MGIT960与罗氏培养法在结核分枝杆菌培养及药敏试验中的比对分析

目的 比对全自动Bactec MGIT960（MGIT960）系统与改良罗氏（L-J）培养方法 2者在结核分枝杆菌培养、鉴定及药敏试验中的优越性。 方法 按国家疾病预防控制中心（CDC）-碧迪项目辽宁工作方案要求和国际标准WS288-2009《肺结核诊断标准》纳入临床病例。本实验共纳入病例435例,其中男性319例,女性116例,平均年龄52.3岁（10～86岁）。上述每份病例标本均分别进行痰液涂片抗酸染色（萋-尼法）镜检,L-J固体培养和MGIT960系统液体培养。培养阳性者分别进行一线药物异烟肼（INH）、利福平（RIF）、链霉素（STR）和乙胺丁醇（EMB）的L-J法药敏试验（比例法）和MGIT960药敏试验;分别计算出抗酸染色镜检与MGIT960和L-J培养的符合率; L-J培养和MGIT960培养阳性检出率;L-J和MGIT960两种培养方法药敏试验所需的培养时间及符合率等。 结果MGIT960培养法和L-J培养法与痰涂片镜检的阳性符合率分别为90.8%（187/206）和89.3%（184/206）;MGIT960与L-J结果符合率92.8%（219/236）;MGIT960和L-J平均培养时间分别为9.5 d和31.5 d;MGIT960和L-J一线药物INH、RIF、STR和EMB敏感性试验的符合率分别为92.7%、95.9%、91.8%和97.3%。 结论 全自动MGIT960系统培养方法的敏感度和特异度高于L-J培养法,报告时间平均缩短至9.5-d,该系统是目前最为理想的快速结核分枝杆菌培养、鉴定和药敏试验检测系统。     

三种实验室诊断技术对结核分枝杆菌复合群检出率及检测费用的比较研究

目的 评估液基夹层杯涂片法(采用集菌法;简称“涂片法”)、L-J固体培养法(简称“L-J培养法”)、结核分枝杆菌复合群核酸检测(采用恒温扩增法;简称“恒温扩增法”)对结核分枝杆菌复合群的检测效能。 方法 采用随机数字表法从湖南省120家结核病定点医院中抽取3家作为研究现场,分别为浏阳市人民医院、醴陵市湘东医院、桃江县人民医院。以3家医院2018年11月1日至12月31日就诊的存在可疑肺结核症状的628例患者为研究对象,对同一份痰标本同时采用涂片法、L-J培养法和恒温扩增法进行检测,分析3种检测方法对结核分枝杆菌复合群阳性检出率的差异;并依据《WS 288—2017 肺结核诊断》的诊断标准,以临床诊断肺结核作为参考标准,计算各种检测方法的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、一致率;再以患者进行每项检测的实际支出费用为准,计算每种方法的检测费用。结核分枝杆菌复合群检出率在3种检测技术间的两两比较采用χ ²检验,检验水准α=0.05/3=0.017。 结果 628例疑似肺结核患者中,临床确诊为肺结核患者153例(24.4%),NTM肺病患者6例(1.0%)。3种技术检测结果显示,涂片法、L-J培养法和恒温扩增法的结核分枝杆菌复合群阳性检出率(排除6例NTM肺病患者)分别为13.5%(84/622)、14.0%(87/622)和12.2%(76/622),涂片法和L-J培养法,L-J培养法和恒温扩增法,涂片法和恒温扩增法之间比较,差异均无统计学意义(χ ²=1.32,P=0.359;χ ²=5.83,P=0.024;χ ²=4.00,P=0.077)。以临床诊断结果作为参考标准,排除6例非结核分枝杆菌肺病患者和32例培养污染的患者,涂片法、L-J培养法和恒温扩增法的敏感度分别为55.2%(80/145)、57.9%(84/145)、50.3%(73/145);特异度分别为99.6%(443/445)、99.3%(442/445)、99.8%(444/445);阳性预测值分别为97.6%(80/82)、96.6%(84/87)、98.6%(73/74);阴性预测值分别为87.2%(443/508)、87.9%(442/503)、86.0%(444/516);一致率分别为88.6%(523/590)、89.2%(526/590)、87.6%(517/590)。3种方法的检测费用,由低到高依次为L-J培养法[317.2元(29500/93)]、涂片法[813.8元(70800/87)]、恒温扩增法[1992.2元(153400/77)]。 结论 涂片法、L-J培养法、恒温扩增法的阳性检出率及其敏感度和特异度均未见差异。平均发现1例病原学阳性结核病患者的检测费用,L-J培养法较低,恒温扩增法较高。     

