肝癌多药耐药产生与低糖环境的关系

目的探讨局部微环境低糖与肝细胞癌多药耐药性(MDR)产生的关系及影响机制。方法低糖培养HepG2细胞,应用流式细胞术Annexin V/PI法检测低糖培养的细胞在化疗药物5-氟脲嘧啶(5-Fu)作用后的凋亡情况,分别应用荧光定量聚合酶链反应(PCR)技术和Western blot技术检测低糖培养后HepG2细胞内多药耐药相关基因mdr1、MRP1、LRP的mRNA和蛋白水平的表达。结果在低糖环境下生长时间越长的HepG2细胞对5-Fu的抵抗越强,而且随着低糖培养时间的增加,5-Fu诱导的HepG2细胞的凋亡高峰延迟。低糖培养的HepG2细胞内多药耐药相关基因mdr1、MRP1、LRP在mRNA和蛋白水平的表达随低糖培养时间的延长而升高,以LRP的改变最为显著。结论肝癌生长微环境葡萄糖耐量不足也是肝癌产生MDR的原因之一。低糖可通过上调一组多药耐药相关基因的表达而诱导肝癌的多药耐药性。     

关于处理肝外伤的几点意见

无论是战争年代还是和平时期上腹部外伤中，肝脏外伤的发病率都是很高的，我们曾统计过的1990年以前国内文献报告的肝外伤，共2588例［1］。最近，李缨来等［2］对1990年1月～1995年12月，6年间我国部分省31所医院（大多是县级医院）收治的外伤性肝破裂进行了调查，共收集了693例。关于肝外伤的治疗，传统上认为，一旦明确诊断，就应进行积极的手术。手术方式有很多种，包括纱布填塞、深部褥式缝合、肝动脉结扎及切肝术等。然而近10多年来，由于B型超声及CT等影像断学的发展以及肝外伤复苏治疗水平的提高，对肝损伤程度轻、血液动力学稳定…     

Tet-on基因表达系统调控HIF-1α表达对肝癌细胞凋亡的影响

目的探讨HIF-1α表达在体外对肝癌细胞凋亡的影响。方法利用Tet—on基因表达系统调控HePG2细胞HIF-1α的表达，观察细胞凋亡。结果酶切和DNA测序证实Tet—on基因表达系统反应质粒P^tre-hif-1α构建成功。获得了受强力霉素调控、稳定表达HIF-1α的肝癌细胞。经阿霉素诱导凋亡后，强力霉素终浓度为0μg／ml、0．02μg／ml、0．2μg／ml、1μg／ml、2μg／ml、5μg／ml时的细胞凋亡率分别为59．6％、50．9％、38．1％、30．5％、23．9％、18．3％；强力霉素0．02μg／ml、0．2μg／ml、1μg／ml、2μg／ml、5μg／ml处理细胞后，Casepase-3活性分别降低了2．3、5．5、8．7、12．6、18．8倍。RT—PCR检测结果显示，随着强力霉素浓度的增加，HIF-1α表达水平增加，Survivin和Bcl-2基因表达强度逐渐增加，差异有统计学意义（P〈0．001）。结论HIF-1α基因在体外可以抑制肝癌细胞凋亡，而且随着HIF-1α表达水平的增加，对肝癌细胞的凋亡抑制作用进一步加强，可能与HIF-1α诱导survivin和Bcl-2的表达及抑制casepase-3的活性有关。     

环氧合酶-2和血管内皮生长因子共表达与肝细胞癌血管形成的关系

目的　探讨环氧合酶 (COX) 2与肝细胞癌血管形成的关系。方法　利用免疫组织化学、Westernblot方法检测 48例肝癌组织中COX 2和血管内皮生长因子 (VEGF)蛋白及逆转录 聚合酶链反应法 (RT PCR)检测COX 2和VEGFmRNA的共表达 ,对共表达COX 2和VEGF蛋白和mRNA的肝癌组织进行微血管记数。结果　免疫组织化学检测中 ,48例肝癌组织 3 6例共表达COX 2和VEGF蛋白。类似结果见于蛋白电泳分析。RT PCR显示 ,48例肝癌组织 3 6例共表达COX 2mRNA和VEGFmRNA。两者之间的表达明显相关 (γ =0 .845 )。共表达COX 2和VEGF蛋白和mRNA的肝癌组织中 ,平均微血管数 (5 6.8± 17.5 )个 ,明显高于阴性表达组。结论　COX 2可能与肝细胞癌的血管形成有关 ,且其作用之一可能是通过上调VEGF通道来发挥的     

槐耳清膏治疗肝癌的实验研究

目的　探讨槐耳清膏对人胎脐静脉内皮细胞的作用 ,以及其对裸鼠皮下接种肝癌细胞形成肝癌的抑制作用及其可能机制。方法　用不同浓度的槐耳清膏作用于人胎脐静脉血管内皮细胞 ,观察其对细胞的增殖能力、迁移能力、附壁能力及血管生成的影响 ,同时观察其对裸鼠皮下接种肝癌细胞形成肝癌过程的影响。结果　槐耳清膏≥ 2mg/ml时可显著降低肿瘤组织的血管内皮细胞增殖能力 ,减少血管形成 ,抑制血管内皮细胞的迁移、黏附 ,从而降低微血管密度。槐耳清膏 ( 3g/kg) MMC( 5 0 0 μg/kg)同时作用于裸鼠的肝癌组织 ,其抑瘤作用最强 ,后依次为MMC组 ,槐耳清膏 ( 3g/kg)组。结论　槐耳清膏对肝癌有抑制作用 ,其可能机制是作用于血管内皮细胞 ,影响血管内皮细胞的增殖能力、迁移能力、附壁能力及血管生成 ,从而抑制肝癌组织的血管生成 ,降低肝癌组织的微血管密度而发挥抑制肝癌生长的作用     

