RNA干扰靶向敲低尿激酶纤溶酶原激活剂及其受体可抑制前列腺癌细胞体内的侵袭、存活及成瘤

肿瘤细胞侵袭力在前列腺癌转移中发挥重要作用,是治疗失败的主要原因。尿激酶纤溶酶原激活剂(uPA)及其受体(uPAR)介导的信号通路参与多种肿瘤的侵袭、存活与转移。本研究旨在探讨uPA与uPAR在前列腺癌细胞侵袭、存活中的生物学作用,以及作为前列腺癌靶向治疗目标的可能性。uPA与     

骨肉瘤中尿激酶型纤溶酶原激活因子和受体的表达

目的研究尿激酶型纤溶酶原激活因子(uPA)及其受体(uPAR)在不同外科分期骨肉瘤中的表达及意义.方法采用荧光定量RT-PCR方法检测32例骨肉瘤组织uPA和uPAR表达情况.结果肿瘤组织与癌旁组织和正常组织比较,uPA和uPAR表达的阳性率明显增高(P＜0.01).骨肉瘤Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期表达uPA的阳性率分别为22.2%(2/9)、76.9%(10/13)、90.0%(9/10),表达uPAR的阳性率分别为33.3%(3/9)、84.6%(11/13)、90.0%(9/10).uPA和uPAR在Ⅰ期和Ⅱ期、Ⅰ期和Ⅲ期骨肉瘤中表达差异均有显著性(P＜0.05、P＜0.01).结论uPA/uPAR在骨肉瘤组织中表达明显升高.肿瘤恶性程度越高,uPA/uPAR表达阳性率越高,提示uPA/uPAR与骨肉瘤恶性进展有高度相关性.     

uPA、uPAR和PTEN在膀胱移行细胞癌中的表达及其与肿瘤侵袭和转移的关系

目的研究膀胱移行细胞癌uPA、uPAR及抑癌基因PTEN蛋白的表达及其与肿瘤侵袭、转移的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测60例膀胱移行细胞癌组织uPA、uPAR和PTEN蛋白的表达。结果uPA、uPAR和PTEN阳性表达率分别为50.00%、50.00%和41.67%。uPA和uPAR的高表达与膀胱移行细胞癌的分化程度、浸润和转移关系密切(P<0.05);PTEN蛋白的低表达与膀胱移行细胞癌的分化程度、浸润和转移密切相关(P<0.05);膀胱癌中uPA和uP-AR与PTEN蛋白表达呈负相关(r=-0.481,P<0.05)。结论uPA和uPAR的高表达可能作为膀胱移行细胞癌侵袭、转移的指征之一,PTEN可能作为膀胱移行细胞癌预后不良的指标;uPA和uPAR对肿瘤细胞侵袭转移的作用可能在一定程度上受到PTEN的调控。     

骨关节炎滑膜uPA,uPAR,tPA表达及意义

目的:探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)和组织型纤溶酶原激活物(tPA)在OA的发生发展中的意义.方法:采用免疫组化方法检测滑膜组织中uPA,uPAR,tPA的表达.结果:40例OA滑膜中阳性表达uPA 31例(77.5%)、uPAR 22例(55%)、tPA 37例(92.5%).10例对照滑膜中阳性表达uPA 2例(20%)、uPAR 1例(10%)、tPA 8例(80%).阳性表达主要分布在滑膜衬里层细胞.结论:uPA系统可能参与介导软骨降解.促进OA的发生发展;而tPA可能与OA关系不密切.     

尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)和其受体(uPAR)在肝细胞癌的表达及其临床和病理意义

