α干扰素联合胸腺肽治疗慢性乙型肝炎效果观察

目的　探讨干扰素(IFN α2b)单用及联合应用胸腺肽对慢性乙型肝炎(CHB)的治疗效果和不良反应。方法　67例CHB患者随机分为联合组与干扰素组。联合组3 3例,采用IFN α2b和胸腺肽联合治疗;干扰素组3 4例,单用IFN α2b治疗。疗程均为3个月。结果　联合组与干扰素组在治疗结束和停药3个月时血清谷丙氨酸转移酶水平均较治疗前明显下降(P <0 .0 1) ;停药后6个月HBeAg/抗 HBe转换率分别为45 .45 %和2 0 .5 9% (P <0 .0 5 ) ,HBVDNA阴转率分别为63 .64 %和3 8.2 4% (P <0 .0 5 )。86.5 7%的患者注射IFN α2b后出现短暂发热等流感样症状,两组不良反应发生率无明显不同。结论　IFN α2b单独或联合胸腺肽治疗CHB均可取得较好的疗效;联合治疗有协同作用。     

干扰素γ对丙型肝炎病毒复制子的抑制作用

目的研究干扰素（IFN）γ直接抑制丙型肝炎病毒（HCV）复制子的作用及其与IFN α联合用药的疗效，并对可能介导IFN γ抗HCV作用的干扰素刺激基因（ISG）的表达水平进行探讨。方法建立HCV复制子细胞模型，用IFN γ或IFN γ联合IFN α处理HCV复制子细胞，通过半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）及实时定量PCR检测细胞中HCV RNA水平；western blot检测细胞中HCV非结构蛋白5A（NS5A）。结果IFN γ对HCV RNA的复制及NS5A的表达有明显抑制作用，10U／ml IFN γ可使HCV RNA较对照组减少36％，25U／ml减少80％；IFN γ对HCV RNA及NS5A蛋白的抑制作用与其剂量及作用时间呈正相关。用IFN γ预处理的细胞对IFN α抗HCV的作用更敏感，且细胞内干扰素调节因子-1（IRF-1）、干扰素刺激基因因子3 γ（ISGF3 γ）和2’5’-寡腺苷酸合成酶（2’5’-OAS）呈明显的诱导性表达。结论IFN γ能有效抑制HCV RNA的复制，并与IFN α有协同抗HCV的作用。IRF-1、ISGF3 γ和2’5’-OAS可能参与介导IFN γ抗HCV的作用。     

噬菌体展示技术筛选干扰素α启动子DNA结合蛋白

目的筛选干扰素α(IFN α)启动子DNA结合蛋白,探讨IFN α基因表达调节的分子生物学机制。方法应用噬菌体展示技术,以IFN α启动子的聚合酶链反应产物作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行5轮“吸附-洗脱-扩增”过程,经噬斑的PCR扩增后,构建克隆载体,最后对所筛选克隆进行DNA序列分析和同源性搜索。结果噬菌体经富集后,随机挑选40个克隆,成功构建了克隆载体,序列测定后经过同源性搜索,确定了和IFN α启动子结合的肝细胞蛋白,筛选到17种与IFN α启动子具有结合作用的蛋白。结论多种具有不同生理、生化功能的蛋白与IFN α启动子具有结合作用。     

重组α-干扰素治疗毛细胞白血病

文献已有报道部分纯化的α-干扰素(α-interfe-ron,IFNα)治疗毛细胞白血病有效。本文的目的在于研究高度纯化的α-干扰素,即重组α-干扰素(re-combinant IFNα,rIFNαA)是否对毛细胞白血病同样有效。     

支气管哮喘中的干扰素研究进展

干扰素 ( interferon,IFN)。干扰素分 型干扰素和 型干扰素 , 型干扰素有 IFN- α、IFN- β和 Tau干扰素。IFN- α主要由白细胞合成 ,还有 B细胞、巨噬细胞、裸淋巴细胞等。IFN- β由多种体细胞合成 ,如成纤维细胞、上皮细胞、巨噬细胞等。Tau干扰素与 α-、β-干扰素具有同样功效。 型干扰素的 IFN- γ是由与巨噬细胞提呈的特异性抗原或有丝分裂原相接触的致敏 T淋巴细胞产生的。1　干扰素 -︽( interferon- gamma)的来源在支气管哮喘病人血清中 IFN-γ的水平是由 T淋巴辅助细胞如 CD4 +、CD8+、单核细胞、巨噬细胞、肥大细…     

