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1.
目的 通过对不同储存期血小板源细胞外囊泡(P-EV)的转录组学分析,进而研究胞外囊泡在血小板质量评价及输血治疗中的潜在作用.方法 以二代测序检测P-EV的全转录组,利用生物信息分析预测非编码基因的靶标及功能,实时PCR(RT-PCR)验证表达趋势.结果 通过对不同储存期P-EV变化的非编码RNA(ncRNA)进行测序和生物信息学分析,发现长非编码RNA(lncRNA)MSTRG.31496.1顺式调控血小板活化基因TREML1,lncRNA MSTRG.23185.19反式调控癌症相关基因CXXC4.环状RNA(circRNA)20:47246008|47262428可能通过吸附miR-483-5p,进而逆转由miR-483-5p靶向的癌症相关基因(ARHGAP10、AXIN1、UBAP2)等.通过RT-PCR对血小板活化相关的lncRNA进行验证,发现lncRNA MSTRG.31496.1的表达与测序结果一致.结论 血小板在体外储存过程中分泌的P-EV,包含大量不同变化趋势ncRNA,部分ncRNA与血小板质量变化密切相关,可作为评价血小板质量的新标志物.同时发现了大量以癌基因及抑癌基因为靶点的ncRNA,P-EV的研究为血小板功能研究和质量评价提供了新的研究方向.  相似文献   
2.
尖吻蝮蛇类凝血酶基因的克隆及生物信息学分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
为了获得蛇毒类凝血酶基因,本研究根据不同蛇毒类凝血酶cDNA5’和3’保守性序列设计了引物;通过RT—PCR从尖吻蝮蛇毒腺总RNA中扩增到1个808bp特异性片段,将该cDNA重组到pMD18-T载体中,利用生物信息学的方法对测序结果进行了分析。结果表明:该特异性片段中有一个783bp的开放阅读框架.其编码蛋白质序列与蛇的类凝血酶序列有98.5%的同源性,也具有蛇毒类凝血酶的典型特征。结论:本实验获得了一个新的尖吻蝮蛇类凝血酶基因。  相似文献   
3.
人层黏连蛋白α4链LG2组件单克隆抗体的制备   总被引:1,自引:0,他引:1  
层黏连蛋白(laminin, LN)为基底膜结构成分之一,它参与细胞分化和细胞内信号转导,对细胞的生长、分化和组织的发育和修复有很重要的作用.本研究探讨采用基因免疫技术制备LG2组件的单克隆抗体,为后续实验对LN α 4链LG组件进行体外重组奠定实验基础.  相似文献   
4.
目的:利用巴斯德毕赤酵母表达系统获得重组的人层黏连蛋白LG1-3组件蛋白,为进一步研究LG1-3的结构和功能间的关系奠定基础。方法:利用RT-PCR从人胎盘组织总RNA中扩增LG1-3组件cDNA,并重组入pPICZαA,电转化入毕赤酵母GS115,利用甲醇诱导表达目的蛋白。结果和结论:获得了1 800 bp LG1-3组件cDNA,利用体外定点突变将SacⅠ酶切位点GAGCTC突变为GAGCGC,经SDS-PAGE和W estern印迹检测到相对分子质量为67.48×103的LG1-3组件蛋白的表达。  相似文献   
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