人胎盘细胞滋养细胞的超微结构观察——明细胞与暗细胞

虽然应用电镜研究人胎盘滋养细胞的超微结构早有报道,但对细胞滋养细胞的电子致密度描述不一。本文对5周至41周人胎盘标本进行了动态观察,发现人胎盘细胞滋养细胞有明细胞与暗细胞之分,并对暗细胞型细胞滋养细胞的意义略加讨论。     

滋养细胞肿瘤的细胞滋养细胞形态定量研究

用全自动图象分析仪对滋养细胞肿瘤的细胞滋养细胞进行形态定量测量。结果表明葡萄胎和绒毛膜癌的细胞滋养细胞为异常增生所形成。葡萄胎Ⅰ至Ⅲ级到绒毛膜癌之间不存在“连续谱系”的逐渐变化，提示葡萄胎与绒毛膜癌间很可能不存在内在因果关系，即细胞滋养细胞的增生程度与细胞良恶性关系较小。以葡萄胎细胞滋养细胞的增生程度作为评估其将来恶变机会的价值较小。     

Merkel细胞和Merkel细胞瘤

Merkel细胞(MC)又名触觉细胞,1875年由Merkel最早描述。广泛分布于人和哺乳动物表皮基底层,与神经纤维终支相连,形成MC-神经轴突复合体。由Merkel细胞或其前体细胞发生的肿瘤称之Merkel细胞瘤。现就有关文献综述如下。 1 Merkel细胞     

从酵母细胞提取细胞色素

在提取酵母细胞中细胞色素过程中,用7％～15％NaCl溶液,裂解酵母细胞。在随后分离阶段,连续用100、30和10kD超滤膜,增加效能。裂解酵母细胞得到的提取物经分离、离子交换层析、凝胶过滤并干燥,得细胞色素。     

杀伤细胞如何抵御瘤细胞

英《泰晤士报》1982年8月18日报道:人体似乎有利用其体内自由基的能力,使其本身具有有利条件来对抗肿瘤细胞. 加拿大一个研究组的生物学家们发现,一种称为天然杀伤细胞的白细胞在接触到癌细胞的数秒钟内,就可释放出一种过氧化物自由基.生物学家认为,过氧化物的释放可触发一系列反应,最后导致癌细胞死亡。在自由基与其他分子起反应前,通常生存的时间很短.生物可     

细胞的自杀行为——细胞凋亡

细胞凋亡 (Ａｐｏｐｔｏｓｉｓ)来源于希腊语 ,原指季节性的叶子脱落 ,它被生物学家借来描述明显有别于细胞坏死 ,但仍以细胞死亡为最终结果的一系列形态学改变。 1972年病理学家Ｋｅｒｒ和Ｗｙｌｌｉｅ首先从形态学上提出了这一概念。由于它是在基因调控下的细胞主动死亡过程 ,因此 ,又称为程序性细胞死亡 (ＰｒｏｇｒａｍｍｅｄＣｅｌｌＤｅａｔｈ ,ＰＣＤ)。1　细胞凋亡与传统的细胞坏死有着本质的不同细胞死亡有两种形式即坏死和凋亡。细胞凋亡与传统的细胞坏死有着本质的不同。坏死是致病因素 (炎症、缺血、理化因素等 )作用于细胞 ,引…     

细胞和分子细胞遗传学技术

经典的细胞遗传学技术是指通过制备染色体标本,分析染色体数目和结构改变与人类疾病之间的关系.近代分子生物学技术与细胞遗传学技术相结合,形成了细胞和分子遗传学技术.其中比较成熟、具有实用价值的技术是:①荧光原位杂交;②比较基因组杂交.     