慢性丙型肝炎干扰素治疗后复发患者的干扰素再治疗

目的探讨干扰素(IFN)治疗后复发的慢性丙型肝炎患者对IFN再治疗的应答情况及影响因素。方法对聚乙二醇化干扰素(PEG-IFN)α-2a与重组人干扰素(CIFN)α-2a治疗中国慢性丙型肝炎患者疗效与安全性的随机、开放、多中心对照研究中的6O例干扰素治疗后复发患者的再治疗进行回顾性研究。其中PEG-IFN α-2a组35例和CIFN α-2a组25例,以持续病毒学应答(SVR)作为疗效的主要评价指标,分析HCV RNA载量、基因型、药物种类对IFN疗效的影响。结果 60例复发患者用IFN再治疗后,55．00％取得治疗结束时的病毒学应答(ETVR),35．00％取得SVR;其中PEG-IFN α-2a组74.29％取得ETVR,显著高于CIFN α-2a组(28．00％),P<0．01; PEG-IFN α-2a组45．71％取得SVR,高于CIFN α-2a组(20．00％), P>0．05;病毒载量高、低组间的ETVR、SVR的差异无统计学意义;对于HCV基因1型感染患者,PEG- IFN α-2a的ETVR(75．00％)和SVR(45．83％)均显著高于CIFN α-2a组(分别为22．22％和11．11％), P相似文献   

干扰素抗性和细胞因子信号转导

干扰素对各种病毒性肝炎及相关肝病都有不同程度的疗效，但是疾病复发以及长期应用的失效构成了干扰素治疗的最大缺陷。干扰素抗性具有多种机制，如干扰素α／β(interferon α／β，IFNα／β)受体表达的下降、抗干扰素抗体的产生、病毒蛋白的干扰等。在肝炎和肝癌患者肝脏中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor α，TNFα)、白介素-1β(interleukin     

安络化纤丸联合干扰素α-1b治疗慢性乙型肝炎肝纤维化疗效观察

目的 观察安络化纤丸联合干扰素(interferon,IFN)α-1b(运德素)治疗慢性乙型肝炎(乙肝)肝纤维化的疗效.方法 将129例慢性乙肝肝纤维化患者随机分为安络化纤丸组(AL组)40例、IFN α-1b组(IFN组)43例和安络化纤丸联合IFN α-1b组(AL+IFN组)46例.3组患者在治疗0、24、48周...     

丙型病毒性肝炎治疗的进展和具体实施

近年来在对抗丙型病毒性肝炎抗病毒治疗方面取得了显著进展。但在实际工作中 ,广大临床医师对于治疗对象的选择 ,最佳药物治疗的应用 ,特殊病人的处理 ,疗效的监测和评估 ,以及对不良反应的认识和处理等方面 ,还有待进一步的深化 ,以达到最优化的治疗。1986年Hoofnagle等首先报道用α干扰素 (IFN α)治疗慢性非甲非乙型肝炎 (慢性丙型肝炎 ) ,取得初步疗效后 ,随后的双盲、随机对照研究进一步证实了IFN α对慢性丙型肝炎的疗效。以后证明 ,12个月较长疗程的效果优于 6个月的较短疗程 ,其持续病毒应答率 (SVR)提高 1倍左右 ,达 13%～ 2 0 % ,2 0世纪 90年代中后期 ,干扰素加利巴韦林的联合疗法 ,又将疗效提高近 2倍。随着聚乙二醇化α干扰素 (PEG IFN α)的问世 ,与利巴韦林的合用 ,疗效又进一步得到提高(见图 1)。当前在国际上已公认PEG IFN与利巴韦林的联合疗法为最优的选策 ,普通干扰素已完成历史使命 ,将在病毒性肝炎治疗的舞台上逐渐隐退。新的抗HCV药物正在积极研究和开发中 ,预计到 2 0 10年 ,丙型肝炎的治疗又会登上新的台阶。　　一、从常规干扰素发展到...     

不同亚型干扰素α的抗乙型肝炎病毒活性研究

我们用Abbot试剂盒检测干扰素(IFN)α-2b、IFN α-2a、IFNα-1b对HepG2.2.15细胞分泌的HBsAg,HBeAg的抑制率,用RT-PCR、Westem blot以及荧光定量PCR方法检测基因应答水平上信号传导分子STAT1 mRNA及蛋白质表达水平,比较信号传导分子的表达水平与1 FN α对HBsAg和HBeAg抑制率的关系,以探讨用信号分子STAT1作为一种新的抗病毒评价标准的可能性.同时通过不同试验方法的比较,以寻求一种更好的评价IFN α抗病毒活性的方法.     

