P〈0.05）。两组MCP-1-2518基因型和等位基因频率差异无显著性（均P〉0.05）。结论：RANTES-403A等位基因与RSV毛细支气管炎易感性相关,其可能是影响发病的一个重要候选基因;未发现MCP-1-2518A/G基因多态性与RSV毛细支气管炎易感性存在关联。     

CD14和IL-8基因多态性与新生儿坏死性小肠结肠炎易感性的关联性分析

目的：探讨白细胞分化抗原14（CD14）-159C/T（rs2569190）和白细胞介素8（IL-8）-251A/T（rs4073）基因多态性与坏死性小肠结肠炎（NEC）易感性之间的关系,阐明NEC易感性的可能影响因素,为NEC的发病机制研究提供遗传学理论依据。方法：选取28例NEC新生儿（NEC组）和41例非NEC新生儿（对照组）作为研究对象,提取并应用基因聚合酶链式反应（PCR）扩增其外周血DNA,并采用Sanger基因测序方法,检测CD14-159C/T和IL-8-251A/T区域的等位基因频数和基因型频数的分布,探讨其与NEC易感性的关联性。结果：CD14-159C/T和IL-8-251A/T位点基因型频数分布符合Hardy-Weinberg平衡定律（P>0.05）;CD14-159C/T的等位基因和基因型频数分布在2组间比较差异无统计学意义（P>0.05）;IL-8-251A/T位点的基因型频数分布在2组间比较差异无统计学意义（P>0.05）;而NEC组IL8-251A/T基因位点T等位基因频数分布高于对照组（χ²=4.184,P=0.041,OR=2.14,95% CI：1.03~4.46）。结论：CD14-159C/T的基因位点多态性和NEC的发病无关联,而IL-8基因的-251 T位点与NEC发病易感性存在关联,IL-8基因的-251 T等位基因突变可能是NEC的危险因素之一。     

IL-4基因多态性与慢性粒细胞自血病的相关性研究

目的探讨IL-4基因启动子区域-590C/T基因多态性与慢性粒细胞白血病（CML）的相关性。方法采用PCR-SNP技术,检测30例CML患者组和40例正常对照组IL-4基因多态性。结果IL-4基因-590C／T基因型频率和C等位基因频率在两组人群中的分布差异有统计学意义（P〈0．05,RR=4．33）,C等位基因携带者患CML的风险是T等位基因的5．65倍（P〈0．01,OR=5．65）。结论IL-4基因-590C／T基因型多态性与CML的发病具有相关性,其中C等位基因可能是CML发病的遗传易感性基因,携带等位基因的个体可能通过降低IL-4的表达而增加CML的发病风险。     

汉族人群肺结核患者白介素-4基因多态性的研究

目的探讨白介素-4（IL-4）基因启动子区-590C/T位点单核苷酸多态性（SNP）与肺结核病的关系。方法采用序列特异性引物PCR（PCR—SSP）22．测序技术检测深圳地区汉族人群肺结核患者194例及健康对照者195例IL-4启动子-590C/T位点基因多态性。采用直接计数法计算各组基因型频率及等位基因频率,并进行）（2检验。以P〈0．05为具有统计学意义。结果两组人群IL-4启动子区-590C/T位点基因型及等位基因分布频率无明显差异（P〉0．05）。结论IL-4基因启动子区-590C／T位点基因多态性与中国汉族人群肺结核病易感性无关。     

Endothelial Nitric Oxide Synthase Gene Polymorphisms Associated with Susceptibility to High Altitude Pulmonary Edema in Chinese Railway Construction Workers at Qinghai-Tibet over 4500 Meters above Sea Level

Objective To examine whether the polymorphisms of endothelial nitric oxide synthase （eNOS） gene are associated with the susceptibility to high altitude pulmonary edema （HAPE） in Chinese railway construction workers at Qinghai-Tibet where the altitude is over 4 500 m above sea level. Methods A case-control study was conducted including 149 HAPE patients in the construction workers and 160 healthy controls randomly recruited from their co-workers, matching the patients in ethnicity, age, sex, lifestyle, and working conditions. Three polymorphisms of eNOS gene, T-786C in promoter, 894G/T in exon 7, and 27bp variable number tandem repeat （VNTR） in intron 4, were genotyped using polymerase chain reaction （PCR） and confirmed with DNA sequencing. Results The frequencies of 894T allele and heterozygous G/T of the 894G/T variant were significantly higher in HAPE patients group than in the control group （P=0.0028 and P=0.0047, respectively）. However, the frequencies of the T-786C in promoter and the 27bp VNTR in intron 4 were not significantly different between the two groups. Haplotypic analysis revealed that the frequencies of two haplotypes （H3,T-T-b, b indicates 5 repeats of 27 bp VNTR; H6, C-G-a, a indicates 4 repeats of 27 bp VNTR） were significantly higher in HAPE patients （both P〈0.0001）. On the contrary, the frequencies of H1 （T-G-b） and H2 （T-G-a） were lower in HAPE patients than in healthy controls （both P〈0.001）. Conclusions Two haplotypes （T-T-b and C-G-a） may be strongly associated with susceptibility to HAPE. Compared with the individual alleles of eNOS gene, the interaction of multiple genetic markers within a haplotype may be a major determinant for the susceptibility to HAPE.     