武汉市涂阳肺结核患者耐药率及耐药谱分析

目的 分析不同登记分类涂阳肺结核患者的耐药［特别是耐多药结核病（MDR-TB）］特点,了解耐药的危险因素,为制订耐药结核病（特别是MDR-TB）控制策略提供参考。 方法 对痰涂片阳性的新患者、复治（复发、返回和其他）和治疗失败（初治失败、复治失败和治疗3个月末痰涂片阳性的新患者）3类患者收集2份痰标本进行培养,用比例法进行6种抗结核药物（INH、RFP、EMB、S、Km和Ofx）敏感性试验。2006年12月至2012年3月进行痰培养的涂阳肺结核患者2110例,培养阳性1947例（92.3%）;经药物敏感性试验和菌型鉴定,Mtb感染1800例（92.4%）。 结果 1800例Mtb感染者中总耐药794例（44.1%,794/1800）,其中单耐药结核病（SDR-TB） 244例（13.6%, 244/1800）、多耐药结核病（PDR-TB）155例（8.6%,155/1800）、MDR-TB 395例（21.9%,395/1800）;MDR-TB检出率明显高于SDR-TB和PDR-TB（χ²=43.4,χ²=123.6,P值均＜0.01）。新患者、复治及治疗失败3类患者SDR-TB检出率分别为11.9%（57/480）、14.4%（159/1107）及13.1%（28/213）,差异无统计学意义（χ²=0.33,P=0.85）;3类患者PDR-TB检出率分别为5.4%（26/480）、9.8%（109/1107）及9.4%（20/213）,复治与治疗失败PDR-TB检出率差异无统计学意义（χ²=0.04,P=0.84）,但高于新患者（χ²=8.53,P=0.01）;3类患者MDR-TB检出率分别为14.4%（69/480）、22.5%（249/1107）及36.2%（77/213）,经χ²检验,治疗失败患者MDR-TB检出率高于复治和新患者（χ²=17.92,χ²=42.07,P值均＜0.01）。 结论 武汉市涂阳肺结核患者耐药检出率高;耐药成因复杂,耐药谱呈多样性和复杂性,对结核病控制构成威胁。     

新疆喀什地区214株结核分枝杆菌耐药情况及菌型分析

目的 分析新疆喀什地区结核分枝杆菌临床分离株对8种抗结核药物的耐药情况,探讨本地区耐药结核病和菌型流行情况。 方法 收集2010年6月1日至2010年12月31日新疆喀什地区结核病防治所确诊的214例结核病患者痰标本,对分离培养的214株分枝杆菌采用比例法进行药物敏感（包括异烟肼、利福平、链霉素、乙胺丁醇、氧氟沙星、卷曲霉素、卡那霉素、阿米卡星8种抗结核药物）和菌型鉴定试验,计数资料组间比较采用χ²检验,P＜0.05为差异有统计学意义。 结果 214株分离株中175例（81.78%）为人结核分枝杆菌,39例（18.22%）为牛结核分枝杆菌,人结核分枝杆菌耐药率（29.14%,51/175）与牛结核分枝杆菌耐药率（12.82%,5/39）差异有统计学意义（χ²=4.398,P=0.034）,人结核分枝杆菌耐多药率（5.71%,10/175）与牛结核分枝杆菌耐多药率（0%）相比,差异无统计学意义(χ²=1.231,P=0.267);患者总耐药率为26.17%（56/214）,初治患者耐药率25.97%（20/77）,复治患者耐药率26.28%（36/137）,两者差异无统计学意义（χ²=0.0003,P=1.00）。8种耐任一抗结核药物耐药率占前四位的分别为：异烟肼、链霉素、利福平、乙胺丁醇。 结论 新疆喀什地区结核病患者耐药情况仍较严重,分型以人结核分枝杆菌为主,在结核病治疗工作中应给予高度重视。     

