石见穿多糖对环磷酰胺诱导小鼠免疫低下的调节作用

目的:观察石见穿多糖对环磷酰胺诱导免疫低下小鼠的免疫增强作用。方法:小鼠腹腔注射环磷酰胺制备免疫低下模型。采用流式细胞术检测小鼠脾脏和胸腺细胞的周期分布;MTT比色法评价脾脏和胸腺细胞的体外增殖能力;中性红摄取试验评价小鼠巨噬细胞的吞噬能力;生化及酶联免疫试剂盒检测巨噬细胞分泌炎症因子的能力。结果:石见穿多糖可提高免疫低下小鼠的脾脏与胸腺指数,上调其脾脏和胸腺内处于分裂期的细胞比例,增强刀豆蛋白A刺激下脾脏与胸腺细胞体外增殖能力及增强免疫低下小鼠巨噬细胞的吞噬功能和分泌IL-1β和NO的能力,并能提高巨噬细胞内IL-1β含量和Caspase-1活性。结论:石见穿多糖能显著缓解环磷酰胺诱导的小鼠免疫低下。     

灵芝酸G对FcεRIα~+肥大细胞的活性影响

目的研究灵芝酸G诱导小鼠肥大细胞活化及细胞因子分泌。方法流式细胞仪检测细胞表面CD117+FcεRIα+分子的表达;比色法测定小鼠肥大细胞β-氨基己糖苷酶释放,OPT法检测组胺释放。ELISA法检测IL-10和TNF-α的分泌。结果灵芝酸G能诱导小鼠肥大细胞97.18%的CD117+FcεRIα+分子表达;体外实验显示2μg/ml灵芝酸G可以诱导小鼠肥大细胞组胺释放率为72.0%,β-氨基己糖苷酶释放率为32.2%,并分泌IL-6和TNF-α。结论灵芝酸G能诱导小鼠肥大细胞脱颗粒并分泌细胞因子,同时抑制炎性反应。     

当归多糖组分促进淋巴细胞增殖及对IL-2和IFN-γ的诱生作用

目的:观察当归多糖及其3个组分对淋巴细胞增殖和细胞因子IL-2、IFN-γ的影响.方法:机械分散法制备小鼠单个脾细胞悬液;MTT法检测细胞增殖;酶联免疫法测定培养上清液中IL-2和IFN-γ的浓度.结果:当归多糖及其3个组分在30～100 μg/ml剂量范围内,能显著促进脾细胞的增殖;其中组分AP-3能够显著促进巨噬细胞、混合淋巴细胞的增殖反应,剂量依赖性地增加细胞上清液中IL-2和IFN-γ的浓度.结论:当归多糖能够活化巨噬细胞和T细胞,还可以通过细胞因子IL-2、IFN￣γ发挥免疫调节作用.     

艾叶多糖对小鼠免疫细胞分泌细胞因子及其活性的影响

目的 为了探索艾叶多糖对体外培养脾细胞以及巨噬细胞分泌细胞因子或细胞因子活性的影响.方法 常规提取艾叶多糖,体外与培养的小鼠脾细胞以及腹腔巨噬细胞共孵育,通过对L929靶细胞的杀伤力以及胸腺细胞增殖法分别测定脾细胞培养上清液中细胞因子TNF和IL-2的活性,ELISA法检测巨噬细胞培养上清液中细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的含量.结果 一定浓度的艾叶多糖能明显提高小鼠脾细胞分泌的TNF和IL-2的活性(P＜0.01),对小鼠巨噬细胞分泌IL-1β、IL-6和TNF-α无影响(P＞0.05).结论 艾叶多糖调节免疫功能的部分药理作用与其提高脾细胞的TNF和IL-2细胞因子活性有关.     

拯阳汤的含药血清对阳虚小鼠免疫功能的影响

目的：采用血清药理学实验方法，观察拯阳汤的含药血清对阳虚小鼠免疫功能的影响。方法：采用氢化可的松（HC）阳虚小鼠模型，用MTT法检测腹腔巨噬细胞（pMФ）的活化作用及其分泌IL-1的活性，脾脏T淋巴细胞的增殖活性及其分泌的IL-2的活性，并用原位末端标记方法（TUNEL）检测胸腺细胞凋亡情况。结果：拯阳汤含药血清对阳虚小鼠腹腔巨噬细胞活化作用及其分泌的IL-1活性在一定剂量范围内均具有促进作用，但大剂量的促进作用有减弱趋势；对脾脏T淋巴细胞增殖活性及其分泌IL-2活性在一定剂量范围内亦均具有促进作用，大剂量的促进作用亦有减弱趋势；对胸腺细胞凋亡的抑制作用在一定剂量范围内成正比，剂量越大，作用越强。结论：拯阳汤含药血清对阳虚小鼠腹腔MФ的活化及其分泌的IL-1活性、脾脏T淋巴细胞增殖及其分泌的IL-2在一定剂量范围内具有促进作用，对阳虚小鼠的胸腺细胞凋亡的抑制作用在一定剂量的范围内呈量一效关系。     