急性髓细胞白血病树突状细胞诱导T细胞对自体白血病细胞毒性作用的研究

目的　研究急性髓细胞白血病 (AML)树突状细胞 (DC)诱导 T细胞对自体白血病的细胞毒性作用。方法　分离 AML 患者外周血单个核细胞 (MNC) ,在含有 GM- CSF、IL- 4、TNF- α等刺激因子的培养体系中培养7～ 14 d,通过形态学和免疫表型鉴定 DC。通过反复冻融的方法获取白血病抗原肽 ,分别以白血病抗原肽及白血病抗原肽 - HSP90复合物方式脉冲 DC,再将 DC与自体 T淋巴细胞共同孵育 ,以乳酸脱氢酶的方法检测经不同抗原方式激活的自体 T淋巴细胞对白血病细胞的杀伤效应。结果　急性白血病患者外周血 MNC中培养出 DC为 (6～11)× 10 4 / 10 6 MNC,经两种抗原方式激活的自体 T淋巴细胞对自体白血病细胞的杀伤活性分别为 (6 2 .0 7±8.2 9) %和 (35 .33± 9.0 4 ) % ;体外培养的 AML 患者外周血 MNC可诱导分化出大量 DC。结论　单纯白血病抗原肽与白血病抗原肽 - HSP90复合物方式脉冲的 DC均能够激活自体白血病特异性 T淋巴细胞 ,但后者具有更强的激活能力。     

应用细胞收集器进行脑脊液细胞分类

应用细胞收集器进行脑脊液细胞分类建湖县人民医院章龙生常规脑脊液细胞分类一般采用直接分类法，分单叶核细胞（包括淋巴及单核细胞）和多核细胞，以百分率表示。也可采用离心沉淀法，取沉淀物二滴，加正常血清一滴，推片制成均匀薄膜，室温或３７℃温箱待干，进行瑞氏染...     

蛋白激酶C活性、表达及亚细胞分布与KBV200细胞多药耐药相关性的研究

目的研究多药耐药肿瘤细胞PKC活性、PKC亚型的表达和亚细胞分布与KBV200细胞多药耐药的关系。方法MTT法检测敏感株KB和耐药株KBV200细胞的耐药性；印掺入法测定PKC的活性；Western blot法检测KBV200及其亲本KB细胞株PKC亚型的表达和亚细胞分布。结果长春新碱（VCK）和阿霉素（ADK）对KBV200细胞的IC50值分别高于KB细胞（P〈0．01）；耐药指数（RI）分别为65．03和19．8。KBV200细胞的膜组分、浆组分的PKC活性均较KB细胞高,KBV200细胞的总PKC活性是KB细胞的2．12倍。Western blot结果发现KBV200和KB细胞膜组分及浆组分均有PKCq的表达，且KBV200细胞的表达较KB明显增强。PMA可升高KBV200细胞的PKC总活性和膜组分PKC活性，降低浆组分PKC活性、表达（P〈0．01）；PMA可升高VCR、ADK对KBV200细胞的IC50值（P〈0．01）。SP可降低PKC活性；SP预孵育使PKCα膜组分和浆组分的表达均降低，可降低VCR、ADK对KBV200细胞的IC50值（P〈0．01）。结论KBV200细胞的PKC活性、表达、亚细胞分布与KB细胞有明显差别，这种差别可能与KBV200耐药性的变化密切相关，在PKC亚型中，PKCα的表达明显高于其他亚型，且高于亲本株，提示KBV200细胞中PKCα与多药耐药相关。     

Correlation of protein kinase C isoform expression with multidrug resistance in KBV200 cells.]

OBJECTIVE: To investigate the association of protein kinase C (PKC) isoforms and multidrug resistance (MDR) mechanism in KBV200 cells. METHODS: Western blotting was utilized to examine the expression and subcellular distribution of PKC isoforms were measured in KBV200 cells with MDR and drug-sensitive KB cells, and the fluorescence intensity of PKC isoforms was detected by flow cytometry (FCM). RESULTS: KBV200 cells possessed higher PKC activities, with increased percentage of membrane fraction. As compared with parental KB cells, the expression of PKCalpha was significantly increased in KBV200 cells, while PKCbeta and epsilon expressions remained unchanged, and PKCgamma and zeta failed to be detected. Fluorescence intensity of PKCalpha in KBV200 cells was increased. CONCLUSION: PKC might contribute to MDR phenotype in KBV200 cells, and of the isoforms so far detected, PKCalpha might play an important role in MDR phenotype.     