目的　研究尿激酶型纤溶酶原激活剂 (uPA)和其特异性受体 (uPAR)在肝细胞癌 (HCC)的表达及其临床和病理意义。　方法　应用免疫组织化学和酶联免疫吸附法 (ELISA)检测uPA和uPAR在HCC和非癌组织中的表达 ,并与临床及病理指标相联系。　结果　HCC中uPA和uPAR的阳性表达率分别为 75 0 % (12 / 16 )和 6 8.8% (1/ 16 )。在进展性和侵袭性肿瘤与非进展性和非侵袭性肿瘤间uPA和uPAR阳性率无显著性差异 (P >0 .0 5 )。阳性染色主要位于癌细胞和基质细胞胞浆且主要位于癌侵犯的边缘。非癌组织仅见少量阳性染色细胞 ,对照组无特异性阳性染色。在ELISA中 ,癌与非癌组织uPA抗原水平分别为 (4 2 3± 0 5 7)ng/mg蛋白和 (1 2 6± 0 14)ng/mg蛋白 ,uPAR抗原水平分别为 (4 2 5± 0 2 1)ng/mg蛋白和 (3 15± 0 2 3)ng/mg蛋白 ,有显著性差异 (t=18.96 3,P =0 .0 0 0 ;t=13.6 93 ,P =0 .0 0 0 )。且进展性和侵袭性肿瘤中其抗原水平显著高于非进展性和非侵袭性肿瘤 (P <0 0 5 )。　　结论　uPA和uPAR在肝细胞癌表达较高并与其进展和侵袭密切关联。     

尿激酶在外科肿瘤的研究进展

uPA介导的纤溶系统与细胞外基质和基底膜的降解有关，在肿瘤的生长、浸润和转移过程中起重要作用。检测uPA系统各蛋白的水平可以作为判断肿瘤的恶性程度和预后的标记，特异性地阻止uPA／uPAR的活性、抑制uPA或uPAR的表达，可以抑制肿瘤的浸润和转移，达到治疗肿瘤的目的。     

肝细胞癌门静脉主干癌栓uPA和uPAR基因表达

目的：探讨uPA,uPAR基因表达和肝癌转移，肝细胞癌门静脉主干癌栓（Tumor thrombosid of the main trunk of the portal vein,PVTT)形成的关系。方法：采用原位杂交等技术检测uPA,uPAR表达。结果：癌栓（A1组）和其原发癌（A2组）uPA,uPAR mRNA阳性表达率均高于无转移肝癌（B组）（P均＜0．01），A1组表达强度均高于A2组（P＜0．01），A2组小血管内可见癌细胞群落，A1组多见，B组无此现象，A1组、A2组uPAR和uPA蛋白质阳性表达率均高于B组（P均＜0．01），A1组表达强度均高于A2组（P＜0．01），uPA,uPAR mRNA和其蛋白质表达存在良好相关性（P均＜0．01），结论：uPA,uPAR在肝癌的侵袭和转移中起重要作用。其过度表达是PVTT形成和肝癌转移的重要因素。     

本期继续教育测试题

(请在您选定的内容打“√”)1·uPA/uPAR在骨性关节炎的发生发展中有何作用?A·导致骨关节软骨组织的降解B·与MMPs之间相互协调C·与细胞因子之间相互促进D·以上都对2·uPA/uPAR治疗骨性关节炎的可靠方法是?A·调节uPA在病变过程中的作用B·调节uPAR在病变过程中的作用C·改变uPA/uPAR与细胞因子等之间的相互协同作用D·以上都对3·在非创伤性股骨头缺血坏死的治疗研究中影响细胞因子过渡到临床的关键问题是?A·合适的载体及其在体内的有效浓度B·细胞因子来源C·并发症D·免疫问题4·藻酸钙的强化特性是?A·不吸收B·毒性…     

肝细胞癌病人血浆TF,uPA及uPAR检测的临床意义

目的 探讨肝细胞癌病人血浆TF,uPA和uPAR水平变化及临床病理意义。方法应用酶联免疫法(ELISA)检测肝细胞癌病人50例及对照组30例的血浆TF,uPA和uPAR水平,并结合临床病理资料探讨其临床意义。结果 肝细胞癌病人血浆TF,uPA及uPAR均较对照组升高,差异有显著性(P<0.05)。肝细胞癌病人血浆TF在低分化组,肿瘤较大组及合并肝硬化组显著升高(P<0.05),而在不同癌灶数目及包膜情况组间无显著差异(P>0.05)。血浆uPA水平只在合并肝硬化组升高(P<0.05),uPAR水平与以上病理指标均无关(P>0.05)。肝细胞癌病人血浆TF,uPA和uPAR水平均与侵袭转移指标有关,在有淋巴转移,肝外脏器转移及门脉癌栓组较无转移及癌栓组升高(P<0.05)。结论 肝细胞癌病人存在凝血,纤溶激活状态。血浆 TF,uPA和uPAR升高与肝细胞癌的发生及侵袭转移有关,其检测有助于早期诊断病情及判断预后。     

