大黄酸对非酒精性脂肪肝病模型大鼠的干预作用及对血清IL-1β、IL- 6的影响

目的观察大黄酸对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)模型大鼠干预作用及血清白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)的影响。方法 SD雄性大鼠40只随机分为对照组10只,模型组20只,大黄酸组10只。采用高脂高果糖诱导建立NAFLD大鼠模型。测定大鼠体质量、肝湿重,检测比较各组大鼠血清ALT、AST、TC、TG、GLU、IL-1β、IL-6水平。结果与对照组比较,模型组大鼠肝脏细胞脂肪性病变明显,且血清ALT[(62.11±6.8)U/L比(28.22±4.2)U/L]、AST[(147.67±5.6)U/L比(100.89±2.0)U/L]、TG[(0.80±0.08)mol/L比(0.40±0.06)mol/L]、TC[(1.65±0.2)mol/L比(0.82±0.1)mol/L]、GLU[(7.44±0.5)mmol/L比(5.28±0.2)mmol/L]、IL-1β[(29.25±5.85)pg/m L比15.32±2.68)pg/m L]、IL-6[(202.64±12.78)pg/m L比(138.08±4.96)pg/m L明显增高(P均0.05);与NAFLD模型组比较,大黄酸组大鼠肝脏细胞脂肪性病变显著改善,且血清ALT[(32.00±4.7)U/L比(62.11±6.8)U/L]、AST[(137.00±6.3)U/L比(100.89±2.0)U/L、TG[(0.55±0.14)mol/L比(0.80±0.18)mol/L、TC[(1.05±0.1)mmol/L比(1.65±0.2)mmol/L]、GLU[(5.58±0.3)mmol/L比(7.44±0.5)mmol/L]、IL-1β[(17.89±1.58)pg/m L比(29.25±5.85)pg/m L、IL-6[(105.56±11.84)pg/m L比(202.64±12.78)pg/m L]明显降低(P均0.05)。结论大黄酸可能通过降低模型大鼠血清IL-1β、IL-6水平,改善肝脏脂质沉积和炎症水平,进而抑制肝脏脂肪变性。     

黄芪多糖配伍三七总皂苷对糖尿病模型大鼠肾脏保护作用研究

目的探讨黄芪多糖与三七总皂苷配伍对糖尿病大鼠肾脏功能的保护作用。方法 SPF级SD大鼠60只,10只为正常对照组,50只予腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病大鼠模型,将糖尿病模型大鼠随机分为模型组、黄芪多糖组、三七总皂苷组、黄芪多糖与三七总皂苷配伍组、贝那普利组,每天给相应药物1次,连续8周。8周后测定各组大鼠24h尿总蛋白、血糖、血肌酐和尿素氮;取肾脏进行病理组织学检查。结果与正常对照组比较,模型组大鼠24h尿总蛋白[(103.76±4.67)mg/24h比(13.82±4.49)mg/24h]、血糖[(28.44±3.74)mmol/L比(6.59±1.11)mmol/h]、血肌酐[(111.91±9.46)μmol/L比(44.78±4.12)μmol/L]和尿素氮[(10.90±1.76)mmol/h比(5.53±1.27)mmol/L]显著升高(P0.01);病理组织学检查可见模型组大鼠肾小球基底膜增厚,肾小管出现大量炎症细胞浸润,间质纤维化;与模型组比较,黄芪多糖组大鼠尿蛋白[(84.01±7.20)mg/24h]、血糖[(20.60±2.10)mmol/L]和肌酐[(80.58±4.52)μmol/L]明显下降(P0.05);三七总皂苷组大鼠血糖[(21.86±4.08)mmol/L]和肌酐[(77.79±5.59)μmol/L]下降(P0.05);黄芪多糖和三七总皂苷配伍组大鼠尿蛋白[(66.00±3.43)mg/24h]、血糖[(16.34±2.34)mmol/L]、肌酐[(68.94±3.22)μmol/L]和尿素氮[(7.43±1.48)mmol/L]含量均明显下降(P0.01)。各给药组肾脏病理改变均有不同程度改善。结论黄芪多糖与三七总皂苷配伍对糖尿病大鼠的肾脏具有保护作用,其作用优于黄芪多糖和三七总皂苷单用组。     

