分泌抗ADRV单克隆抗体细胞系的建立

1984年,洪涛等分离出“成人腹泻轮状病毒”(简称ADRV)。由于ADRV的某些特点(细胞培养尚未成功,尚无动物模型),诊断该病的手段一般靠聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、电镜等。为寻找快速、特异、敏感、简易的方法供基层现场使     

轮状病毒引起儿童腹泻其抗体在体内维持时间的研究

目的观察儿童腹泻轮状病毒(ADRV)抗体在人体内维持时间。方法采用特异性的ADRV-ELISA阻断试验检测ADRV抗体,对儿童腹泻的病人恢复1年、6年、10年后的血清进行ADRV抗体的检测。结果261例ADRV病人恢复1年、6年、10年后其血清中ADRV抗体阳性率分别为22.7%(34/150)、36.3%(29/80)、22.6%(7/31);对92例ADRV抗体阳性者进行了抗体维持时间的观察,ADRV抗体在人体内可维持1～6年。结论儿童腹泻轮状病毒感染人后一旦产生了抗体,可维持16年。     

轮状病毒引起儿童腹泻其抗体在体内维持时间的研究

轮状病毒（ADRV）是婴幼儿急性胃肠炎最常见病原体,占所有肠道感染病因的50％以上,部分病例早期,可感染肠道外其他组织,常见有呼吸道、心血管系统、中枢神经系统等。它在我国许多地区都曾爆发流行,有关ADRV的病原学及其分子生物学等已有许多报道,ADRV的全基因已经获得克隆,主要目的基因也已做了全序列分析和表达。为研制诊断试剂和制备疫苗奠定了基础。然而,对它的免疫学了解甚少,尤其是ADRV感染人体后其抗体的维持时间与发病的关系研究较少,我们进行了此方面的研究。     

成人腹泻轮状病毒单克隆抗体的研制

1983年洪涛等在我国首次发现了成人腹泻轮状病毒(ADRV)。为了进一步研究此病毒的抗原特性和建立简便敏感的早期诊断方法,我们于1985年开始应用杂交瘤技术研制ADRV单克隆抗体,目前已得到10株能连续传代稳定分泌抗-ADRV的杂交瘤细胞系。结果如下: 1.10株杂交瘤细胞分泌的McAb组织培养上清液的ELISA滴度为1∶128—1∶512,腹水滴度为1∶3,200—1∶128,000。     

改良PAGE快速诊断婴幼儿轮状病毒肠炎

我们对常规的PAGE法进行改进,不用浓缩胶,缩短了电泳、染色时间;应用本改良PAGE法与ELISA法进行比较,检测39例2岁以下患儿腹泻大便,其结果用改良PAGE法检测为23例阳性、16例阴性,用ELISA法检测为18例阳性、21例阴性。改良PAGF法能直接检测出轮状病毒的核酸区带,既比ELISA法敏感,又比常规的PAGE法快速。     

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法对粪便中轮状病毒的检测及基因分析

本文报道了1985年10月-1986年1月对广州105例3岁以下急性腹泻儿童粪便标本,用PAGE法检测HRV RNA的方法及结果。105例中有66例阳性,阳性率为62.8％,其中3例为S型,63例为L型,后者又可进一步分为11种不同类型的电泳图型。文中并讨论了PAGE对HRV检测的实用意义和注意事项,认为PAGE是一种值得推广的快速、敏感、特异的试验方法。     

用PAGE法检测婴幼儿腹泻粪便中轮状病毒核酸的研究

本文首次在国内报告用PAGE法对轮状病毒感染作分子流行病学调查,并首次确认该病毒是本地区引起婴幼儿急性腹泻的主要病原(据我们手头资料)。本研究从151份急性腹泻患儿粪便中提取轮状病毒核酸,用PAGE法进行核酸检测,共测出轮状病毒核酸阳性标本90份(阳性率为59.6%),其中86份的RNA基因图型为“长型”,仅4份为“短型”。我们对轮状病毒核酸检测方法亦作了一些改进。     