香菇多糖对荷瘤鼠白细胞介素-2和白细胞介素-6表达及肿瘤细胞周期影响的研究

目的 探讨了香菇多糖对IL-2和IL-6表达及肿瘤细胞周期的影响.方法 昆明小鼠随机分为4组:正常对照组,肿瘤(S180)模型组,肿瘤环磷酰胺组,肿瘤香菇多糖组.放免法检测各组小鼠血清IL-2和IL-6水平、镜下观测计算小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率和吞噬指数、流式细胞仪检测肿瘤细胞周期.结果 香菇多糖可使荷瘤鼠IL-2含量升高(P<0.01),IL-6含量降低(P<0.01);香菇多糖可提高荷瘤鼠腹腔巨噬细胞吞噬率(P<0.01)和吞噬指数(P<0.01);使Gl期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,使肿瘤细胞的增殖指数明显下降(P<0.01).结论 香菇多糖可抑制荷瘤机体Th1/ Th2细胞的平衡向Th2细胞漂移,活化巨噬细胞功能,减低肿瘤细胞的增殖指数.     

戴氏虫草胞外水溶性多糖在体外对细胞免疫及细胞因子的影响

 目的 研究虫草属新种戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖在体外对人扁桃体淋巴细胞和水鼠脾细胞免疫功能的影响。方法 采用³H-TdR掺入法测定淋巴细胞增殖,乳酸脱氢酶法(LDH)测定NK细胞活性,L929细胞杀伤法测定肿瘤坏死因子(TNF),MTT法测定白细胞介素-2(IL-2)活性。结果 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖不仅能够促进人扁桃体及小鼠脾活化T细胞的增殖,而且能恢复环磷酰胺抑制免疫小鼠脾活化T细胞的增殖。它能增高小鼠脾细胞NK活性及分泌IL-2,也能增进人扁桃体活化T细胞分泌TNF β。结论 戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖是具有增强细胞免疫功能的生物免疫反应调节剂。     

氟伐他汀对人外周血T淋巴细胞活性的影响

 目的　研究氟伐他汀对人外周血T淋巴细胞活性的影响。方法　采用流式细胞术分析T细胞活化和增殖情况,ELISA法检测细胞因子分泌量,TransAM^TMELISA法测定活化T细胞核因子 (NFAT)的活化状态。结果　氟伐他汀能抑制T细胞表面CD69的表达,显著抑制T细胞增殖,对CD25的表达无影响。能抑制NFAT的活化,显著降低IL-2的产生,对IFN-γ和IL-10的分泌几无影响,但明显诱导IL-4的分泌。结论　氟伐他汀具有免疫抑制作用。     

杨梅素对小鼠脾淋巴细胞和腹腔巨噬细胞增殖的影响

目的:研究杨梅素体外对小鼠脾脏淋巴细胞增殖及腹腔巨噬细胞活化的影响。方法:取健康小鼠,MTT法检测杨梅素对小鼠脾淋巴细胞增殖的作用;中性红法测腹腔巨噬细胞吞噬活性;Griess试剂法测NO释放量;Elisa法测TNF-α、IL-1β和IL-4的含量。结果:杨梅素对未活化及丝裂原(Con A、LPS)活化的淋巴细胞增殖均有明显促进作用;可剂量依赖性地增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬中性红能力和促进NO释放;促进RAW264.7细胞TNF-α、IL-1β产生,抑制IL-4的释放。结论:杨梅素可能通过促进小鼠脾淋巴细胞增殖和提高巨噬细胞吞噬及分泌功能,提高机体免疫功能。     