黄葵胶囊对慢性肾小球肾炎模型大鼠肾组织病理和免疫功能的影响

目的观察黄葵胶囊对慢性肾小球肾炎模型大鼠肾组织病理和免疫功能的影响。方法SD大鼠50只随机分为空白对照组、模型组、黄葵胶囊低、中、高剂量组,每组10只,采用小牛血清白蛋白法建立慢性肾小球肾炎大鼠模型,空白对照组和模型组给予生理盐水灌胃,黄葵胶囊低、中、高剂量组分别给予0.5g/kg、1.0g/kg和2.0g/kg的黄葵胶囊灌胃,共8周。观察各组大鼠肾组织病理学变化,检测外周血T淋巴细胞亚群比例和血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)及肾组织白介素-6(IL-6)、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平。结果空白对照组大鼠肾小球、系膜基质未见明显病理变化,模型组大鼠肾小球硬化、系膜基质增生,黄葵胶囊各剂量组大鼠肾脏病理变化较模型组明显减轻。模型组大鼠外周血CD3、CD4和CD4/CD8均明显低于空白对照组和黄葵胶囊低、中、高剂量组,差异均有统计学意义[CD3:(41.51±3.84)%比(58.23±4.52)%、(46.31±4.14)%、(50.25±4.37)%、(56.04±4.42)%,P0.05;CD4:(21.73±2.86)%比(37.61±3.47)%、(26.59±2.97)%、(32.44±3.11)%、(35.31±3.32)%,P0.05;CD4/CD8:(0.64±1.16)比(1.75±1.68)、(0.86±1.31)、(1.23±1.52)、(1.52±1.54),P0.05];CD8高于空白对照组和黄葵胶囊低、中、高剂量组,差异均有统计学意义[(33.74±2.46)%比(21.49±2.07)%、(30.81±2.27)%、(26.33±2.05)%、(23.17±2.15)%,P0.05]。模型组大鼠血清Scr、BUN和UA含量高于空白对照组、黄葵胶囊低、中、高剂量组,差异均有统计学意义[Scr:(68.62±5.74)μmol/L比(45.21±6.72)μmol/L、(62.17±7.23)μmol/L、(58.06±6.18)μmol/L、(52.45±6.85)μmol/L,P0.05;BUN:(17.29±2.43)mmol/L比(7.26±2.01)mmol/L、(14.67±2.28)mmol/L、(11.05±2.17)mmol/L、(9.14±2.37)mmol/L,P0.05;UA:(114.37±9.27)μmol/L比(65.68±7.12)μmol/L、(87.53±8.76)μmol/L、(80.49±8.49)μmol/L、(72.66±8.27)μmol/L,P0.05]。模型组大鼠肾组织IL-6、ICAM-1和TGF-β1水平均高于空白对照组、黄葵胶囊低、中、高剂量组,差异均有统计学意义[IL-6:(0.27±0.04)比(0.15±0.01)、(0.22±0.02)、(0.19±0.02)、(0.17±0.01),P0.05;ICAM-1:(0.26±0.02)比(0.12±0.03)、(0.21±0.03)、(0.18±0.02)、(0.15±0.03),P0.05;TGF-β1:(0.42±0.03)比(0.21±0.02)、(0.36±0.02)、(0.31±0.03)、(0.27±0.01),P0.05]。结论黄葵胶囊可保护慢性肾小球肾炎模型大鼠肾脏组织,改善肾功能,减轻炎症反应,机制可能与调节免疫相关。     

五福饮治疗膝骨关节炎大鼠模型实验研究

目的观察五福饮颗粒剂(WFYG)治疗大鼠膝骨关节炎(KOA)及对血清、关节液白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、关节软骨骨形态发生蛋白-2(BMP-2)表达的影响。方法SPF级雄性大鼠30只随机分为假手术组、模型组和治疗组,各10只;模型组和治疗组采用Hulth法建立大鼠KOA模型;造模6周后治疗组大鼠开始WFYG[2.64g/(kg·d)]灌胃,假手术组和模型组(10m L/kg)等量生理盐水灌胃,共4周。ELISA法测定各组大鼠血清及关节液IL-1β、IL-6,免疫组化检测各组大鼠关节软骨BMP-2表达。结果与模型组相比,治疗组大鼠血清IL-1β[(2.751±0.269)μg/L比(3.660±0.371)μg/L,P0.01]、IL-6[(2.719±0.391)μg/L比(3.385±0.313)μg/L,P0.01],以及关节液IL-1β[(2.670±0.381)μg/L比(3.630±0.384)μg/L,P0.01]、IL-6[(2.517±0.343)μg/L比(3.254±0.460)μg/L,P0.01]显著降低,BMP-2[(0.371±0.025)比(0.212±0.018),P0.01]表达上调。结论五福饮颗粒剂可能通过降低KOA模型大鼠血清和关节液IL-1β、IL-6含量,上调关节软骨BMP-2表达,延缓关节软骨退变。     