KBV200细胞多药耐药与蛋白激酶C表达上调的关系

目的 研究KBV200多药耐药细胞蛋白激酶C（PKC）的表达，探讨PKC的表达上调与肿瘤多药耐药的关系。方法KBV200细胞分对照组和佛波酯（PMA）组，PMA组应用200nmol/L的PMA预孵育细胞．而对照组不用。^32P掺入法测定多药耐药KBV200细胞株的PKC活性，通过Western blotting检测PKC各亚型表达和亚细胞分布。用MTT法检测细胞耐药性。结果PMA预孵育可提高KBV200细胞的PKC总活性和膜组分PKC活性，降低浆组分PKC活性（P〈0．01）。PMA预孵育使膜组分PKCa表达增加，浆组分PKCa表达降低，膜组分PKCβ无明显变化，浆组分PKCB的表达稍增强。PMA可升高长春新碱、阿霉素对KBV200细胞的IC50值（P〈0．01）。结论PMA使KBV200细胞耐药性增加，可能与PKC表达上调有关。     

KBV200细胞多药耐药与蛋白激酶C表达上调的关系

目的 研究KBV200多药耐药细胞蛋白激酶C(PKC)的表达,探讨PKC的表达上调与肿瘤多药耐药的关系。方法 KBV200细胞分对照组和佛波酯(PMA)组,PMA组应用200nmol/L的PMA预孵育细胞,而对照组不用。³²P掺入法测定多药耐药KBV200细胞株的PKC活性,通过Westernblotting检测PKC各亚型表达和亚细胞分布。用MTT法检测细胞耐药性。结果 PMA预孵育可提高KBV200细胞的PKC总活性和膜组分PKC活性,降低浆组分PKC活性(P<0.01)。PMA预孵育使膜组分PKCα表达增加,浆组分PKCα表达降低,膜组分PKCβ无明显变化,浆组分PKCβ的表达稍增强。PMA可升高长春新碱、阿霉素对KBV200细胞的IC₅₀值(P<0.01)。结论 PMA使KBV200细胞耐药性增加,可能与PKC表达上调有关。     

NK／LAK细胞对人口腔癌耐细胞药株杀伤活性的观察

OBJECTIVE: To understand the relation between cytotoxic activity of immunologic effector cells and multidrug resistance of the tumor cells. METHODS: Continuous observation of the morphological changes and MTT colorimetry were employed to evaluate the cytotoxic activity of lymphokine-activated killer (LAK) cells and natural killer (NK) cells against multidrug-resistant (MDR) human oral carcinoma cell line-KBV200 (before and after reversal of MDR) and parental drug-sensitive cell line KB. The morphologic changes of LAK cells and the 3 target cell lines were observed continuously under inverted microscope 3 h after co-culture of LAK cells with one of three target cell lines respectively. The lysis rates of three tumor cell lines in response to co-culture with LAK or NK cells were determined using MTT colorimetry. RESULTS: In comparison with the parental drug-sensitive cell line KB, both KBV200 and its reserved cell line by verapamil (KBVV) showed earlier adherence and greater number of cells lysed by LAK. In MTT colorimetry assay, the cytotoxicity of both LAK and NK cells against the 3 cell lines was associated with the effector-to-target (E/T) cell ratio; the lysis rates of KBV200 and reversed KBV200 cells by verapamil in response to LAK and NK cells were higher than that of KB cells (P<0.05), but KBV200 and KBVV did not significantly differ (P>0.05). At the same E/T ratio, LAK cells possessed stronger cytotoxicity than NK cells against all the tumor cell lines (P<0.05). CONCLUSIONS: Immunologic effector cells possess strong cytotoxic activity against multidrug-resistant cell line KBV200. Modulation of MDR does not decrease the cytotoxic activity of the immunologic effector cells. The results of this study suggest that adoptive cell immunotherapy with immunologic effector cells may be of value in controlling the progress of MDR tumors.     

