深低温冷存的吻合血管同种异体长骨移植的实验研究

目的：探讨深低温冷存的吻合血管异体长骨治疗大块骨缺损的效果。方法：32只兔随机分成3组：A组12只，用深低温冷存的吻合血管作异体骨移植；B组12只，深低温冷存的吻合血管异体移植术后4周用免疫抑制剂环孢素A（Cyclosporine A CsA);C组8只作新鲜的吻合血管异体骨移植。术后2、4、8、12周摄X线片，第3周取外周血栓测自发性淋巴母细胞生成率，第8周取外周血检测白细胞介素2（IL－2），并于12周通过灌注墨汁等检测吻合血管的通畅情况，并对移植骨进行组织学检测。结果：A、B2组术后12周两端可达骨性连接（愈合），而C组仅1例近端达骨连接且明显延迟。术后3周A、B2组自发性淋巴母细胞生成与未移植兔比值均＜2。术后8周外周血IL－2活性，C组最高，A组次之，B组最低，且任意2组之间均有显著性差异（P＜0．01）。术后12周，A、B2组血管通畅率无显著性差异（P＞0．05）。组织切片中可见移植骨与受区两端有骨小梁连接。结论：深低温冷存吻合血管异体长骨可修复大块骨缺损；深低温冷存和CsA可协同抑制吻合血管异体长骨移植的排斥反应。     

复合骨移植在下肢骨肿瘤保肢治疗中的应用

目的探讨复合骨移植在下肢骨肿瘤保肢术中重建骨缺损的手术原理及效果。方法应用携带监测皮岛吻合血管的自体腓骨与深低温冷冻大段同种异体骨复合移植，重建下肢骨肿瘤切除后的长段骨缺损12例。其中，骨肉瘤6例，恶性纤维组织细胞瘤1例，骨纤维结构不良2例，骨巨细胞瘤3例。结果12例经术后8～38个月随访，1例死于肺转移，2例带瘤存活，9例无瘤存活。术后功能优良率达75％。10例术后3个月内X线示骨端骨性愈合，2例内固定失败重新外固定后骨性愈合，所有均在9个月内能完全负重行走。结论携带监测皮岛吻合血管的自体腓骨与深低温冷冻大段同种异体骨复合移植，适用于下肢骨肿瘤保肢术中的长段骨缺损的修复，具有自体活骨移植和异体骨移植的双重优点。     

骨移植物再血管化与骨改建的相关研究

目的探讨骨移植物再血管化与骨改建的相互关系,并对深冻自体骨和深冻异体骨的再血管化和骨改建进行比较。方法实验动物选用纯种成年健康新西兰大白兔36只。建立兔桡骨干15 mm骨—骨膜缺损模型,于其左侧缺损区植入深冻异体骨,右侧缺损区植入深冻自体骨。于术后4、8、12、16、20、24周处死动物,进行放射学、组织学及免疫组织化学观察,并借助计算机图像分析仪进行定量分析,分别用再血管化指数(每平方毫米总骨面积内的血管数)与新骨形成面积代表再血管化和骨改建程度。结果X线片显示,与宿主骨骨性愈合时间,自体骨移植组较异体骨移植组约提早4周。对再血管化指数及新骨形成面积的计量资料相关分析表明,两者呈高度正相关(r自体=0.938 8;r异体=0.969 6)。术后8~24周自体骨移植组较异体骨移植组有较高的再血管化指数(8周时分别为1.618±0.631和1.298±0.706,24周时分别为2.943±0.847和2.790±0.944)和较多的新骨形成(8周时分别为1.988±1.614和1.563±1.700,24周时分别为6.103±2.912和5.800±2.962,P<0.05)。结论骨移植后再血管化与骨改建呈高度正相关。移植骨的再血管化对骨改建可能起重要作用,免疫排斥反应可能通过影响移植骨的再血管化而最终影响骨改建。     

骨肿瘤

20061286 复合骨移植在下肢骨肿瘤保肢治疗中的应用／王建炜…∥中华显微外科杂志．-2005，28（4）．-309-311 应用携带监测皮岛吻合血管的自体腓骨与深低温冷冻大段同种异体骨复合移植，重建下肢骨肿瘤切除后的长段骨缺损12例。其中，骨肉瘤6例，恶性纤维组织细胞瘤1例，骨纤维结构不良2例，骨巨细胞瘤3例。结果：12例经术后8～38个月随访，1例死于肺转移，2例带瘤存活，9例无瘤存活。术后功能优良率达75％。10例术后3个月内X线示骨端骨性愈合，2例内固定失败重新外固定后骨性愈合，所有均在9个月内能完全负重行走。结论；携带监测皮岛吻合血管的自体腓骨与深低温冷冻大段同种异体骨复合移植，适用于下肢骨肿瘤保肢术中的长段骨缺损的修复，具有自体活骨移植和异体骨移植的双重优点。图3参6     