汉黄芩素对糖尿病肾病模型大鼠干预作用及肾组织RAGE、S100A8表达的影响

目的探讨汉黄芩素对糖尿病肾病模型大鼠疗效及肾组织晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、髓样相关蛋白8(S100A8)表达的影响。方法 SD大鼠60只根据随机数字表法分为对照组、模型组、厄贝沙坦组(15mg/kg)、汉黄芩素低、高剂量组(50、100mg/kg),每组12只;除对照组外,其余各组建立糖尿病肾病模型大鼠,建模成功后第1天开始给予相应药物灌胃,持续8周,对照组和模型组给予10mL/kg生理盐水。测定各组大鼠24h尿蛋白、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血糖,观察大鼠肾脏病理改变,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法及蛋白免疫印迹(WB)法测定肾脏RAGE、S100A8 mRNA和蛋白水平。结果与对照组比较,模型组大鼠BUN[(27.69±3.15)mmol/L比(9.54±2.69)mmol/L]、Scr[(27.29±4.65)μmol/l比(6.65±2.69)μmol/l]、24h尿蛋白[(96.54±2.50)mg/24h比(14.47±3.54)mg/24h]、血糖[(26.32±3.18)mmol/L比(5.65±3.36)mmol/L]、肾脏组织RAGE、S100A8mRNA[(6.54±0.21)比(0.93±0.23)、(5.95±0.27)比(1.19±0.25)]和蛋白[(6.56±0.23)比(0.95±0.26)、(5.83±0.23)比(1.23±0.20)]水平升高(P0.05);与模型组比较,厄贝沙坦组、汉黄芩素低、高剂量组大鼠BUN[(12.96±2.87)mmol/L、(23.84±2.56)mmol/L、(16.59±2.36)mmol/L比(27.69±3.15)mmol/L]、Scr[(7.41±3.45)μmol/L、(20.36±4.28)μmol/L、(15.41±3.45)μmol/L比(27.29±4.65)μmol/L]、24h尿蛋白[(16.36±3.48)mg/24h、(56.41±2.51)mg/24h、(28.96±3.56)mg/24h比(96.54±2.50)mg/24h]、血糖[(12.48±4.02)mmol/L、(22.69±3.41)mmol/L、(18.42±3.43)mmol/L比(26.32±3.18)mmol/L]、肾脏组织RAGE、S100A8 mRNA[(1.41±0.26)、(4.36±0.20)、(2.22±0.19)比(6.54±0.21),(1.65±0.28)、(3.82±0.32)、(2.13±0.23)比(5.95±0.27)]和蛋白[(1.63±0.22)、(4.75±0.29)、(2.89±0.23)比(6.56±0.23),(1.41±0.19)、(3.69±0.20)、(2.19±0.32)比(5.83±0.23)]水平降低(P0.05),且随着汉黄芩素剂量的增加,大鼠BUN、Scr、24h尿蛋白、血糖、肾脏组织RAGE、S100A8 mRNA和蛋白水平逐渐降低(P0.05);与厄贝沙坦组比较,汉黄芩素低、高剂量组大鼠BUN、Scr、24h尿蛋白、血糖、肾脏组织RAGE、S100A8 mRNA和蛋白水平升高(P0.05)。结论汉黄芩素对糖尿病肾病模型大鼠具有明显治疗效果;其机制可能与汉黄芩素对糖尿病肾病大鼠肾脏组织RAGE、S100A8 mRNA和蛋白产生抑制作用有关。     

复方芪苓配方颗粒对尿酸性肾病模型大鼠作用机制研究

目的研究复方芪苓配方颗粒降尿酸及改善肾功能的作用机制。方法 60只雄性SD大鼠按随机数字表法分为复方芪苓配方颗粒高剂量组(9.6g·kg-1·d-1)、中剂量组(4.8g·kg-1·d-1)、低剂量组(2.4g·kg-1·d-1),别嘌醇组(10.5mg·kg-1·d-1),正常对照组,模型对照组,每组10只。采用灌胃腺嘌呤联合腹部皮下注射氧嗪酸钾制备大鼠尿酸性肾病模型,连续造模2周。造模成功后各组给予相应药物灌胃,正常及模型对照组以等体积蒸馏水灌胃,连续给药2周。分别采用肌氨酸氧化酶法、尿素酶法、尿酸酶法测定其血清肌酐、尿素、尿酸,化学比色法测定肝脏黄嘌呤氧化酶,免疫组化检测肾脏组织有机阴离子转运体1(OAT1)、尿酸盐转运体1(URAT1)、有机阳离子转运体2(OCT2)的表达。结果与模型对照组比较,复方芪苓配方颗粒高、中、低剂量组尿酸性肾病模型大鼠血清尿酸水平显著降低[(107.80±9.27)μmol/L、(119.31±10.63)μmol/L、(129.41±9.27)μmol/L比(178.00±10.84)μmol/L,P<0.01];复方芪苓配方颗粒高、中剂量组血清肌酐、尿素水平显著降低[(51.00±5.30)μmol/L、(57.65±10.36)μmol/L比(101.67±9.84)μmol/L,(12.43±1.09)μmol/L、(18.37±2.41)μmol/L比(29.35±4.59)μmol/L,P<0.01];复方芪苓配方颗粒高、中剂量组肝脏黄嘌呤氧化酶明显降低[(38.38±3.85)U/L、(39.09±4.39)U/L比(45.90±5.02)U/L,P<0.05];复方芪苓配方颗粒高剂量组肾脏OAT1蛋白的表达显著上调[(636786.94±46980.65)比(330652.32±36608.14),P<0.01],且其高、中剂量组OCT2蛋白的表达显著上调[(698162.61±24727.35)、(668148.15±39230.42)比(462729.95±34117.12),P<0.01],URAT1蛋白的表达显著下调[(33202.67±2481.30)、(63795.48±5177.65)比(159163.58±16016.05),P<0.01]。结论复方芪苓配方颗粒能降低尿酸性肾病模型大鼠血清肌酐、尿素、尿酸水平,其作用机制可能与降低大鼠肝脏黄嘌呤氧化酶活性,上调大鼠肾脏OAT1、OCT2水平,下调URAT1水平,从而抑制尿酸生成、并通过增加尿酸盐的分泌及降低肾脏尿酸盐重吸收能力促进尿酸排泄相关。     

