白术挥发油对小鼠S180的抑瘤作用及瘤组织凋亡相关基因bcl-2表达的影响

目的探讨白术挥发油对小鼠S180肉瘤的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达的影响；方法荧光免疫组织化学法，通过激光共聚焦显微镜观察并计数表达bcl-2基因的瘤细胞数。结果白术挥发油各剂量组对小鼠S180肉瘤组织具有抑制作用；白术挥发油各剂量组能明显降低小鼠S180肉瘤凋亡相关基因bcl-2的表达。结论白术挥发油可能通过调控肿瘤细胞凋亡相关基因bcl-2的表达而实现抑瘤作用。     

热疗对纤维肉瘤S180株的抑瘤作用及其生物学机制

目的 探讨热疗对纤维肉瘤S180株的抑瘤作用及其生物学机制.方法 40只昆明小鼠,接种S180肿瘤细胞株后用加热进行实验干预,标本于实验后6、2、54h取材,原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞,流式细胞仪测定细胞周期分布,RT-PCR检测bcl-2基因的mRNA表达.结果 热疗对纤维肉瘤有显著的治疗作用,可以诱导纤维肉瘤S180株细胞凋亡,改变细胞周期分布,使发生G1期阻滞,下调Bcl-2基因.结论 热疗可以诱导纤维肉瘤S180株细胞凋亡,改变细胞周期分布,使发生G1期阻滞,下调bcl-2基因,为进一步的基因配合热放疗治疗肿瘤和选择肿瘤放化疗结合时机和化疗药物提供了理论基础.     

miR-122a对肝癌细胞HepG2化疗药物敏感性的影响及其机制研究

目的:探究过表达miR-122 a是否可提高肝癌细胞HepG2对化疗药物的敏感性,并阐明其提高化疗药物敏感性的部分机制.方法:构建过表达miR-122 a的HepG2细胞系(miR-122a肿瘤细胞组),并与HepG2细胞(肿瘤细胞组)置于含不同浓度顺铂的培养液中,CKK-8法观察miR-122a上调对HepG2细胞存活率的影响,Annexin V-PE/7-AAD双染法观察miR-122a上调对HepG2细胞凋亡率的影响;Western blot检测miR-122a肿瘤细胞组和肿瘤细胞组中bcl-2和p53蛋白的表达水平.结果:低铂浓度顺铂条件下,miR-122 a肿瘤细胞组细胞的存活率低于肿瘤细胞组细胞的存活率,miR-122 a肿瘤细胞组24 h细胞的凋亡率高于肿瘤细胞组(P<0.05);Western blot法检测bcl-2和p53蛋白结果显示,在低浓度顺铂溶液中,miR-122a肿瘤细胞组bcl-2表达量低于肿瘤细胞组(P<0.05),miR-122a肿瘤细胞组p53表达量高于肿瘤细胞组(P<0.05).结论:过表达miR-122a能上调p53蛋白表达、下调bcl-2蛋白表达,增加HepG2细胞对顺铂敏感性,为肝癌患者提供基因治疗和降低肿瘤细胞耐药提供了理论和实验基础.     

bcl-2硫代反义寡核苷酸对U937细胞药物敏感性及细胞凋亡的影响

目的　 bcl- 2是调控细胞死亡的重要基因之— ,它编码的蛋白质通过阻止细胞凋亡而延长细胞存活。多血液系统的恶性肿瘤都有 bcl- 2表达异常。肿瘤细胞 bcl- 2高表达与其化疗耐药性有关。实验采用针对 bcl- 2 m RNA阅读框起始部位的 18碱基硫代反义寡核苷酸 (ASODN)作用于较高表达bcl- 2的 U937细胞 ,探讨 bcl- 2 ASODN U937细胞药物敏感性及细胞凋亡的影响。　方法　 MTT比色法检测 bcl- 2硫代寡核苷酸及与 VP16联合应用对 U937细胞的毒性作用 ;半定量 RT- PCR检测 bcl- 2 m RNA表达情况 ;免疫细胞化学染色和流式细胞仪检测 bcl…     

栀子抑制小鼠S180和肝癌及促进小鼠肝癌细胞凋亡作用

目的 探讨栀子提取物对荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2表达以及细胞凋亡的作用.方法 分别采用荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌模型,灌胃栀子提取物10g·(kg·d)-1,qd×10d;观察瘤重和肿瘤抑瘤率,以及用酶联免疫分析法检测肝癌小鼠血清肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2含量及用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡情况.结果 栀子提取物能抑制荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌的增重(P＜0.01),抑瘤率分别为44.8%和61.0%;下调荷瘤小鼠肝癌模型血清肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达(P＜0.01),小鼠肝癌细胞凋亡率为52.6%.结论 栀子提取物对荷瘤小鼠S180肉瘤和肝癌有抑制作用,抑瘤作用机制是下调肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达,从而诱导小鼠肝癌细胞凋亡.     