灵芝醇提物对小鼠免疫功能影响的初步研究

目的:初步探讨灵芝乙醇提取物(灵芝醇提物)的免疫调节作用。方法:MTT法检测免疫细胞的(增殖)代谢活力,二硝基氟苯诱导迟发型超敏反应(DTH)检测小鼠细胞免疫功能,兔红细胞免疫法(血清溶血素水平)检测小鼠体液免疫功能,碳粒廓清法检测单核/巨噬细胞的吞噬功能。结果:灵芝醇提物(100、50μg/mL)可显著抑制刀豆素A(Con A)和细菌脂多糖(LPS)诱导的小鼠脾细胞(增殖)代谢活力。灵芝醇提物(200、100 mg/kg)能显著降低二硝基氟苯诱导小鼠DTH反应的耳廓肿胀度,降低小鼠体内的碳粒廓清能力,提高兔红细胞免疫所致小鼠血清溶血素的水平。结论:灵芝醇提物体外抑制小鼠T细胞和B细胞的增殖反应;体内抑制小鼠的细胞免疫反应和单核/巨噬细胞的吞噬功能,增强小鼠的体液免疫反应。     

麻黄-甘草药对对脂多糖诱导的RAW264.7细胞的体外抗炎作用分析

目的:观察麻黄-甘草药对对小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7细胞的增殖以及对脂多糖(LPS)刺激条件下对细胞分泌一氧化氮(NO),肿瘤坏死因子(TNF)-α和经典活化(M1)/替代活化(M2)炎症表型转化的影响。方法:利用噻唑蓝(MTT)比色法考察不同剂量的药对对RAW264.7细胞增殖的影响;药对干预脂多糖(LPS,1 mg·L-1)建立的细胞炎症模型,格里斯试剂法(Griess)法检测NO释放量,酶联免疫吸附法(ELISA)法检测上清中TNF-α的含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测药对对LPS刺激条件下RAW264.7细胞M1型巨噬细胞常见标志物一氧化氮合酶(iNOS),白细胞介素-6(IL-6),IL-1β及M2型巨噬细胞常见标志物IL-10,精氨酸酶1(ARG1)及甘露糖受体1(MRC1)基因的表达。结果:麻黄-甘草药对的剂量在100 mg·L-1及以下时对RAW264.7细胞增殖没有影响;与LPS组比较,剂量在25~100 mg·L-1的药对可以显著降低NO的含量(P0.05,P0.01),10~100 mg·L-1剂量下对TNF-α表达的抑制显著(P0.05,P0.01);50 mg·L-1的药对还可以显著降低M1型巨噬细胞标志基因iNOS,IL-6及IL-1β的表达(P0.05,P0.01),而对M2型巨噬细胞标志基因IL-10,ARG1,MRC1没有影响。结论:麻黄-甘草药对能够抑制LPS诱导的RAW264.7细胞炎症,其机制可能与抑制巨噬细胞向M1型方向的偏移,减少NO及TNF-α等炎症因子的分泌相关。     

柴胡多糖增强巨噬细胞的抗鼻咽癌作用及其机制研究

目的:观察柴胡多糖对M2巨噬细胞的极化及其抗鼻咽癌作用的影响,并初步分析机制。方法:佛波酯(PMA)诱导单核细胞系THP-1贴壁分化,并通过白介素-4(IL-4)刺激建立M2型巨噬细胞;流式细胞术检测柴胡多糖对M2巨噬细胞表型(CD68、CD86、CD197(CCR7)、CD206)、及SIRPα表达的影响;ELISA测定细胞因子(IL-1β、IL-4、IL-6、IL-10、iNOS、TNF-α、IFN-γ)含量;荧光分析仪分析柴胡多糖对M2和肿瘤细胞共培养的杀伤能力与CD47表达的关系;Western bolt检测JAK1、JAK2、p-JAK1、p-JAK2、STAT1、STAT3、STAT5、p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5蛋白表达水平。结果:柴胡多糖能显著升高M2巨噬细胞CD86、CD197表达(P0.05),极化M1表型,下调SIRPα表达(P0.05),抑制细胞因子IL-4、IL-10分泌,促进细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α、IFN-γ、iNOS分泌(P0.01);柴胡多糖对M2巨噬细胞共培养的鼻咽癌细胞系CNE-2Z和HNE-1的抑制作用表现出CD47高相关性(P0.05);并能上调JAK2、p-STAT1蛋白的表达(P0.05)。结论:柴胡多糖能极化M2巨噬细胞为M1型,显著上调促炎因子分泌,促进巨噬细胞对鼻咽癌细胞杀伤,其机制与激活JAK2/STAT1信号通路有关。此外,对SIRPα表达的抑制是柴胡多糖增强巨噬细胞杀伤作用的另一重要机制。     

