酸枣仁提取物促进慢波睡眠引起身体增高的实验研究

目的探讨酸枣仁提取物通过调节慢波睡眠从而促进动物增高的作用及其作用机制。方法给予小鼠酸枣仁提取物低剂量和高剂量(0.18 mg/g,0.32 mg/g体重灌胃),与空白对照组比较,观察酸枣仁提取物是否促进发育期小鼠体长的增长,同时给予大鼠酸枣仁提取物,观察脑组织5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)表达,慢波睡眠的变化,体内生长激素含量变化,阐明酸枣仁提取物促进骨骼增长的作用是通过增加5-HT1AR表达而延长慢波睡眠进而促进生长激素分泌实现的。结果酸枣仁提取物可以促进发育期小鼠体长增长,灌胃10 d和20 d后高、低剂量组体长较空白对照组明显增长(P0.01);高剂量具有更好的增高效果;同时高剂量组大鼠5-HT1AR活性较空白对照组增高(P0.01),慢波睡眠较空白对照组有所延长(P0.01),而且血清生长激素含量较空白对照组升高(P0.01);而5-HT1AR选择性抑制剂可以抑制这一现象。结论酸枣仁提取物可以促进动物体长的增长,其作用机制可能是通过提高脑组织5-HT1AR含量而与5-HT结合,延长慢波睡眠时长,从而促进生长激素的分泌引起的。     

HPLC法测定不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量

目的：采用HPLC法测定不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A的含量,并客观比较不同产地药材的质量。方法：用高效液相色谱法,使用Kromasil C18色谱柱（4．6mm×150mm,5μm）;流动相：乙腈-水（30：70）,检测波长204nm,流速0．8mL/min,柱温25℃。结果：6个产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量为0．5372％-0．0731％,不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量有差异。结论：6个不同产地酸枣仁中酸枣仁皂苷A含量均符合药典标准,其中陕西延安产区的酸枣仁药材质量较其他产地相比较好。     

酸枣仁皂苷A对大鼠心室肌细胞L-型钙通道的影响

目的:研究酸枣仁皂苷A对大鼠单个心室肌细胞膜L-型钙电流(ICa-L)通道的影响。方法:采用全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的酸枣仁皂苷A对ICa-L的作用。结果:①酸枣仁皂苷A对ICa-L呈浓度依赖性抑制。②100 mg/L酸枣仁皂苷A能使ICa-LI-V曲线明显上移。③100 mg/L酸枣仁皂苷A能使ICa-L稳态激活曲线右移,稳态失活曲线左移,还能增加失活后恢复的τ值。结论:提示酸枣仁皂苷A能够影响ICa-L通道的激活态和失活态抑制ICa-L。     

酸枣仁皂苷A对大鼠脑缺血海马区氨基酸递质水平及细胞凋亡的影响

目的：观察酸枣仁皂苷A对大鼠脑缺血海马区兴奋性氨基酸及细胞凋亡的影响,探讨酸枣仁皂苷A对脑缺血损伤保护的作用机制。方法：建立大鼠大脑中动脉闭塞再灌注损伤模型,将健康SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注模型组、尼莫地平组、酸枣仁皂苷A组,四组于脑缺血再灌注后12、24、48小时、4天、7天,各取6只大鼠断头取脑,测定大鼠缺血侧脑海马区氨基酸递质水平及细胞凋亡数。结果：除假手术组外,与模型组比较,尼莫地平组和酸枣仁皂苷A组各观察时间点缺血侧脑海马区谷氨酸（Glu）及细胞凋亡均明显降低（P〈0．05）,而γ-氨基丁酸（GABA）在各时间点均明显升高;与尼莫地平组比较,酸枣仁皂苷A组大鼠缺血侧海马区Glu降低（P〈0．05）,酸枣仁皂苷A组细胞凋亡数降低更显著（P〈0．05）,两组GABA比较,差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：酸枣仁皂苷A能调节脑缺血损伤后海马区氨基酸水平的释放,抑制细胞凋亡。     

酸枣仁皂苷A对机械刺激剥夺果蝇睡眠节律变化的干预

目的 探讨酸枣仁皂苷A对机械刺激剥夺果蝇睡眠节律的干预作用.方法 实验选取2日龄果蝇作为研究对象,随机分为空白组、模型组和给药组3组,以睡眠时间和睡眠-觉醒节律为考察指标,利用果蝇活动监测仪连续监测48 h,考察酸枣仁皂苷A对果蝇的干预.结果 酸枣仁皂苷A能延长2、3日龄果蝇的夜晚睡眠时间(P＜0.01),缩短3日龄果蝇的白天睡眠时间(P＜0.01),改善在机械刺激剥夺下果蝇的睡眠-觉醒节律.结论 酸枣仁皂苷A对机械刺激剥夺果蝇睡眠节律变化具有干预作用.     

