血液制品病毒灭活／去除技术平台的建立与应用

目的：建立血液制品病毒灭活／去除技术并应用于血液制品的病毒灭活／去除工艺验证。方法建立指示病毒库以及S／D处理法、低pH孵放法、干热法、巴氏消毒法、纳米膜过滤法等血液制品病毒灭活／去除技术,采用细胞病变法测定病毒滴度,Spearman和Karber法计算病毒滴度,病毒滴度降低量（ LRV）≥4判为有效,对企业的血液制品样品进行病毒灭活／去除验证。结果 S／D处理法和低pH孵放法可有效灭活有包膜指示病毒,干热法和巴氏消毒法可有效灭活有、无包膜指示病毒,纳米膜过滤法可在一定过滤量范围内去除PPV指示病毒。结论所建立的血液制品病毒灭活／去除技术可用于血液制品的病毒灭活／去除工艺验证,以提高血液制品的病毒安全性。     

扩增我国登革2型病毒全长cDNA分子的融合PCR方法

目的：建立扩增登革2型病型基因组全长cDNA的融合PCR法，为深入探讨病毒基因的结构与功能提供有效的技术途径，方法：根据我国登革2型病毒D2－43株列设计引物，首先采用长链RT－PCR技术扩增病毒基因组5‘及3‘半分子，然而以阗分子采用融合PCR法将两个半分子建成全长cDNA分子，为进一步证实所构建全长cDNA分子的特异性，再以融合PCR产物为模板扩增5‘非编码区序列，与pGEM-T载体连接，在377A型自动测序仪进行序列分析，结果：通过对逆转录反应及PCR扩增条件的优化，建立了制备大片段cDAN及构建全长cDNA分子的融合PCR方法，扩增的我国登革2型病毒的5‘及3‘半分子的半度均为5kb左右，采用融合PCR方法制备的全长cDNA长约11kb，与预期大小一致，非编码区测序结果表明扩增产物为D2－43所特有，结论：所建立的融合PCR方法是构建登革闰因组全成cDNA的有效技术。     

亚甲蓝/光化学法灭活血浆中的SARS冠状病毒

目的：探讨亚甲蓝／光化学法灭活人血浆中SARS冠状病毒(SARS-CoV)的效果。方法：从SARS患者血清中分离出冠状病毒，经VeroE6细胞增殖后将病毒加入含有不同浓度亚甲蓝的人血浆中，再用亚甲蓝／光化学法处理不同时间，取样接种细胞，观察细胞病变作用。结果：在激发光源照度为40000lx条件下，经1μmol/L的亚甲蓝作用30min可灭活血浆中6．5lgTCID50/ml的SARS-CoV，经5μmol/L的亚甲蓝作用3min可灭活上述滴度病毒。结论：亚甲蓝／光化学法能够灭活血浆中的SARS-CoV。     

五种出血热病毒重组酶聚合酶等温扩增方法的建立

目的 建立五种出血热相关病毒,即扎伊尔型埃博拉病毒、苏丹型埃博拉病毒、马尔堡病毒、拉沙病毒和黄热病毒的一步法重组酶聚合酶等温扩增(RPA)技术,为病原体的确定提供现场快速检测方法.方法 通过基因组序列分析,选择每种病毒的特异核酸片段作为检测靶基因,针对靶基因序列设计RPA检测的引物和探针;取系列稀释的模板基因进行RPA检测,确定其灵敏性;取出血热相关病毒核酸为模板进行RPA检测,确定其特异性;验证不同温度反应条件(37~42℃)对检测结果的影响.结果 五种出血热病毒的RPA反应体系均可有效扩增靶基因,灵敏性为1.5×102~1.5×103copies/反应,与其他出血热相关病毒的核酸无交叉反应;RPA实验在37~42℃均可实现靶基因的有效扩增.结论 建立了五种出血热病毒的RPA等温扩增体系,该体系反应快速,温度范围宽,适用于现场快速检测.     

