姜黄素对肿瘤坏死因子-α诱导的大鼠平滑肌细胞Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42丝裂原活化蛋白激酶表达的影响

目的观察姜黄素对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的离体大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)Syndecan-4蛋白及p44/42丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响。方法分别用20 ng/ml TNF-α、20μmol/L姜黄素、20 ng/ml TNF-α联合20μmol/L姜黄素作用于体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞24 h,MTS/PMS法检测VSMCs的增殖状态,Western blot蛋白免疫印迹法分别测定VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达。结果(1)统计分析表明,与对照组比较,TNF-α能显著刺激大鼠VSMCs的增殖(P<0.01),单独应用姜黄素对大鼠VSMCs增殖无显著作用(P>0.05)。与TNF-α组比较,姜黄素能显著抑制TNF-α所诱导的大鼠VSMCs的增殖(P<0.01);(2)统计分析表明,与对照组比较,TNF-α组能显著刺激大鼠VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达(P<0.01),TNF-α的这一作用能被姜黄素所抑制(P<0.01),单独应用姜黄素对大鼠VSMCs中Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达无显著作用(P>0.05)。结论一定剂量的姜黄素可显著抑制TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖和Syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达。     

阿司匹林对肿瘤坏死因子-α诱导的大鼠平滑肌细胞syndecan-4蛋白及p44/42丝裂原活化蛋白激酶表达的影响

目的观察阿司匹林(ASA)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的离体大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响。方法体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,分别用20 ng/mL TNF-α、1 mmol/L ASA、2 mmol/L ASA、20 ng/mL TNF-α+1 mmol/L ASA、20 ng/mL TNF-α+2 mmol/L ASA作用24 h,并设立相关对照组进行比较。采用MTS/PMS法确定VSMCs的增殖状态,Western blot蛋白免疫印迹法测定VSMCs中syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK表达。结果 (1)与对照组比较,TNF-α组能显著刺激大鼠VSMCs的增殖(P<0.01),单独应用ASA对大鼠VSMCs的增殖无明显作用(P>0.05)。TNF-α联合ASA组与TNF-α组比较,联用能明显抑制TNF-α诱导的大鼠VSMCs增殖(P<0.01)。(2)与对照组比较,TNF-α组能显著刺激大鼠VSMCs中syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK的表达(P<0.01),单独应用ASA对二者的表达无明显作用(P>0.05)。TNF-α联合ASA组与TNF-α组比较,联用可显著降低这两种蛋白的表达水平(P<0.05)。结论一定剂量的ASA可明显抑制TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞syndecan-4蛋白及磷酸化p44/42MAPK蛋白的表达。     

姜黄素通过抑制ERK1/2磷酸化减弱ET-1诱导的大鼠VSMCs增殖

目的观察姜黄素（curcumin）对内皮素-1（ET-1）诱导培养的离体大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖及p44/42丝裂原活化蛋白激酶（p44/42 MAPK,ERK1/2）表达的影响。方法组织贴块法培养大鼠胸主动脉VSMCs。分别以ET-110-8 mol/L,ET-110-8 mol/L联合浓度为10-6 mol/L、10-5 mol/L、10-4 mol/L的姜黄素作用于体外培养的VSMCs 24 h,采用细胞计数检测VSMCs的增殖,3H-胸腺密啶掺入（3H-TdR）法测定VSMCs的DNA合成,western bolt法检测VSMCs磷酸化ERK1/2的表达。结果与对照组比较,ET-1能显著刺激VSMCs增殖,姜黄素能显著抑制ET-1诱导的VSMCs增殖,且呈剂量依赖关系;ET-1能显著刺激VSMCs磷酸化ERK1/2的表达,该作用可被姜黄素所抑制。结论姜黄素能抑制ET-1刺激的VSMCs的增殖,其作用可能与抑制磷酸化ERK1/2的表达相关。     

