家兔化学裸露心肌标本制备及其张力-pCa关系

家兔右室乳头肌在含3mM EDTA、5mM Na_2ATP、10mM Tris、140 mM KCl的溶液中浸浴150min,其Ca~(2+)通透性显著增高。Ca~(2+)浓度为10~(-7)M时,便可产生张力,10~(-4.6)M时,张力达到最大。相对张力-pCa(Ca~(2+)浓度的负对数)关系近似一S形曲线,产生50％最大张力的Ca~(2+)(pCa_(50))约为10~(-6.6)M。同法制备的大鼠乳头肌Ca~(2+)通透性未见增高。     

钙离子的生理与病理作用的最新认识

一、钙离子(Ca~(2+))的生理运转和作用正常细胞内Ca~(2+)浓度为10~(-7)M)100～200nM),细胞外浓度为10~(-3)M(1000000nM)。细胞内外呈1:10,000之差,即质膜内外浓度梯度相差5,000～10,000倍,细胞内的Ca~(2+)90％聚集在线粒体和内质网上。     

胞内Ca~(2+)与吗啡依赖

<正>吗啡依赖机制复杂,目前尚未清楚.在发现脑内阿片受体后的十余年中,学者对阿片受体进行大量研究,试图用脑内受体密度、数目和亲和力的改变来解释吗啡依赖成因,但均告失败.近年来,许多学者的注意力逐渐转向了受体后效应在吗啡依赖中的作用.其中,G蛋白的活性、Ca~(2+)、cAMP等第二信使和蛋白磷酸化过程的改变.与受体偶联的胞内Ca~(2+),以及钙调素(CaM)、Ca~(2+)/CaM依赖性蛋白激酶(CaM-K)在吗啡依赖过程中具有重要作用.1 Ca~(2+)与吗啡依赖吗啡作为一种阿片类化合物与阿片受体相互作用,影响着受体门控性离子通道的关闭或开放.目前已知所有的阿片受体都是由鸟苷酸结合蛋白(G蛋白)介导而产生效应的.阿片类物质对神经元胞内Ca~(2+)有两种相反的作用.一是急性作用,即直接降低神经元胞内Ca~(2+)浓度.急性注射大剂量吗啡可减少大、小鼠脑突触中钙离子的含量.Toru等(1989)发现к、μ、δ受体激动剂都     

骨骼肌细胞内钙离子活度的动态检测

采用钙离子敏感中性载体ETH 1001研制成外径<0.7 um的钙离子敏感微电极(Ca~(2+)—ISM),Ca~(2+)浓度在10~(-3)～10~(-7)M之间,平均斜率为25.4 mV。检测下限为10~(-8)M。应用该Ca~(2+)-ISM及常用微电极,同时测定了蟾蜍缝匠肌细胞内的钙离子活度α_(Ca)~i和细胞膜电位(E_M),测定结果为:α_(Ca)~i=0.11um,E_M=-79.0mV。通过分别改变任氏液中的钾离子浓度[K~+]。和钙离子浓度[Ca~(2+)]。测定α_(Ca)~i了及E_M的动态变化。结果表明:[K~+],从3.5 mM升高至10 mM时,α_(Ca)~i由0.11μM变为0.15 uM,E_M由-79.0mV变为-67.7 mV[Ca~(2+)],从1.8mM降低为1μM时,α_(Ca)~i由0.11 μM穸为0.03μM,E_M由-79.0mV变为-73.8mV。实验表明Ca~(2+)-ISM是细胞内钙离子动态检测极为有效,方便和直观的方法之一。     

钙调素拮抗剂和药物研究

1883年英国生理学家Sidney Ringer在离体蛙心实验中发现Ca~(2+)与肌肉收缩有关。此后许多研究证明:Ca~(2+)参与多方面的代谢调节,神经递质的释放、血液凝固、分泌和转运、许多细胞过程(如胞吐和胞饮作用、细胞分化、细胞移动、受精和细胞增殖)等。Ca~(2+)被确认为胞内第二信使。而上述过程都要通过专一的细胞内钙结合蛋白介导来完成。     