酸枣仁皂苷A对果蝇睡眠影响的量效关系与时效关系研究

目的 研究酸枣仁皂苷A对野生型CS品系果蝇睡眠作用影响的量效关系与时效关系.方法 选择野生型CS品系7d龄雄性果蝇为研究对象,采用液体给药的方式,利用果蝇活动监测系统,观察不同浓度酸枣仁皂苷A对果蝇睡眠影响的量效关系和时效关系.结果 1 mg/mL剂量为最佳给药浓度,给药3d为最佳给药时间,并可以明显延长果蝇白天平均睡眠的总时间和夜晚平均睡眠的总时间,增强果蝇的片段化睡眠.结论 酸枣仁皂苷A对野生型CS品系7d龄雄果蝇的睡眠具有一定的改善作用.     

酸枣仁化学成分研究

目的 研究酸枣仁的化学成分。方法 利用正、反相硅胶柱色谱分离纯化,通过化学及波谱分析方法鉴定化合物的结构。结果 从酸枣仁中分离并鉴定了1个新的酮基达玛烷型四环三萜皂苷H(jujuboside H,Ⅰ)及3个已知化合物原酸枣仁皂苷A(protojujuboside A,Ⅱ)、酸枣素(斯皮诺素,Ⅲ)、白桦脂酸(Ⅳ)。结论 化合物Ⅰ为新化合物,命名为酸枣仁皂苷H。     

HPLC-ELSD法测定酸枣仁滴丸中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸

目的 建立酸枣仁滴丸中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸的测定方法。方法 应用超声提取和高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)检测。Hypersil C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相：乙腈-水(0.1％醋酸),梯度洗脱;体积流量：1.0 mL/min;柱温：30 ℃;进样量：20 μL;ELSD参数：雾化温度：45 ℃;气体流量：2.0 L／min。结果 制剂中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸达到基线分离且线性关系良好,线性范围分别为15.4～154 μg／mL,22.8～228 μg／mL、28.0～280 μg／mL,平均加样回收率分别为98.17％、99.21％、97.89％。结论 该方法快速简便、精密度好、灵敏度高,可用于酸枣仁滴丸剂中酸枣仁皂苷A、B和白桦脂酸的同时测定。     

不同剂量酸枣仁汤的镇静催眠作用比较

目的:观察酸枣仁汤的镇静催眠作用。方法:将100只小鼠随机分为酸枣仁汤大、中、小剂量组、安定组、生理盐水组共5组,各组分别灌胃给予相对应药物,再将每组小鼠分为A组和B组(B组注射戊巴比妥钠)。观察各组药物对所有A组小鼠自主活动次数的影响及对B组小鼠睡眠时间的影响和各组小鼠的大脑重量。结果:大剂量的酸枣仁汤能减少A组小鼠自主活动次数,但与生理盐水组相比,差异并不显著。中剂量的酸枣仁汤能显著延长B组小鼠的睡眠时间,增加所有小鼠大脑重量。结论:酸枣仁汤在不同剂量时发挥不同的药效。     

宁心安神口服液中酸枣仁皂苷A和B的含量测定

目的:建立宁心安神口服液中酸枣仁皂苷A和B含量的测定方法,保证药品质量和临床疗效.方法:应用高效液相色谱法-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD),钻石ODS(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-水-冰醋酸(70:30:1)为流动相,流速是1.0 mL/min;柱温:35℃,漂移管温度85℃,气体流速1.1 L/min.结果:酸枣仁皂苷A线性范围是2.4675μg～12.3375μg,r=0.99997、酸枣仁皂苷B线性范围是1.34μg～6.70μg,r=0.99991,酸枣仁皂苷A及B的平均回收率分别为99.31%(RSD=1.87%)和99.27%(RSD=1.51%)(n=6).结论:方法快速简便,重现性良好,可用于测定宁心安神口服液中酸枣仁皂苷A和B的含量.     