参附桃红承气汤对多器官功能障碍综合征模型大鼠肝肾功能及组织病理的影响

目的观察参附桃红承气汤对多器官功能障碍综合征(MODS)模型大鼠肝肾功能及组织病理的影响。方法将50只健康Wistar大鼠随机分成空白组,模型组,参附桃红承气汤低、中、高剂量组,每组10只。参照文献方法造模,自造模前3天至处死前,空白组和模型组给予生理盐水1mL灌胃,1天2次参附桃红承气汤组分别给予2、4、8g/mL生药灌胃,1天2次,观察各组大鼠造模前后生命体征。造模24h后处死大鼠取血,检测血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、总胆红素(TB)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、摘取肝、肾组织行病理学检查。结果模型组大鼠血清BUN、Cr、TB、ALT、AST水平明显高于空白组[(24.26±7.1)mmol/L、(80.02±26.27)μmol/L、(4.51±1.29)μmol/L、(259.90±199.81)U/L、(345.80±209.95)U/L比(6.82±0.62)mmol/L、(45.68±6.69)μmol/L、(0.42±0.14)μmol/L、(55.33±16.43)U/L、(108.44±15.89)U/L,P均0.05];与模型组比较,参附桃红承气汤高剂量组BUN、Cr、TB、ALT、AST水平显著降低[(12.53±3.80)mmol/L、(56.51±14.63)μmol/L、(2.41±0.89)μmol/L、(67.00±36.27)U/L、(135.78±27.03)U/L比(24.26±7.1)mmol/L、(80.02±26.27)μmol/L、(4.51±1.29)μmol/L、(259.90±199.81)U/L、(345.80±209.95)U/L,P均0.05]。光镜下,参附桃红承气汤高剂量组肝肾组织较模型组炎性浸润有明显改善,出血、水肿及坏死明显减轻。结论高剂量参附桃红承气汤能降低MODS模型大鼠血清BUN、Cr、TB、ALT、AST水平,对脂多糖(LPS)介导的MODS模型大鼠肝肾组织病理有改善作用。     

当归对胶原性关节炎模型大鼠血清MCP-1、MMP-3的影响

目的观察当归对胶原性关节炎(CIA)模型大鼠血清单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、基质金属蛋白酶-3(MMP-3)的影响。方法清洁级Wistar大鼠30只,随机分为空白对照组、胶原性关节炎(CIA)模型组、甲氨蝶呤组和当归低、高剂量组,每组6只。除空白对照组外,采用Ⅱ型胶原免疫法制备胶原性关节炎模型。、甲氨蝶呤组每次给药1mg/kg,每周2次,腹腔注射;当归低、高剂量组分别灌饲当归煎液0.75g(kg·d)和1.5g(kg·d),空白对照组和模型组灌饲等量生理盐水,持续3周。观察大鼠血清MCP-1、MMP-3及大鼠关节肿胀指数。结果造模后,各药物组大鼠血清MCP-1、MMP-3均明显升高(P0.05)。与CIA模型组比较,甲氨蝶呤组、当归高剂量组大鼠MCP-1均有降低[(139.20±11.69)pg/m L、(151.64±13.42)pg/m L比(179.21±13.79)pg/m L,P0.05];甲氨蝶呤组、当归高剂量组大鼠MMP-3均有降低[(1.57±0.19)ng/m L、(1.69±0.21)ng/m L比(2.04±0.27)ng/m L,P0.05];甲氨蝶呤组、当归高剂量组的大鼠关节肿胀评分均有降低[(2.83±0.41)分、(3.33±0.52)分比(3.83±0.41)分,P0.05)]。结论当归能不同程度降低胶原性关节炎大鼠血清MCP-1、MMP-3含量,且同时减轻大鼠关节肿胀指数。     

衢枳壳提取物改善2型糖尿病db/db模型小鼠肾脏氧化损伤的作用研究

目的观察衢枳壳提取物(QFAE)改善2型糖尿病db/db模型小鼠肾脏氧化损伤的作用及机制。方法 24只7～8周龄雄性C57BLKS/J db/db模型小鼠随机分为模型组,QFAE低、高剂量组,每组8只;同时以8只C57BLKS/J db野生型小鼠为对照组,对照组和模型组小鼠每天以蒸馏水灌胃,QFAE低、高剂量组小鼠每天按QFAE 100、300mg/kg灌胃,连续7周。记录小鼠体质量、血糖、肾质量;检测血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和还原型谷胱甘肽(GSH)活性;HE染色观察肾组织病理学形态;RT-PCR法检测各组小鼠肾组织抗氧化基因谷氨酸-半胱氨酸修饰亚基(Gclm)、醌氧化还原酶1(Nqo1)和谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(Gclc)表达情况。结果与模型组比较,QFAE对db/db模型小鼠血糖[(31.30±1.88)mmol/L、(30.78±2.07)mmol/L比(32.78±0.66)mmol/L,P0.05]、体质量[(44.76±3.55)g、(43.92±4.58)g比(45.26±2.74)g,P0.05]无影响,但显著减轻小鼠肾质量[(0.54±0.04)g、(0.48±0.08)g比(0.66±0.05)g,P均0.01],降低血清Cr[(38.16±2.47)μmol/L、(36.17±2.00)μmol/L比(45.76±3.70)μmol/L,P0.05或P0.01]和血清BUN [(7.72±1.22)mmol/L、(7.55±0.72)mmol/L比(11.31±0.63)mmol/L,P均0.01]水平,提高肾组织SOD [(125.74±18.17)U/mgprot、(147.64±16.36)U/mgprot比(107.15±10.83)U/mgprot,P均0.05]、GSH [(2.34±0.28)μmol/mgprot、(2.40±0.26)μmol/mgprot比(1.93±0.06)μmol/mgprot,P0.05或P0.01]和CAT [(38.20±6.53)U/mgprot、(42.50±10.90)U/mgprot比(28.99±1.67)U/mgprot,P0.05或P0.01]活性,且显著减轻肾组织病理损伤。RT-PCR结果显示,与模型组比较,QFAE能够促进抗氧化基因Gclm[(1.30±0.15)、(1.46±0.27)比(0.87±0.11),P0.05或P0.01]、Nqo1 [(1.23±0.06)、(1.31±0.18)比(0.82±0.16),P0.05或P0.01]、Gclc [(1.19±0.08)、(1.28±0.16)比(0.93±0.11),P0.05或P0.01]mRNA表达。结论 QFAE能够显著改善2型糖尿病db/db小鼠肾脏氧化损伤,其机制可能与促进抗氧化基因表达,提高肾组织抗氧化能力有关。     