人兽共患病病毒基因芯片检测敏感性的测定

目的 测定人兽共患病病毒基因芯片检测的敏感性,为建立高通量的人兽共患病病毒检测基因芯片提供依据. 方法 以黄病毒属的日本脑炎病毒(JBEV)作为检测敏感性的模型,以随机PCR扩增法扩增病毒基因组,然后将扩增产物标记荧光染料后与基因芯片进行杂交,以两种方式测定芯片的敏感性,即最低检出核酸量和最低检出病毒TCID50,量.最后,与特异PCR敏感性比较,评估本芯片的检测敏感性. 结果 人兽共患病病毒基因芯片至少可以检测出300ng的随机PCR产物核酸量.对病毒的检测敏感性可以达到10倍稀释的TCID50病毒量(即每200μl含有105TCID50的病毒量),与特异PCR检测敏感性相当. 结论 人兽共患病病毒芯片技术达到了较高的检测敏感性;建立高通量的人兽共患病病毒检测基因芯片技术具有可行性与实用性.     

用原位逆转录PCR两种扩增系统检测HCV RNA 的对比研究

原位PCR(IS-PCR)技术是能在组织切片或细胞涂片上原位对特定的DNA或RNA进行扩增的一种新技术,是PCR和原位杂交两种技术相结合的产物.与原位杂交相比,由于先对待测基因片段进行扩增,因而具有更高的灵敏度,可以检测出原位杂交所检不出的单拷贝、低拷贝(20bp)基因,能将敏感性提高50～100倍,同时又具有原位杂交良好的定位能力.间接法IS-PCR是目前应用最广泛的靶序列原位扩增技术,其所用引物和dNTP都不带标志,扩增结束后,再用原位杂交技术检测特异性扩增产物.与直接法相比较,虽然操作复杂,但是扩增效率高,更重要的是特异性强,假阳性率低,这是因为原位杂交所用的探针可特异性地检出扩增产物中的靶序列,这样,即使扩增产物中有非靶序列成分,也不会呈阳性反应,因而提高了原位PCR的特异性.原位逆转录PCR(IS-RT-PCR)是结合逆转录反应和PCR扩增检测细胞内低拷贝mRNA的方法.以mRNA为模板,在逆转录酶催化下合成cDNA,再以cDNA为模板,用PCR对靶序列进行扩增,然后进行IS-PCR检测RNA常用方法,并已成功用于检测丙型肝炎组织的HCV RNA.由于丙型肝炎是RNA病毒,不能直接进行PCR扩增,需经逆转录成cDNA方可扩增,称之为原位逆转录PCR.目前常用的逆转录酶有两种:禽类成髓细胞性白血病病毒(AMV)和莫罗尼鼠类白血病病毒(MMLV),在实际工作中发现两种酶系统存在着较大的差异,故此,对两种系统的酶用不同浓度在原位PCR中的HCV RNA逆转录扩增的灵敏度进行研究与探索. 　　……     

次氯酸钠消毒剂灭活新冠病毒的实验研究

目的 评估新冠病毒(SARS-CoV-2)对次氯酸钠消毒剂的敏感性,为新冠病毒疫情防控中合理使用次氯酸钠消毒剂提供依据.方法 购买3个品牌84消毒液,用碘量法测定有效氯含量,稀释成不同的浓度,分别取200μl与等量滴度为(5.82±0.14)lgTCID50/ml的新冠病毒(BetaCoV/Beijing/AMMS01...     