天花粉多糖对人外周血单个核细胞的免疫活性作用

目的:建立天花粉多糖促人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)淋巴细胞增殖的方法,了解天花粉多糖对淋巴细胞增殖、活化作用,对T淋巴细胞亚群分群的影响和诱导产生TNF-α,IL-6水平的差异。方法:制备天花粉多糖提纯液。健康人PBMC作为药物筛选的靶细胞;采用MTT法测定不同浓度天花粉多糖(0.5,1.0,5.0,10.0,20.0,50.0 mmol.L-1)的促人PBMC淋巴细胞增殖作用;采用流式细胞术和ELISA法分别检测药物作用后人PBMC中T淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+T细胞)的表达和诱导人PBMC分泌产生TNF-α,IL-6水平。结果:1.0~50.0 mmol.L-1天花粉多糖对人PBMC具有明显促增殖作用(P0.05);经5.0,10.0 mmol.L-1天花粉多糖刺激后的人PBMC中,CD3+,CD4+,CD8+T细胞的含量明显高于对照组(P0.05),1.0,5.0,10.0 mmol.L-1天花粉多糖刺激人PBMC 8 h后,TNF-α,IL-6水平显著升高(P0.05)。结论:天花粉多糖对人PBMC有明显促增殖和活化作用,不同程度地上调T淋巴细胞亚群中CD3+,CD4+,CD8+T细胞的含量,并可诱导人PBMC高水平分泌产生TNF-α,IL-6,为阐明天花粉多糖的免疫活性和作用机制奠定基础。     

雷公藤红素对巨噬细胞焦亡的影响

目的探讨雷公藤红素对小鼠巨噬细胞RAW264.7焦亡的影响及相关机制。方法采用MTT法测定细胞增殖;吖啶橙(AO)/溴化乙啶(EB)、Hoechst/PI荧光染色观察细胞焦亡形态变化;ELISA法检测细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)分泌量;Western blotting法检测Caspase-1蛋白表达水平;Caspase-1活性检测试剂盒检测细胞内Caspase-1酶活性。结果经MTT法检测发现,雷公藤红素在50 nmol/L以下对巨噬细胞RAW264.7增殖活性无显著影响;AO/EB、Hoechst/PI染色显示雷公藤红素能够改善脂多糖(LPS)与三磷酸腺苷(ATP)诱导的细胞焦亡;ELISA结果显示,雷公藤红素能够抑制IL-1β的分泌(P0.05),且具有一定的浓度依赖性;Western blotting检测发现cleaved-Caspase-1蛋白表达量降低,同时雷公藤红素能抑制Caspase-1的酶活性。结论雷公藤红素抑制LPS与ATP诱导的细胞焦亡,可能与抑制IL-1β的分泌,抑制Caspase-1的活化有密切关系。     

羧甲基茯苓多糖对小鼠T淋巴细胞分泌细胞因子的影响

目的：探讨羧甲基茯苓多糖（CMP）对小鼠T淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-10的影响。方法：CMP溶液给小鼠腹腔注射，10天后取外周血分离T细胞，体外将不同浓度的CMP与T细胞共培养，MTT法观察其对T细胞的毒性作用，ELISA法检测IFN-γ、IL-10的含量。结果：CMP在0～500μg／ml对小鼠T细胞无明显毒性作用，CMP能显著提高IFN-γ水平，降低IL-10含量。结论：CMP具有较好的调节Th1／Th2细胞因子分泌作用。     

大黄牡丹汤含药血清对巨噬细胞释放炎症因子的影响

目的研究大黄牡丹汤临床治疗炎症性疾病的部分机制。方法常规制备大黄牡丹汤水煎剂,分大、中、小剂量灌胃干预小鼠并制备含药血清,在96孔板中将含药血清与小鼠腹腔巨噬细胞共孵,收集培养上清,采用Griess比色法检测巨噬细胞NO分泌量、ELISA法检测巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌量。结果与正常血清对照组比较,大黄牡丹汤含药血清能剂量依赖性地促进正常巨噬细胞分泌NO、TNF-α、IL-1β和IL-6(P0.01);能抑制LPS活化的巨噬细胞分泌NO、TNF-α和IL-1β(P0.05或P0.01),但对LPS活化的巨噬细胞分泌IL-6无显著影响(P0.05)。结论大黄牡丹汤对活化前后的巨噬细胞分泌炎症因子的干预作用,可能是该方调控炎症反应的主要机制之一。     