酸枣仁中酸枣仁皂甙A和B的含量测定

用薄层扫描法，以正丁醇-冰醋酸-水（4:1:5）的上层溶液为展开系统，测定了不同产地的酸枣仁中的酸枣仁皂甙A和B（jujubosidesAandB）的含量。     

巴戟天对小鼠学习记忆障碍的影响

目的:探讨巴戟天提取物对D-半乳糖诱致小鼠学习记忆障碍的改善作用。方法:60只昆明种小鼠完全随机分为6组正常对照组、模型组、石杉碱甲组[0.4 mg/(kg·d)]、巴戟天提取物高剂量组[45g/(kg·d)],巴戟天提取物中剂量组[22.5 g/(kg·d)]和巴戟天提取物低剂量组[11.25 g/(kg·d)],每组10只。上述动物除正常对照组外,均皮下(sc)注射D-半乳糖8周,并于第5周起分别灌胃相应药物。采用水迷宫和自主活动仪测试小鼠学习和记忆能力;采用高效液相检测去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)二羟苯乙酸(DOPAC)的含量;测定血清糖化血红蛋白(Hb A1c)、果糖胺(FRA)、晚期糖基化终末产物(AGEs)和糖基化终末产物受体(RAGEs)以及醛糖还原酶活性水平(AR activity)。结果:巴戟天提取物明显改善模型小鼠学习和记忆能力;各给药组与模型对照组相比单胺类递质含量无明显变化;能明显降低药物处理后引起的AR活性增高,同时巴戟天提取物高、中、低剂量组均明显降低Hb A1c、FRA、AGEs和RAGEs。结论:巴戟天提取物具有改善D-半乳糖诱致小鼠学习记忆障碍的作用,其作用可能与其减少糖基化对脑神经细胞的损伤有关。     

酸枣仁中有效成分抗抑郁作用的实验研究

目的:探讨酸枣仁原药及其多糖、生物碱的抗抑郁作用。方法:建立小鼠抑郁症模型,用酸枣仁水煎液、酸枣仁多糖、酸枣仁生物碱和盐酸氟西汀对抑郁症模型进行灌胃治疗,通过强迫游泳实验和悬尾实验评价各组药物疗效。实验结束,取脑,作组织匀浆,测定脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量。结果:与空白组比较,模型组小鼠呈明显抑郁状态,强迫游泳实验和悬尾实验中模型组不动时间较长(P<0.01),SOD活性降低(P<0.01),MDA含量升高(P<0.01);与模型组比较,阳性对照组、酸枣仁水煎液组、酸枣仁生物碱组小鼠游泳和悬尾不动时间均减少(P<0.05,P<0.01),SOD活性升高(P<0.05,P<0.01),MDA含量降低(P<0.05,P<0.01)。酸枣仁多糖组变化不明显。结论:酸枣仁有抗抑郁、镇静的作用,其中生物碱抗抑郁作用较强,多糖类抗抑郁作用不明显,且药效均不及酸枣仁煎剂。     

黄精皂苷对慢性应激抑郁大鼠海马5-HT1AR/cAMP/PKA信号通路的影响

目的探讨黄精皂苷(SRP)对慢性应激抑郁模型大鼠行为学的影响及部分机制。方法 SD大鼠60只随机分为6组:正常组、模型组、SRP(100、200、400 mg/kg)组和氟西汀(2 mg/kg)组。采用不同应激方法建立大鼠慢性应激抑郁模型,观察大鼠行为学指标变化,放射免疫法测定海马环腺苷酸(cAMP)含量,免疫组化法测定海马5-羟色胺受体(5-HT1AR)、蛋白激酶A(PKA)、反应元件结合蛋白(CREB)蛋白表达水平。结果应激刺激后,与正常组相比,模型组大鼠自主活动次数减少,体重降低,糖水消耗减少,处于抑郁状态。免疫组化结果显示,与正常组比较,模型组海马5-HT1AR、cAMP、PKA、CREB表达显著降低,SRP组5-HT1AR、cAMP、PKA、CREB表达显著上调(P<0.01)。结论 SRP对慢性应激抑郁大鼠的行为学有改善作用,可能是通过调节5-HT1AR/cAMP/PKA/CREB信号通路发挥抗抑郁作用。     

Effect of saponins of Rhizoma Polygonati on the pathway of 5-HT1AR/cAMP/PKA/CREB in rats with chronic stress induced depression

目的 探讨黄精皂苷(SRP)对慢性应激抑郁模型大鼠行为学的影响及部分机制.方法 SD大鼠60只随机分为6组:正常组、模型组、SRP(100、200、400 mg/kg) 组和氟西汀(2 mg/kg)组.采用不同应激方法 建立大鼠慢性应激抑郁模型,观察大鼠行为学指标变化,放射免疫法测定海马环腺苷酸(cAMP)含量,免疫组化法测定海马5-羟色胺受体(5-HT1AR)、蛋白激酶A(PKA)、反应元件结合蛋白(CREB)蛋白表达水平.结果 应激刺激后,与正常组相比,模型组大鼠自主活动次数减少,体重降低,糖水消耗减少,处于抑郁状态.免疫组化结果 显示,与正常组比较,模型组海马5- HT1AR、cAMP、PKA、CREB表达显著降低,SRP组5-HT1AR、cAMP、PKA、CREB表达显著上调(P＜0.01).结论 SRP对慢性应激抑郁大鼠的行为学有改善作用,可能是通过调节5-HT1AR/cAMP/PKA/CREB信号通路发挥抗抑郁作用.     