蟾酥注射液诱导肿瘤细胞凋亡和对bcl-2基因表达影响的研究

目的 观察蟾酥注射液体外诱导的肿瘤细胞凋亡,探讨其对凋亡相关基因bcl-2蛋白和mRNA表达的影响.方法 采用Giemsa染色、透射电镜技术、AI计数、DNA片段化电泳、DNA片段化定量和流式细胞术对蟾酥注射液诱导的肿瘤细胞凋亡进行观察.同时采用流式细胞术和逆转录PCR检测蟾酥注射液作用后肿瘤细胞凋亡相关基因bcl-2蛋白和mRNA表达水平的变化.结果 2.25×10-1mg/L蟾酥注射液处理48h的HL-60,K562,U937细胞出现典型的凋亡细胞形态特征和生化特征改变.2.25×10-1mg/L蟾酥注射液处理不同时间的HL-60、K562、U937细胞的凋亡指数、DNA片段化率、凋亡细胞率均高于对照组(P均<0.05).2.25×10-1mg/L蟾酥注射液处理的HL-60细胞bcl-2蛋白表达阳性率高于对照组(P<0.05),并且随着时间延长bcl-2蛋白表达有减少趋势.2.25×10-1mg/L蟾酥注射液处理的HL-60细胞bcl-2基因mRNA相对表达量随着时间延长,有下降趋势.结论 蟾酥注射液体外诱导肿瘤细胞HL-60,K56,U937发生细胞凋亡.诱导细胞凋亡可能是蟾酥注射液抗肿瘤的机制之一.蟾酥注射液在诱导肿瘤细胞凋亡时影响bcl-2基因mRNA和蛋白表达水平,提示bcl-2基因表达的改变可能是蟾酥注射液诱导细胞凋亡的机制.     

舌癌术前化疗PCNA、bcl-2、Bax基因表达及临床意义

目的 :通过舌癌术前化疗增殖细胞核抗原 (PCNA )和细胞凋亡相关基因 bcl- 2、Bax表达的研究 ,探讨舌癌的化疗作用机制。 方法 :对舌乳头状瘤、舌癌和舌癌术前化疗标本共 34例 ,采用免疫组织化学染色技术——酶标链亲和素生物素法 (L SAB)染色并进行光镜下观察。结果:PCNA在舌癌中的表达最强 ,在舌癌术前化疗中的表达明显减弱 (P <0 .0 5 ) ,其与舌乳头状瘤表达相似 (P >0 .0 5 )。 bcl- 2在舌癌术前化疗及舌乳头状瘤中低表达(P >0 .0 5 ) ,舌癌中表达明显增强 (P <0 .0 5 )。Bax在舌癌组和乳头状瘤组中表达有明显差异 (P <0 .0 5 )。结论 :化疗药物抑制肿瘤生长的机制可能与抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞程序性死亡有关 ,提示舌癌术前化疗对肿瘤的预后有重要意义。     

热化疗联合5—Fu诱导大肠癌细胞凋亡和bcl—2表达

目的：研究热化疗诱导大肠癌（LoVo)细胞凋亡及其与bcl-2基因表达的关系，探讨热化疗治疗大肠癌的机制。方法：应用热疗联合5-氟尿嘧啶（5-Fu)在不同药物浓度、时间和温度条件下诱导LoVo细胞株调亡，以流式细胞仪检测其凋亡率bcl-2基因的表达。结果：随着药物浓度的升高、作用时间的延长，细胞凋亡率增加；在相同时间和浓度条件下，热疗联合5-Fu的凋亡率与单纯化疗组、单纯热疗组相当；随着药物浓度的升高，bcl-2的表达下调；各处理组与对照组比较均差异显著（P＜0.05)；但热化疗使bcl-2表达下调的程度与单纯热疗及单纯化疗相当；高温也可以使bcl-2的表达下调。结论：热化疗、单纯化疗及单纯热疗均能诱导LoVo细胞凋亡且可使bcl-2基因表达下调；热疗联合5-Fu在诱导凋亡及下调bcl-2基因表达方面无协同作用。     

