新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织C/EBPβ基因单核苷酸多态性分析

目的:探讨新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织C/EBPβ基因启动子500 bp和外显子区序列的单核苷酸多态性位点。方法:C/EBPβ基因启动子500 bp和外显子区域设计6对引物,使用聚合酶链反应结合DNA测序方法分析15例维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织和2例子宫颈正常组织C/EBPβ基因序列。结果:C/EBPβ基因上检测出6个已知SNP位点和3个新发现的或低频的多态性位点,有1例标本检测发现在2091-2092处插入GGCGGCAGC 9个碱基,而在维吾尔族正常子宫颈组织未发现新多态性位点。结论:C/EBPβ基因上新的多态性位点可能与维吾尔族子宫颈鳞癌发生相关。     

REG1a基因单核苷酸多态性与胃癌遗传易感性研究

目的寻找中国汉族人群REG1a基因单核苷酸多态性位点,探讨其基因多态性与胃癌(Gastric Cancer)的关系。方法应用PCR产物测序的方法在中国人群中检测散发性胃癌组(n=183)及对照组(n=204)REG1a基因的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)。结果REG1a基因第929位(T/C)、第1790位(C/G)、第2751位(A/T)发现3个新的SNP位点,其中第929位和第1790位2个位点基因型在胃癌与健康人群的差异具有统计学意义(P<0.05)。结论对特定人群进行测序可有效筛查出候选SNP位点,初步发现REG1a基因的2处单核苷酸多态性与胃癌的发生、淋巴转移和远处转移有一定关系,为后续利用单核苷酸多态性标志进行胃癌风险预测奠定了研究基础。     

先天性甲状腺功能减退症伴甲状腺肿大患儿DUOXA2基因突变研究

目的研究中国山东地区先天性甲状腺功能减退症(congenital hypothyroidism,CH)伴甲状腺肿大患儿双氧化酶成熟因子2(DUOXA2)基因突变类型及特点,为CH的诊断及治疗提供理论依据。方法选取55例CH伴甲状腺肿大患儿和100例正常对照。提取外周静脉血基因组DNA,采用PCR扩增与直接测序的方法,对DUOXA2基因全部外显子进行突变筛查。对发现的SNP位点的基因频率进行χ2检验。结果在1例CH患者中发现1个DUOXA2基因纯合性无义突变(c.C738G)。并在10例CH患儿和13个健康人中发现1个单核苷酸多态性(SNP)位点(rs2576092,IVS4+6CT)。在正常对照中未发现突变。两组的SNP基因频率比较,差异无统计学意义。结论 DUOXA2基因突变率较低,可能不是山东地区CH伴甲状腺肿大患者的主要病因。     

CFH、CFB基因单核苷酸多态性与中国人老年黄斑变性的相关性研究

目的本实验通过对中国大陆汉族人CFH和CFB基因的多态性进行病例-对照研究。探寻补体旁路途径中相关基因变异与老年黄斑变性(AMD)的发生关系。方法收集200例湿性AMD患者,120例干性AMD患者,500例匹配的正常对照,采用SNaPshot方法对其CFH基因上的7个单核苷酸多态性位点(SNP)和CFB基因上两个SNP位点进行基因型检测,并进行关联分析和单倍体型分析。结果 CFH基因中的4个SNP位点与中国汉族人的湿性AMD有显著的相关性:rs3753394(P=0.0189),rs800292(P=0.0135),rs1061170(P=0.0036)和rs1329428(P=0.0054),该4个位点组成的单倍体型CATA对湿性AMD起到保护作用,其P=3.33E-05,OR=0.569(95%CI:0.434～0.746)。与目前报道的其他人群不同,CFH基因上的rs7535263、rs2274700和rs1410996这3个SNP在中国汉族人中未能发现与湿性AMD有相关。所有研究的CFH基因的SNP与中国人干性AMD无显著相关性。CFB基因单核苷酸多态性与中国人AMD的发生无关。结论通过实验,我们可证实CFH基因中的rs3753394、rs800292、rs1061170和rs1329428位点与中国汉族人的湿性AMD有显著的相关性;而rs7535263、rs2274700和rs1410996这3个SNP在中国汉族人中未能发现其与湿性AMD有相关;同时CFB基因与中国人AMD的发生无关。干性AMD与CFH、CFB基因单核苷酸多态性无关。     