氨氯地平对大鼠动脉粥样斑块稳定性和MMP-9及其抑制物表达的影响

目的：探讨氨氯地平对大鼠动脉粥样斑块稳定性和基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其抑制物表达的影响。方法以18只雄性Wistar大鼠构建动脉粥样硬化模型,采用随机数字表法将18只雄性Wistar大鼠分为氨氯地平组和模型组,每组9只。模型组采取单纯高脂饲料喂养,氨氯地平组每日在高脂饮食基础上给予苯磺酸氯氨地平6 mg/(kg·d)灌胃。连续饲养3个月后采血检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG);免疫组织化学SABC法进行MMP-9及基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP-1)表达检测,同时计数血管平滑肌细胞(VSMC)和巨噬细胞占总细胞的百分比。结果氨氯地平组大鼠TC和TG水平分别为(1.63±0.74) mmol/L和(0.81±0.21) mmol/L,明显低于模型组的(3.08±0.67) mmol/L和(1.35±0.34) mmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05);氨氯地平组MMP-9表达水平为(266.53±32.15)μm2,明显低于模型组的(351.02±45.69)μm2,TIMP-1表达水平为(305.64±36.22)μm2,明显高于模型组的(230.36±25.11)μm2,差异均有统计学意义(P<0.05);氨氯地平组血管平滑肌细胞[(88.12±3.58)%vs (100.00±0.00)%]和巨噬细胞[(90.35±5.33)%vs (100.00±0.00)%]占总细胞的百分比均显著低于模型组(P<0.05)。结论氨氯地平可抑制MMP-9的表达,进而起到稳定动脉粥样硬化板块、降低血脂的作用。     

巴马香猪Toll样受体4基因cDNA的克隆及生物信息学分析

目的观察三聚氰胺急性毒性及中药三金汤对三聚氰胺的清除作用。方法昆明小鼠90只,分为7组灌胃三聚氰胺,2组对照,观察其对小鼠的毒性。昆明小鼠70只分为7组,三金汤预防高、中、低剂量组,三金汤治疗组、三聚氰胺模型组、2组对照,一次性给予三聚氰胺后,观察三金汤对小鼠肾和肺三聚氰胺的清除作用。结果昆明小鼠灌胃三聚氰胺的LD50为9366mg／kg,肾脏未见结晶,肾、肝、肺有炎性细胞浸润。三聚氰胺灌胃后在肾、肺含量分别为327ng／g、177．5ng／g,三金汤预防高剂量组清除三聚氰胺效果最佳,肾、肺三聚氰胺含量分别降低至58ng／g、28．2ng／g。结论本实验条件下,初步认定三聚氰胺属微毒或无毒;中药三金汤对小鼠体内三聚氰胺的清除作用以三金汤预防高剂量组的效果最佳。     

三聚氰胺诱发SD大鼠尿结石初步观察

[目的]观察三聚氰胺连续给药20 d诱发SD大鼠尿结石的情况.[方法]60日龄SPF级SD大鼠190只共分为6组,5组给药组每组各34只,分别给予三聚氰胺2.5、2.0、1.5、1.0、0.5 g/kg连续灌胃;空白对照组20只,每天灌胃10 g/L甲基纤维素溶液.采用肉眼和体视显微镜观察大鼠肾脏、输尿管和膀胱形态改变,比较各组肾脏、膀胱的质量和脏器指数,观察大鼠血肌酐(CREA)、尿素氮(BUN)、尿酸(UA)、钙、磷、镁的含量变化.[结果]给药10 d各组大鼠膀胱结石发生率为9%(4/47),给药20 d各组大鼠膀胱结石发生率为37%(11/30),输尿管结石发生率为93%(28/30).给药10 d和20d各组大鼠肾脏均肿大呈灰黄色,肾内均出现条索状黄色沉淀物,部分肾脏有点状或片状出血灶.给药20d各组肾内黄色沉淀物开始融合成片状或颗粒状,并在皮质和髓质之间形成黄色弧形光环.给药10 d和20 d各组肾脏质量和脏器指数均显著性升高,给药20 d血CREA、BUN、磷、镁含量升高(P<0.01).[结论]使用0.5～2.5 g/kg三聚氰胺连续给药20d,可诱发部分SD大鼠产生膀胱结石和输尿管结石,肾脏出现黄色片状或颗粒状沉淀物.     