梁金菇多糖诱导肝癌细胞凋亡及对bcl-2表达的影响

目的 :探讨梁金菇多糖诱导人肝癌细胞株 SMMC-772 1凋亡作用的机制。方法 :采用电镜、DNA电泳、免疫组化以及流式细胞仪分析法 ,对 SMMC-772 1细胞凋亡以及凋亡抑制基因 bcl-2在肿瘤细胞内的表达进行检测。结果 :经梁金菇多糖处理的 SMMC-772 1细胞出现核固缩 ,凋亡小体形成 ,琼脂糖凝胶电泳呈现出细胞凋亡特征性的 DNA梯状带。凋亡细胞发生率与药物浓度和作用时间呈正相关 ,凋亡细胞的发生率从 3 .5%上升至3 6 .4%。经梁金菇多糖处理的 SMMC-772 1细胞内 bcl-2表达较对照组降低。结论 :梁金菇多糖对肿瘤细胞的杀伤主要是通过诱导细胞凋亡 ,其抑制细胞内 bcl-2的表达是诱发肿瘤细胞凋亡的主要机制之一     

舌癌术前化疗PCNA、bcl—2、Bax基因表达及临床意义

目的：通过舌癌术前化疗增殖细胞核抗原（PCNA）和细胞凋亡相关基因bcl-2、Bax表达的研究,探讨舌癌的化疗作用机制。方法：对舌乳头状瘤、舌癌和舌癌术前化疗标本共34例,采用免疫组织化学染色技术－酶标链亲和素生物素法（LSAB）染色并进行光镜下观察。结果：PCNA在舌癌中的表达最强,在舌癌术前化疗中的表达明显减弱（P＜0．05）,其与舌乳头状瘤表达相似（P＞0．05）。bcl-2在舌癌术前化疗及舌乳头状瘤中低表达（P＞0．05）,舌癌中表达明显增强（P＜0．05）。Bax在舌癌组和乳头状瘤组中表达有明显差异（P＜0．05）。结论：化疗药物抑制肿瘤生长的可能与抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞程序性死亡有关,提示舌癌术前化疗对肿瘤的预后有重要意义。     

高压氧对化疗药物体外诱导急性髓性白血病细胞Bax和Bcl—2基因表达的影响

①目的 采用体外实验方法探讨高压氧(HBO)对化疗药物体外诱导急性髓性白血病(AML)细胞Bax和bcl-2基因表达的影响。②方法　高三尖杉酯碱(H)、阿糖胞苷(A)、足叶乙甙(V)3种化疗药物分别作用于AML患者的单个核细胞,一组加HBO,另一组不加HBO,观察各组凋亡细胞、Bax和bcl-2实验前后积分变化、Bax/bcl-2积分比和TUNEL阳性率。同时设无药加HBO组和不加HBO组以排除HBO或其它因素对AMI,细胞的影响。③结果　3种化疗药物加HBO组具有典型凋亡特征的AML细胞明显增多;Bax的表达无明显改变(P>0.05),bcl-2的表达明显减少(P<0.01),Bax/bcl-2积分比明显高于不加HBO组(P<0.05);TUNEL 阳性率明显高于不加HBO组(P<0.01);无药加HBO组与无药不加HBO组实验前后Bax、bcl-2基因的表达无明显改变(P>0.05)。④结论HBO对化疗药物体外促进AML细胞Bax基因的表达无明显影响,但增强了化疗药物对bcl-2基因表达的抑制作用,Bax/bcl-2比值明显增加,因而增强了AML细胞的化疗敏感性,使化疗药物体外诱导AML细胞凋亡增加。单纯HBO对AML细胞Bax和bcl-2基因的表达无明显影响。     