醛固酮合成酶基因单核苷酸多态性与心房颤动的关系

目的 探讨醛固酮合成酶(CVP11B2)基因的单核苷酸多态性与中国汉族人群非家族性心房颤动(房颤)的关系.方法 采用1:1配对的病例对照研究方法,选择297例住院房颤患者作为病例组,同时期、同病房的297例非房颤患者作为对照组.应用GenomeLabTM SNPstream基因分型系统,对CYP11B2基因的两个标签单核苷酸多态位点(tSNPs-rs4545、rs3802228)进行多态性检测.结果 两位点多态性的分布均符合Hardy-Weinberg平衡.病例组患者左心房直径(LA)显著高于对照组(P<0.0001),两个tSNPs的基因型频率及等位基因频率分布在病例组和对照组的差异均无统计学意义,但在病例组3'端非编码区(3'UTR)的rs3802228位点中,具有GG基因型患者的LA显著高于其他型者.多元logistic回归模型在校正年龄、吸烟、BMI、高血压之后,未发现CYP11B2基因两位点基因多态性与房颤发病相关联.两个位点间也不存在连锁不平衡.结论 CYP11B2基因的rs4545tSNPs位点多态性可能与房颤无相关性,位于3'端非编码区的rs3802228tSNPs位点可能与心房结构重构有关.     

帕金森病Parkin,LRRK 2基因序列变异研究

目的 探讨散发性早发性帕金森病患者遗传易感基因突变的形式和分布及易感基因突变在PD发病中的可能作用.方法 病例组由23例散发性早发帕金森患者组成,10例对照组.以基因组DNA为模板,扩增Parkin基因的第1、4、6号外显子和LRRK 2基因的第31号外显子.观察PCR产物测序后的突变情况.结果 发现样本中存在突变以及单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP).在一例患者Parkin基因Exon6上发现735ntT→C,对应的密码子TGT212CGT,翻译的氨基酸C212R,国内罕有报道.另一例患者Parkin基因Exon6上发现突变833ntG→C,导致第244密码子同义突变.结论 Parkin基因外显子4、6的突变可能是我国散发性早发PD患者的致病原因之一.     

p53基因第4外显子第72密码子多态性与中国女性宫颈癌相关性的Meta分析

目的评价p53基因第4外显子第72密码子G/C多态性与中国女性宫颈癌的相关性。方法检索中国知网、万方数据库、维普数据库、中国生物医学文献数据库、Pub Med、EMBase、the Cochrane Library和Wan Fang Data数据库,收集国内外关于p53基因第4外显子第72密码子G/C多态性与中国女性宫颈癌相关性的病例对照研究文献,筛选符合纳入标准的研究,根据研究对象是否感染人乳头瘤病毒(HPV)分为2个亚组,并对相关数据进行Meta分析。结果共纳入13篇文献,调查宫颈癌患者1 780例及对照1 517例。Meta分析显示对于非HPV感染亚组,具有基因型G/G、基因型G/C和等位基因G的中国女性,与具有基因型C/C(OR=0.980,95%CI:0.558~1.723)、基因型G/C(OR=0.843,95%CI:0.556~1.277)和等位基因C(OR=1.070,95%CI:0.789~1.449)的中国女性发生宫颈癌的风险相当;同样对于HPV感染亚组,具有基因型G/G、基因型G/C和等位基因G的中国女性,也与具有基因型C/C(OR=0.891,95%CI:0.213~3.722)、基因型G/C(OR=1.351,95%CI:0.942~1.937)和等位基因C(OR=0.981,95%CI:0.493~1.951)的中国女性发生宫颈癌的风险相当。所纳入文献不存在发表偏倚,本研究Meta分析结果稳定。结论目前尚未发现p53基因第4外显子第72密码子G/C单核苷酸多态性与中国女性宫颈癌的发病有关。     