县（区）级结核病防治定点医院模式的实施效果分析

目的 分析江苏省定点医院在结核病防治新体系中的实施效果,为制定结核病防控策略提供科学依据。 方法 选择江苏省采用定点医院模式和CDC模式的县（市、区）各10个,收集这20个地区2012年1月至2012年12月期间发现登记的10 578例肺结核患者的诊断延迟、转诊追踪、系统管理、治疗结局、资料质量等数据,采用SPSS 17.0软件进行分析,探讨两种模式的运行效果。 结果 定点医院模式和CDC模式下的肺结核登记率［分别为55.60/10万（4768/8 575 823）和55.93/10万（5810/10 388 634）,χ²=0.091,P=0.763］、转诊追踪总体到位率［分别为99.1%（4939/4985）和99.2%（6064/6111）,χ²=0.780,P=0.3771］、从诊断至报告的时间［分别为（0.021±0.009）d和（0.025±0.010）d,t=0.419,P>0.05］、系统管理率［分别为99.0%（5048/5097）和98.7%（5645/5719）,χ²=2.65,P=0.103］、涂阴患者完成疗程率［分别为96.6%（3182/3295）和97.4%（3661/3760）,χ²=3.82,P＞0.05］的差异均无统计学意义。定点医院模式下的肺结核患者从发病到诊断的平均时间为（11.117±6.109）d,显著低于CDC模式的（15.399±6.866）d（t=12.42,P<0.001）,而且因症就诊比率定点医院模式与CDC模式［分别为52.0%（2479/4768）和33.8%（1966/5810）,χ²=352.468,P＜0.0001）、转诊率［分别为99.1%（4941/4985）和98.5%（6017/6111）,χ²=9.606,P=0.0019］、追踪到位率［分别为99.6%（1320/1325）和97.9%（1559/1593）,χ²=16.993,P=0.000 04］比较前者高于后者,差异有统计学意义。而定点医院模式与CDC模式比较,新涂阳治愈率［分别为89.8%（1172/1305）和94.7%（1293/1366）,χ²=22.03,P＜0.0001］、复治涂阳治愈率（分别为80.8%（274/339）和88.9%（335/377）,χ²=9.06,P＜0.01）、信息录入及时率［分别为98.9%（23 571/23 840）和99.0%（28 773/29 050）,χ²=4.088,P=0.043］和完整率［分别为98.8%（28 272/28 608）和99.4%（34 646/34 860）,χ²=60.113,P＜0.0001］均低于CDC模式,但均能够满足相关工作要求。 结论 江苏省县（区）级定点医院模式的实施效果较好,定点医院模式是符合我国医疗机构改革大方向的必然趋势,能适应不断发展的结核病防治工作需求,可以因地制宜地稳步推行。     

痰模型及目测涂片法检测抗酸杆菌的比较研究

目的 评价痰模型涂片法检测抗酸杆菌的价值。 方法 对1089份初诊为活动性肺结核患者的痰标本,分别应用模型涂片法、目测涂片法检测抗酸杆菌,并与罗氏培养结果进行比较。检测结果比较采用χ²检验和秩和检验,以P＜0.05为差异有统计学意义。 结果 模型涂片法阳性检出率31.68%（345/1089）,高于目测涂片的24.24%（264/1089）（χ²=14.955;P＜0.05）,模型涂片法与目测涂片法的质量指标合格率分别为痰细胞（94.21%,86.41%）、痰膜大小（98.99%,75.30%）、厚薄（96.14%,74.29%）、染色（94.49%,87.60%）、痰膜脱落（97.43%,86.41%）,较目测涂片法均明显提高（χ²值分别为37.915、272.799、206.432、31.683、89.011,P值均=0.001）。以罗氏培养结果为标准,模型涂片法灵敏度为82.69%（344/416）,Kappa值为0.853,优于目测涂片法［灵敏度为63.46%（264/416）,Kappa值为0.682］,说明模型涂片法与罗氏培养法具有较好的一致性。 结论 模型涂片既继承了目测涂片检测抗酸杆菌的简便快速,又较目测涂片制片质量和阳性检出率明显提高,具有较高的敏感度、特异度,适合基层实验室推广应用。     