Bcl-2基因和肿瘤细胞耐药的研究

肿瘤细胞耐药严重影响化疗效果和肿瘤预后 ,是肿瘤治疗的重要障碍。肿瘤细胞耐药存在多种机制 ,并在不同阶段启动 ,使细胞在恶劣环境中的生存能力增强。实验表明 ,许多化疗药物通过诱导或强化肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用 ,因此细胞的凋亡抑制能够促进肿瘤细胞生存并对化疗药物产生耐受 [1] 。 Bcl- 2是最受关注的抑制细胞凋亡的基因 ,它的高表达可阻断多种因素诱导的细胞凋亡 ,使细胞对放化疗耐受 ,被认为是一种新型的耐药基因 [2 ]。1　Bcl- 2基因及其蛋白Bcl- 2是 1 985年 Tsujimoto在研究人滤泡性非霍奇金淋巴瘤染色体 t( 1 4;1 8)易位…     

舌癌术前化疗PCNA、bcl-、BaX基因表达及临床意义

目的:通过舌癌术前化疗增殖细胞核抗原(PCNA)和细胞凋亡相关基因bcl-2、Bax表达的研究,探讨舌癌的化疗作用机制.方法:对舌乳头状瘤、舌癌和舌癌术前化疗标本共34例,采用免疫组织化学染色技术--酶标链亲和素生物素法(LSAB)染色并进行光镜下观察.结果:PCNA在舌癌中的表达最强,在舌癌术前化疗中的表达明显减弱(P＜0.05),其与舌乳头状瘤表达相似(P＞0.05).bcI-2在舌癌术前化疗及舌乳头状瘤中低表达(P＞0.05),舌癌中表达明显增强(P＜0.05).Bax在舌癌组和乳头状瘤组中表达有明显差异(P＜0.05).结论:化疗药物抑制肿瘤生长的机制可能与抑制肿瘤细胞增殖和诱导肿瘤细胞程序性死亡有关,提示舌癌术前化疗对肿瘤的预后有重要意义.     

恶性血液病bcl—2基因表达及其检测技术

bcl-2基因为一原癌基因,因其在淋巴瘤和白血病中出现重排而得名,是细胞凋亡的重要抑制基因.细胞凋亡障碍涉及淋巴造血系统癌变过程.bcl-2基因的激活是淋巴瘤/白血病的分子生物学病因之一,临床上血液肿瘤中bcl-2基因均有较高频度表达,且往往导致它们对化疗、放疗耐受,预后不良.     

bcl-2反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸(F951)治疗人恶性淋巴瘤的药效学和药代动力学实验研究

bcl- 2是在多种恶性肿瘤中高表达的抗凋亡基因 ,它的高表达是肿瘤细胞对各种凋亡诱导剂不敏感的主要原因之一 ,因此 bcl- 2基因是反义寡核苷酸治疗恶性肿瘤的良好靶基因。 F95 1是与其他反义寡核苷酸序列不同的针对 bcl- 2基因 m RNA的反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸 ,FNS18与 F95 1的核苷酸组成相同 ,但序列混杂的无义对照序列。　目的　研究 F95 1对人 Burkitt's淋巴瘤 CA 4 6细胞生物学特性的影响及治疗 CA4 6细胞裸鼠移植瘤的药效学 ,同时探索 F95 1与小剂量阿糖胞苷 (Ara- c)治疗 CA 4 6细胞裸鼠移植瘤的药效学 ;研究 F95 1在 BAL B/c小鼠体内的药代动力学过程 ;在体外研究 CA 4 6细胞对 F95 1的摄取及 F95 1在 CA4 6细胞内的分布。　方法　 (1)用锥虫蓝拒染法检测细胞生长情况 ;用MTT法检测细胞生长抑制率 ;用荧光定量 RT- PCR及流式细胞仪检测细胞 bcl- 2 m RNA和 Bcl- 2蛋白表达 ;用原位凋亡 TU NEL试剂盒和线粒体凋亡试剂盒检测早期凋亡细胞。(2 )制作 CA 4 6细胞裸鼠移植瘤模型并治疗 ;治疗过程中检测肿瘤体积变化 ;治疗结束后称量肿瘤重量 ;瘤块病理学检查、透射电镜观察 ;用荧光定量 RT- PCR检测瘤细胞内 bcl- 2基因 m RNA的水平 ;用 TU NEL试剂盒检测瘤组织内的凋亡细胞 ;用流式细胞仪检测瘤细     