2002年100例秋冬季腹泻患儿轮状病毒分子流行特征的研究(摘要)

目的：研究2002年100例秋冬季腹泻患儿轮状病毒分子流行特征．方法：2002年9月～12月在昆明医学院第一附属医院儿科收集秋冬季腹泻患儿便样标本，利用ELISA和PAGE（聚丙烯胺凝胶电泳）方法，检测100例秋冬季腹泻患儿A组轮状病毒的感染情况，尽可能的降低检测中出现的假阳性和假阴性．并采用RT-PCR及net-PCR方法对PAGE阳性的80份标本进行A组轮状病毒4种主要的VP7血清型（G1、G2、G3和G4）分型．结果：（1）经ELISA检测，有83份阳性，检出率为83％；PAGE检测有80份阳性，检出率为80％；     

南京地区成人轮状病毒抗体的调查

采用ELISA-BL试验对南京地区336份正常人血清进行ADRV抗体调查。结果显示正常人群中ADRV抗体阳性率为2．67%，平均几何滴度为1；5．2；各年龄组间ADRV抗体阳性率有显著差异，而40岁以下各年龄组未检出阳性标本；男士间ADRV抗体的阳性率无显著性差异，分别为1．96％和3．28%。南京地区与河北正定的ADRV抗体阳性率也无差异。另外，南京地区婴幼儿轮状病毒(RV)的抗体水平明显高于ADRV抗体水平。     

广州及邻近地区人轮状病毒的基因RNA分析

本文报道了用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对广州及邻近地区1982年11月到1985年1月收集的603份婴幼儿腹泻标本进行了人轮状病毒(HRV)的基因RNA分析。共发现21个电泳型,每年均有一个优势电泳型流行,而且在不同的地理位点和年份所检出的非流行优势电泳型基本不同,表明HRV电泳型的变异性较大。另外,发现长—长电泳型和长—短电泳型HRV混合感染各6例,表明同一宿主可同时感染不同电泳型的HRV株,以及HRV在自然界会发生基因重组的迹象。对成人流行性急性腹泻病人的粪便标本的RNA电泳分析结果表明,广东省的中山县,江门市,新会县三地区以及湖南省所发现的成人轮状病毒(ADRV)感染可能由同一毒株引起,而该毒株与广西发现的ADRV株有少许的差别。表明ADRV也存在电泳型变异性的问题,本文还提出了对HRV电泳型分类及命名的建议,并探讨其在实践应用上的可行性。     

我国昆明地区人轮状病毒RNA基因组分析

最近国外应用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术对人轮状病毒RNA基因组进行分析,在轮状病毒胃肠炎流行病学研究中获得一些有意义的结果。为探索我国人轮状病毒基因组电泳型(Electrop-herotype)及其与疾病流行的关系,我们用PAGE对1979～1981年昆明地区两次     

健康人群成人腹泻轮状病毒感染的血清流行病学调查

<正> 1983年以来,我地区田东、靖西、田阳等县相继暴发流行一种以侵袭青壮年为主的急性流行性腹泻,经病原学分离鉴定,证实为一种新的轮状病毒——成人腹泻轮状病毒(ADRV)。为摸清我地区该病的分布情况及规律,我们分别在靖西县(流行     

PAGE银染色法分析粪便中轮状病毒亚群

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)银染色法检测秋季腹泻患儿的粪便标本129份,轮状病毒的检出率达89.1%,发现有三种电泳型。据电泳图型可确定流行株中第Ⅱ亚群占98.3%。实验证明PAGE 的敏感性与酶联免疫吸附试验一致,又具有电镜的特异性。     

应用SDS-PAGE检测成人腹泻轮状病毒

成人腹泻的病因错综复杂,由成人轮状病毒(ADRV)引起的腹泻在临床上由于不能及时做出病原学诊断而常常被误诊,从而导致滥用抗生素,造成人体内正常菌群失调和毒株的耐药性增加,既影响治疗效果又可能导致严重脱水等不良后果,同时也加重了患者的经济负担.应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)法快速检测临床成人腹泻粪便样品,能直接观察到ADRV的RNA片段,且特异性强、定性准确可靠、简便易行,极具推广价值.     