EGCG对裸鼠移植瘤中人口腔表皮样癌耐药细胞凋亡的影响

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)增敏长春新碱(VCR)对人口腔表皮样癌多药耐药细胞株KBV200裸鼠移植瘤的抑瘤作用及与瘤细胞凋亡的关系.方法:采用KBV200接种于裸鼠皮下,建立耐药肿瘤模型;2周后,EGCG和VCR腹腔注射,联合处理2周;免疫组化法检测瘤组织Bcl-2,Bax的表达;TUNEL法检测细胞凋亡; 流式细胞仪进行细胞周期分析;透射电镜观察瘤组织细胞超微结构的改变.结果:EGCG联合VCR处理治疗后瘤重、肿瘤相对体积明显低于对照组和VCR组(P<0.05),且与EGCG的剂量呈正相关;低、中、高EGCG联合 VCR组Bcl-2的表达明显低于VCR组(P<0.01);低、中、高EGCG联合 VCR组Bax蛋白的表达明显高于VCR组(P<0.01);TUNEL法低、中、高EGCG联合 VCR组凋亡指数明显高于VCR组,与EGCG呈剂量依赖关系; 流式细胞技术显示低、中、高EGCG联合 VCR组G2/M期细胞高于VCR组(P<0.01); 电镜下三个联合用药组瘤组织中可见较多典型的细胞凋亡的形态学表现.结论:EGCG在体内具有增敏VCR对KBV200移植瘤的杀伤作用.机制可能是通过下调Bcl-2蛋白,上调Bax蛋白的表达,从而促进肿瘤细胞的凋亡.     

NK/LAK细胞对人口腔癌耐细胞药株杀伤活性的观察

目的明确免疫活性细胞对肿瘤细胞的杀伤活性是否与肿瘤的耐药性相关。方法采用连续形态学观察及MTT比色法,研究淋巴因子激活的杀伤(LAK)细胞及自然杀伤(NK)细胞,对人口腔癌耐药细胞株KBV200耐药性逆转前后及亲本敏感株KB的杀伤活性。(1)在肿瘤细胞与LAK细胞共育后3 h内连续在倒置显微镜下观察LAK细胞对上述3者的杀瘤效应;(2)采用MTT比色法检测NK及LAK对3株细胞的杀伤率。结果与KB细胞组相比,在KBV200和KBV200 维拉帕米组,LAK细胞出现在靶细胞周围的时间早、数量多,伸出伪足的LAK细胞比率高,出现集落样细胞团块时间亦早。NK、LAK细胞对KBV200细胞株耐药性逆转前后的杀伤率均明显高于敏感株KB(P<0.05),而对耐药株耐药性逆转前后的杀伤率无统计学差异(P>0.05);LAK对各株的杀伤活力均明显强于NK细胞(P<0.05)。结论免疫活性细胞对KBV200细胞株有较强的杀伤作用,逆转耐药性不降低免疫活性细胞杀伤活力,提示细胞过继免疫治疗可能成为控制化疗耐药病人病情发展的一个有效手段。     

苦参碱与6种抗肿瘤药联用对KBV200耐药细胞株P-糖蛋白表达的研究

目的探讨6种常用抗肿瘤药物长春新碱、阿霉素、平阳霉素、顺铂、5-Fu、环磷酰胺等与苦参碱联合对KBV200耐药细胞株P-糖蛋白（P-gp）表达的影响。方法以喉癌KBV200耐药细胞株为研究对象，通过流式细胞仪（FCM）检测6种抗肿瘤药物作用于KBV200耐药细胞株后p-Pg表达以及分别联合苦参碱后对p-Pg表达的影响。结果苦参碱分别联合长春新碱、阿霉素作用后，KBV200耐药细胞株P—Pg表达水平下降。结论苦参碱分别与长春新碱和阿霉素联合作用后，可使KBV200耐药细胞株P-pg的表达水平下降，从而逆转其耐药性。     

龙眼参提取物对耐药口腔上皮样癌细胞株KB／MIT及耐药乳腺癌细胞株MCF-7／ADR的逆转作用

目的：研究龙眼参提取物XCKB／MIT细胞及MCF-7／ADR细胞株的耐药逆转作用。方法：设计4个不同浓度的龙眼参提取物组，采用MTT方法．测定体外培养的阿霉素敏感株MCF-7及其耐药株MCF-7／ADR以及米托蒽醌敏感株KB及其耐药株KB／MIT的IC50。结果：MCF-7／ADR耐药株及KB／MIT耐药株在龙眼参提取物与阿霉素或米托蒽醌的联合用药中其IC50值分别接近于单独用约于敏感株MCF-7和KB的水平．而与单独用药于耐药株其IC50有显著性差异。结论：龙眼参提取物可以逆转MCF7／ADR和KB／MIT的耐药性。