联合应用以MRP和bcl-2为靶标的siRNA对肺癌细胞耐药和凋亡的影响

目的研究联合转染以MRP和bcl-2为靶标的siRNA,肺癌细胞株SW1573和SW1573／R20药物敏感性及凋亡的改变。方法以MRP和bcl-2为靶标的siRNA（均为100μmol／L）分别或联合转入柔红霉素处理的SW1573和SW1573／R20与单纯化疗处理组和未处理组对照。转染后24、48、72h MTT法检测各组生长抑制率,计算IC50值。RT-PCR检测转染12h各组相应靶基因mRNA表达水平,流式细胞仪检测转染48h各组MRP和bcl-2蛋白表达率和细胞凋亡率。结果细胞转染siRNA后,相应靶基因mRNA及蛋白表达明显减低,细胞的凋亡率升高,IC50均较单纯化疗组低,有统计学意义〈0．01）;联合应用两种siRNA后细胞IC50进一步下降,细胞凋亡率显著升高,与各组相比均有统计学差异俨〈0．05）。结论联合以MRP和bcl-2基因为靶标的siRNA,通过降低靶基因蛋白表达,产生协同作用,明显增加耐药和亲本肿瘤细胞药物敏感性和凋亡率。     

急性白血病bcl-2基因表达的研究

目的观察凋亡调控基因bcl-2在急性白血病（AL）患者中的表达。方法体外模拟常规用药的血药浓度最大值进行研究。首先应用流式细胞仪（FCM）技术检测凋亡调控基因bcl-2在各种急性白血病中的表达；然后检测体外药物作用后bel-2表达水平。结果bcl-2表达在AML中无显著性差异，而在ALL中表达明显低于AML。bcl-2蛋白在化疗药物作用一定时间后明显下调，与对照组有显著性差异（P〈0．05）。结论bcl-2蛋白在诱导AL原代细胞凋亡中有相应作用。     

栀子抑制小鼠S_(180)和肝癌及促进小鼠肝癌细胞凋亡作用

目的探讨栀子提取物对荷瘤小鼠S_(180)肉瘤和肝癌的抑瘤作用及肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2表达以及细胞凋亡的作用。方法分别采用荷瘤小鼠S_(180)肉瘤和肝癌模型,灌胃栀子提取物10g·(kg·d)~(-1),qd×10d;观察瘤重和肿瘤抑瘤率,以及用酶联免疫分析法检测肝癌小鼠血清肿瘤凋亡相关基因蛋白bcl-2含量及用流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡情况。结果栀子提取物能抑制荷瘤小鼠S_(180)肉瘤和肝癌的增重(P＜0．01),抑瘤率分别为44．8%和61．0%;下调荷瘤小鼠肝癌模型血清肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达(P＜0．01),小鼠肝癌细胞凋亡率为52．6%。结论栀子提取物对荷瘤小鼠S_(180)肉瘤和肝癌有抑制作用,抑瘤作用机制是下调肿瘤凋亡相关基因bcl-2表达,从而诱导小鼠肝癌细胞凋亡。     

米非司酮诱导子宫肌瘤细胞凋亡及其调控基因的研究

目的　探讨米非司酮对子宫肌瘤细胞凋亡及其调控基因bcl- 2、bax表达的影响。方法　选择服米用非司酮和单纯行子宫切除的子宫肌瘤组织标本 4 4例 ,应用流式细胞定量分析技术进行DNA分析 ,采用免疫荧光标记对bcl- 2、bax基因蛋白进行分析。结果　服米非司酮后瘤细胞凋亡指数显著升高 ,bax基因蛋白表达明显上升 ,两者呈正相关 (r=0 6 5 38,P <0 0 5 ) ,而bcl- 2无明显变化。结论　米非司酮治疗子宫肌瘤可能是通过诱导瘤细胞凋亡来实现的 ,bcl- 2 /bax比值下降是诱导瘤细胞凋亡的原因之一。     

转导Caspase-1基因对人胃癌细胞药物敏感性的影响

许多研究表明.化学药物对敏感肿瘤细胞有促凋亡作用[1,2]胃癌的发生发展与肿瘤细胞凋亡受抑有关,而且胃癌细胞对化疗药物的敏感性差.Caspase-1基因是哺乳动物细胞促凋亡基因.转染该基因可使肿瘤细胞的增殖受抑,但对化疗药物的敏感性如何尚未见报道.为全面了解转导Caspase-1基因后肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,本实验观察了4种化疗药物对转染Caspase-1基因的胃癌细胞的杀伤作用.