通过环介导恒温扩增技术检测空肠弯曲杆菌

目的 建立基于DNA环介导恒温核酸扩增法(LAMP)快速检测空肠弯曲杆菌.方法 以空肠弯曲杆菌马尿酸酶基因(hipO基因)为靶序列,设计6套特异性引物进行LAMP反应,通过比较扩增效率筛选出最佳引物用以快速检测空肠弯曲杆菌.对检测方法的特异性进行验证,敏感性与PCR法比较.结果 实时浊度仪监测反应结果表明,LAMP反应在62℃恒温条件60 min 内完成;如果在反应前添加钙黄绿素与氯化锰混合液(FD),黄绿色的阳性结果明显区别于橙色阴性结果.LAMP法最低检出限为6.97×102拷贝/μl,敏感性为PCR法(6.97×103拷贝/μl)的10倍.结论 LAMP法用于快速检测空肠弯曲杆菌具有检测过程简单、实验装置简便、反应结果判读方便、敏感性高、特异性强等特点,特别适于现场和基层检疫及医疗机构快速诊断.     

血液制品病毒安全性控制措施研究进展

血液制品是以健康人血浆为原料生产制备的一种特殊“药品”,自20世纪80年代经血液制品传播人类免疫缺陷病毒事件频发以来,如何确保血液制品病毒安全性倍受关注。经过数十年的努力,目前各国均形成了严密体系,通过多种预防控制措施确保血液制品的病毒安全性,包括原料血浆的控制、生产过程中的病毒灭活／去除处理、严格遵守药品生产质量管理规范等。未来,新发传染病病原体将对血液制品的病毒安全性造成新的威胁,因此需不断研究新的应对措施。     

锚定多重PCR技术的建立及其在核酸相对分子质量标准制备中的应用

目的利用5＇端锚定引物及多重聚合酶链反应（PCR）技术建立高效、特异性扩增核酸片段的方法,并探讨其在核酸相对分子质量（Mr）标准（DNA标志物）制备中的应用。方法针对常用的pMD19-T载体（2692 bp）序列,利用命令行程序pd4marker.py,结合Primer3及多因素引物特异性评估软件MFEprimer,设计5＇端锚定的上游引物和7对扩增不同目的片段的下游引物;其次,以转化有pMD19-T载体的大肠杆菌DH5α菌液为模板,分别进行一至七重PCR扩增;并将扩增产物经2%琼脂糖凝胶分离及凝胶成像仪采集图像分析;最后,评估该方法在核酸Mr标准制备中的应用。结果制备了特异性较好的一至七重PCR扩增产物,可针对不同实验目的进行不同核酸Mr标准的制备。结论建立了一种快速、特异性扩增核酸片段的锚定多重PCR方法,可根据不同实验目的,快速制备出不同Mr标准大小的核酸片段,进一步拓展了PCR技术的应用范围。     

海马头部浅沟消失对海马硬化诊断价值的探讨

目的　探讨海马头部浅沟消失对海马硬化的诊断价值。方法　对 18例经组织学检查证实的海马硬化患者的MRI检查资料和 18例年龄相匹配的对照组进行回顾性分析 ,观察海马头部浅沟的显示情况、海马头部大小和信号改变。结果　 18例海马硬化患者中 ,16例硬化侧海马头部浅沟消失 ,1例硬化侧海马头部浅沟明显变浅 ,几乎消失 ,1例硬化侧海马头部浅沟存在。硬化侧海马头部均有萎缩 ,并在T2 WI和液体衰减恢复 (FLAIR)成像呈高信号。海马头部浅沟消失对海马硬化诊断的敏感性为 88.9% ,特异性为 10 0 %。结论　海马头部浅沟消失是诊断海马硬化的一个可靠征象 ,结合患侧海马有萎缩性改变和T2 加权成像信号增高 ,可肯定诊断海马硬化。     

Study of age of fusion of hyoid bone

The present study was conducted to determine the age of fusion of greater cornua with the body of hyoid bone. Age of fusion of hyoid bone can help in determining the age of an individual, especially of unknown dead bodies where only skeletal remains are available. A victim of compression of neck will more likely have fracture of hyoid bone if his hyoid bone is fused. Indian authors have reported that the fusion of hyoid bone occurs after 40 years of age. Studies done by foreign workers observed that hyoid bone fused at an earlier age (30-40 years). A total of 170 excised hyoid bones from dead bodies belonging to the age group of 20-65 years were studied. Fusion occurred earlier in females as compared to males by about 5 years. The mean age of unilateral and bilateral fusion in males was 38.25 and 53.16 years, respectively. The mean age of unilateral and bilateral fusion in females was 38.00 and 48.50 years, respectively. All the hyoid bones were fused after the age of 60 years. No significant differences were found between the fusion on right and left side.     