仙茅多糖对巨噬细胞分泌几种活性因子的影响

目的:观察仙茅多糖对体外培养的巨噬细胞分泌几种活性因子的影响,以期探索仙茅多糖活化巨噬细胞的部分机制。方法:将仙茅多糖体外与RAW264.7巨噬细胞共同培养36h,ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-1的含量,Griess比色法检测培养上清中NO的含量。结果:与空白对照组比较,仙茅多糖高、中剂量组TNF-α、IL-1和NO等活性因子的水平明显升高(P0.05或P0.01),且与阳性对照组的调节趋势相似。结论:仙茅多糖刺激巨噬细胞分泌TNF-α、IL-1和NO等活性因子可能是其活化巨噬细胞的重要机制。     

参梨活力饮对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的探讨参梨活力饮对小鼠免疫功能的影响。方法以正常BALB/c小鼠(SPF级)作为研究对象,灌胃给予参梨活力饮14天后,在细胞、分子水平上,利用流式细胞术检测小鼠脾细胞中CD3+、CD4+/CD8+T细胞;DTH免疫法检测小鼠CD4+T淋巴细胞的活性;吞噬中性红试验检测小鼠腹腔活化巨噬细胞的功能;MTT法检测小鼠脾脏NK细胞的活性;ELISA法检测小鼠血清中抗体的含量;3H-TdR掺入法检测参梨活力饮体外对小鼠脾细胞增殖的影响。通过对这一系列的相关免疫学指标的测定,研究参梨活力饮对小鼠免疫功能的影响。结果参梨活力饮能增加CD4+T淋巴细胞活性;能有效增强小鼠腹腔活化巨噬细胞的功能;有效提高小鼠脾脏NK细胞的活性;对于B淋巴细胞分泌抗体的功能有一定的促进作用;1∶8、1∶16、1∶32浓度的参梨活力饮在体外能有效的刺激小鼠脾细胞的增殖,并呈梯度依赖性。结论参梨活力饮具有增强小鼠免疫功能作用。     

灵芝孢子油对小鼠T淋巴细胞功能影响浅释

[目的]观察灵芝孢子油对小鼠T淋巴细胞功能的影响。[方法]测定灵芝孢子油对小鼠T淋巴细胞亚群的含量变化、IL-2的活性和ConA诱导的脾淋巴细胞的增殖反应。[结果]灵芝孢子油可显著升高正常小鼠外周血CD4+T细胞比例,降低CD8+T细胞比例,升高CD4+/CD8+比值。可以促进正常小鼠诱生IL-2。促进ConA诱导的脾T淋巴细胞增殖反应。[结论]灵芝孢子油能促进小鼠T淋巴细胞的免疫功能。     

盐藻水提物对小鼠细胞免疫功能的影响

目的:阐明盐藻水提物(WEDS)对小鼠细胞免疫功能的调节作用.方法:以DNCB诱导小鼠迟发性超敏反应(DTH),80和250mg·kg-1环磷酰胺(Cy)分别诱导小鼠DTH反应增强和减弱模型,观察不同剂量的WEDS对小鼠DTH反应的影响;以0.6%巯基乙醇酸钠诱生小鼠腹腔巨噬细胞,观察不同剂量的WEDS对小鼠腹腔巨噬细胞生成IL-1的影响;以Con A诱导T淋巴细胞增殖,观察不同浓度的WEDS体外对T淋巴细胞增殖的影响.以Con A诱导T淋巴细胞增殖,观察WEDS不同剂量、不同作用时间体内对T淋巴细胞增殖和IL-2生成的影响.结果:剂量为100,200和300mg·kg-1·d-1的WEDS对Cy诱导的小鼠免疫功能的增强和减弱均有显著的下调和提升作用;浓度为125～500μg·mL-1的WEDS对腹腔巨噬细胞分泌IL-1有显著的促进作用,超出上述范围之外浓度的WEDS对腹腔巨噬细胞分泌IL-1的促进作用显著减弱;浓度为62.5μg·mL-1的WEDS体外对T淋巴细胞增殖有显著的促进作用;剂量为100,200和300mg·kg-1·d-1的WEDS能显著促进Con A诱导的小鼠T淋巴细胞增殖、IL-2的分泌,其中200mg·kg-1·d-1的促进作用最为显著.结论:WEDS对小鼠的细胞免疫功能具有双向调节作用.