Iloprost及其改良液4℃保存兔胎脑皮层组织时的腺苷酸含量变化

本实验以生理盐水、ｉｌｏｐｒｏｓｔ及其改良液为保存液，在４℃保存兔胎脑皮层组织，以高效液相色谱分析仪（ＨＰＬＣ）测定在保存过程中的腺苷酸含量变化，以了解胎脑组织在４℃保存时的能量代谢情况。结果显示，在生理盐水组及ｉｌｏｐｒｏｓｔ液组，随保存时间延长，胎脑组织中的三磷酸腺苷（ＡＴＡＴＰ）含量、能量负荷（ＥＣ）水平明显下降（Ｐ＜０．０１），在保存２小时接近耗竭，且两组间无明显差异（Ｐ＞０．０５）；而改良ｉｌｏｐｒｏｓｔ液组的ＡＴＰ含量及ＥＣ水平在保存２小时却略高于保存１小时（Ｐ＞０．０５）。此结果表明，要改进４℃保存的效果，不仅需应用细胞保护剂，还应考虑如何延缓能量衰竭的发生。本实验通过在ｉｌｏｐｒｏｓｔ液中加入ＡＴＰ等物质，获得了较ｉｌｏｐｒｏｓｔ液更好的保存效果。     

Iloprost液4℃保存兔胎脑皮层组织的实验研究

选择４℃条件，以生理盐水、ｉｌｏｐｒｏｓｔ液、改良ｉｌｏｐｒｏｓｔ液为保存液，对兔胎脑皮层组织进行保存的研究。从台盼蓝染色、碘化丙啶染色经流式细胞分析及光镜、电镜检查方面判定保存后的活性。结果表明，改良的ｉｌｏｐｒｏｓｔ液能较好地保存组织活性及正常的神经结构。     

Iloprost液4℃保存兔胎脑皮层组织的实验研究

选择４℃条件，以生理盐水、ｉｌｏｐｒｏｓｔ液、改良ｉｌｏｐｒｏｓｔ液为保存液，对兔胎脑皮层组织进行保存的研究。从台盼蓝染色、碘化丙啶染色经流式细胞分析及光镜、电镜检查等方面判定保存后的活性。结果表明，改良的ｉｌｏｐｒｏｓｔ液能较好地保存组织活性及正常的神经结构。     

胎脑组织保存

随着脑组织移植研究的深入开展,胎脑组织的来源和保存已逐渐引起人们的重视。近年来对胎脑组织保存有不少研究,取得了一些宝贵经验。本文就胚胎脑组织保存方法及有关理论进行综述。一、脑组织4℃保存生物组织保存方面,低温是一条最理想的条件。     

自制PV液对大鼠肝脏低温保存的实验研究

【摘要】 目的 探讨自制PV液对大鼠肝脏低温保存的效果。方法 Wistar大鼠90只随机分成三组：UW液组、PV液组和生理盐水（NS）对照组，采用大鼠肝脏非循环离体灌注模型，每组对大鼠肝脏保存0h、6h、12h、18h、24h，每个亚组6只大鼠。测定保存不同时间段后肝脏酶学变化（ALT、AST、LDH）、灌注流出液中氧自由基代谢产物（MDA、SOD）的含量，观察胆汁分泌量及镜下肝脏形态学变化。结果 PV液组与UW液组比较，灌注流出液中ALT、AST、LDH、SOD含量相近，无显著差异（P>0.05）；保存6h后，PV液组TNF-α值较UW液组升高明显（P<0.05）；保存12h后UW液组MDA含量升高较PV液组明显（P<0.05)；保存18h后PV液组胆汁分泌量低于UW液组（P<0.05）；两组光镜、电镜下组织形态改变相似。结论 PV液与UW液对Wistar大鼠肝脏功能具有保护作用，两者短时间保存效果相似，在抗氧化及清除氧自由基方面，PV液略优于UW液。     