醛固酮合成酶基因单核苷酸多态性与心房颤动的关系

目的 探讨醛固酮合成酶(CVP11B2)基因的单核苷酸多态性与中国汉族人群非家族性心房颤动(房颤)的关系.方法 采用1:1配对的病例对照研究方法,选择297例住院房颤患者作为病例组,同时期、同病房的297例非房颤患者作为对照组.应用GenomeLab~(TM) SNPstream基因分型系统,对CYP11B2基因的两个标签单核苷酸多态位点(tSNPs-rs4545、rs3802228)进行多态性检测.结果 两位点多态性的分布均符合Hardy-Weinberg平衡.病例组患者左心房直径(LA)显著高于对照组(P<0.0001),两个tSNPs的基因型频率及等位基因频率分布在病例组和对照组的差异均无统计学意义,但在病例组3'端非编码区(3'UTR)的rs3802228位点中,具有GG基因型患者的LA显著高于其他型者.多元logistic回归模型在校正年龄、吸烟、BMI、高血压之后,未发现CYP11B2基因两位点基因多态性与房颤发病相关联.两个位点间也不存在连锁不平衡.结论 CYP11B2基因的rs4545tSNPs位点多态性可能与房颤无相关性,位于3'端非编码区的rs3802228tSNPs位点可能与心房结构重构有关.     

小儿热性惊厥与IL-6基因多态性的关联性研究

目的:探讨白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)基因-572C/G、-174G/C多态性与小儿热性惊厥(fe-brile seizures,FS)的关联。方法:选择2009年6月～2010年6月热性惊厥患儿50例为FS组,同期门诊健康体检儿童30例为对照组(所有研究对象均为汉族,无血缘关系)。采用PCR/RFLP对病例组与对照组小儿的IL-6基因的-572、-174位点基因进行分析。结果:IL-6基因-572位点基因型和等位基因频率在FS组与对照组间分布差异有统计学意义,FS组-572 GG基因型和G等位基因频率均显著高于对照组(P<0.05);携带G等位基因个体患FS的风险约是C等位基因型个体的7.64倍(95%CI:2.89～18.13,P<0.05);IL-6基因启动子-174位点未发现基因多态性。结论:IL-6基因-572C/G多态性可能是中国汉族儿童FS发病的遗传危险因素之一。     

钙粘蛋白23基因多态性与噪声性听力损失易感性的关系研究

目的探讨钙粘蛋白23基因(CDH23)多态性与噪声性听力损失之间的关系。方法采用横断面流行病学研究方法,对194名噪声暴露作业工人进行调查和听力测试,按听力学评价的结果将其分为听力损失组和听力正常组;用多聚酶链反应-限制性片断长度多态性(PCRRFLP)方法检测其CDH23基因上4个单核苷酸位点的多态性。结果CDH23基因的rs1227049和rs1227051两个位点的基因型分布及其等位基因频率在93名噪声性听力损失与101名听力正常工人之间差异无显著性(P>0.05);而rs3802711位点和第七外显子的末位单核苷酸位点的基因型分布及其等位基因频率在两组之间差异均有极显著性(P<0.01)。用多元Logistic回归分析对两组间年龄、性别、吸烟状况、爆震史和累积噪声暴露量等因素进行校正后,发现rs1227049位点的CC基因型与GG基因型相比噪声性听力损失的危险度显著升高,调整OR值为3.865(95%可信区间为1.076～13.886);rs3802711位点的TT基因型与CT基因型相比噪声性听力损失的危险度有极显著性升高,调整OR值为6.088(95%可信区间为2.485～14.917);第七外显子的末位单核苷酸位点的GG基因型与AG基因型相比噪声性听力损失的危险度也有极显著性升高,调整OR值为5.769(95%可信区间为2.745～12.121)。结论钙粘蛋白23基因多态性可能在噪声性听力损失的发病过程中起重要作用,携带rs1227049CC基因型、rs3802721TT基因型和第七外显子末位单核苷酸位点GG基因型的个体对噪声性听力损失更为易感。     