过氧化物酶体增殖物激活受体对小鼠肝细胞生长周期的影响

目的 探讨过氧化物酶体增殖物对小鼠原代肝细胞生长周期的影响和配体过氧化物酶体增殖物激活受体（proxisome proliferators—activated receptor，PPAR）alpha在肝癌形成过程中的变化。方法 在小鼠原代肝细胞中加入PPAR配体Wy-14，643，经不同培养时间后，应用流式细胞仪、逆转录-聚合酶链反应及Western blot等方法检测细胞增殖和凋亡，细胞周期蛋白p21WAFI、cyclinD1的mRNA及蛋白的变化情况。结果 在小鼠原代肝细胞中加入Wy-14，643培养2、4、6d，S＋G2／M期细胞比例分别为（42．3±1．2）％，（50．3±2．1）％，（52．1±2．3）％，细胞凋亡率分别（9．0±0．2）％，（7．9±2．O）％，（7．4±1．3）％，与未加药组相比，细胞增殖明显增高（P〈0．05），凋亡明显减少（P〈0．05）；各加药组cylinD1 mRNA和蛋白的表达也比对照组明显增高（P〈0．05）；各加药组p21^WAF1 mRNA与对照组相比表达无显著变化（P〉0．05），第4天开始出现p21^WAF1。蛋白的表达显著增加（P〈0．05）。结论 过氧化物酶体增殖物通过其配体PPARα引起细胞周期蛋白的改变，导致正常细胞周期信号的传导紊乱，引起细胞异常的增殖和凋亡，从而有可能诱发肿瘤。     

胰性脑病的诊断与治疗(附9例报告)

本文报道我院4年来收治的9例胰性脑病（PE），并对其诊断与治疗进行讨论。1临床资料1.l一般资料：1986年1月～1990年1月我们共收治急性胰腺炎98例，其中9例并发PE。9例中男性3例，女性6例，年龄19～73岁，平均年龄59岁。1.2主要临床表现：除急性胰腺炎的症状与体征外，9例患者均出现不同程度的一般脑性症状与精神障碍，5例发生脑膜刺激征与颅内压增高，3例发生脑脊髓病症候群。PE出现时间为胰腺炎发病后2～60d，除去1例术后60d发生PE外，平均起病时间为3d。1.3辅助检查：白细胞总数平均为17677.78／L，中性粒细胞0.92，血淀粉酶537.78U…     

胰十二指肠切除术出血的防治

在腹部外科中，胰十二指肠切除术（PD）是一难度较大的手术。在评价某个单位腹部外科水平时，常常把能否很好地开展这一手术作为综合指标之一。影响胰十二指肠切除术成败的因素当中，术中和术后出血占有重要地位。本文就这个问题作一论述。1PD术中出血的防治1．1门静脉、肠系膜上静脉及其分支出血分离胰腺与门静脉和肠系膜上静脉以及胰腺钩突部的处理是PD的重要步骤之一。在这些重要步骤的操作当中，如不小心，容易损伤门静脉或SMV及其分支，特别是当门静脉、SMV与胰腺有紧密粘连，或钩突部肿瘤浸润静脉壁，以及钩突部汇入SMV的小静脉…     

保尔佳对原发性肝癌患者sIL-2R、IL-6、TNFα的影响及促进肝癌细胞凋亡的初步研究

对２０例原发性肝癌患者（大剂量组１０例、小剂量组１０例）临床应用保尔佳１周，用ＥＬＩＳＡ法检测治疗组用药前后外周血及用药后门静脉血的ｓＩＬ－２Ｒ，ＩＬ－６，ＴＮＦα的水平变化及用末端转移酶标记法（ＴＵＮＥＬ法）检测治疗组肝癌细胞的凋亡情况，与未治疗组、正常对照组相比。结果表明，治疗组外周血ｓＩＬ－２Ｒ水平明显下降（大剂量组Ｐ＜０．０１、小剂量组Ｐ＜０．０５），ＩＬ－６水平明显上升（大剂量组Ｐ＜０．０１、小剂量组Ｐ＜０．０５），ＴＮＦα水平有所下降（大剂量组Ｐ＜０．０５、小剂量组Ｐ＞０．０５），治疗组门静脉血与外周血ｓＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－６、ＴＮＦα两者间无明显差异（Ｐ＞０．０５）。ＴＵＮＥＬ法检测显示保尔佳能促进肝癌细胞的凋亡（Ｐ＜０．０１，大、小剂量组间Ｐ＞０．０５）。且保尔佳对肝癌患者的血常规、肝功能等无不良影响。保尔佳是一种具有增强机体免疫功能、促进肿瘤细胞凋亡且无明显毒副作用的新型抗癌药物。     

肝癌细胞耐药诱导过程中过氧化物酶增殖物激活受体α的表达

目的研究阿霉素（adriamycin，ADM）诱导肝癌细胞（HepG2）耐药过程中过氧化物酶增殖物激活受体（PPARa）表达的变化及意义。方法通过梯度增加培养液中阿霉素的浓度，长期筛选培养，建立肝癌HepG2／ADM耐药细胞株。Western blot检测耐药细胞中多药耐药基因（MDRl）、PPARa蛋白的表达变化，RT-PCR检测耐药细胞中PPARa和CYP3A mRNA的表达变化。结果HepG2／ADM细胞是一个明确的多药耐药细胞模型，在耐药诱导过程中，MDR1表达上调，PPARa mRNA和蛋白的表达下降，CYP3AmRNA的表达也呈下降趋势。结论在耐药诱导过程中，PPARa表达的下降可能与HepG2细胞耐药的发生有关，其机制可能在于PPARa能影响MDR1和CYP3A的表达。