NO代谢变化对缺血性脑组织内皮素产生的影响

在兔大脑中动脉阻断（ＭＣＡｏ）型局灶脑缺血前后分别应用外源性一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）抑制剂Ｌ－ＮＮＡ和ＮＯ合成底物Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ，观察缺血４小时后脑组织内皮素（ＥＴ）含量的变化。结果发现Ｌ－ＮＮＡ组较缺血对照组脑组织ＥＴ含量明显增多（１２６２．９±３８７．６ｖｓ７８９．３±１８８．４ｐｇ／ｍｇ·ｐｒｏ，Ｐ值＜０．０１），脑水肿显著；而Ｌ－ａｒｇｉｎｉｎｅ用药组脑组织ＥＴ含量较缺血对照组明显减少（Ｐ值＜０．０５），且脑水肿减轻。本研究提示ＮＯ能抑制缺血脑组织ＥＴ的产生。ＮＯ对脑缺血影响可能与此途径有关。     

选择性一氧化氮合成酶抑制剂对脑组织保护作用研究

目的：探讨创伤性脑损伤后脑组织中一氧化氮（NO）含量变化与脑组织病理及超微结构变化之间的关系，及选择性一氧化氮合成酶抑制剂（iNOS）1400W(N-[3-(aminomethyl)benzyl]acetamidine)对脑组织的保护作用。方法：114只大鼠随机分成正常组、假手术组、生理盐水治疗组和1400W治疗组，建立大鼠自由落体脑外伤模型，伤后18h开始分别给予生理盐水和1400W腹腔内注射，每8h一次。测定各组不同时期脑组织NO含量，同时观察脑组织病理及超微结构的改变，将结果进行比较。结果：生理盐水治疗组NO含量于伤后6h开始升高，48h达到高峰，以后逐渐下降。1400W治疗组NO含量降低，与生理盐水治疗组结果比较有统计学意义，72h后逐步恢复正常。生理盐水治疗组组织病理学检查和超微结构检查结果与NO改变同步，1400W治疗组较生理盐水治疗组明显改善。结论：NO对脑外伤后继发性损伤起着重要作用，1400W对脑外伤后脑组织有显的保护作用。     

创伤性脑水肿的发生机制及Iloprost的治疗作用

目的 探讨创伤性脑水肿的发生机制及前列环素的衍生物Ｉｌｏｐｒｏｓｔ对创伤性脑水肿的治疗作用。方法 干湿重法测定脑组织含水量,甲酰胺法测定伊思蓝（ＥＢ）含量,Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光标记法测定突触全内「Ｃａ＾２＋」ｉ,并采用前列腺环素稳定的衍生物Ｉｌｏｐｒｏｓｔ进行治疗,研究其对ＥＢ含量、「Ｃａ＾２＋」ｉ及脑水肿的影响。结果 创伤后２ｈ即已发生钙超载,脑组织水含量及ＥＢ含量的增加,Ｉｌｏｐｒｏｓｔ治     

SOD、MDA在猫运动区癫痫模型中的作用

目的探讨氢氧化铝致猫运动区癫痫模型的制作方法及SOD、MDA在猫运动区癫痫模型中的作用。方法在猫的左侧大脑乙状前回注入氢氧化铝乳剂或生理盐水50ul。术后观察猫的行为学变化,皮层脑电图变化,20周后取材检测致痫区脑组织SOD、MDA的含量。结果氢氧化铝组于术后11-14周时发现临床癫痫发作;氢氧化铝组于8周时检测到皮层棘波放电,12周时放电次数最明显,持续到20周仍有棘波放电,且趋于稳定;氢氧化铝组致痫区脑组织SOD含量明显低于生理盐水组,MDA含量明显高于生理盐水组。结论成功制成氢氧化铝癫痫模型,其发病机制与SOD含量减少及MDA含量增多有关。     

SOD、MDA在猫运动区癫痫模型中的作用

目的 探讨氢氧化铝致猫运动区癫痫模型的制作方法及SOD、MDA在猫运动区癫痫模型中的作用.方法 在猫的左侧大脑乙状前回注入氢氧化铝乳剂或生理盐水50μl.术后观察猫的行为学变化,皮层脑电图变化,20周后取材检测致痫区脑组织SOD、MDA的含量.结果 氢氧化铝组于术后11～14周时发现临床癫痫发作;氧氧化铝组于8周时检测到皮层棘波放电,12周时放电次数最明显,持续到20周仍有棘波放电,且趋于稳定;氢氧化铝组致痫区脑组织SOD含量明显低于生理盐水组,MDA含量明显高于生理盐水组.结论 成功制成氢氧化铝癫痫模型,其发病机制与SOD含量减少及MDA含量增多有关.     