结核分枝杆菌临床分离株对四种注射用抗结核药物耐药及交叉耐药分析

目的 探讨链霉素（S）、卡那霉素(Km)、阿米卡星(Am)和卷曲霉素(Cm)对结核分枝杆菌的耐药及交叉耐药情况,为耐药结核病的化学治疗提供理论依据。 方法 对首都医科大学附属北京胸科医院2004年1月至2010年12月间4247株临床分离株的药物敏感试验结果进行分析。采用绝对浓度法进行药物敏感试验。4种药物之间总耐药率的差异采用配对χ²检验及χ²分割法,以P<0.007 14为差异有统计学意义。4种药物之间交叉耐药率的差异采用两个样本率比较的χ²检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。 结果 4247份临床分离株标本中,S的耐药率为45.11%(1916/4247),Km的耐药率为17.93%(718/4005),Am的耐药率为19.02%(792/4164),Cm的耐药率为9.44%(401/4247)。经配对χ²检验,Cm与S、Am、Km之间耐药率差异有统计学意义,χ²值分别为1349.34、281.54、193.16,P值均小于0.007 14。经配对χ²检验,S与Am、Km之间耐药率差异有统计学意义,χ²值分别为821.10、869.28,P值均小于0.007 14。经配对χ²检验, Am与Km之间耐药率差异有统计学意义,χ²值为13.98,P值小于0.007 14,耐药率从高到低依次为S、Am、Km和Cm。S在其他3种药物的耐药株中的耐药率分别为82.59%（耐Km株,593/718）、77.78%（耐Am株,616/792）、76.81%（耐Cm株,308/401）,χ²值分别为502.959、453.911、626.654,P值均小于0.05。Km在另外3种药物耐药株中的耐药率分别为33.13%（耐S株,593/1790）、83.31%（耐Am株,634/761）、67.89%（耐Cm株,260/383）,χ²值分别为502.959、12.079、100.536,P值均小于0.05。Am在另外3种药物耐药株的耐药率分别为32.78%（耐S株,616/1879）、89.55%（耐Km株,634/708）、77.95%（耐Cm株,304/390）,χ²值分别为453.911、12.079、163.761,P值均小于0.05。Cm在其他3种药物的耐药株中的耐药率分别为16.08%（耐S株,308/1916）、36.21%（耐Km株,260/718）和38.38%（耐Am株,304/792）,χ²值分别为626.654、100.536、163.761,P值均小于0.05。 结论 4种注射用抗结核药物的耐药率从高到低依次为S、Am、Km和Cm。4种药物之间均表现出交叉耐药,但程度不同。S与其他3种药物之间为单向耐药,Km和Am两个药物之间近似完全交叉耐药,Cm是其他3种药物耐药时的选择药物。     

培养滤液MPT64抗原检测结核分枝杆菌复合群生长的效能分析

目的 评价以培养滤液MPT64抗原作为结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex,MTBC)生长指示实验（简称“MPT64检测法”）的检测效能,为建立新型结核分枝杆菌培养方法提供科学依据。方法 对799例应用BACTEC MGIT 960分枝杆菌快速培养仪器法（简称“仪器法”）进行分枝杆菌培养的培养液在培养的第42天进行MPT64检测,对1265例每隔7 d（即培养第1～6周末）进行1次 MPT64检测,以出现阳性检测结果或第42天为检测终点,并和仪器法比较。应用χ²检验统计分析所有样本（2064例）的检测结果,分析MPT64检测法的准确度;对1265例监测样本应用t检验分析MPT64检测法的快速性。 结果 （1）在2064例分枝杆菌培养的临床样本中,仪器法报告298例MTBC、108例非结核分枝杆菌（non-tuberculous mycobacteria,NTM)、1521例培养阴性及137例污染（后三者即无MTBC生长）,其中分别有279、6、0、2例MPT64检测阳性（即有MTBC生长）,两者间差异无统计学意义（χ²=0.12, P=0.742）;与仪器法的总体一致性为98.69%（2037/2064）;对仪器法报告为MTBC者MPT64检测法的阳性率为93.62%（279/298）,具有较高的阳性符合水平。（2）在每周进行MPT64监测的1265例培养液样本中,两种方法均检测到MTBC者168例。其中：仪器法在培养1～6周报告阳性率分别为25.60%(43/168)、66.67%(112/168)、92.26%(155/168)、98.21%(165/168)、98.81%(166/168)和100.00%(168/168);MPT64检测法的阳性检出率则分别为17.26%(29/168)、61.90%(104/168)、89.88%(151/168)、95.24%(160/168)、98.81%(166/168)和100.00%(168/168)。两者阳性报告时间差异无统计学意义（t=1.68,P=0.366）。 结论 MPT64检测法具有准确、快速、简便的特点,值得在临床中推广应用。     

荧光定量PCR技术对前驱期小儿结核性脑膜炎的应用价值

目的 了解荧光定量PCR（FQ-PCR）技术对前驱期（早期）小儿结核性脑膜炎（简称“结脑”）的快速诊断、疗效观察和预后判断的作用和意义。方法 选择被金标准（快速Mtb培养）确诊未经抗结核治疗的117例前驱期结脑组患儿和排除结脑的30例对照组患儿脑脊液标本,数字表法随机编号进行FQ-PCR检测Mtb DNA,计算其敏感度、特异度、诊断指数、阳性预测值、阴性预测值、符合率等统计指标并进行分析;治疗3周后结脑组盲法行培养和FQ-PCR检测,计算二者阳性检出率;随访出院时两种方法检测为阴性的结脑组患儿2年后各自复发率,进行统计学分析。结果 初诊患儿FQ-PCR检测结果与金标准比较敏感度、特异度、符合率为100.0%（117/117）、96.7%（29/30）、99.3%（146/147）,诊断指数达196.7%,经卡方检验,两者差异无统计学意义（χ²=0.000,P=1.000）,相关性分析r=0.9790,两种方法间有相关性（χ²=140.9,P=0.000）。结脑组治疗3周后培养法和FQ-PCR法阳性检出率分别为27.35%（32/117）和58.12%(68/117),两者差异有统计学意义（χ²=22.63,P=0.000）;随访结脑组患儿出院时两种方法检测阴性2年后复发结果为：78例培养法阴性患儿复发7例（8.97%）,69例FQ-PCR检测阴性患儿未见复发患者,差异有统计学意义（χ²=4.6736,P=0.0306）。结论 FQ-PCR检测脑脊液TB-DNA,准确、简便、快速,有助于早期诊断结脑,对疗效监测和预后评估比培养法更具优势。     