DMSO诱导小鼠肝癌腹水瘤细胞16A-3分化前后胞液磷酸化酶a活性和Ca~(2+)浓度的改变

本文采用二甲亚矾(DMSO)诱导近交系615小鼠肝癌腹水瘤细胞系Hca-F25/CL-16A_3,测定了细胞分化前后胞液磷酸化酶a活性和Ca~(2+)浓度。结果表明,经DMSO促分化后,胞液磷酸化酶a活性明显升高,而胞液Ca~(2+)浓度则显著下降。结果提示,磷酸化酶a在肿瘤细胞分化前后对Ca~(2+)的敏感性不同,不能反映肿瘤细胞胞液Ca~(2+)浓度变化情况。     

蛋白激酶C抑制剂对去甲肾上腺素促进大鼠巨噬细胞I_a抗原表达的影响

我们以前的工作证明,在去甲肾上腺素(NE)促进大鼠巨噬细胞(MΦ)I_a抗原表达的效应中,细胞内的第二信使物质三磷酸肌醇(IP_3)和C_a~(2+)起着必不可少的作用。然而,另一第二信使物质甘油二酯(DG)的作用如何,尚待阐明。为此,我们用4α-佛波醇-12,13-二癸酸盐(4α-phorbol-12,13-dideeanoate,4α-PDD)抑制MΦ,内的蛋白激酶C(protein Kinase C,PKC)以阻断DG的作用,结果是NE促进MΦI抗原表达的效应就显著减弱(P<0.01,P<0.01),说明在NE促进MΦI_a抗原表达的效应中,IP_3·C_a~(2+)和DG都起重要的作用。     

罗哌卡因对离体人脐动脉收缩性的影响及其机制

目的 研究不同浓度罗哌卡因对离体人脐动脉平滑肌的收缩作用,并分析其可能的机制.方法 采用离体脐动脉环灌流模型,用MedLab生物信号采集系统测定并记录血管的张力变化情况,观察累积浓度罗哌卡因对去内皮血管环的收缩效应,并同时观察细胞外Ca~(2+)"浓度、L-型Ca~(2+)通道阻滞剂维拉帕米、内质网三磷酸肌醇受体阻滞剂肝素和兰尼定受体阻滞剂钌红对罗哌卡因血管效应的影响.结果 罗哌卡因诱发剂量关联性双相脐血管反应:在低浓度(1.0×10~(-5)～1.0 × 10(~4)moL/L)时收缩张力逐渐升高,较高浓度(3.0×10~(-4)～3.0×10~(-3)mol/L)时收缩张力依次回落.在无钙液中罗哌卡因未能诱发脐动脉环收缩,而随细胞外液钙离子浓度增加较低浓度罗哌卡因致脐动脉收缩张力增加.维拉帕米可显著抑制罗哌卡因对脐动脉环的收缩反应,而维拉帕米+钌红、维拉帕米+肝索并不增加维拉帕米的抑制作用.结论 罗哌卡因可诱发离体人脐动脉剂量关联性双相收缩效应.细胞外Ca~(2+)通过L-型钙通道内流,而非肌质网Ca~(2+)释放,使细胞内[Ca~(2+)]升高介导了罗哌卡因诱发的血管平滑肌收缩反应.     

缺血(氧)鼠心肌肌质网和线粒体内钙离子变化的研究

用液体闪烁计数法测定离体再灌注鼠心肌肌质网(SR)和线粒体(Mit)内~(45)Ca~(2+)放射性强度(cpm),比较能量制剂ATP-氯化镁,活性氧自由基清除剂SOD和钙阻滞剂Verapamil对离体缺血(氧)再灌注鼠心肌细胞SR和Mit钙离子浓度的影响。结果表明,ATP-氯化镁,SOD和Verapamil组SR内~(45)Ca~(2+)的cpm均高于对照组cpm(P<0.01或P<0.05),而Mit内均低于对照组cpm(P<0.01)。此3种药物均能增高离体大鼠心肌细胞内SR~(45)Ca~(2+)和降低Mit~(45)Ca~(2+)积聚,从而保护心肌细胞缺血再灌注损伤。     

高压氧对脑缺血大鼠海马组织三磷酸肌醇的作用

目的:研究高压氧(HBO)对脑缺血大鼠海马组织三磷酸肌醇(IP_3)的作用。方法:实验用 SD 大鼠,制作四动脉闭塞脑缺血模型,应用 Amersham 公司的 IP_3测定系统,观察脑缺血时及高压氧作用后 IP_3的改变。结果:脑缺血后,海马组织 IP_3明显升高,其中缺血10 min 较30 min 改变更明显;缺血10 min 后经不同处理,IP_3水平均明显下降,其中经0.1 MPa 纯氧和0.25 MPa 高压氧处理动物,IP_3水平不及单纯再灌注和0.25 MPa高压空气作用更为明显。结论:IP_3在脑缺血早期改变明显,参与胞内游离 Ca~(2+)浓度调释,但 IP_3在高压氧降低胞浆内游离 Ca~(2+)浓度过程中,未显示重要作用,而且高压氧可能有促进 IP_3产生的作用。     