壳聚糖纳米粒载体转染Cu-SOD对缺血再灌注脑组织的作用

目的 制备适用的壳聚糖纳米粒，并连接上SOD质粒，研究壳聚糖纳米粒-SOD联合体对脑缺血再灌注脑组织氧自由基的清除能力及对脑组织内SOD含量的影响。方法 以分子交联法制备壳聚糖纳米粒；通过静电吸附作用连接上Cu-SOD质粒；经琼脂糖凝胶电泳分析载体与SOD-DNA的结合能力，并通过紫外分光光度计检测其包埋率。将壳聚糖纳米粒-SOD联合体输注到缺血再灌注大鼠体内，然后测定大鼠脑海马组织内丙二醛及超氧化物歧化酶含量。结果经壳聚糖纳米粒-SOD质粒联合体治疗的大鼠，其海马组织丙二醛含量明显低于生理盐水对照组及生理盐水＋SOD组（P〈0.05）（P〈0.01）。其海马组织超氧化物歧化酶含量明显高于生理盐水对照组及生理盐水＋SOD组（P〈0.05）（P〈0.01）。结论 壳聚糖纳米粒-SOD质粒联合体在接近临床应用的实验中具有较强氧自由基清除能力，其较强的氧自由基清除能力在于壳聚糖纳米粒能助SOD质粒通过血脑屏障及细胞膜，使SOD-DNA在脑细胞内表达，增加了超氧化物歧化酶在脑细胞中的含量。     

巴曲酶对大鼠缺血再灌注损伤的保护作用─—降低NO神经毒性作用

本文用Ｗｉｓｔａｒ大鼠四条血管关闭的全脑缺血再灌注模型，观察脑缺血再灌注脑组织ＮＯ含量的变化及巴曲酶对它的影响。发现：对照组胞组织ＮＯ含量（２２．２２±４．７７ｐｍｏｌ／ｍｇ湿重脑组织）均显著高放假手术组（１３．４７±３．４３ｉ及巴曲酶组（１６．９３±４．３６），而巴曲酶组与假手术组间差异不显著。提示巴曲酶通过降低ＮＯ的神经毒性作用起到保护脑组织、减轻缺血再灌注损伤作用。     

川芎嗪对脑挫伤大鼠脑组织MDA、SOD、NO及含水量影响的研究

目的 观察川芎嗪对脑挫伤大鼠脑组织中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮（NO）含量及脑组织含水量的影响，探讨川芎嗪在治疗脑挫伤中的应用。方法 建立自由落体大鼠脑挫伤模型，治疗组脑挫伤后第2天开始应用川芎嗪腹腔注射治疗，对照组腹腔注射等量生理盐水．连续应用6d。正常组不致伤。检测治疗组、对照组及正常组大鼠脑组织中MDA、SOD、NO含量及脑组织含水量，并进行统计分析。结果 脑挫伤后大鼠脑组织中MDA、NO含量及脑组织含水量较正常组增高，SOD含量较正常组降低（P〈0．05）。川芎嗪治疗组大鼠脑组织中MDA、NO含量及脑组织含水量较对照组显著降低，SOD含量较对照组显著上升（P〈0．05）。结论 川芎嗪能够有效提高挫伤后脑组织中SOD含量，减少MDA及NO含量产生．有效改善脑水肿，从而发挥治疗作用。     

轻度低温对大鼠脑缺血损伤的保护作用

本文观察了轻度低温对大鼠脑缺血的保护作用。Ｗｉｓｔａｒ大鼠在３６．８℃下将四血管阻断１０分钟，低温组３３℃低温再灌流３小时，正常体温组保持在３６．８℃，缺血后第２～６天观察动物行为，第７天处死大鼠进行脑组织病理分析。结果发现，正常体温组神经系统损害积分明显高于低温组，学习记忆能力也明显减退；正常体温组海马ＣＡ１段神经细胞损害率（９１．７％）明显高于低温组（３８．９％）。提示轻度低温对短暂脑缺血后再灌流期脑组织有明显保护作用。     

胚胎脑组织液氮保存与移植的实验研究

本实验观察了大鼠胎脑组织在液氮中保存的细胞存活率，并用保存的组织和新鲜组织做同种异体移植实验。一、实验方法正常妊娠１５～２１天的ＳＤ大鼠经戊巴比妥钠麻醉后，在无菌条件下剖腹取胎，切取所需胎脑组织，制成１ｍｍ大小的组织块。用吸管将其移入含１０％二甲基亚...     