湿润烧伤膏治疗婴儿湿疹的临床疗效观察

目的观察、探讨湿润烧伤膏(MEBO)治疗婴儿湿疹的临床疗效。方法将84例婴儿湿疹患儿随机分为治疗组(44例)和对照组(40例),治疗组外涂湿润烧伤膏治疗,对照组外涂湿疹膏治疗,连续治疗1周后,观察两组疗效。结果治疗组有效率为97.73%,对照组有效率为82.50%;两组疗效经秩和检验,差异具有统计学意义(P0.05);随访1个月,治疗组未见复发,对照组有2例患儿复发。结论湿润烧伤膏治疗婴儿湿疹疗效好,无毒副作用,安全可靠。     

延迟性脾破裂误漏诊原因分析

目的探讨延迟性脾破裂误漏诊原因和预防措施.方法回顾性分析总结12例延迟性脾破裂中的诊断和误漏诊的经验与教训.结果本组延迟性脾破裂的误漏诊5例(41.66%).对多发伤与脾破裂并存可能认识不足,外伤史轻微或伤员隐瞒外伤史,缺乏腹痛-缓解-突然再腹痛的典型病史,缺乏“对冲性脾破裂”力学分析和整体化诊断思路等为其误漏诊的主要原因.结论详细的外伤史和全面系统检查,重视腹以外多发伤掩盖腹内脏器伤及延迟性脾破裂可能.确立外伤-腹内脏器伤-脾破裂整体化诊断思路.不间断地辅以B超检查脾形态学变化和腹内有无积液,腹腔穿刺确定有无血腹、X线胸腹部检查观察左侧胸肋角和膈肌运动情况、必要时CT检查以尽早发现脾包膜下血肿,降低延迟性脾破裂误漏诊率.     

Analysis of the results of the international comparison of activity measurements of a solution of Fe

The results of an international comparison of activity measurements of a solution of ⁵⁵Fe organized by the BIPM in 2005 are reported and analysed. This exercise, which follows the procedures of the CIPM mutual recognition arrangement to update older comparisons, is a renewal of the comparison organized by the BIPM that took place in 1978. A EUROMET comparison was organized in 1996 specifically to compare activity measurements of a ⁵⁵Fe solution by means of liquid-scintillation techniques. Results of these three comparisons are presented and discussed in this paper.

The radionuclide solution was provided by the NPL, which also distributed the samples to the participants. The activity of the ampoules was measured by 16 laboratories using 12 methods producing 25 results. Some general considerations on uncertainty assessments pertaining to the different techniques used are drawn. The outcome of four different estimators is compared from which the presence of at least one outlier can be confirmed. Further measurements should be made to try to reduce the discrepancy between the results. To date the outcome of the present comparison does not show an improvement to that of the 1996 comparison.     

消妇炎胶囊辅料的合理性实验研究

目的确定消妇炎胶囊的辅料及用量。方法以浸膏粉的吸湿率和流动性为考察指标,对加入淀粉、糊精及微晶纤维素3种不同辅料后制得的颗粒进行考察,优选出最佳辅料后,再对最佳辅料的不同用量进行考察。结果加入辅料后,颗粒的抗吸湿能力和流动性都明显改善,其中加入淀粉后,分别在6、12、24、48、60 h测得的吸湿率为2.01%、4.03%、5.98%、6.66%、7.31%,休止角为34.61°,均小于糊精与微晶纤维素,表明加入淀粉颗粒质量最好;每80 g浸膏粉中分别加入30、45、60 g淀粉,综合判定45 g较好。结论每80 g浸膏粉加入淀粉45 g为辅料用量参数,制得颗粒的抗吸湿能力和流动性均好,可节约成本。     