酸枣仁皂苷A促进大鼠股骨骨折愈合的机制研究

目的探讨酸枣仁皂苷A促进大鼠股骨骨折愈合的效果与可能的机制,为临床治疗骨折损伤提供实验基础。方法取40只健康雄性SD大鼠,分为空白组、模型组、酸枣仁皂苷A低剂量组、酸枣仁皂苷A高剂量组4组,每组10只。除空白组外,其余3组大鼠麻醉后构建左侧股骨闭合骨折模型。造模后第2天,酸枣仁皂苷A低剂量组腹腔注射酸枣仁皂苷A10mg/kg（50mg溶于100ml0.9%氯化钠注射液,20ml/kg）,酸枣仁皂苷A高剂量组腹腔注射酸枣仁皂苷A20mg/kg（100mg溶于100ml0.9%氯化钠注射液,20ml/kg）,空白组与模型组大鼠腹腔注射0.9%氯化钠注射液20ml/kg。给药开始14、28d后使用动物数字化X线影像系统观察骨折愈合情况,28d后使用戊巴比妥钠麻醉大鼠,分离左侧股骨,采集愈合骨痂样本用于HE染色观察骨组织愈合情况;收集腹主动脉血液样本,ELISA法检测血清中IL-1β、IL-6、TNF-α、ALP与骨钙素（BGP）含量;Westernblot法检测骨痂组织中骨形态发生蛋白-2（BMP-2）、NF-资B抑制剂蛋白-α（I资B-α）、NF-资B抑制蛋白激酶-β（I资K-β）、NF-资B蛋白表达水平。结果病理学检查发现,酸枣仁皂苷A组大鼠骨折愈合情况明显优于模型组,而且愈合速度快;ELISA结果显示,使用酸枣仁皂苷A后,骨折大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α含量均降低,ALP与BGP含量均升高;Westernblot结果显示,酸枣仁皂苷A能抑制骨折大鼠骨组织中NF-资B信号通路中I资B-α、I资K-β、NF-资B的蛋白表达水平。结论酸枣仁皂苷A能降低股骨骨折大鼠血清中炎症因子的含量,提高骨形成因子的含量,促进骨折愈合,其机制可能是通过调控NF-资B信号通路发挥促骨折愈合作用。     

酸枣仁皂苷A对小鼠MC3T3-E1成骨细胞增殖与分化的影响

【摘要】 目的 通过体外细胞实验探讨酸枣仁皂苷A对小鼠MC3T3-E1成骨细胞增殖分化的影响,为临床治疗骨折与促进骨折愈合提供实验基础。方法将酸枣仁皂苷A分4个浓度（5、10、20、40 mg/L)分别干预细胞,使用CCK-8法检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Von kossa染色法检测细胞矿化结节生成情况,Elisa法检测细胞中ALP与BGP的含量,RT-qPCR法检测细胞中Runx-2与BGP的基因表达水平,Western Blot法检测细胞中TGF-β1、Col I与BMP 2的蛋白表达水平。结果酸枣仁皂苷A能促进MC3T3-E1细胞增殖,减少细胞凋亡,提高细胞中ALP与BGP的含量,提高细胞中Runx-2与BGP基因的表达水平与TGF-β1、Col I与BMP-2的蛋白表达水平,增加细胞中矿化结节的形成数量（均P<0.05）。结论酸枣仁皂苷A能促进MC3T3-E1成骨细胞增殖,减少细胞凋亡,提高细胞分化程度与成骨效率,其机制可能是通过调控TGF/BMP通路而发挥的。     