肺结核门诊辅助诊治按病例付费对患者发现与治疗的影响

目的 探讨肺结核门诊辅助诊治按病例付费对患者发现与治疗的影响。方法 根据研究现场入选条件,汩罗市和临湘市入选为试点县,华容县为对照县,3县市2008年末人口数分别为66.0万、50.2万和72.9万。试点县主要干预措施是新型农村合作医疗实施肺结核门诊辅助诊治按病例付费,通过比较试点前后1年及试点县与对照县肺结核患者初诊就诊率、患者发现、就诊延误率、患者丢失率来评价试点的实施对患者发现和治疗管理的影响,采用统计描述、χ²检验及Wilcoxon秩和检验对数据进行统计学处理,检验水准为0.05。结果 研究期间汩罗市肺结核患者初诊就诊率为332.0/10万,去年同期为209.8/10万,增长58.2%,差异有统计学意义（χ²=182.852,P<0.001）,临湘市肺结核患者初诊就诊率为491.2/10万,去年同期为407.2/10万,增长20.6%,差异有统计学意义（χ²=39.921,P<0.001）。研究期间汩罗市和临湘市登记活动性肺结核患者分别为478例和533例,去年同期分别为416例和409例,分别增长14.9%和30.3%。研究期汩罗市就诊延误率为40.2%,去年同期为57.2%,下降29.7%,差异有统计学意义（χ²=25.884,P<0.001）,临湘市就诊延误率为41.8%,去年同期为49.4%,下降15.4%,差异有统计学意义（χ²=5.328,P<0.05）。研究期汩罗市和临湘市肺结核患者初诊就诊率分别为332.0/10万和491.2/10万,对照县为359.0/10万,汩罗市与对照县比较差异有统计学意义（χ²=7.253,P<0.01）;临湘市与对照县比较差异有统计学意义（χ²=127.685,P<0.001）。研究期间汩罗市和临湘市就诊延误率分别为40.2%和41.8%,对照县为48.9%,汩罗市与对照县比较差异有统计学意义（χ²=7.881,P<0.01）,临湘市与对照县比较差异有统计学意义（χ²=5.443,P<0.05）。研究期间汩罗市和临湘市登记的活动性肺结核患者丢失率分别为0.2%和0,对照县为1.8%,汩罗市与对照县比较差异有统计学意义（χ²=6.283,P<0.05）,临湘市与对照县比较差异有统计学意义（Fisher确切概率法, P<0.01）。结论 肺结核门诊辅助诊疗按病例付费提高了患者发现水平,减少了患者丢失,对患者的规范治疗管理具有促进作用。     

上海市某结核病定点医院结核病房空气样本中分枝杆菌的检测

目的 了解上海市某结核病定点医院结核病房空气中的分枝杆菌污染情况及潜在传染性。 方法 采用液体撞击式微生物气溶胶采样器（FA-1型撞击式空气微生物采样器）采集该医院22间结核病房中空气样本134份,均在痰涂片抗酸杆菌阳性（＋~＋＋＋＋）患者床边采集。每间病房均有4张床位,每间病房的空间布局相同,但患者组成情况不完全相同。经氢氧化钠-N-乙酰-L-半胱氨酸(NALC-NaOH)前处理,分别采用罗氏培养、BacT/ALERT 3D全自动快速培养进行分枝杆菌分离培养,并对培养阳性样本采用DNA序列分析的方法进行菌型鉴定。两种分离培养方法对医院空气样本中分枝杆菌分离率的比较采用配对卡方检验,以P<0.05为差异有统计学意义。 结果 134份结核病房涂阳患者床边采集到的空气样本中有3份分枝杆菌分离培养阳性,经DNA序列分析证实分别为结核分枝杆菌、胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌。BacT/ALERT 3D培养阳性3份,经DNA序列分析证实分别为结核分枝杆菌、胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌,污染2份,阳性检出率为2.3%（3/132）。罗氏培养阳性2份,经DNA序列分析证实分别为胞内分枝杆菌和戈登分枝杆菌,污染1份,阳性检出率为1.5%(2/133)。经配对卡方检验,两种分离培养方法对医院空气样本中分枝杆菌分离率差异无统计学意义（χ²=0.00,P>0.05）。 结论 该医院结核病房痰涂片抗酸杆菌阳性患者床边所采集的空气样本中可分离到分枝杆菌,虽然目前尚无法判断这些菌株是否由于就诊患者传播所致,但是定期监测医院内空气质量是预防与控制医院内感染的一项重要措施。     