桡骨远端瘤段切除后单纯自体腓骨移植与吻合血管腓骨移植重建桡腕关节疗效比较

目的分析单纯自体腓骨移植与吻合血管腓骨移植在桡骨远端瘤段切除后修复桡骨远端缺损和重建桡腕关节远期效果.方法 1979年1月～2002年9月对15例桡骨远端肿瘤患者行瘤段切除后,6例行单纯自体腓骨移植,9例行吻合血管腓骨移植重建桡腕关节.随访1年,参照Enneking系统及国际肢体修复讨论会所制定的同种/带血管蒂骨移植的影像学评价方法,进行肢体功能、影像学及供区的功能评价.结果 8例吻合血管腓骨移植恢复肢体功能的80%,6个月内完成骨愈合;6例单纯自体腓骨移植恢复肢体功能的67%,其中4例移植骨在5 cm以内术后6个月骨愈合可,2例骨移植超过12 cm者愈合延迟,分别为13个月和16个月;1例术后2个月行肘下截肢术.结论应用腓骨头替代桡骨远端重建腕关节是合适的;吻合血管腓骨移植重建桡腕关节不受骨缺损长度影响,且植骨愈合率高、时间短,无骨吸收.可作为桡骨远端肿瘤手术治疗的一种有效手段.     

桡骨远端骨缺损的修复与功能重建

对于桡骨远端骨缺损的治疗包括修复骨缺损及重建腕关节功能。自１９７９年以来，采用了吻合腓血管的腓骨移植，吻合膝下外血管的腓骨上段骨瓣移植及带血管蒂的肩胛骨瓣移植修复桡骨远端骨缺损，并重建腕关节功能共１３例，经１年～１０年随访，获得了较满意的效果。对桡骨中、远端骨病损后长段骨缺损的修复、术式、手术注意事项及适应证等的选择进行了讨论。认为，应根据骨缺损的长短，分别选用吻合腓血管的腓骨移植或吻合膝下外血管的腓骨上段骨瓣移植来修复骨缺损，并重建腕关节功能。     

新鲜和深低温冷冻同种异体骨软骨移植长期转归实验研究

[目的]观察和比较新鲜和深低温冷冻同种异体骨软骨移植后的长期转归情况,为同种异体骨软骨移植治疗关节软骨缺损进一步提供理论基础。[方法]建立兔膝关节软骨缺损模型,行新鲜和深低温冷冻同种异体骨软骨移植。在术后12个月和18个月,骨软骨移植物取材进行关节软骨蛋白多糖、软骨细胞活性检测和软骨细胞超微结构观察。[结果]新鲜和冷冻骨软骨移植物中蛋白多糖阿尔新蓝染色强度和存活软骨细胞比率术后均下降,且在各时间点新鲜移植组的结果优于冷冻移植组,有统计学差异(P0.05)。超微结构显示软骨细胞退行性改变。[结论]新鲜和深低温冷冻同种异体骨软骨在移植术后较长时间均出现严重退变,冷冻骨软骨移植物退变较严重,其作为关节软骨缺损治疗方法目前是不可行的。     

吻合血管同种异体骨移植后存活状况研究

目的报道吻合血管同种异体骨移植术后不同时段存活状况。方法建立吻合血管同种异体股骨干移植动物模型，在术后不同时段进行活体解剖，观察血管的通畅度．并切取移植骨进行组织学、电镜及SDH染色检测。结果术后4周对照组血管基本完全闭塞，而实验组术后血管保持通畅。组织学检查显示对照组术后移植骨骨陷窝内骨细胞缺失，哈弗斯管内血管亦消失；而实验组术后骨陷窝内始终有骨细胞充填。电镜表现为对照组术后移植骨出现骨细胞核浓缩．核碎裂，直至骨陷窝内骨细胞丢失；实验组术后骨细胞超微结构正常、对照组术后2周．骨组织SDH染色已无蓝染的骨细胞，而实验组术后可见同心圆排列蓝染的骨细胞。结论在免疫调控下，吻合血管的同种异体骨移植术后供体始终保持活力状态。     