超声对观察椎动脉椎骨段走行的诊断意义

目的探讨超声对观察椎动脉椎骨段走行的诊断价值。方法对162例患者(走行异常者经血管造影或MR I等其他检查证实)的双侧椎动脉走行的二维和彩色血流信号等声像图信息进行回顾性分析,对椎动脉椎骨段走行异常作出诊断及分型。结果(1)超声通过二维或彩色多普勒的血流信号可显示椎骨段椎动脉有无、穿入位置和走行形态。(2)超声根据椎骨段椎动脉的有无、穿入位置和在椎骨段中的走行形态可将椎动脉椎骨段走行异常分为缺如0.6%(2/324),走行变异2.7%(9/324),走行弯曲5.5%(18/324)三大类。结论超声能清晰显示椎动脉椎骨段的有无、穿入位置及走行形态,能对椎动脉椎骨段的走行异常作出分型诊断,在形态学上为临床明确椎动脉的病因提供帮助。     

The value of information of duration of pregnancy in establishment of paternity

Summary In order to get an idea of the value of the information on the duration of pregnancy in establishment of paternity, 511 records from 17 lower courts in Sweden were studied.It was found that when a blood group investigation has been performed, only a small number of cases remain where the paternity claim should be rejected by a court of law for the reason that the period of pregnancy has been extremely long or short.It was shown that only very extreme probability values (percentages) should give reason for rejection of paternity claims if a larger risk of error is to be avoided. The risk is somewhat smaller with long pregnancies than with short ones.The results of this study emphasize the difficulties involved in probability assessment in paternity suits.This report was presented at the Seventh International Medical-Legal Seminar, Stockholm 1971.     

武警某院急诊科抗菌药物处方分析

 目的 了解武警某院急诊科抗菌药物的使用情况。方法 提取急诊科2015年下半年的处方,遴选出使用抗菌药物(除去眼膏、外用膏药及中成药)的处方。对抗菌药物处方进行分类统计及分析, 包括使用抗菌药物的种类及比例、使用居前6位的抗菌药物、抗菌药物的联合使用情况等。结果 在2015年下半年急诊处方中有抗菌药物处方3872张,占处方总数的22.3%。使用抗菌药物构成比中,喹诺酮类药物使用频率最高,占42.9%。使用居第一位的药物是左氧氟沙星,占39.8%。单联处方77.86%,二联处方22.14%,无三联处方。结论 2015年下半年我院急诊科抗菌药物使用符合卫生部抗菌药物使用规定,但有些方面还需要进一步改进。     

抑郁意象特征因子结构探索

 目的 探索抑郁意象特征问卷的因子结构及有效性,为抑郁情绪判定和测量提供依据。方法 通过文献分析、专家小组讨论确定抑郁意象特征因子56项并编制初测问卷施测于109名被试,对初测数据进行项目分析和探索性因素分析,确定22个抑郁意象特征的正式施测问卷,并施测于另一组109名被试,对数据进行因子选取及主成分分析,而后进行方差最大正交旋转法进行因子旋转,获得主成分数目特征值>1的为因子数目,进行KMO和Bartlett球形度检验分析。结果 在探索性因素分析中,抽取12个项目中特征值>1的因子4个:情绪低落、乐感降低、精力减退和能力下降,共解释总方差的55.18％。验证性因子分析结果为:近似误差均方根(RMSEA)为0.057、χ²值与自由度之比(χ²/df) 为2.134、拟合优度指数(GFI)为0.935、比较拟合指数(CFI)为0.912、不规范拟合指数(NNFI)为0.896。结论 由12个抑郁意象特征问卷构建的四因子结构,数据对模型拟合较好,验证抑郁意象特征四因子模型是合理的,可以作为抑郁情绪判定和测量的依据