鱼腥草素衍生物对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞Syndecan-4表达的影响

目的观察一种鱼腥草素衍生物（houttuyfonate derivative,HD）对肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factorα,TNF-α）诱导的大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）增殖及Syndecan-4表达的影响。方法以终浓度分别为TNF-α20ng/mL、HD 4μg/mL、HD 8μg/mL、TNF-α20 ng/mL＋HD 4μg/mL及TNF-α20 ng/mL＋HD 8μg/mL对体外培养的VSMCs作用24 h,并设立相关对照组,用MTS/PMS法检测VSMCs的增殖,用Western blot蛋白免疫印迹法测定Syndecan-4的表达情况。结果与对照组相比,HD各剂量组单独应用对VSMCs的增殖无明显作用（P〉0.05）;HD 4μg/mL和8μg/mL可分别抑制TNF-α对VSMCs的增殖作用（P〈0.05）。Western blot测定显示：与对照组相比,HD各剂量组单独应用对Syndecan-4的表达无明显影响（P〉0.05）,HD 4μg/mL和8μg/mL均可抑制TNF-α刺激后Syndecan-4的表达（P〈0.05）。结论HD对TNF-α刺激后的VSMCs的增殖及Syndecan-4表达均有抑制作用。     

虫草素对肿瘤坏死因子-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖及syndecan-4蛋白表达的影响

目的观察虫草素对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）刺激的离体大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和syndecan-4蛋白表达的影响。方法体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,分别应用终浓度为20 ng/mL TNF-α、20μmol/mL虫草素、40μmol/mL虫草素、20 ng/mL TNF-α＋20μmol/mL虫草素、20 ng/mL TNF-α＋40μmol/mL虫草素作用24 h,并设对照组进行比较。采用MTS/PMS法确定VSMCs的增殖状态,利用Western blot蛋白免疫印迹法测定VSMCs中syndecan-4蛋白的表达。结果（1）与对照组比较,TNF-α组能显著刺激大鼠VSMCs的增殖（P〈0.05）,而虫草素不同剂量组单独应用对大鼠VSMCs的增殖均无明显作用（P〉0.05）。TNF-α联合虫草素共同作用组与TNF-α组比较,VSMCs增殖均显著减少（P〈0.05）。（2）Western blot蛋白免疫印迹法测定显示：与对照组比较,TNF-α组能显著刺激VSMCs的syndecan-4蛋白表达（P〈0.05）,而虫草素不同剂量组单独应用对V...更多SMCs的syndecan-4蛋白表达均无明显影响（P〉0.05）。TNF-α联合虫草素共同作用组与TNF-α组比较,VSMCs的syndecan-4蛋白表达显著降低（P〈0.05）。结论虫草素可明显抑制TNF-α诱导的VSMCs增殖及细胞syndecan-4蛋白的表达。     

丹皮酚抑制脂多糖诱导的血管内皮细胞TNF-α释放对共培养体系中血管平滑肌细胞凋亡及p38 MAPK信号通路的影响

目的 观察丹皮酚（Paeonol,Pae）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）损伤的大鼠血管内皮细胞（vascular endothelial cells,VECs）炎性因子释放及对血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）凋亡的影响,阐明Pae抑制VSMCs凋亡是否通过影响VECs释放的炎性因子调控p38 MAPK信号通路。方法 组织块预消化贴壁法原代培养VECs和VSMCs;Transwell小室建立VSMCs和VECs共培养体系;LPS诱导VECs损伤;MTT方法检测细胞存活率;ELISA检测VECs分泌肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha, TNF-α）的水平;流式细胞仪检测VSMCs凋亡率;Western blotting检测VSMCs中p38 MAPK信号通路及凋亡相关蛋白表达。结果 与正常对照组比较,LPS可显著提高VECs分泌的TNF-α水平（P＜0.05）,明显升高共培养体系中VSMCs p38 MAPK信号通路蛋白及凋亡相关蛋白（p-MKK3/6、p-p38、p53和Cleaved caspase-3）水平（P<0.05）,显著提高VSMCs凋亡率（P<0.05）;与LPS刺激组比较,Pae可显著抑制VECs分泌的TNF-α（P＜0.05）,明显降低共培养体系中VSMCs p38 MAPK信号通路蛋白及凋亡相关蛋白（p-MKK3/6、p-p38、p53和Cleaved caspase-3）水平（P＜0.05）,显著降低VSMCs凋亡率（P＜0.05）。结论 Pae可抑制VECs释放TNF-α,从而抑制p38 MAPK信号通路,进而减少VSMCs凋亡。     