骨关节炎滑膜uPA,uPAR,tPA表达及意义

目的：探讨尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)及其受体(uPAR)和组织型纤溶酶原激活物(tPA)在OA的发生发展中的意义。方法：采用免疫组化方法检测滑膜组织中uPA，uPAR，tPA的表达。结果：40例OA滑膜中阳性表达uPA31例(77．5％)、uPAR22例(55％)、tPA37例(92．5％)。10例对照滑膜中阳性表达uPA2例(20％)、uPAR1例(10％)、tPA8例(80％)。阳性表达主要分布在滑膜衬里层细胞。结论：uPA系统可能参与介导软骨降解。促进OA的发生发展；而tPA可能与OA关系不密切。     

Gene expression changes of urokinase plasminogen activator and urokinase receptor in rat testes at postnatal stages

Aim： To investigate the gene expression changes of urokinase plasminogen activator （uPA）/urokinase receptor （uPAR） in rat testes at postnatal stages and explore the effects of uPA/uPAR system on the rat spermatogenesis. Methods： The mRNAs of uPA and uPAR in rat testes were measured by using real-time quantitative polymerase chain reaction （PCR） at postnatal days 0, 5, 10, 15, 21, 28, 35, 42, 49 and 56, respectively. Results： The tendencies of uPA and uPAR mRNA expression were similar at most postnatal stages except for Do. The expression of uPAR mRNA in rats testes was relatively higher than that of uPA at postnatal Do, and both were decreased until D21, increased obviously at postnatal D28, reached a peak at postnatal D35, then declined sharply at postnatal D42 and retained at a low level afterwards. Conclusion： The uPA/uPAR system may be strongly linked to spermiation and spermatogenesis via regulating germ cell migration and proliferation, as well as promoting the spermiation and detached residual bodies from the mature spermatids.     

尿激酶型纤溶酶原激活因子及其受体在神经母细胞瘤中的表达及其意义

目的：研究尿激酶型纤溶酶原活因子（uPA)及其受体（uPAR）在神经母细胞瘤（NB）中的表达和意义。方法：应用免疫组织化学方法研究uPA及uPAR在42例神经母细胞瘤中的表达，并应用逆转录-聚合酶链式反应（RT－PCR）方法检测患儿骨髓和外周血中的神经蛋白基因产物9．5（PGP9．5）。结果：uPA及uPAR阳性表达主在进展期肿瘤（均为85．7％）高于局灶期肿瘤（42．9％，28．6％）；预后不良型患儿（91．7％，83．3％）高于预后良好型患儿（均为44．4％），且差异均具有非常显著性（P＜0．01）。患儿骨髓和外周血中PGP9．5阳性检出率在uPA阳性患儿组（60．0％）显著高于uPA阴性患儿组（8．3％，P＜0．01）；uPAR阳性组（57．1％）高于uPAR阴性组（21．4％，P＜0．05）。uPA和uPAR同时阳性的10例患儿，骨髓和外周血中均有PGP9．5阳性表达，而同时阴性的5例患儿中，均未检测到PGP9．5。结论：uPA和uPAR在NB的浸润转移过程中发挥重要的作用。     

尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体高表达增强血管收缩性重塑和内膜增生的研究

目的　探讨血管壁中尿激酶型纤溶酶原激活物 (uPA)和其受体 (uPAR)表达与血管收缩性重塑和内膜增生的相关性。方法　建立兔髂动脉粥样硬化再狭窄模型 ,比较内膜和中膜层的uPA、uPAR表达及其与内膜面积和血管重塑指数的相关性。结果　内膜层uPA、uPAR的抗原和mRNA表达明显强于中膜层 (P <0 .0 1) ,血管壁内膜uPA、uPAR的抗原和mRNA表达水平与血管重塑指数呈负相关 (r =-0 .870 0 7,P =0 .0 10 9;r =-0 .860 3 8,P =0 .0 13 0和r =-0 .845 5 5 ,P =0 .0 165 ,r =-0 .862 40 ,P =0 .0 12 5 ) ,与内膜面积呈正相关 (r=0 .92 0 0 0 ,P =0 .0 3 3 0 ;r=0 .90 772 ,P =0 .0 0 47和r=0 .92 14 9,P =0 .0 0 3 2 ;r =0 .90 614 ,P =0 .0 0 49) ,血管重塑指数和血管内膜面积与中膜uPA、uPAR表达无明显相关性。结论　内膜层uPA、uPAR高表达增强了血管重建后血管壁收缩性重塑和内膜增生。     