应用免疫磁珠分离-改良罗氏培养技术检测痰结核分枝杆菌的研究

目的通过免疫磁珠分离技术(immunomagnetic beads separation techniques,IMBS)富集痰液中的结核分枝杆菌,提高痰液培养的阳性率,以期用于结核病的快速诊断。方法制备兔抗结核杆菌IgG抗体,并将其结合于免疫磁珠表面。采集71例确诊结核病患者的痰液标本,通过免疫磁珠分离技术捕获、富集吸附结核分枝杆菌后用改良罗氏培养基培养,并与传统改良罗氏(L-J)培养法和痰涂片抗酸染色法作比较。结果 71例结核病患者痰涂片抗酸染色检查阳性26例,阳性率36.6%;传统改良L-J培养阳性34例,阳性率47.9%;免疫磁珠分离技术捕获、富集结核分枝杆菌后进行改良L-J培养阳性48例,阳性率67.6%。三者阳性率差异有统计学意义(P<0.05),改良L-J培养和痰涂片检查阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用免疫磁珠分离技术捕获、富集痰液中的结核分枝杆菌后进行培养,可显著提高痰培养的阳性率,该方法可用于结核病的快速诊断。     

结核分枝杆菌复苏因子对结核性胸腔积液中结核分枝杆菌生长促进作用的探索

目的探讨结核分枝杆菌复苏因子（resuscitationpromotingfactor,Rpf）对结核性胸腔积液中病原菌生长的促进作用,以期提高临床标本体外培养阳性率,缩短培养时间。方法选择2012年10月至2013年10月期间北京胸科医院62例结核性胸膜炎患者,抽取胸腔积液经过离心处理后分别接种于改良罗氏培养基,以及含高、低浓度Rpf的MiddleBrook7H11固体培养基（简称“7H11培养基”）和生理盐水7H11培养基（生理盐水阴性对照组）中,每隔3d观察菌落形成情况,阳性者行抗酸染色（AFB）、PCR扩增试验及DNA测序进行菌种鉴定,观察比较高、低浓度Rpf对Mtb的促进生长作用。利用统计软件SPSS17．0进行统计学分析。Rpf培养组与改良罗氏培养组,以及Rpf培养组与生理盐水阴性对照组Mtb培养阳性率比较采用配对计数资料的x2检验;不同浓度Rpf培养组与生理盐水阴性对照组可视菌落平均时间（d）和阳性菌落数量比较采用配对样本t检验。以P〈0．05为差异有统计学意义。结果（1）结核性胸腔积液改良罗氏培养组中的Mtb培养阳性率为16．1％（10／62）,含Rpf的7H11培养基中的Mtb培养阳性率为43．5％（27／62）,两者比较差异具有统计学意义（x2=12．84,P〈0．01）;（2）含高、低浓度Rpf7H11培养基的可视菌落形成时间各为（20．92±0．58）d和（21．69±0．50）d,两组间差异无统计学意义（t=0．085,P〉0．05）,但显著快于生理盐水对照组（不含Rpf）的（38．08±0．94）d（t值分别为10．19、9．91,P值均GO．001）;（3）含高、低浓度Rpf的7H11培养基菌落形成单位数各为（34．12±4．06）×10^2和（37．27±5．63）×10^2,两组间差异无统计学意义（t=0．45,P〉0．05）,但显著多于生理盐水对照组（3．77±0．88）×10^2（t值分别为5．88、7．30,P值均〈0．001）。结论接种结核性胸腔积液后,含Rpf的7H11培养基较改良罗氏培养基可提高Mtb的培养阳性率,并缩短培养时间。     