普伐他汀对肿瘤坏死因子-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞syndecan-4蛋白表达的影响

目的 观察普伐他汀对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的离体大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖和syndecan-4蛋白表达的影响.方法 体外培养大鼠胸主动脉VSMCs,分别应用终浓度为20 ng/ml TNF-α、10 μmol/ml普伐他汀、20μmol/ml普伐他汀、20 ng/ml TNF-α+10 μmol/ml普伐他汀、20 ng/ml TNF-α+20 μmol/ml普伐他汀分别作用24 h,并设立相关对照组进行比较.采用MTS/PMS法确定VSMCs的增殖状态,利用Western blot蛋白免疫印迹法测定VSMCs中syndecan-4蛋白的表达.结果 (1)与对照组比较,TNF-α组能显著刺激大鼠VSMCS的增殖(P<0.05),而普伐他汀不同剂量组单独应用对大鼠VSMCs的增殖均无明显作用(P>0.05).TNF-α联合普伐他汀共同作用组与TNF-α组比较,VSMCs增殖均有显著减少(P<0.05).(2)Western blot蛋白免疫印迹法测定显示:与对照组比较,TNF-α组能显著刺激VSMCs的syndecan-4蛋白表达(P<0.05),而普伐他汀不同剂量组单独应用对VSMCs的syndecan-4蛋白表达均无明显影响(P>0.05).TNF-α联合普伐他汀共同作用组与TNE-α组比较,VSMCs的syndecan-4蛋白表达显著降低(P<0.05).结论 普伐他汀可明显抑制TNF-α诱导的VSMCs增殖及细胞syndecan-4蛋白的表达.     

绿茶多酚抑制晚期糖基化终产物诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的本研究观察绿茶多酚对晚期糖基化终产物(AGEs)刺激下离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)应用不同浓度的AGEs分别刺激VSMCs并设立对照组进行比较,将不同剂量的绿茶多酚与AGEs共同作用并设立对照组进行比较,采用非放射性的MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。结果与对照组相比,晚期糖基化终产物对血管平滑肌细胞增殖具有明显的刺激作用。在晚期糖基化终产物刺激下,绿茶多酚可明显抑制血管平滑肌细胞的生长。AGEs对p44/42 MAPK磷酸化蛋白表达有显著的增强作用,此作用可被绿茶多酚抑制。结论本研究提示绿茶多酚可抑制晚期糖基化终产物诱导的血管平滑肌细胞增殖及p44/p42 MAPK磷酸化蛋白的表达。     