尿激酶型血浆纤溶酶原激活物及其受体对胃癌细胞腹膜转移生物学行为的影响

我们选择高表达尿激酶型血浆纤溶酶原激活物（uPA）和高腹膜转移潜能的胃癌细胞系MKN45作为研究对象，观察μPA及其受体（uPAR）对胃癌细胞腹膜转移生物学行为的影响。[第一段]     

骨关节炎滑膜组织中uPA、uPAR、PAI-1mRNA及蛋白的表达及其临床意义

目的 检测尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）、其受体（uPAR）、其抑制剂（PAI-1）mRNA及蛋白在骨关节炎（OA）滑膜中的表达,探讨uPA、uPAR及PAI—1在OA细胞外基质降解中的作用。方法采用RT—PCR及免疫组化检测36例OA（实验组）和21例正常（对照组）滑膜组织中uPA、uPAR、PAI-1mRNA及蛋白的表达情况。结果经RT—PCR及免疫组化实验,实验组与对照组间3种mRNA及蛋白表达差异均有显著性（P〈0．05）;再将实验组按年龄及软骨破坏程度分组,按年龄分组3种mRNA及蛋白表达差异均无显著性（P〉0．05）;按软骨破坏程度分组3种mRNA及蛋白表达差异均有显著性（P〈0．05）。结论OA滑膜组织存在高水平uPA、uPAR、PAI—1mRNA及蛋白的表达,提示在OA的发生发展过程中,uPA、uPAR及PAI-1起着重要作用,为骨关节炎的治疗提供了一个崭新的思路。     

封闭负压引流技术对创面愈合过程纤溶酶原激活剂级联表达的影响

目的研究封闭负压引流技术对急慢性创面纤溶酶原激活剂(plasminogen activator,PA)级联中尿激酶型纤溶酶激活剂(urokinase-type plaminogen activator,uPA)和尿激酶型纤溶酶激活剂受体(urokinase-type plasminogen activator receptor,uPA)表达的影响。方法雄性小家猪5头,背部两侧形成急性创面,分为实验组和对照组,仅实验组动物接受封闭负压引流治疗。分别在治疗前和治疗后第1、3、6、9、12、18、25天于创缘切取标本,用兔抗人uPA和uPAR单克隆抗体按ABC程序进行免疫组织化学染色,并计算uPAA和uPAR的标记指数。人慢性创面6例,清创后进行持续封闭负压引流治疗,在治疗后第13、、5、7天采集创面渗出液,并用ELISA法检测渗出液中uPA和uPAR的含量。结果猪急性创面在封闭负压引流治疗后uPA和uPAR均增加,在第3天达到高峰,然后急速下降,但实验组的基因表达量和染色强度均显著高于对照组。6例人慢性创面进行治疗前uPA和uPAR表达较多,随着治疗时间的延长而逐渐减少。结论封闭负压引流治疗既能上调急性创面伤口周围的表皮角质形成细胞的uPA和uPAR表达,使之迅速增殖迁移;又能通过抑制慢性创面uPA和uPAR表达,从而减少细胞外基质的降解。     

转染环氧合酶-2反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞侵袭性的抑制作用

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)反义寡核苷酸(ODNs)对人骨肉瘤细胞株OS-732侵袭性的抑制作用及其机制.方法 设计和合成COX-2反义寡核苷酸,体外转染骨肉瘤OS-732细胞,逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot证实转染效果.改良Boyden-transwell方法观察肿瘤细胞侵袋抑制率,RT-PCR方法研究转染COX-2反义ODNs对OS-732细胞尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体(uPA、uPAR)mRNA表达的影响.结果 转染COX-2反义ODNs的细胞COX-2核酸、蛋白表达水平显著降低.转染组细胞侵袭能力显著降低,呈浓度依赖性.转染组细胞uPA、uPAR的mRNA表达水平显著降低(P<0.01).结论 COX-2反义ODNs对OS-732细胞侵袭能力有明显抑制作用,其对uPA、uPAR表达的下调是主要作用机制.     