器官保存液中聚乙二醇对人红细胞聚集性和血液流变学的影响

背景：聚乙二醇作为一种非渗透性大分子物质,在器官保存液中可发挥保护细胞膜、维护细胞骨架完整性、防止细胞水肿、抗脂质过氧化和免疫调节的作用。 目的：探讨器官保存液中的聚乙二醇对人红细胞聚集性和血液流变学的影响。 设计、时间及地点：对比观察实验,于2008-10在解放军第二军医大学附属长征医院器官移植科完成。 材料：抽取接受体格检查的6名健康志愿者的肘前静脉血。 方法：在抽取的新鲜血液中按5∶1的稀释比分别加入生理盐水、器官保存液及含不同相对分子质量、不同浓度聚乙二醇的多器官保存液,按加入液体的不同分为：生理盐水组、器官保存液组、不添加聚乙二醇的保存液组、20聚乙二醇1,10,30 g/L和35聚乙二醇1,10,30 g/L组。 主要观察指标：室温下通过魏氏法检测红细胞沉降率、自动血液流变仪检测血液流变学指标、光镜观察红细胞聚集的形态学改变,分析聚乙二醇对人红细胞聚集性和血液流变学的影响。 结果：不含胶体的保存液对红细胞聚集无影响,含低浓度聚乙二醇的保存液对红细胞聚集性和血液流变学的影响较小,器官保存液组、20聚乙二醇30 g/L,35聚乙二醇10 g/L和35聚乙二醇30 g/L的保存液则可显著加快红细胞沉降率,降低红细胞变形能力,引起红细胞明显聚集。 结论：器官保存液中的聚乙二醇可引起红细胞聚集,降低红细胞变形能力,其相对分子质量越大,浓度越高,促进红细胞聚集的作用越明显,对血液流变学的影响越大。     

新鲜人关节软骨试件在体外不同环境下退变的组织学观察

背景：采用新鲜人软骨试件是进行生物力学实验的最佳选择,但当实验不能及时完成时,何种保存方法能最大限度地保护软骨样本,使其退变达到对实验影响最小是关键。 目的：观察新鲜人关节软骨试件在体外不同环境下的组织学变化,寻找试件最佳保存方法和时间。 方法：将新鲜人关节软骨试件分为4组：正常对照组,以软骨用固定液固定;空气暴露组,暴露于空气;生理盐水组,以浸湿的生理盐水纱布包裹,滴注生理盐水;林格氏液组,以浸湿的林格氏液纱布包裹,滴注林格氏液。处理后1,2,3 h,进行苏木精-伊红染色、Masson三色染色法、番红O染色。 结果与结论：染色结果显示,生理盐水或林格氏液滴注1 h,关节软骨表面无明显改变,3 h后则出现较明显的变化,软骨表面出现明显的粗糙纤维,排列紊乱,并可见较多的裂隙。空气暴露1 h软骨表面即已出现皲裂,3 h后已失去关节软骨表面的田埂样外观,出现甚大裂隙和纤维暴露,产生软骨损伤。提示以生理盐水或林格氏液纱布包裹新鲜人离体关节软骨试件均是有效的处理方法,并且软骨保存时间最好在离体后2 h内。     