吻合血管的同种异体骨移植后移植物再血管化的研究

目的 探讨吻合血管的同种异体骨移植后移植物在宿主体内再血管化过程及其规律.方法 建立吻合血管的同种异体骨移植修复兔股骨大段缺损的模型,实验分成两组,实验组(吻合旋股外血管股骨中上段等位异体骨移植组)和对照组(未吻合血管的股骨中上段等位异体骨移植组).对移植物骨膜、皮质骨及骨髓进行组织学切片,同时对微血管内皮细胞进行免疫组化染色,血管计数后.进行统计学分析,制备墨汁灌注标本,观察各部位微血管再生情况.结果 实验组即可见骨膜、皮质骨和骨髓同时出现再血管化现象,而对照组则由浅至深逐渐出现再血管化现象,在术后2、4、8、16周实验组微血管密度分别为10.0±1.8、15.8±1.5、13.8±1.5、13.8±1.5,对照组分别为2.8±0.8、6.0±0.9、5.5±1.0、6.0±1.1,实验组明显高于对照组;墨染显示实验组墨染范围及程度明显强于对照组.结论 吻合血管的异体骨移植能加快移植物再血管化的过程.     

自固化磷酸钙复合BMP及同种异体骨修复兔股骨大段骨缺损

[目的] 观察一种新型自固化磷酸钙（CPC）复合BMP与同种异体骨修复兔股骨节段性骨缺损的效果，为临床复合应用大段同种异体骨移植提供参考。[方法] 54只新西兰大白兔随机分成3组，于一侧股骨中上段造成2cm长皮质骨缺损模型，分别进行：A组复合BMP与CPC的新鲜冷冻同种异体骨移植；B组单纯新鲜冷冻同种异体骨移植；C组自体大段骨移植。移植骨均用直径3mm三棱髓内针固定。于术后4、8、12周，进行影像学、组织学检查，对比各组移植骨愈合过程与修复效果。[结果] CPC复合BMP大段同种异体骨移植早期骨修复效果优于单纯异体骨移植（P〈0．01），与自体骨移植修复效果相似，至12周3组均达骨性愈合，以A组及C组骨修复塑形较好。CPC复合BMP组骨痂量较多，分布于移植骨与宿主骨结合部及移植骨周围，形成皮质骨外骨桥，并较早在异体骨外表面形成破骨与成骨，异体骨内哈佛氏管扩大，衬垫细胞、成骨细胞、破骨细胞及血细胞较其它组多。CPC随着新骨的形成及改建塑形逐步缓慢降解。[结论] CPC复合BMP对大段同种异体骨移植的愈合及替代有增强和促进作用。     

补肾密骨片结合骨髓移植对桡骨延迟愈合的实验研究

[目的]观察补肾密骨片结合经皮自体骨髓移植对骨折延迟愈合治疗后的骨密度和生物力学性能影响。[方法]预制新西兰大耳白兔骨延迟愈合模型，将75只兔随机分为四组：A组20只，饲料中加入补肾密骨片，骨延迟愈合区注入自体红骨髓2ml；B组20只，饲料中加入补肾密骨片，骨延迟愈合区不注入自体红骨髓；C组20只，饲料中不加补肾密骨片，骨延迟愈合区注入自体红骨髓；D组15只，造成骨延迟愈合模型后，饲料中不加补肾密骨片，骨延迟愈合区不注人自体红骨髓。治疗后12周处死动物取材，行骨密度及生物力学测试。[结果]骨密度及生物力学测试均显示A组骨愈合优于B、C、D组。[结论]补肾密骨片结合经皮自体骨髓移植治疗骨折延迟愈合的骨组织的骨密度及生物力学强度优于单一骨髓移植或中药治疗。     

兔半侧颜面移植模型

目的 为异体颜面移植（换脸）的研究建立一种动物模型.方法 以青紫蓝兔及新西兰大白兔为实验动物,应用颈外动脉携带其分支颌外动脉和耳大动脉为蒂,获得半侧颜面游离复合组织瓣,进行同种异体移植,其中青紫蓝兔为受体、新西兰大白兔为供体.术后观测复合组织瓣的存活情况,检验实验动物模型的可行性.结果 通过美蓝显示应用本程序获得的游离复合组织瓣模型,依靠颈外动脉供血,可以保证其存活.结论 本实验程序可以作为研究异体颜面移植的一种良好模型.     