四种方法检测粪便中轮状病毒的比较

用电镜(EM)、聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、酶联免疫吸附试验(ELISA)和协同凝集试验(CoA)等四种方法检测腹泻患儿粪便中轮状病毒,在20份四种方法全检标本中,EM 阳性13份,PAGE16份,ELISA14份,CoA16份。在70份PAGE、ELISA 和 CcA 三种方法检测标本中,PAGE 阳性率为76%,ELISA60%,CoA79%。以 PAGE 为参照,ELISA 和 CoA 两法的敏感性各为75%和91%,特异性各为88%和59%,诊断准确度各为79%和83%。本文对四种方法的优缺点作了评价。     

新生儿早期轮状病毒感染的检测与探讨

人类轮状病毒(HRV)是我国婴幼儿腹泻的重要病原之一。近年来,国外有不少产科新生儿室流行HRV感染的报道。为此我们于1989年3～5月对产科新生儿室中新生儿的新鲜大便用PAGE法与ELISA法测定HRV核酸和抗原,并进行对比研究,同时还对部分母血、脐血、羊水的抗HRV抗体进行检测,现将与临床有关结果报告如下。     

一次新生儿轮状病毒性腹泻的流行病学分析

目的 调 研1994年4月本院婴儿室发生的一次新生儿肠炎流行的流行规律及发病病原。方法 用10%聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）及酶联免疫吸附试验检测患儿粪便中轮状病毒。结果 共查出阳性标本 23份,阳性率为45.3%。其平均发病日龄为（4.0±1.8） d,经治疗全部患儿均痊愈出院,平均病程为（9.1±4.0） d。结论 本次流行为轮状病毒感染,对传染源的管理是控制疾病流行的关键所在。     

引起婴幼儿腹泻的成人腹泻轮状病毒

从婴幼儿急性腹泻患者粪便中发现6株新轮状病毒,ELISA和免疫电镜证明属B组成人腹泻轮状病毒(ADRV),但其基因组核酸电泳图型为4:2:3:2,与典型ADRV(4:2:2:3)不同,而与婴幼儿腹泻A组轮状病毒相似,可能是ADRV基因组变异株。     

秋冬季部分婴幼儿病毒性肠炎病原及临床研究

<正> 材料与方法一、对象为1984～1985年长春市秋冬季婴幼儿病毒性肠炎患者粪便,1986年长春、四平、延边、通化、吉林等5个地区的秋冬季婴幼儿病毒性肠炎患儿粪便。二、将1984～1985年粪便标本做 ELISA检测,全部标本均经电镜(JEM—7)检出有关病毒。对单纯由人轮状病毒(HRV)感染的标本进行核酸(RNA)聚丙烯酰胺电泳(PAGE)分析,确定年度流行优势株。三、ELISA 检测:采用 HRP 标记豚鼠抗HRV—IgG 双抗体夹心法。四、HRV—RNA—PAGE:参照 Hirring法,并做了一些改进。五、以同期未检出病毒的肠炎患儿做为对照组。结论一、病原种类:本文200例经 EMELISA     

小儿轮状病毒分子流行病学与临床观察(摘要)

人轮状病毒(NRV)是婴幼儿秋冬季腹泻的重要病原,为了研究西宁地区流行的规律和特点,我们与首都儿科研究所合作,运用聚丙稀胺凝胶电泳(PAGE)与(EIiSa)法对比研究了1987年西宁地区(HRV)的流行状况,现将结果报告如下。