丙型肝炎肝硬化患者抗病毒疗效的影响因素分析

目的探讨丙型肝炎肝硬化抗病毒治疗疗效影响因素.方法以干扰素(interferon,IFN) α为基础抗病毒治疗的丙型肝炎肝硬化患者作为研究对象,收集其流行病学资料、基线的相关化验指标、抗病毒治疗方案及经过.分析抗病毒治疗后获得的持续病毒学应答(sustained virological response,SVR)率及其影响因素.结果 28例经IFN α联合利巴韦林抗病毒治疗的丙型肝炎肝硬化患者入选,9例获得了SVR,占32.1%.SVR组和非持续病毒学应答(non-SVR,N-SVR)组基线性别比例、年龄、感染时限、HCV RNA、转氨酶、中性粒细胞绝对计数、HGB、PLT和Child-Pugh评分均无统计学差异(P > 0.05).应用聚乙二醇干扰素(pegylated interferon,Peg-IFN) α患者的SVR率高于普通IFN α(P =0.003),但去除中途脱落的患者后2组SVR率的差异无统计意义(P =0.308).依从性好的患者SVR率显著高于依从性差的患者(P =0.004).普通IFN α治疗的患者终止治疗的比例显著高于Peg-IFN α(P =0.009),Child-Pugh评分高的患者终止治疗的比例显著高于Child-Pugh评分低的患者(P=0.034).结论丙型肝炎肝硬化患者抗病毒治疗的SVR率较低,主要与其依从性差有关,而依从性与干扰素类型和肝硬化的严重程度有关.     

融合基因IFN-α1b/CSPⅡ原核表达载体的构建及在大肠埃希菌中的表达

目的　构建融合基因IFN α1b/CSPⅡ的原核表达载体并予以表达。　方法　采用聚合酶链反应(PCR)从人基因组DNA中扩增出IFN α1b基因 ,克隆入原核表达载体 pGEX 4T 1,构建原核表达载体 pGEX 4T 1/IFN α1b。利用PCR法从恶性疟原虫基因组DNA中扩增出环子孢子蛋白Ⅱ区 (CSPⅡ )基因 ,克隆入原核表达载体 pGEX 4T 1,构建原核表达载体pGEX 4T 1/CSPⅡ 。用限制性内切酶BamHⅠ和EcoRⅠ将IFN α1b从原核重组质粒 pGEX 4T 1/IFN α1b中切下 ,克隆入经相同酶切的原核重组质粒pGEX 4T 1/CSPⅡ 中 ,构建融合基因的原核表达载体 pGEX 4T 1/IFN α1b/CSPⅡ。融合基因IFN α1b/CSPⅡ经异丙基 β D硫代半乳糖苷 (IPTG )诱导 ,在大肠埃希菌中进行初步表达。结果　构建的原核表达载体 pGEX 4T 1/IFN α1b、pGEX 4T 1/CSPⅡ和 pGEX 4T 1/IFN α1b/CSPⅡ经PCR和酶切鉴定与预期结果一致。证实融合基因IFN α1b/CSPⅡ拼接成功并正确地克隆入原核表达载体。在大肠埃希菌中表达出融合蛋白IFN α1b/CSPⅡ ,该融合蛋白经十二烷基磺酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS PAGE)分析与理论预测值相符。经蛋白质印迹法 (Westernblotting)鉴定具有免疫原性。　结论　构建了融合基因IFN α1b/CSPⅡ的原核表达载体 ,并在大肠埃希菌中表达了。     

干扰素今昔和肝脏疾病

在20世纪40年代已发现病毒感染有被干扰的现象，1957年Isaacs和Lindenmann报道在鸡胚尿囊膜上有干扰素（IFN）存在，引起广泛注意。以后Isaacs等发现IFN不仅有抗病毒作用，而且对细胞内细菌或立克次体感染也有效。近50年来对IFN研究不断发展，特别1979年后用层析手段获得纯品后，相继获得不同类型IFN的cDNA，采用基因重组技术获得大量IFN纯品，以供实验及临床研究用。[第一段]     