自然抗性相关巨噬细胞蛋白1基因 与云南汉族人肺结核易感性的相关性研究

目的探究自然抗性相关巨噬细胞蛋白1（NRAMP1）基因D543N、INT4位点多态性与肺结核易感的相关性。方法采用病例-对照研究,挑选122例痰涂片阳性的云南汉族活动性肺结核病人为病例组,另选同期101名与病例组民族、年龄、性别相匹配的健康体检者为对照组。通过聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）技术对2组入选者NRAMP1基因D543N、INT4位点多态性进行分型。结果INT4位点野生纯合子（G/G）、杂合子（G/C）、突变纯合子（C/C）在病例组和对照组的分布频率分别为66.4%、32.0%、1.6%和86.1%、12.9%、1.0%,2组差异有统计学意义（P < 0.01）,其中杂合型（G/C）携带者肺结核的患病风险为野生纯合型（G/G）的3.22倍（95%CI:1.61~6.47）。而D543N位点野生纯合子（G/G）、杂合子（G/A）、突变纯合子（A/A）在病例组和对照组的分布频率分别为61.5%、36.9%、1.6%和70.3%、29.7%、0%,差异无统计学意义（P>0.05）。结论基因INT4位点多态性可能影响云南汉族人群对肺结核的易感性。     

载脂蛋白E基因启动子多态性与年龄相关性黄斑变性的关系

目的:探讨载脂蛋白E(APOE)基因启动子(-219G/T)多态性与年龄相关性黄斑变性(AMD)发病危险性的关系。方法:用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性分析法对AMD组(50例)和对照组(95例)的APOE-219G/T基因型做出鉴定。结果:两组间不存在-219G/T基因型频率分布的差异(P>0.39)。结论:APOE基因-219G/T多态性与AMD发病危险性无关。     

凝血酶激活的纤溶抑制物编码区基因多态性与2型糖尿病的关系

目的探讨凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)编码区2个单核苷酸多态性位点(505A/G,1040C/T)与2型糖尿病(T2DM)发病及病程进展的相关性。方法应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR RFLP)分析技术检测157例T2DM患者(T2DM组)和140例正常对照者（对照组）的TAFI505A/G 、1040C/T两位点的多态性,其中T2DM组根据尿白蛋白排泄量与尿肌酐的比值(ACRs) 进一步分型。结果505A/G多态性位点病例组及对照组中各基因型的分布差异无统计学意义,但在1040C/T位点T2DM组T等位基因的频率较对照组明显下降(15.6% vs 25.7%, P＜0.05),这主要由于病例组T/T纯合子型比例显著下降所致(P＜0.05, 95% OR 0.28, CI 0.11～0.70)。但这种显著性差异只呈现在早期T2DM组。结论① TAFI1040C/T基因多态性与T2DM患病危险度存在关联;② T等位基因可能在T2DM早期病情进展中起保护性作用。     

中国藏族人群HLA-DRB1、-DQA1、-DQB1等位基因多态性与肺结核易感性的关联性研究

目的探讨HLA-DRB1、-DQA1和-DQB1等位基因多态性与中国藏族人群肺结核易感性之间的关系。方法采用聚合酶链反应/序列特异性引物(PCR/SSP)技术对176例中国西藏地区藏族肺结核患者和189例该地区藏族健康人群的HLA-DRB1、-DQA1和-DQB1等位基因多态性进行分析。结果 HLA-DRB1*0901、-DQA1*0101和-DQB1*0301在肺结核组的等位基因频率明显高于健康对照组,2组相比差异具有统计学意义(17.33%vs 7.94%,χ2=17.185,P=0.000,OR=2.811;25.85%vs 13.76%,χ2=22.382,P=0.000,OR=2.821;35.51%vs 19.58%,χ2=37.329,P=0.000,OR=3.809)。HLA-DRB1*1301/1302、-DQA1*0501在肺结核组的等位基因频率明显低于健康对照组,2组相比差异具有统计学意义(0.85%vs 6.08%,χ2=15.085,P=0.000,OR=0.125;14.49%vs 26.72%,χ2=22.44,P=0.000,OR=0.355)。结论 HLA-DRB1*0901、-DQA1*0101和-DQB1*0301与肺结核的易感性密切相关,可能是肺结核的易感基因。HLA-DQA1*0301与肺结核的保护性密切相关,可能为肺结核的保护基因。     