Caveolin-1和p42/p44MAPK在哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用

目的观察哮喘大鼠肺组织中Caveolin-1和p-p42/p44MAPK含量的变化,探讨Caveolin-1和p42/p44MAPK在哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用。方法 2009年4月～2010年6月间选择SPF级雄性SD大鼠24只,随机分为对照组（C组）、哮喘组（A组）和地塞米松组（D组）,每组8只。以卵白蛋白（OVA）致敏和激发的方法复制大鼠慢性哮喘模型。观察肺组织病理超微结构变化,以图像分析软件测定支气管壁厚度（wat/pbm）和支气管平滑肌厚度（wam/pbm）,免疫组化法检测气道平滑肌Caveolin-1、p-p42/p44MAPK蛋白的表达。结果 A组大鼠wat/pbm、wam/pbm大于C组（P〈0.01）;D组大鼠wat/pbm、wam/pbm小于A组（P〈0.01）,大于C组（P〈0.01）;免疫组化法测定A组Caveolin-1表达量显著低于C组（P〈0.01）,D组表达高于A组（P〈0.01）,但低于C组（P〈0.01）;A组p-p42/p44MAPK表达量显著高于C组（P〈0.01）,D组表达低于A组（P〈0.01）,但高于C组（P〈0.05）;Caveolin-1表达与大鼠wam/pbm呈负相关（r=-0.894,P〈0.01）;p-p42/p44MAPK表达与大鼠wam/pbm呈正相关（r=0.805,P〈0.01）;Caveolin-1与p-p42/p44MAPK表达呈负相关（r=-0.941,P〈0.01）。结论 Caveolin-1与p42/p44MAPK对哮喘大鼠气道重塑有一定影响,其相互作用对哮喘大鼠的气道平滑肌细胞增殖有调节作用。     

绿茶多酚抑制LDL诱导的血管平滑肌细胞增殖

观察绿茶多酚对低密度脂蛋白(LDL)刺激下离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖和p44/42MAPK表达的影响。体外培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,在LDL(100 μg/ml)刺激时,应用不同剂量的绿茶多酚作用24 h后,采用MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。应用流式细胞术测定细胞周期,p44/42磷酸化抗MAPK抗体的蛋白免疫印迹法测定MAPK蛋白表达。与未经LDL处理的平滑肌细胞相比,LDL可以明显刺激大鼠血管平滑肌细胞的增殖,绿茶多酚对LDL刺激下的大鼠血管平滑肌细胞增殖具有明显的抑制作用(P<0.05),并呈现剂量依赖性。流式细胞术检测表明,绿茶多酚可以使LDL刺激下的大鼠血管平滑肌细胞大部分处于G0/G1期,与LDL组相比有明显差异(P<0.05)。LDL对磷酸化p44/42MAPK蛋白表达有显著的增强作用,此作用可被绿茶多酚抑制。绿茶多酚可明显抑制LDL刺激下的大鼠血管平滑肌细胞增殖和磷酸化p44/42丝裂素活化蛋白激酶的表达。     

绿茶多酚抑制晚期糖基化终产物诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖

目的 本研究观察绿茶多酚对晚期糖基化终产物(AGEs)刺激下离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法 体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)应用不同浓度的AGEs分别刺激VSMCs并设立对照组进行比较．将不同剂量的绿茶多酚与AGEs共同作用并设立对照组进行比较，采用非放射性的MTS／PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。结果 与对照组相比，晚期糖基化终产物对血管平滑肌细胞增殖具有明显的刺激作用。在晚期糖基化终产物刺激下．绿茶多酚可明显抑制血管平滑肌细胞的生长。AGEs对p44／42MAPK磷酸化蛋白表达有显著的增强作用，此作用可被绿茶多酚抑制。结论 本研究提示绿茶多酚可抑制晚期糖基化终产物诱导的血管平滑肌细胞增殖及p44／p42 MAPK磷酸化蛋白的表达。     