尿激酶受体在尿激酶诱导小鼠精子趋化运动中的作用

目的研究尿激酶受体(uPAR)在尿激酶(uPA)诱导精子趋化运动中的作用。方法采用精子聚集毛细管内法检测精子趋化性。实验分为对照组和处理组,处理组又根据uPAR抗体浓度的不同分为10、50、100μg/ml 3组。各组毛细管内的液体都是浓度相同的uPA;对照组精子培养皿内的液体为精子悬液与Ham’s F-10的混合液,处理组精子培养皿内液体是在对照组的基础上加有不同浓度的抗-uPAR抗体。分别在实验的第203、0 min检测每组毛细管内聚集的精子数量。结果随着uPAR抗体浓度的增加,uPA趋化精子的数目逐渐减少,与对照组之间差异有显著性(P<0.05)。抗-uPAR抗体与精子作用20 min时对精子趋化运动的抑制最明显,其中50、100μg/ml组与对照组比较,P<0.01。结论阻断精子uPAR可以抑制由uPA诱导的精子趋化运动,推测uPAR可能在精卵识别中起一定的作用。     

尿激酶及其受体对膀胱癌细胞系侵袭转移影响的体外研究

目的：探讨尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）及其受体（uPAR）与膀胱癌侵袭转移的关系。方法：对BIU-87、T24及EJ细胞系进行体外培养，夹心抗体ELISA法测定细胞培养上清及细胞溶解产物uPA含量，对培养细胞团块行uPAR免疫组化测定，并进行体外人工基底膜侵袭检测。结果：BIU-87、T24和EJ细胞培养上清uPA检测结果分别为（11．77&#177;3．65）ng／ml、（8．70&#177;2．45）ng／ml、（105．9&#177;8．60）ng／ml，EJ细胞培养上清uPA明显高于BIU87和T24细胞系（P〈0．001）。细胞溶解产物uPA结果分别为（1．15&#177;0．40）ng／ml、（0．78&#177;0．34）ng／ml、（1．92&#177;0．56）ng／ml，EJ细胞溶解产物uPA含量明显高于BIU-87、T24细胞溶解产物（P〈0．02，P〈0．01）。EJ细胞uPAR蛋白主要弥散于细胞质，着色强度与数量明显多于T24细胞（P〈0．01），而BIU-87细胞基本无着色。EJ细胞具有浸润Matrigel的能力，BIU-87、T24无浸润Matrigel能力。结论：肿瘤细胞有uPA的分泌或来源并同时表达uPAR在体外即具备浸润能力，uPA系统在膀胱肿瘤的浸润转移过程中起重要作用。     

辛伐他汀对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞炎性反应抑制作用

目的：运用脂多糖（LPS）诱导体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）的炎性反应,观察辛伐他汀对HUVECs炎性反应的抑制作用。方法：体外培养HUVECs,细胞至第3代,随机分为空白对照组、LPS（100 ng/mL）组、辛伐他汀（5 mg/mL）组、辛伐他汀（5 mg/mL）和LPS（100 ng/mL）共作用组,运用实时荧光定量PCR和ELISA的方法,测定各组细胞单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、白介素-1（IL-1）、白介素-6（IL-6）和尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体（uPA/uPAR）的mRNA和蛋白表达的变化。结果：与对照组相比,LPS组细胞的MCP-1I、L-1I、L-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清液中各因子蛋白的表达均明显增加（P均〈0.01）;与LPS组相比,辛伐他汀和LPS共作用组的细胞MCP-1I、L-1、IL-6及uPA/uPAR的mRNA表达和上清液中各因子蛋白的表达均明显降低（P均〈0.05）。结论：辛伐他汀可抑制HUVECs合成及分泌细胞因子MCP-1I、L-1I、L-6及uPA/uPAR,延缓动脉粥样硬化的进程。