IFN α-1b联合胸腺肽治疗慢性活动性乙型肝炎54例疗效观察

2004年6月～2007年1月，我们应用α—1b干扰素（IFN α—1b）联合国产胸腺肽治疗慢性活动性乙型肝炎（慢活肝）患者54例，现报告如下。     

炭疽杆菌水肿因子的纯化及其性质

将炭疽杆菌Sterne株芽孢液注入小鼠腹部皮下引起水肿,收集水肿渗出液,经硫酸铵分段盐析、离子交换纤维素层析、葡聚糖凝胶-G6200层析,可将水肿因子纯化131～178倍;经硫酸铵分段盐析、离子交换纤维素层析、高效液相层析,可纯化269倍。其中纯化178倍及269倍的EF在聚丙烯酰胺凝胶电泳时只见1条蛋白带。EF在pH7.0,-30℃或4℃保存较稳定,在37℃及偏酸、偏碱条件下均易失活;EF的生物学活性对炭疽保护性抗原有依赖性。     

干扰素α对Ⅰ型胶原及转化生长因子β1基因表达的影响

目的 观察干扰素α(IFN α)对血小板衍生生长因子-BB(PDGF-BB)刺激的大鼠肝星状细胞(HSC)分泌Ⅰ型胶原及转化生长因子β1(TGF β1)基因表达的影响,探讨IFN α抗肝纤维化的可能机制.方法 体外培养大鼠HSC系rHSC-99,分别用0、0.0125、0.0250、0.0500,0.1000、0.2000,0.4000 ng/ml IFN α,PDGF-BB干预和两者共同干预,用四甲基偶氮唑盐实验观察各组对HSC细胞活力的影响,采用逆转录聚合酶链反应方法测定各组对HSC细胞Ⅰ型胶原mRNA和TGF β1 mRNA表达的影响.结果 (1)HSC细胞活力(A值)PDGF-BB干预组为1.35±0.22,空白对照组为0.89±0.12,两组比较,F=16.311,P＜0.05,差异有统计学意义,说明PDGF-BB可提高HSC细胞活力.0.025,0.050、0.100、0.2000,0.400ng/ml IFN α加PDGF-BB共干预组,A值分别为0.84±0.18.0.45±0.15、0.26±0.01、0.33±0.07,0.30±0.06,较空白对照组明显降低,F=7.430,P＜0.05,差异有统计学意义,说明IFN α与PDGF-BB共同作用可抑制HSC细胞活力,且在0.025-0.100 ng/ml范围内随着IFN α浓度的增加其抑制作用越明显.(2)0.050、0.100、0.200ng/ml IFN α加PDGF-BB共干预各组Ⅰ型胶原mRNA相对表达值分别为0.94±0.19、0.61±0.12,0.52±0.02,空白对照组为1.41±0.01,共干预各组比空白对照组均明显降低,F=127.921,P＜0.05,差异有统计学意义.0.050、0.100,0.200ng/mlIFN α加PDGF-BB共干预组各组TGFβ1 mRNA相对表达值分别为1.18±0.06、1.15±0.10、1.39±0.04,空白对照组为1.62±0.12,共干预各组比空白对照组均明显降低,F=82.115,P＜0.05,差异有统计学意义,说明IFN α与PDGF-BB共同作用对HSC细胞Ⅰ型胶原、TGFβ1基因的表达有抑制作用,且随着浓度的增加其抑制作用越明显.结论 IFN α对PDGF-BB诱导的HSC细胞活力及Ⅰ型胶原、TGF β1基因的表达有抑制作用,且随着浓度的增加其抑制作用越明显.这可能是IFN α发挥抗肝纤维化作用的途径之一.     

肺炎支原体感染对老年慢性阻塞性肺疾病急性发作及肺炎患者免疫功能的影响

目的　探讨肺炎支原体感染 (MP)对老年慢性阻塞性肺疾病 (COPD)急性发作及社区获得性肺炎 (肺炎 )患者细胞免疫功能的影响。　方法　 39例老年COPD急性发作、4 0例老年肺炎患者及 30例老年健康对照者用ELISA法测定其血清MP特异性IgM、IgG抗体及干扰素 γ(IFN γ)、白细胞介素 6 (IL 6 )、肿瘤坏死因子 α(TNF α)含量 ;通过聚合酶链式反应 (PCR)法检测痰液中的MP。　结果　 (1)COPD组MPPCR法及MP IgM阳性率明显高于肺炎组及对照组 (P <0 0 5 ) ;(2 )COPD组IFN γ含量明显低于肺炎组 (P <0 0 1) ,而TNF α含量则反之 ;(3)COPD、肺炎组MP IgM阳性者IFN γ含量明显低于组内MP IgM阴性者 (P <0 0 5 )。　结论　 (1)老年人中COPD急性发作MP感染阳性率显著高于肺炎患者 ;(2 )老年COPD急性发作患者IFN γ水平明显低于老年肺炎患者 ,而TNF α、IL 6水平则显著升高 ;(3)MP感染可能抑制了老年人COPD急性发作及肺炎患者IFN γ的产生。     