降钙素基因相关肽对脂多糖诱导血管平滑肌细胞TLR4/NK-资B及炎症因子表达的影响

目的探讨降钙素基因相关肽（CGRP）对脂多糖（LPS）诱导的血管平滑肌细胞（VSMCs）TLR4/NK-kB 及炎症因子表达的影响。方法贴壁法培养VSMCs,根据不同的处理方案,分为对照组、LPS 处理组、CGRP组、（LPS+CGRP）组及（LPS+CGRP+C8-37）组;ELISA 检测不同组VSMCs 中白介素1β（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α ）和基因表达水平,免疫印迹法（Western blot）检测不同组VSMCs 中Toll 样受体4（TLR4）、I资Ba及p65蛋白表达水平。结果①LPS处理VSMCs后,随着LPS浓度的升高,IL-1β和TNF-α表达水平成梯度增加,并于1 000 ng/ml 时分泌水平最高（p <0.05）,在8 h时达到峰值（ p<0.05）;②CGRP 剂量依赖性降低LPS 诱导IL-1β和TNF-α的表达（p <0.05）,并于100 nmol/L 时达到低峰点（p <0.05）;③CGRP能抑制LPS 诱导的细胞TLR4 蛋白的积累（p <0.05）,抑制IkBa 与p65 蛋白的磷酸化水平（p <0.05）;④CGRP阻断剂C8-37可以逆转CGRP对LPS刺激的VSMCs中IL-1β和TNF-α表达（p <0.05）,拮抗CGRP对TLR4和NK-kB 的抑制（p <0.05）。结论CGRP 通过抑制TLR4 蛋白的积累,阻断NF-κB 信号蛋白IkBa 与p65的磷酸化,进而削弱LPS 诱导的细胞炎症因子IL-1β和TNF-α的激活,抑制LPS 诱导的VSMCs 炎症的激活。     

FGF21对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞TLR4/p38MAPK通路的影响

目的 探讨成纤维细胞生长因子21（FGF21）对谷氨酸钠（MSG）诱导非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞炎症及TLR4/p38MAPK信号通路的影响。方法 新生SD大鼠随机分成正常对照组、MSG组和FGF21组（n=10）。MSG组和FGF21组大鼠于生后第2、4、6、8、10天皮下注射MSG 4g/（kg·d）喂养至13周,FGF21组大鼠腹腔注射FGF21 1mg/（kg·d）32天。HE染色分析肝脏病理学改变;观察肝重、肝功能;qRT-PCR和Western blot法检测肝组织IL-6、TNF-α、TLR4、p38MAPK表达情况。结果 与正常对照组比较,MSG组大鼠肝细胞发生脂肪变性伴炎性细胞浸润,肝重、ALT、AST、ALP水平升高（P<0.01）,肝细胞IL-6、TNF-α、TLR4、p38MAPK mRNA表达增加（P<0.01）,TLR4、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白表达升高（P<0.01）;与MSG组比较,FGF21组大鼠肝细胞脂泡和炎性细胞减少,肝重、ALT、AST、ALP降低（P<0.05,P<0.01,P<0.01,P<0.05）,IL-6、TNF-α、TLR4、p38MAPK mRNA表达下降（P<0.01）,TLR4、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白水平降低（P<0.01）。结论 FGF21可能通过调节TLR4/p38MAPK信号转导通路,抑制NAFLD炎性反应。     

Forskolin激活cAMP信号通路调控小鼠心肌成纤维细胞结缔组织生长因子的表达

目的：研究胞内环磷酸腺苷（cAMP）水平提高对小鼠心肌成纤维细胞（MCFs）表达结缔组织生长因子（CT‐GF）的影响及其信号通路。方法采用出生1周内C57BL乳鼠心脏分离培养原代MCFs,第3代MCFs使用腺苷酸环化酶激活剂Forskolin干预培养后检测细胞CTGF、蛋白激酶A（PKA）、p44/42丝裂素活化蛋白激酶（MAPK）及磷酸化p44/42MAPK表达情况。分别给予磷酸化p44/42MAPK抑制剂PD98509及PKA抑制剂Rp‐cAMPS阻断相关信号节点,检测细胞内PKA、p44/42MAPK、磷酸化p44/42MAPK以及CTGF表达变化。结果Forskolin干预培养MCFs细胞后,胞内cAMP水平提高,细胞活力下降,PKA表达上升,p44/42MAPK总蛋白无明显改变,p44/42MAPK磷酸化水平下降,CTGFmRNA及蛋白表达下降;给予PD98509抑制p44/42MAPK磷酸化后,PKA表达上升,CTGFmRNA及蛋白表达下调;Rp‐cAMPS抑制PKA活化后,p44/42MAPK磷酸化水平升高,CTGFmRNA及蛋白表达上调。结论Forskolin可以通过提高MCFs胞内cAMP水平抑制CTGF的表达,其作用信号通路为高水平cAMP上调PKA表达,降低下游p44/42MAPK磷酸化水平,抑制CTGF的表达。     