川芎嗪及丹参对正常及高血压大鼠动脉平滑肌Ca~(2+)内流的动力学影响

钙(Ca)与高血压发病密切相关.血管平滑肌(VSM)细胞内持续的高钙水平,导致VSM紧张,最终引起高血压.胞内高钙浓度的主要原因是Ca~+内流与外流机制障碍。正常时,Ca~(2+)内流与外流速率处于动态平衡,维持着细胞内低外高的钙的浓度差。本工作比较了正常及高血压大鼠主动脉(AS)及肠系膜动脉(MS)平滑肌Ca~(2+)内流情况,并观察川芎嗪及丹参对Ca~(2+)内流的影响。     

卵巢癌细胞内Ca~(2 )含量与化疗敏感的相关性研究

不同浓度的五种化疗药物(顺铂、阿霉素、长春新碱、平阳霉素和更生霉素)以及碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)分别作用于卵巢癌COCl细胞系,荧光法动态测定肿瘤细胞内Ca~(2 )浓度.结果:①在静息状态下肿瘤细胞浆内游离Ca~(2 )浓度是85.6±9.7nmol/L;在bFGF作用下胞内游离Ca~(2 )浓度增高,若细胞外液中有CaCl_2,则胞内Ca~(2 )浓度增高.②在化疗药物作用下,肿瘤细胞内游离Ca~(2 )浓度呈短暂快速下降,随后恢复到初始浓度乃至稍高于初始浓度,但各药各剂量对Ca~(2 )的影响无明显规律性.     

ConA、IL-1刺激T淋巴细胞引起早期Ca~(2+)和环核苷酸含量的变化

本实验观察ConA和IL-1刺激小鼠睥脏T细胞引起的胞内早期Ca~(2+)和环核苷酸含量的变化。ConA和IL-1单独作用使T细胞内Cu~(2+)浓度增大,cAMP含量升高,cGMP含量不变。ConA和,IL-1联合作用,T细胞内Ca~(2+)浓度在10分钟内先是下降而后上升,cGMP亦呈现先下降后恢复正常,二者似有依存关系。     

肌醇磷脂代谢物与细胞功能的调控

有关细胞内第二信使系统的研究,近几年有很大进展,不但对cAMP的作用有许多新的认识,而且发现Ca~(2+)与肌醇磷脂的代谢物作为第二信使的联合体,对细胞功能的调节起重要作用。体内有许多细胞活动是依赖于Ca~(2+)的,所谓依赖于Ca(2+)的细胞反应,如内分泌、外分泌、中间代谢、细胞分化、神经传递及肌肉收缩。所有这些反应都     

TSH和Carbachol对甲状腺细胞内游离钙的动员作用

研究促甲状腺激素(TSH)和 Carbachol(Cch)对猪甲状腺细胞 Ca~(2+)的动员作用的结果表明,0.01～10mU/ml TSH 或10~(-5)～10~(-4)mol/L Cch 可引起甲状腺细胞[Ca~(2+)]急性升高.甲状腺细胞对 TSH 或 Cch 反应的敏感性在贴壁的单层细胞高于细胞悬液,在近汇合单层细胞高于汇合单层细胞。TSH 和 Cch 均能在无钙/EGTA 缓冲介质中刺激猪甲状腺细胞[Ca~(2+)]升高,提示此升高的[Ca~(2+)]源自细胞内储藏 Ca~(2+)的动员。     

依脉特灵对Ca^2＋所致小鼠离体子宫平滑肌收缩的拮抗作用

本文观察到IT对小鼠离体子宫平滑肌高K~+去极化后Ca~(2+)所致的收缩有显著抑制作用。CaCl_2量效曲线IT对其呈非竞争性拮抗。在无Ca~(2+)高K~+溶液中,IT10μM抑制OXY依赖细胞内Ca~(2+)引起的收缩,而IT50μM对依赖细胞内外Ca~(2+)所致子宫肌收缩均有抑制作用。Ver对小鼠离体子宫的作用,远较IT的强。但Ver较高浓度(59nM)只抑制依赖细胞内Ca~(2+)的收缩,对依赖细胞外Ca~(2+)的收缩影响甚少。IT与Vcr拮抗ca~(2+)的作用相似。IT为Ca~(2+)拮抗剂。     