低密度cDNA Macroarray对干扰素α抗病毒蛋白的筛选

目的 基于低密度cDNA Macoarray技术筛选出差异表达的干扰素(IFN)α抗病毒基因,以探讨IFN α抗病毒蛋白的表达与HBV复制的关系. 方法 以一定浓度的IFN α处理肝胚瘤细胞株HepG2和HepG2.2.15细胞6h,用cDNA Macroarray分析比较两细胞株IFN α抗病毒基因表达谱,并筛选出差异表达的IFNα抗病毒基因.将表达HBV核心蛋白(HBc)的质粒pHBc-EGFP转染HepG2细胞,RT-PCR法分析HBc对IFN α抗病毒基因表达的影响.将表达抗黏病毒A蛋白(MxA)的表达质粒pcDNA3.1-Flag-MxA转染HepG2.2.15,以酶联免疫吸附试验、Dot blot、Southern blot等方法分别检测HepG2.2.15细胞表达释放的HBsAg与HBeAg、细胞外HBV DNA和细胞内HBV DNA复制中间体(松弛环状DNA、双股线性DNA),以判断HBV复制情况.两组间数据比较采用t检验,组间不同时间点数据比较采用单因素方差分析.结果 cDNA Macroarray分析显示HepG2和HepG2.2.15细胞的抗病毒基因表达谱具有差异性:IFNa抗病毒基因中干扰素诱导跨膜蛋白(IFITM)1、IFITM2、IFITM3、RING4等在HepG2.2.15细胞的表达被部分抑制,而重要的抗病毒蛋白MxA表达被完全抑制.HBc转染组细胞中MxA mRNA表达的相对水平为0.31±0.05,低于空白对照组的0.74±0.04,差异有统计学意义,P＜0.05.MxA蛋白转染HepG2.2.15细胞48、72 h后,MxA转染组细胞上清液中HBsAg的S/CO值分别为1.42+0.21和1.58±0.18,HBeAg的S/CO值为1.44±0.14和2.28±0.24,而空白对照组细胞上清液中HBsAg的S/CO值为1.92±0.19和2.79±0.25,HBeAg的S/CO值为2.31±0.46和3.37±0.29,两组细胞上清液中HBV抗原的S/CO值差异均有统计学意义,P值均＜0.05.细胞外HBV DNA、胞内HBV复制中间体DNA均无明显变化.结论 HBV及其抗原成分的复制和表达影响着IFNα抗病毒蛋白的表达;HBV通过抑制IFN α抗病毒蛋白的表达而发挥拮抗IFNα的抗病毒活性.     

慢性乙丙丁各型肝炎干扰素疗法进展

干扰素(IFN)是一组宿主蛋白,对细胞内病毒有抗病毒作用,IFN有α、β、γ三种类型,α-IFN(或IFN-α)为白细胞产生的干扰素,常用的国产干扰素为血液棕黄层白细胞干扰素,进口的有类淋巴细胞干扰素(Wellferon)、重组人干扰素αA(Roferon)、重组人干扰素α_2b(IntronA),国产重组干扰素正在临床进行验证。IFN抑制病毒复制具有广谱性、间接性、相对种属特异性及选择性等特点,在正     

γ干扰素、α1b干扰素对慢性乙型肝炎肝纤维化的影响

应用γ干扰素(IFN γ),α干扰素(IFN α1b)治疗慢性乙型肝炎肝纤维化患者,观察肝纤维化标志物的变化,现将结果报道如下。1.资料与方法:(1)病例选择:80例慢性乙型肝炎患者,年龄在17～66岁,男52例,女28例,病程在2～32年不等,病例均符合2000年西安会议“病毒性肝炎诊断标准”[1]。随机分为两组,每组40例,两组病例治疗前的一般情况均有可比性。(2)治