实时荧光核酸恒温扩增检测技术在结核病诊断中的临床应用

目的 评估实时荧光核酸恒温扩增检测技术（simultaneous amplification and testing,SAT）在结核病患者的痰液、体液及病灶组织等标本中检测结核分枝杆菌的价值.方法 收集在广州市胸科医院就诊的疑似结核病患者的痰液734份、体液标本94份（包括68份胸腔积液、21份脑脊液、5份关节积液,以下统称“体液”）及病灶组织标本76份,共计904份标本.同时采用SAT法、改良罗氏培养法进行检测,培养阳性者进行基因芯片菌种鉴定.SAT法与改良罗氏培养法结果不相符的标本,用结核分枝杆菌聚合酶链（polymerase chain reaction technology for Mycobacterium tuberculosis,PCR-TB）荧光诊断试剂盒进行检测.采用x2检验比较SAT法与改良罗氏培养法对结核病患者的阳性检出率.结果 以改良罗氏培养结果为金标准,则SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的敏感度、特异度、符合率分别为90.20％（230/255）、92.48％（443/479）、91.69％（673/734）;94.74％（18/19）、81.33％（61/75）、84.04％（79/94）;100.00％（14/14）、77.42％（48/62）、81.58％（62/76）.以扩大金标准（培养＋PCR法）比对,则SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的敏感度、特异度、符合率分别为96.30％（260/270）、99.35％（461/464）、98.23％（721/734）;96.97％（32/33）、100.00％（61/61）、98.94％（93/94）;100.00％（27/27）、97.96％（48/49）、98.68％（75/76）.改良罗氏培养法和SAT法在痰液、体液、病灶组织标本的阳性检出率分别为34.74％（255/734）和36.24％（266/734）、20.21％（19/94）和34.04％（32/94）、18.42％（14/76）和36.84％（28/76）;痰标本两者的阳性率比较,差异没有统计学意义（x2=0.36,P＞0.05）.体液与病灶组织标本中,SAT法较改良罗氏培养法的阳性率高出13.83％和18.42％,差异有统计学意义（x2值分别为4.55、6.44,P值均＜0.05）.结论 SAT法检测痰液、体液及病灶组织标本中的结核分枝杆菌,具有快速、敏感度和特异度较高的优点,可提高结核分枝杆菌的检出率.     

抗结核抗体及结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用

目的探讨抗结核抗体(38kD-IgG)及结核感染T细胞斑点试验（T SPOT-TB）在结核病临床诊断中的价值。方法以上述2种方法单项及联合检测活动性结核病患者83例（菌阳结核患者43例,菌阴结核患者40例）,非结核对照者50例（其中有呼吸系统疾病者15例,健康查体者35例）,共计133例。结果38kD-IgG及T SPOT-TB试验检测菌阳结核的阳性率分别为79.1%和93.0%,联合检测阳性率为97.7%;2种方法单项检测菌阴结核的阳性率均为72.5%,联合检测阳性率提高到92.5%。50名非结核对照中,2种试验特异性分别为70.0％和94.0%,联合检测特异性为66.0％。结论对于菌阳患者,T SPOT-TB试验敏感性较高（93.0%）,但与38kD-IgG方法相比,统计学上差异无统计学意义（χ²=3.49, P>0.05）;T SPOT-TB试验的特异性明显高于38kD-IgG试验（χ²=9.76, P<0.01）;2种方法联合检测能显著提高菌阴结核患者阳性检出率,与单项检测方法相比,差别有统计学意义（χ²=5.54, P<0.05）因此,联合检测对于菌阴结核患者的诊断,具有实用价值。     

Rv1656重组蛋白在结核病辅助诊断中的应用价值研究

目的研究结核分枝杆菌Rv1656重组蛋白在结核病辅助诊断中的应用价值。方法以痰涂片、痰培养及3个商品化的结核杆菌抗体试剂盒为对照,应用化学发光酶免疫分析法检测42例结核病患者和54例非结核肺部疾病患者尿液中抗Rv1656抗体水平;绘制抗Rv1656抗体检测工作特征曲线(ROC曲线),确定其诊断结核病的临界值,并评价其诊断效能。结果结核病组患者尿液抗Rv1656抗体为(39517.2±11802.7pg/ml),非结核呼吸病组为(11416.3±1145.4pg/ml),差异有统计学意义(t=3.002,P<0.01);痰菌阴性结核病患者尿液中抗Rv1656抗体为(47011.4±1529.9pg/ml),痰菌阳性结核患者为(15535.7±1629.7pg/ml),差异有统计学意义(t=2.035,P<0.05)。尿Rv1656抗体诊断结核的灵敏度为42.8%,上海奥普血清结核抗体试剂盒为71.4%,差异有统计学意义(χ2=63.87,P<0.01)。尿Rv1656抗体诊断结核的特异性为83.3%,上海奥普血清结核抗体试剂盒为38.9%,差异有统计学意义(χ2=76.15,P<0.01)。结论结核分枝杆菌Rv1656重组蛋白具有抗原特异性可作为尿液结核抗体检测的组合抗原之一。     