丹参素干预体外低温保存大鼠肝脏血红素氧合酶1的表达

背景：研究发现丹参能够降低诱导型一氧化氮合酶mRNA 的表达，减少一氧化氮的产生，抑制肿瘤坏死因子、白细胞介素等炎性因子的分泌，具有抗氧化作用。丹参素作为丹参的重要单体成分，是否具有相同的作用? 目的：验证丹参素干预大鼠肝脏血红素氧合酶1的表达，以及对体外肝脏低温保存肝脏的保护。 方法：建立大鼠肝脏低温灌注保存模型。分为3组，对照组术前腹腔注射生理盐水，术中用乳酸林格液灌注；实验组术前腹腔注射生理盐水，术中用丹参素+乳酸林格液灌注；抑制剂组：术前腹腔注射锌原朴啉，术中用丹参素+乳酸林格液灌注。保存0，1，3，6 h，分别RT-PCR检测血红素氧合酶1mRNA及蛋白表达的情况，检测细胞线粒体钙离子含量及钙离子ATP酶活性，电镜观察各组肝细胞、线粒体形态改变，光镜观察肝细胞、肝小叶形态改变。 结果与结论：实验组肝血红素氧合酶1 mRNA及蛋白的表达水平明显比其他两组高(P < 0.05)。实验组的肝细胞线粒体钙离子含量明显较其他两组低，Ca2+-ATP酶活性较其他两组高。结果提示，丹参素灌注保存液可以诱导大鼠肝脏中血红素氧合酶1的过表达，延长肝脏低温保存时间。     

一氧化碳及一氧化氮对局灶性缺血脑组织的影响

目的 研究一氧化碳与一氧化氮对局灶性缺血脑组织脑含水量及血脑屏障通透性的影响。方法 将SD大鼠随机分为4组：为生理盐水组、Hemin组、ZnPP组及Hemin ZnPP组，分别用等量生理盐水、Hemin、ZnPP、Hemin ZnPP腹腔注射，1h后制成MCAO模型。栓塞后24h检测血浆CO及NO浓度、脑组织含水量、血脑屏障通透性。结果 与生理盐水组相比，Hemin组血浆CO浓度明显升高，NO浓度无变化，脑组织含水量下降，血脑屏障通透性减低；ZnPP组血浆CO浓度明显减低，NO浓度上升，脑组织含水量上升，血脑屏障通透性增高；同时注射Hemin ZnPP时CO浓度无变化，NO浓度升高，脑组织含水量上升，血脑屏障通透性增高。结论 NO及CO在缺血早期对脑组织均具有保护作用，两者之间存在着相互作用，CO通过HO影响NOS及NO。     

自制新型多器官保存液低温保存小型猪肾

背景：在前期实验的基础上,此次实验成功配制了含聚乙二醇的新型上海多器官保存液。 目的：以普通器官保存液为对照,验证自制含聚乙二醇的上海多器官保存液低温保存小型猪肾的效果。 设计、时间及地点：随机分组,对照实验观察,2006-05/2007-07在解放军器官移植研究所移植实验室完成。 材料：健康成年实验用巴马小型猪12头。自制新型新型上海多器官保存液,主要含聚乙二醇,相对分子质量20 000。pH7.43±0.10,渗透压825~900 kPa,UW液,购自美国Bristol-Myers Squibb公司。 方法：巴马小型猪肾分别以4 ℃器官保存液或上海多器官保存液原位灌注后离体保存24,48,72 h。保存终点测保存液pH值及乳酸脱氢酶含量,左肾取标本行组织学检查,右肾采用体外非循环猪肝/肾灌注系统灌注30,60,120 min测灌注液乳酸脱氢酶含量。灌注终点取肾皮质标本测丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性。 主要观察指标：光镜、电镜观察肾冷保存后的形态学变化;灌注液及保存液乳酸脱氢酶含量;肾皮质标本测丙二醛浓度和超氧化物歧化酶活性;肾组织细胞凋亡指数。 结果：保存48,72 h后,器官保存液组保存液pH值高于上海多器官保存液组(P < 0. 05)。保存72 h终点保存液及再灌注30,60,120 min灌注液中乳酸脱氢酶活性器官保存液组高于上海多器官保存液组(P < 0.05)。同时间点两组肾组织光镜、电镜下形态学改变、肾皮质凋亡指数、超氧化物歧化酶、丙二醛含量差异均无显著性。 结论：新型上海多器官保存液对小型猪肾脏低温保存效果与普通器官保存液基本一致,对缺氧代谢器官细胞内酸中毒的缓冲能力以及对低温和缺血再灌注损伤的保护作用优于普通器官保存液。