Diagnosis and treatment of melamine-associated urinary calculus complicated with acute renal failure in infants and young children

Background Infants in some areas of China developed urinary lithiasis after being fed with powdered milk that was tainted with melamine in 2008 and very small proportion of the infants developed acute renal failure caused by urinary tract calculus obstruction. The aim of this article was to summarize clinical characteristics, diagnosis and treatment of infants with urinary calculus and acute renal failure developed after being fed with melamine tainted formula milk. Methods Data of infant patients with urinary calculus and acute renal failure due to melamine tainted formula milk admitted to the Beijing Children＇s Hospital Affiliated to the Capital Medical University and the Xuzhou Children＇s Hospital in 2008 were used to analyze the epidemiological characteristics, clinical manifestations, imaging features as well as effects of 4 types of therapies. Results All the 34 infants with urinary calculus were complicated with acute renal failure, their blood urea nitrogen （BUN） was （24.1±8.2） mmol/L and creatinine （Cr） was （384.2±201.2） umol/L. The chemical analysis on the urinary calculus sampled from 15 of the infants showed that the calculus contained melamine and acidum uricum. The time needed for the four types of therapies for returning Cr to normal was （3.5±1.9） days for cystoscopy group, （2.7±1.1） days for lithotomy group, （3.8±2.3） days for dialysis group, and （2.7±1.6） days for medical treatment group, which had no statistically significant difference （P=-0.508）. Renal failure of all the 34 infants was relieved within 1 to 7 days, averaging （3.00±1.78） days. Conclusions Melamine tainted formula milk may cause urinary calculus and obstructive acute renal failure. It is suggested that firstly the patients with urinary calculus complicated with acute renal failure should be treated with dialysis or medication to correct electrolyte disturbance, in particular hyperkalemia, and then relieve the obstruction with available medical and surgical methods as soon as possible. It was observed that the short-term prognosis was satisfactory.     

三聚氰胺致大鼠泌尿系统组织损伤的实验观察

目的 为三聚氰胺泌尿系统组织损伤的研究建立动物模型. 方法 60日龄SPF级SD大鼠分为4组,3组分别给予三聚氰胺1.0、0.5、0.25 g/kg,连续灌胃6周;空白对照组每天灌胃10 g/L甲基纤维素溶液.于6周末处死动物,采用肉眼和体视显微镜观察大鼠肾脏、输尿管和膀胱形态改变,计算各脏器系数,同时检测大鼠血液生化指标,并利用小动物活体Micro CT对大鼠肾脏进行扫描,观察肾脏形态改变. 结果 给药6周末各组大鼠膀胱结石发生率为66.6%（20/30）,肾脏结石发生率为56.6%（17/30）.给药6周各组大鼠肾脏均肿大呈灰黄色,肾内均出现条索状黄色沉淀物,融合成片状或颗粒状,并在皮质和髓质之间形成黄色弧形光环,给药6周各组肾脏质量和脏器指数均显著性升高,血清CREA、BUN、磷、镁含量升高（P＜0.01）. 结论 使用0.5～1.0 g/kg三聚氰胺连续灌胃给药6周,可诱发部分SD大鼠产生不同程度的泌尿系统结石.     

抗Ⅳ型胶原酶单链抗体对博莱霉素诱导小鼠肺纤维化的防治作用

目的 研究抗Ⅳ型胶原酶单链抗体scFv(3G11)对博莱霉素(BLM)诱导的小鼠肺纤维化的防治作用.方法 C57BL/6小鼠分为空白对照组、盐水对照组、BLM组和低、中、高剂量scFv(3G11)组.BLM组气管内注射BLM 400 ng/g;低、中、高剂量scFv(3G11)组注射BLM当天记为0 d,第1～7天每天腹腔注射scFv(3G11) 15、30、45 μg/g.第21天处死盐水对照组、BLM组和中剂量scFv(3G11)组小鼠各6只,取左肺行组织病理学观察,并测定肺泡隔面积比和有核细胞计数;另处死空白对照组、盐水对照组、BLM组和低、中、高剂量scFv(3G11)组小鼠各6只,取肺组织测定羟脯氨酸含量以衡量肺胶原沉积状况.取小鼠腹腔巨噬细胞进行原代培养,采用明胶酶谱法观察不同浓度scFv(3G11)(0、15、30、45、60 μmol/L)对巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的影响.结果 组织病理学观察显示scFv(3G11)组小鼠肺纤维化程度明显轻于BLM组,肺泡隔面积比(45.3%± 3.2%)和有核细胞计数(451 ± 47)均明显低于BLM组(59.0% ± 3.0%,599 ± 42,均P<0.01).中、高剂量scFv(3G11)组小鼠肺组织羟脯氨酸含量[分别为(0.82±0.05)和(0.80±0.03)μg/mg]明显低于BLM组[(0.92±0.07)μg/mg,P<0.05,P<0.01].明胶酶谱分析显示,scFv(3G11)浓度为15 μmol/L时即可抑制巨噬细胞分泌的MMP-2和MMP-9的活性.结论 抗Ⅳ型胶原酶单链抗体scFv(3G11)能抑制BLM诱导的小鼠肺纤维化.     