滋肾疏肝胶囊对焦虑模型大鼠海马区5-HT1AR表达的影响

目的 :通过建立焦虑大鼠模型,研究中药复方滋肾疏肝胶囊的抗焦虑作用及其机制。方法 :采用不确定性空瓶刺激法制备焦虑大鼠模型,24只大鼠随机分为4组,即空白对照组、模型组、地西泮片给药组、滋肾疏肝胶囊给药组,除空白对照组外,分别以蒸馏水、地西泮片、滋肾疏肝胶囊灌胃给药。运用RT-PCR和Western Blotting方法分别检测5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)m RNA及蛋白表达水平,单因素方差分析相关数据。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠攻击行为和修饰行为频率均显著性升高(P0.01),高架十字迷宫实验OE%和OT%值均显著性下降(P0.01),海马区5-HT1AR m RNA及蛋白表达均显著性降低(P0.01)。与模型组比较,滋肾疏肝胶囊给药组大鼠攻击行为和修饰行为频率均显著性降低(P0.01),OE%和OT%值均显著性升高(P0.01),海马区5-HT1AR m RNA及蛋白表达均显著性升高(P0.01)。结论:滋肾疏肝胶囊对焦虑症大鼠具有明显的治疗效果,5-HT1AR基因可能是该药物的作用靶点。     

酸枣仁脂肪油提取物对大鼠血脂及SOD、CAT活性的影响

目的观察酸枣仁脂肪油提取物对高血脂大鼠血脂的调节作用,以及对血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、全血氧化氢酶(CAT)活性的影响。方法取雄性SD大鼠50只,随机分为生理盐水组,高脂血症组,酸枣仁脂肪油提取物高、中、低剂量组;灌胃30d后,取血测其总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL),以及全血CAT、血清SOD、MDA活性。结果与高血脂组相比,酸枣仁脂肪油提取物各剂量组大鼠血清TC、TG、LDL含量均明显降低(P<0.05);血清SOD及全血CAT含量均明显增强(P<0.05),而MDA含量则明显降低。结论酸枣仁脂肪油具有调节血脂作用,并可增强SOD、CAT活力,减少脂质过氧化损伤。     

防风提取物通过5-羟色胺信号轴对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠黏膜肥大细胞的影响

[目的]探讨防风提取物通过5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)信号轴对腹泻型肠易激综合征大鼠结肠黏膜肥大细胞的作用。[方法]60只清洁级健康SD大鼠中随机选择10只作为A组,剩余50只建立腹泻型肠易激综合征模型,建模成功46只,随机分为B组(11只)、C组(11只)、D组(12只)、E组(12只)。A组、B组灌胃5 mL蒸馏水;C组灌胃5-HT信号抑制剂昂丹司琼2.6mg/(kg·d)(溶于5 mL蒸馏水);D组灌胃防风提取物6.3mg/(kg·d)(溶于2.5 mL蒸馏水)+昂丹司琼2.6mg/(kg·d)(溶于2.5 mL蒸馏水);E组灌胃防风提取物6.3mg/(kg·d)(溶于5 mL蒸馏水)。观察各组大鼠精神心理行为变化,检测排便粪点数、直肠内玻璃小球排出时间;以苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法观察结肠黏膜组织病理学改变;甲苯胺蓝染色法检测结肠黏膜肥大细胞数、阳性面积;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,Real-time q PCR)检测结肠组织5-HT3受体(5-HT3 receptor,5-HT3R)、5-HT4受体(5-HT4 receptor,5-HT4R)、色氨酸羟化酶1(tryptophan hydroxylase 1,TPH1)mRNA相对表达量;Western blot检测结肠组织5-HT3R、5-HT4R、TPH1蛋白相对表达量。[结果]与A组比较,B组、C组、D组、E组水平运动次数、垂直运动次数减少,而且C组B组D组E组(P0.05)。与A组比较,B、C、D、E组粪点数增多,直肠内玻璃小球排出时间减少,且粪点数,E组D组B组C组,直肠内玻璃小球排出时间,C组B组D组E组(P0.05)。HE染色显示,与B、C组比较,D、E组结肠黏膜上皮较完整,腺体排列较整齐,间质未见炎性细胞、红细胞,其中E组改善更显著。与A组比较,B、C、D、E组肥大细胞数、阳性面积增高,E组D组B组C组(P0.05)。与A组比较,B、C、D、E组5-HT3R、TPH1 mRNA及蛋白相对表达量升高,5-HT4R m RNA及蛋白相对表达量降低,且5-HT3R、TPH1 m RNA及蛋白相对表达量,E组D组B组C组,5-HT4R mRNA及蛋白相对表达量,C组B组D组E组(P0.05)。[结论]防风提取物可减少腹泻型肠易激综合征大鼠结肠黏膜肥大细胞数,改善肥大细胞功能及大鼠行为,作用机制可能与调节5-HT信号轴有关。