槐定碱对内毒素血症小鼠肺组织p38MAPK/AP-1表达的影响

目的观察槐定碱对内毒素血症小鼠p38MAPK信号分子、转录因子激活蛋白1(AP-1)及下游炎症因子TNF-α影响,探讨槐定碱抗内毒素的药理机制。方法 BALB/c小鼠尾静脉注射LPS(7mg.kg-1)制备内毒素血症小鼠模型,30min后腹腔注射槐定碱,剂量分别为12、6和3mg.kg-1,6h后取血和肺组织。免疫印迹法(Western-blot)检测肺组织总p38MAPK、磷酸化p38 MAPK蛋白表达,RT-PCR检测肺组织c-jun和c-fos mRNA表达,放免法检测血清中TNF-α含量。结果与内毒素血症模型组比较,三个剂量槐定碱干预组肺组织中磷酸化p38蛋白表达显著降低(P<0.01或P<0.05),c-jun和c-fos mRNA表达显著减少(P<0.01或P<0.05),血清中TNF-α含量明显下降(P<0.01或P<0.05)。结论槐定碱可抑制肺组织中p38MAPK的磷酸化,下调c-jun和c-fos mRNA的表达,抑制下游炎症因子TNF-α表达。     

阿司匹林对血管内皮细胞增殖及磷酸化p44/42MAPK表达的抑制作用

目的 观察阿司匹林对体外培养的血管内皮细胞的增殖和磷酸化p44/42丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响。方法 体外培养血管内皮细胞株ECV304,应用1、2、5、10 mmol/L的阿司匹林分别作用并设立对照进行比较,采用MTS/PES法确定ECV304细胞的增殖状态。利用p44/42磷酸化抗MAPK抗体的蛋白免疫印迹法测定磷酸化p44/42 MAPK蛋白表达。结果 各组的细胞增殖率分别为对照组1.533±0.286,阿司匹林1 mmol/L组1.253±0.225,2 mmol/L组0.953±0.149,5 mmol/L组0.708±0.125,10 mmol/L组0.459±0.107。统计分析显示低至1 mmol/L的阿司匹林仍能明显抑制ECV304细胞的增殖(P<0.05),并呈现剂量依赖性。阿司匹林对ECV304细胞的磷酸化p44/p42 MAPK表达有显著的抑制作用(P<0.05)。结论 阿司匹林对体外培养的血管内皮细胞的增殖和内皮细胞中磷酸化p44/42 MAPK的表达均有明显的抑制作用。     

栝楼桂枝汤调控p38MAPK、Caspase-3减轻MCAO大鼠脑缺血再灌注损伤的机制研究

目的研究栝楼桂枝汤对脑缺血再灌注损伤大鼠大脑缺血侧皮质区细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）表达的影响,探讨其对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。方法 27只SD大鼠随机分为假手术组（Sham组）、缺血再灌注损伤模型组（MCAO组）、栝楼桂枝汤组（GLGZD组）,用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注损伤（MCAO）模型,连续灌胃给药7 d后,进行各组大鼠神经行为学评分,TUNEL法检测各组大鼠大脑缺血侧皮质区细胞凋亡,免疫组化法检测各组大鼠大脑缺血侧皮质区Caspase-3蛋白的表达,免疫印迹法检测各组大鼠大脑缺血侧皮质区p38MAPK蛋白磷酸化表达的情况。结果与Sham组比较,MCAO组大鼠神经行为学评分明显升高（P<0.01）,大脑缺血侧皮质区凋亡细胞数量明显增加,Caspase-3蛋白表达增多,p38MAPK蛋白磷酸化表达水平增高（P<0.01）。与MCAO组比较,GLGZD组大鼠神经行为学缺损改善,细胞凋亡数量降低,Caspase-3蛋白表达减少,p38MAPK蛋白磷酸化表达水平降低（P<0.01）。结论栝楼桂枝汤对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠有保护作用,其机制可能与抑制p38MAPK活化、下调Caspase-3蛋白表达,减少细胞凋亡有关。     