沉默ADRB2基因对卵巢上皮性癌细胞生物学特性及顺铂敏感性的影响

目的 探讨下调β2型肾上腺素受体(beta-2 adrenergic receptor,ADRB2)基因表达对卵巢上皮性癌细胞顺铂敏感性以及细胞增殖、凋亡的影响及机制。 方法 以人卵巢癌细胞株SKOV3/DDP为研究对象,采用小RNA干扰技术沉默ADRB2的表达,实验分为4组:ADRB2 shRNA1感染组、ADRB2 shRNA2感染组、阴性对照shRNA感染组、未感染的SKOV3/DDP细胞作为空白对照组。采用不同浓度(0、2.5、5、10、20、40 μmol/L)顺铂作用后,采用CCK-8法检测4组卵巢癌细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测4组细胞的凋亡率,Western blot法检测4组卵巢癌细胞中caspase-9、Bcl-2及Bax蛋白的表达,采用单因素方差分析进行比较。 结果 不同浓度的顺铂处理后,4组细胞的生长抑制率均逐渐升高,且呈剂量依赖性。2组ADRB2 shRNA感染细胞的顺铂耐药IC50分别为(29±8)μmol/L和(32±11)μmol/L,明显低于阴性对照组[(104±15)μmol/L,P<0.01]和空白对照组[(112±10)μmol/L,P<0.01];4组细胞的凋亡率逐渐增加,且呈剂量依赖性。2组ADRB2 shRNA感染细胞的凋亡率均明显高于阴性对照组(P<0.01)。4组细胞的caspase-9、Bax蛋白的表达水平逐渐增加,且呈浓度依赖性,2组ADRB2 shRNA感染细胞的caspase-9、Bax蛋白水平均明显高于阴性对照组(均P<0.05)。4组细胞的Bcl-2蛋白的表达水平逐渐降低,且呈浓度依赖性,2组ADRB2 shRNA感染细胞的Bcl-2蛋白水平均明显低于阴性对照组(均P<0.05)。 结论 顺铂诱导可使ADRB2基因下调的顺铂耐药卵巢癌细胞的增殖减少、凋亡增加,其可能机制为通过调节caspase-9、Bcl-2和Bax凋亡家族蛋白的表达,从而增加细胞对顺铂的敏感性。      

胆肠吻合术后胆汁中与结石成因相关成分分析

目的 探讨胆肠吻合术后胆汁成分的变化是否会导致术后患者结石的形成或复发.方法 收集2014年6月至2015年2月期间我院肝胆科患者40例,其中行胆肠吻合术2~3个月后患者经"T"形引流管引出的胆汁(观察组)和因"胆囊息肉"行腹腔镜下胆囊切除术患者胆总管内的胆汁(对照组)各20例.对比两组胆汁中与结石成因相关的成分,如总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、总胆汁酸、钙离子和黏蛋白等.结果 观察组中总胆红素、直接胆红素、间接胆红素、钙离子、黏蛋白测量数值均较对照组明显降低[(204.01±61.06) μmol/L vs (674.68±162.68) μmol/L、(138.78±40.24) μmol/L vs (441.13±94.30) μmol/L、(65.23±21.22) μmol/L vs (233.56±71.96) μmol/L、(0.80±0.23) mmol/L vs (1.98±0.64) mmol/L、(4.43±1.42) μg/L vs (6.29±2.04) μg/L],而总胆汁酸测量值则较对照组明显增高[(633.06±89.82) μmol/L vs (474.89±75.21) μmol/L],差异均有统计学意义(P<0.05).结论 胆肠吻合术后胆汁成分的变化在短期内不会导致结石的形成或复发.     

DADS上调miR-200b抑制视网膜母细胞瘤细胞的生长与侵袭

目的 探索miR-200b和二烯丙基二硫(DADS)相关的抑瘤机制,为揭示DADS抑制视网膜母细胞瘤生长及侵袭的内在分子机制提供理论依据.方法 采用qRT-PCR分别检测不同浓度的DADS对Y79细胞miR-200b表达的影响,DADS分别设置六种浓度:0 μmol/L、25 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L和400 μmol/L.MTT和Transwell侵袭实验分别检测DADS和miR-200b对Y79细胞生长及侵袭能力的影响,将实验设置成五个组,即miRNA阴性对照组(瞬时转染scramble 40μmol/L);miR-200b组(瞬时转染miR-200b-mimics 40μmol/L);DADS阴性对照组(DMSO 10μmol/L,即mock组);DADS组(DADS 200μmol/L)和DADS+miR-200b组(瞬时共转染miR-200b-mimics 40μmol/L)和DADS (200μmol/L).结果 DADS可上调Y79细胞中miR-200b的表达,且其呈剂量依赖性(P<0.05);在MTT实验中,miR-200b组的OD值(0.549±0.057)较miRNA阴性对照组(0.737±0.135)明显降低;DADS组的OD值(0.508±0.064)较DADS阴性对照组(0.722±0.145)明显降低;而DADS+miR-200b组的OD值(0.362±0.081)较miRNA阴性对照组和DADS阴性对照组降低最为显著(P<0.05),即DADS可以通过上调miR-200b抑制Y79细胞的增殖能力.在Transwell侵袭实验中,外源性的高表达miR-200b组(105±13)较miRNA阴性对照组(162±12)能够显著抑制Y79细胞的穿膜细胞数,DADS组(102±13)较DADS阴性对照组(154±8)能够显著降低Y79的穿膜细胞数,且DADS+miR-200b组(77±8),细胞穿膜细胞数较miRNA阴性对照组和DADS阴性对照组减少最显著(P<0.05),即DADS通过上调miR-200b抑制Y79细胞侵袭.结论 DADS通过上调miR-200b的表达抑制视网膜母细胞瘤细胞的生长及侵袭.     