中国山东汉族人群TIM-3基因启动子区域两单核苷酸多态与支气管哮喘的相关性

目的：检测中国山东汉族人群T细胞免疫球蛋白域和粘蛋白域蛋白 3（T cell immunoglobulin domain and mucin domain protein 3, TIM 3）基因启动子区域的单核苷酸多态（single nucleotide polymorphism,SNP）位点T 882C以及T 574G的多态性,探讨TIM 3基因启动子区域的单核苷酸多态与汉族人群支气管哮喘易感性的关系。方法：采用聚合酶链反应－限制性片断长度多态性（polymerase chain reaction and restriction fragment length polymorphism,PCR RFLP）法检测449例哮喘患者以及386例正常对照TIM 3基因启动子区域单核甘酸多态位点T 882C及T 574G的基因型,计算基因型频率及等位基因频率,进行χ2检验。结果：T 882C及T 574G在中国汉族人群中处于完全连锁不平衡状态,其基因型频率及等位基因频率一致;T 882C位点TT/TC/CC基因型频率以及T 574G位点TT/TG/GG基因型频率在病例组中为0/0.042?3/0.957?7,在对照组中为0/0.018?1/0.981?9;两位点的基因型、等位基因分布以及单倍体型分布在哮喘组与对照组之间均有统计学差异。结论：中国汉族人群TIM 3基因启动子区域单核苷酸多态T 882C、T 574G与支气管哮喘易感性相关。     

非糖尿病患者脂联素基因SNP+276 G/T单核苷酸多态性与冠心病的相关性研究

目的:探讨在中国南京地区汉族人群中脂联素单核苷酸多态性SNP 276 G/T与冠心病的关系.方法:采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,分析了266例非糖尿病患者的冠脉造影结果和脂联素单核苷酸多态性(SNP 276 G/T)的关系,研究设立了病例组和正常对照组.结果:相对于T/T基因型,G/G基因型修正后的OR值为3.16,(P＜0.05);G/G G/T基因型的修正后OR值为2.69,(P＜0.05).结论:脂联素SNP 276 G/T各种基因型和冠心病的发病密切相关,G/G基因型很可能是冠心病的易感基因型.     

XRCC1单核苷酸多态及单体型分布与乳腺癌的相关研究

目的：探讨X线交叉互补基因1（XRCC1）外显子C26304T、G27466A和G28152A三处最常见的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism，SNP）与乳腺癌的关系。方法：以自然人群为基础的病例对照研究方法，对84例乳腺癌患者组和以1：3成组频数匹配原则获得的252例对照组进行研究，XRCC1 C26304T、G27466A和G28152A SNPs基因分型采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性（polymerase chain reaction—restriction fragment length polymorphism，PCR—RFLP）分析方法。单体型分布采用EH linkage software 1．2分析软件进行预测和比较。结果：乳腺癌患者组和对照组吸烟状况分布差异有显著性，病例组曾经或现在吸烟个体比例7．1％明显高于对照组2．0％（P〈0．05），性别、年龄、饮酒状况及一二级亲属家族恶性肿瘤史等基本特征因素分布差异均无显著性（P〉0．05）。C26304T、G27466A和G28152A SNPs多态基因型和多态等位基因分布在两组间分布差异均无显著性（P〉0．05）。经上述因素校正后，XRCC1 SNPs与乳腺癌发病没有显著相关关系（P〉0．05）。应用EH linkage software 1．2单体型分析软件显示，XRCC1 SNPs在各组内均存在连锁不平衡现象，CGG、CGA、CAG和TGG是最常见的4类单体型。单体型组间分布同样不存在显著性差异（P〉0．05）。结论：XRCC1 C26304T、G27466A和G28152A SNPs与乳腺癌的风险没有相关关系，各SNPs存在连锁不平衡现象，CGG、CGA、CAG和TGG是最常见的4类单体型。