发光二极管荧光显微镜检测结核分枝杆菌在基层实验室的应用评价

目的 评价发光二极管（light-emitting diodes,LED）荧光显微镜在基层实验室痰涂片中检测结核分枝杆菌的应用效果。 方法 收集2011年7月至2011年9月在青海省西宁市7个县（区）级结核病防治机构（简称“结防机构”）就诊的所有肺结核可疑症状者592例（1738份痰标本）。对每份痰标本涂片2张,分别进行萋-尼（Ziehl-Neelsen, Z-N）抗酸染色和金胺O（auramine O）荧光染色,然后以盲法用传统光学显微镜和LED荧光显微镜进行检测,以简单法固体罗氏培养（L-J）结果为金标准,比较两种显微镜阳性检出率的差异、诊断的准确性及检出时间的差异。 结果 LED荧光显微镜痰涂片阳性检出率为14.90%（259/1738）,比传统光学显微镜13.75%（239/1738）提高1.15%,差异有统计学意义（Z=5.88,P〈0.05）。以简单法固体罗氏培养结果为金标准,传统光学显微镜的敏感度为79.60%（199/250;95%CI=74.60％～84.60%）,特异度为97.31%（1446/1486;95%CI=96.49％～98.13%）;ROC曲线下面积为0.8878（95%CI=0.8623～0.9133）。LED荧光显微镜的敏感度为84.80%（212/250;95%CI=80.30%～89.25%）,特异度为96.84%（1439/1486;95%CI=95.95%～97.73%）,ROC曲线下面积为0.9118（95%CI=0.8890～0.9347）。传统光学显微镜的平均读片时间为（185.600±79.271）s,LED荧光显微镜的平均读片时间为（144.19±62.173）s,时间差异有统计学意义（t=15.32, P〈0.01）。 结论 应用LED荧光显微镜可明显提高痰涂片中结核分枝杆菌的阳性检出率,较传统光学显微镜有更高的敏感度,但特异度相当,诊断肺结核患者的价值更高,且能明显缩短读片时间。     

荧光染色发光二极管显微镜检测结核分枝杆菌的效果分析

目的： 探讨荧光染色发光二极管（LED）显微镜镜检对结核分枝杆菌的检出效果。方法： 收集232例可疑结核病患者的痰标本,每位患者收集3份痰（即时痰、清晨痰和夜间痰）,共696份痰标本。分为萋-尼染色(Z-N)法镜检组（简称Z-N组）,荧光染色发光二极管显微镜镜检组（简称LED组）。对每份痰标本同时采用上述两种镜检法进行检测。比较两者的检查结果,分析两种方法检查结核分枝杆菌的阳性率差异情况。结果： LED组检出率为37.9%（88/232）,Z-N组检出率为26.7%（62/232）,经检验, χ²=6.66,P＜0.01,差异有统计学意义。结论： LED显微镜镜检具有阳性检出率高等优点。     

2011—2013年合肥市结核分枝杆菌与人类免疫缺陷病毒感染双向筛查情况分析

目的 分析合肥市Mtb与HIV感染者或AIDS患者的双向筛查情况,为今后的双重感染防治工作提供科学依据。 方法 在2011—2013年合肥市所辖县（市、区）能随访到的1422例HIV感染者或AIDS患者中筛查结核病,动员新登记的5772例结核病患者进行HIV抗体检测。应用SPSS 21.0软件进行数据处理,采用趋势性χ^2检验和列联表χ^2检验,P〈0.05为差异有统计学意义。 结果 2011—2013年HIV感染者或AIDS患者接受结核病检查率分别为92.62%（276/298）、99.57%（458/460）和98.29%（688/700）,3年间HIV感染者或AIDS患者接受结核病检查率呈显著上升趋势（χ趋势^2=18.57, P〈0.001）;2011—2013年登记的结核病患者接受HIV抗体检测率分别为40.17%（1701/4234）、38.20%（1632/4272）和53.49%（2439/4560）,3年间结核病患者接受HIV抗体检测率呈显著上升趋势（χ趋势^2=162.83, P〈0.001）;实行“三位一体”结核病防治模式地区的结核病患者接受HIV抗体检测率为60.99%（2029/3327）,显著高于未实行“三位一体”地区的结核病患者接受HIV抗体的检测率［33.25%（410/1233）］（χ^2=1083.62,P〈0.001）。 结论 Mtb与HIV感染双向筛查是发现Mtb与HIV双重感染患者最主要的途径,因此,积极开展并做好双向筛查工作对于提高双重感染者的发现率、有效控制Mtb与HIV双重感染疫情、改善双重感染患者生活质量及降低死亡率具有重要意义。