p42/44MAPK对PGF2α所致大鼠子宫平滑肌收缩中Connexin43表达的介导

为探讨p42/44促分裂原活化蛋白激酶（MAPK）-间隙连接蛋白43（Cx43)信号途径与PGF2α致大鼠子宫平滑肌收缩的关系。采用RT-PCR技术检测Cx43mRNA表达水平，采用western-blot方法检测Cx43蛋白表达水平。结果表明，PGF2α增强子宫平滑肌收缩时，伴有Cx43mRNA和蛋白表达水平增高；PD98059（MEK1抑制剂）部分抑制PGF2α致大鼠子宫平滑肌的收缩，同时还可抑制PGF2α所致的Cx43mRNA和蛋白表达水平的增高，提示：p42/44MAPK-Cx43信号途径参与PGF2α致子宫平滑肌的收缩。     

丝裂原活化蛋白激酶在大黄素收缩大鼠胃平滑肌细胞中的作用

[目的]研究丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)在大黄素对大鼠胃平滑肌细胞收缩信号转导途径中的作用机制。[方法]酶解法分离的大鼠胃平滑肌细胞经过培养后分为3个实验组:空白对照组、大黄素组、蛋白激酶C(PKC)抑制剂组(Calphostin C 大黄素)。通过Western blotring方法分析p44／42 MAPK在不同实验组中的表达量变化。[结果]磷酸化p44／42 MAPK的表达量在对照组最少,大黄素组最多,抑制剂组表达量较大黄素组少;三组表达量的差别具有显著性(P值均<0．01)。[结论]磷酸化p44／42 MAPK的表达量变化说明,在相同实验条件下,PKC受抑制后,磷酸化p44／42 MAPK的表达明显低于未受抑制的试验组。本实验结果提示, PKC到p44／42 MAPK信号转导通路参与了大黄素对大鼠胃平滑肌细胞收缩活动的调节。     

非霍奇金淋巴瘤组织中PTEN/MMAC_1/TEP_1和MAPK的表达及其相互关系

目的:研究非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkinlymphoma,NHL)中PTEN/MMAC1/TEP1和p42/44MAPK的表达及其相互关系。方法:利用免疫组织化学技术检测77例淋巴结非霍奇金淋巴瘤中PTEN蛋白和p42/44MAPK的表达。结果:在NHL中,PTEN蛋白和p42/44MAPK的阳性率分别为91%(70/77)和84.4%(65/77),PTEN蛋白阴性表达率为9.1%(7/77);PTEN蛋白和p42/44MAPK的阳性表达强度之间呈明显负相关(r=-0.6452);低度恶性组PTEN蛋白的阳性表达强度明显高于高度恶性组(P<0.01);而p42/44MAPK则为高度恶性组的阳性表达强度明显高于低度恶性组(P<0.01);B细胞性NHL中PTEN蛋白和p42/44MAPK的阳性表达强度与T细胞性NHL比较无明显差异(P>0.05)。结论:提示在NHL的发生及进展过程中,可能是由于PTEN蛋白表达降低或缺失,不能有效抑制由致瘤因子异常激活的Ras/Raf/MAPK信号转导通路,使淋巴细胞异常增殖、分化和恶性转化。