两种不同处理方法对同种异体骨移植作用的实验研究

[目的]探讨两种不同处理方法对同种异体骨移植修复大段骨缺损疗效的实验研究。[方法]选取健康成年新西兰大白兔48只,随机分2组,实验1组:血管束植入同种异体骨修复组,实验2组:带血运骨膜包裹同种异体骨修复组。观察术后组织学切片,成骨量,生物力学,X线片等变化。比较两种术式修复骨缺损的差异。[结果]术后X线片观察实验2组较实验1组骨痂增加明显,光镜组织学检查实验2组较实验1组骨痂形成早,骨髓腔再通时间短。两组成骨量均在8周时达到峰值,实验2组在各时段成骨量均大于实验1组。三点弯曲试验结果示实验2组优于实验1组。[结论]带血运骨膜瓣包裹异体骨修复骨缺损优于单纯血管束植入同种异体骨修复骨缺损,带血运骨膜瓣包裹异体骨是修复大段骨缺损的较理想的方法。     

Localization of technetium-99m methylene diphosphonate in bone using microautoradiography

Technetium-99m methylene diphosphonate ([99mTc]MDP) is the most widely used bone-scanning agent today. In order to determine the precise bone locus of 99mTc corresponding to the delayed bone scan image, and to test the potential clinical use of this agent in enhancing the information obtained by bone scan, we employed [99mTc]MDP in this microautoradiographic study of normal bone and bone reparative tissue. Four white rabbits underwent operations in which two 1.5-mm drill holes were created in the subtrochanteric regions of both of their femora. An additional four white rabbits underwent sham operations of their femora, in which neither drilling nor periosteal injury occurred. Two rabbits were controls and did not undergo operation. After 7 days, the first two groups of rabbits were injected with [99mTc]MDP and bone scanned 2 h later. After the scans were completed, all three groups of animals were killed and their femora histologically processed for microautoradiography and routine histopathology. In the two groups that were injected with [99mTc]MDP, all bones showed the isotope to be clearly localized along mineralization fronts. The isotope was occasionally found in the substance of the osteoid, but was absent from the cytoplasm and nuclei of osteoblasts and osteocytes. Osteocytic lacunae showed the presence of isotope at their borders, but no identifiable pattern of isotope uptake was noted. Neither osteoclasts nor Howships lacunae showed isotope uptake.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

成型脱钙骨基质移植重建完全半月板缺损的实验研究

[目的]探索成型脱钙骨基质作为完全半月板缺损后替代假体的可行性，并进行移植假体引导自体组织再生效果的评价。[方法]脱钙骨基质按照Urist方法制备，并依据半月板的形状预制成型。48只新西兰大白兔随机分为脱钙骨基质移植组和脱细胞同种异体移植（冻融处理）对照组，并将两组按照三个不同时期分为3个配伍组。将各组动物分作关节功能评价，大体观察，组织学和免疫学观察；并进行统计分析。[结果]脱钙骨基质组回缩较小，细胞组织的增殖活性更高；两组总体和各期在移植体回缩率，免疫组织化学检查均有统计学意义。[结论]成型脱钙骨基质作为半月板假体较脱细胞同种异体半月板具有更好的性能结构和增殖活性。     

补肾密骨片结合经皮自体骨髓移植治疗兔桡骨骨折延迟愈合

[目的]观察口服补肾密骨片结合经皮自体骨髓移植对骨折延迟愈合的治疗作用及机制。[方法]预制新西兰大耳白兔骨延迟愈合模型，将75只兔随机分为3组：A组20只，饲料中加入补。肾密骨片，骨延迟愈合区注入自体红骨髓2ml；B组20只，饲料中加入补肾密骨片，骨延迟愈合区不注入自体红骨髓；C组20只，饲料中不加补肾密骨片，骨延迟愈合区注入自体红骨髓：D组15只，造成骨延迟愈合模型后，饲料中不加补肾密骨片，骨延迟愈合区不注入自体红骨髓。治疗后4、8、12周分别行大体观察、组织学、碱性磷酸酶及X线片检查。[结果]大体标本肉眼观察、病理组织学检查、碱性磷酸酶及放射学检查均显示A组愈合时间较B、C、D组早，且愈合率明显高于B、C、D组。[结论]口服补肾密骨片结合经皮自体骨髓移植是治疗骨折延迟愈合的一种有效方法。     