一氧化氮合成酶神经化学重塑在脊髓损伤大鼠下尿路功能障碍中的机制及应用

目的 观察完全性脊髓损伤(SCI)大鼠下尿路传入神经一氧化氮合成酶(NOS)的表达及鞘内注射NOS抑制剂对SCI大鼠膀胱测压参数的影响.方法 ①选取SD大鼠24只,随机分为正常对照A组、SCI 1周组、SCI 4周组和SCI 8周组(n=6),SCI1周组、SCI 4周组和SCI 8周组大鼠横断胸10脊髓节段建立完全性SCI模型,免疫组织化学法检测各组大鼠L6～S1脊髓节段神经型NOS(nNOS)和诱导型NOS(iNOS)的表达.②另选取SD大鼠16只,随机分为正常对照B组(n=9)和损伤组(n=7),损伤组大鼠横断胸10脊髓节段建立完全性SCI模型4周后,两组大鼠分别鞘内注射0.1 mL生理盐水、1μmol nNOS抑制剂和1μmoliNOS抑制剂,观察给药前后两组大鼠膀胱测压参数的变化.结果 ①SCI 1周组和SCI 4周组大鼠脊髓后角nNOS阳性表达细胞数[(5.5±2.7)/视野和(10.3±7.9)/视野]显著大于正常对照A组[(2.0±1.5)/视野](P＜0.05),SCI 8周组大鼠脊髓前角nNOS阳性表达细胞数[(6.7±1.5)/视野]显著大于正常对照A组[(4.3±1.5)/视野](P＜0.05).②损伤组大鼠鞘内注射nNOS抑制剂后最大膀胱测压容积[(1.58±0.94)mL]显著大于给药前[(1.06±0.70) mL] (P ＜0.05).结论 脊髓水平一氧化氮可能不参与正常排尿反射过程,一氧化氮相关的神经化学递质的可塑性改变与SCI后自主排尿反射的触发有关,鞘内注射药物调节脊髓水平神经化学递质的表达为SCI后下尿路功能障碍的治疗提供了新思路.     

大黄素对急性淤胆型肝炎模型大鼠的治疗作用及机制

目的 初步探讨大黄素对急性淤胆型肝炎模型大鼠的治疗作用及机制.方法 SD大鼠分为5组:大黄素组、熊去氧胆酸组、地塞米松组、模型组、正常对照组,各24只.除正常对照组外,其余4组均给予α-异硫氰酸萘酯(ANJT)50 mg/kg一次灌胃大鼠建立淤胆型肝炎动物模型,并给予相应的药物干预.造模后24、48、72 h 3个时间点采集标本(每时间点8只),检测肝功能和肝脏病理学检查.实时荧光定最PCR检测肝组织中细胞因子诱导的中性粒细胞趋化因子1(CINC-1)、巨噬细胞炎症蛋白2(MIP-2)mRNA表达,Western印迹法检测肝组织中细胞间黏附分子1(ICAM-1)蛋白表达.结果 大黄素组24、48、72 h各时间点总胆红素[TB,(32.8±3.7)μmol/L、(61.0±16.4)μmol/L、(10.8±4.5)μmol/L],直接胆红素[DB,(26.03±3.10)μmol/L、(49.40±18.16)μmol/L、(8.04±3.03)μmol/L],丙氨酸氨基转移酶[ALT,(314±50)U/L、(664±97)U/L、(200±60)U/L]均明显低于模型组(均P<0.05),天冬氨酸氨基转移酶(AST)48、72 h时间点、碱性磷酸酶(ALP)48 h、γ-谷氨酰转移酶(GGT)72 h、总胆汁酸(TBA)48、72 h时间点均明显低于同时间点模型组(均P<0.05);TB24、48 h,DB、ALT 24 h,TBA 24 h[(204±55)μmol/L]、72 h,均明显低于同时间点熊去氧胆酸组(均P<0.05);TB、TBA 24、48 h,AIX、AST、GGT各时间点,时间点均明显低于同时间点地塞米松组(均P<0.05).各时间点大黄素组的CINC-1、MIP-2 mRNA表达和ICAM-1蛋白表达水平均明显低于同时间点模型组(均P<0.05).结论 大黄素治疗ANIT诱导的急性淤胆型肝炎模型大鼠的作用以降低TB、DB、ALT最为显著,起效比熊去氧胆酸快,其对ALT、AST、GGT、TBA的作用优于地塞米松.其作用机制可能与抑制CINC-1、M1P-2、ICAM-1的活化有关.