骨骼肌胞浆Ca2+稳态与肌疾病

骨骼肌胞浆内Ca~(2+)稳态是Ca~(2+)转运系统对Ca~(2+)释放和Ca~(2+)摄取保持动态平衡的结果。本文将从细胞和分子水平 讨论肌浆网(SR)钙转运系统的分子基础以及某些肌疾病的发病机制。1 胞浆Ca~(2+)的来源 骨骼肌兴奋-收缩偶联过程中有两个因素,即肌膜的去极化和胞浆内大量的Ca~(2+)快速聚集。前者通过二氢吡啶受     

钙离子与疼痛的关系

<正> Ca~(2+)作为第二信使,其生物学功能十分广泛。Ca~(2+)不仅参与神经介质的合成、神经元的营养和发育,降低神经元的兴奋性,在蛋白质磷酸化中起着重要作用,还与很多神经介质的活性密切相关,是神经系统中举足轻重的离子之一。 Ca~(2+)与疼痛的关系很早就受到人们的关注。早在1916年,Schiitz等将Ca~(2+)注入兔的下丘脑漏斗组织中就观察到Ca~(2+)能引起睡眠和麻醉样状态,这一发现距今已有七十年之久。但以往的研究多侧重于Ca~(2+)在吗啡     

外源性cUMP对艾氏腹水癌细胞DNA合成及胞内cAMP、cGMP水平的影响

艾氏腹水癌细胞在cUMP(浓度为10~(-6)-10~(12M)/10~6细胞)作用下,生长受到抑制,随cUMP浓度降低,抑制作用减小。在10~(-7)M/10~6细胞cUMP作用下,胞内cAMP水平几乎没有变化,而cGMP水平升高38.3％(P<0.005)。浓度为10~(-6)-10~(-12)McUMP对胞内cAMP-PDE活性几乎没有影响,而抑制cGMP-PDE的活性,抑制作用随cUMP浓度降低而减小,这可能是胞内cGMP水平增高的原因。cUMP可能与细胞的cAMP PK结合,释放催化亚单位,细胞生长的抑制可由此发生。     

钙拮抗剂对高草酸尿导致的大鼠肾小管上皮细胞损伤的保护作用

目的 观察高草酸尿对大鼠肾小管上皮细胞内游离钙离子浓度 ([Ca~(2+)]i)和细胞凋亡的影响,并了解钙拮抗剂硝苯地平对该影响的保护作用.方法 60只雄性SD大鼠随机分成饮水组(只饮去离子水)、硝苯地平组(饮去离子水,并灌喂硝苯地平10 mg·kg~(-1)·d~(-1))、诱石组(饮1%乙二醇去离子水)、诱石+硝苯地平干预组(共3组,饮1%乙二醇去离子水,并分别灌喂硝苯地平 3、6、10 mg·kg~(-1)·d~(-1)),每组10只,连续处理4周.测定各组大鼠24 h尿草酸浓度;TUNEL技术检测肾小管上皮细胞凋亡指数;应用Flou-3/AM荧光指示剂测定大鼠肾近曲小管细胞内Ca~(2+)的荧光强度.结果 诱石组和诱石+硝苯地平干预组24 h尿草酸浓度均高于饮水组和硝苯地平组(P<0.01).与饮水组相比,诱石组大鼠肾小管上皮细胞凋亡指数和肾小管上皮细胞内Ca~(2+)荧光强度均明显增加(P<0.01).诱石+硝苯地平(3、6、10 mg·kg~(-1)·d~(-1))干预组Ca~(2+)荧光强度分别为诱石组的76.7%、62.7%和56.4%,量效关系显著(r＝0.839,P<0.01).肾小管上皮细胞内Ca~(2+)荧光强度与肾小管上皮细胞凋亡指数密切相关(r＝0.826,P<0.01).结论 高草酸尿可使大鼠肾小管上皮细胞[Ca~(2+)]i及细胞凋亡水平显著增加,钙拮抗剂硝苯地平对此有明显的干预效果.