肝联合其他器官移植术后近期免疫抑制策略的方案探讨

目的探讨肝联合其他器官移植术后近期的免疫抑制策略。方法我中心于2004年至2009年共实施肝联合其他器官移植22例,其中肝肾联合移植17例,肝胰十二指肠联合移植5例。存活时间大于3个月的患者共18例,比较此类患者与单一器官移植患者术后近期排斥反应发生率和免疫抑制策略的差别。结果肝联合其他器官移植的患者术后3个月内,移植肝排斥反应发生率为5．5％;移植肾的排斥反应发生率为5．9％;其他器官没有发生排斥反应,较我中心单一器官移植排斥反应发生率低。同时,肝联合其他器官移植患者免疫抑制剂初始剂量及术后近期所需浓度均较单一器官移植低。结论肝联合其他器官移植的患者,由于移植肝对其他移植器官的免疫保护作用,排斥反应发生率低,所需免疫抑制剂初始剂量及浓度均低于单一器官移植。但肝脏对其他移植器官的免疫保护作用机制尚需进一步研究。     

The use of skin allograft with donor-specific tolerance in a rabbit model of full-thickness burn

Previous studies in our laboratory demonstrated that portal vein or intraosseous administration of donor bone marrow cells for modulation of the central immune system is likely to be beneficial for allograft tolerance induction in rabbits. We recently reported that the severity of host conditioning for donor-specific tolerance induction was reduced without loss of efficacy by using a single intraosseous injection of donor bone marrow cells without immunosuppressive agent administration or T cell depletion. We now further investigated the feasibility and effectiveness of skin allografting using donor-specific tolerance to treat full-thickness burns. MATERIALS AND METHODS: Dutch rabbits were used as recipients, and Japanese white rabbits were used as donors. Three experimental groups of burned rabbits were studied. Group I, allograft control; group II, allograft plus total-body irradiation; group III, allograft plus total-body irradiation and bone marrow infusion. Allograft survival times were determined by macroscopic and histopathologic examinations. RESULTS: Mean (S.D.) skin allograft survival was as follows: group I, 13.2 (4.1) days; group II, 15.2 (3.7) days; group III, 108.4 (14.3) days. CONCLUSION: We have shown the potential to perform long-term skin allografts by the induction of donor-specific tolerance in a rabbit model of burn.     

同种异体骨髓基质细胞肌肉内成骨分化的实验研究

目的 观察并探讨同种异体兔骨髓基质细胞在未接受免疫抑制剂的正常兔肌肉内移植后的免疫原性、存活及成骨状况.方法 首先通过兔谱系差异选择供、受体,并采用淋巴细胞反应进一步证实免疫学错配,之后抽取兔骨髓、体外分离培养、获取骨髓基质细胞,体外加矿化条件培养液诱导成骨、并对成骨特性予以鉴定后,将异体骨髓基质细胞移植入受体兔肌肉内,从淋巴细胞转化率、淋巴细胞杀伤活性、组织学检查、种子细胞体内成活及成骨情况等方面检测. 结果 术后各检测时间,异体骨髓基质细胞移植未诱发淋巴细胞大量增殖反应(P>0.05),淋巴细胞杀伤活性与自体组差异无统计学意义(P>0.05),移植区未见到大量炎性细胞浸润,经组织学及免疫组化染色证实异体骨髓基质细胞在受体组织内存活,8周后于异体肌肉中形成骨组织. 结论 同种异体骨髓基质细胞移植,未诱发免疫排斥反应,在无免疫抑制剂应用的情况下,移植细胞在受体肌肉内存活、并形成骨性组织.     

兔自体骨髓间充质干细胞体内复合移植的成骨研究

目的 观察兔自体骨髓间充质干细胞（MSCs)体内复合移植的成骨能力，以寻求理想的MSCs载体。方法将10只新西兰大白兔随机分成A、B两组，从自体骨髓中分离出MSCs，体外培养并扩增后分别与相同大小的小牛脱钙骨（DBCB），自固化磷酸钙人工骨（CPC）复合移植于两组大白兔左侧骶棘肌中，同时右侧骶棘肌分别植入相同大小的DBCB，CPC作空白对照；16周后取出标本，观察成骨情况并行组织学检查。结果 A组5例：MSCs DBCB侧均发现有新骨组织形成，单纯DBCB侧3例被完全吸收，降解，2例大部分吸收，降解；B组5例；MSCs CPC侧和单纯CPC侧均未见骨组织形成，植入物也无明显吸收，结论 自体骨髓MSCs在适合载体负载下可在体内自动分化成骨，DBCB是MSCs的良好载体之一。