先天性甲状腺功能减退症患儿双氧化酶1基因突变研究

目的 研究山东地区先天性甲状腺功能减退症(CH)伴甲状腺肿大患儿双氧化酶1(DUOX1)基因突变类型及特点,为CH的诊断及基因治疗提供理论依据。方法 选取43例经新生儿筛查确诊为CH伴甲状腺肿大患儿及100例正常对照新生儿,提取CH患儿及正常新生儿外周血基因组DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)扩增及一代测序法(Sanger测序法),对DUOX1基因全部外显子进行基因突变检测,结合测序结果及生物信息学数据,分析DUOX1基因是否存在突变,并对发现的单核苷酸多态性(SNP)位点的基因频率进行χ²检验。结果 在43例CH伴甲状腺肿大患儿及100例正常对照新生儿中,均未发现DUOX1基因突变。但在外显子区发现了2个SNP位点(rs16939752,c.3076T>C;rs1706804,c.3228A>G),前者为错义突变(Cys→ Arg),后者为同义突变(Thr→Thr);内含子区发现了1个SNP位点(rs2020216,IVS8+129C>T)。经统计,本文实验组患儿与正常对照组新生儿SNP的基因频率比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。结论 山东地区CH伴甲状腺肿大患儿中,DUOX1基因突变率低,可能不是该地区CH伴甲状腺肿大的主要病因。     

hsp60基因多态性在中国汉族人中的分布

目的 检测中国汉族人热休克蛋白60（heat shock protein 60,hsp60）基因调控区和编码区的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）,寻找hsp60基因的遗传标记.方法 采用分片段扩增直接测序的方法检测60名汉族人hsp60基因的5＇侧翼区、部分编码区和内含子区,将测序结果与美国国家生物技术信息中心（National Center for Biotechnology Information,NCBI）及国际人类基因组单体型图计划（International HapMap Project,HapMap）中日本人、欧洲人及非洲人的序列进行对比,确定中国汉族人群hsp60基因SNPs的位置、类型和频率.结果 在hsp60基因2号外显子区发现1个新的同义SNP,位于2号染色体198189061位,最小等位基因频率（the minor allele frequency,MAF）为0.025.检测区域内包含11个已报道的SNPs,7个未在研究人群中检出;4个被检出的SNPs为rs1116734、rs3749095、rs1050347、rs8539,MAF分别为0.51、0.30、0.29、0.49;rs1116734、rs1050347、rs8539在日本人和中国汉族人群中的分布相似;rs3749095在中国汉族人中较常见,在日本人种中未检出;rs8539在欧洲及非洲人中的分布与在中国人的分布差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 中国汉族人群hsp60的SNPs分布有别于其他人种,rs1116734、rs3749095、rs1050347、rs8539是hsp60基因在中国汉族人群中较常见的SNPs,可为Hsp60蛋白功能研究及hsp60基因与疾病关联研究候选SNPs的选择提供科学依据.     

Assessment of the mutations of p53 suppressor gene and Ha- and Ki-ras oncogenes in malignant mesothelioma in relation to asbestos exposure: a study of 12 American patients

In our previous study, we found no genetic alteration in exons 1 and 2 of Ha- and Ki-ras oncogenes nor in exons 5 to 9 of the p53 suppressor gene in seven Japanese malignant mesothelioma patients exposed to asbestos. To examine further whether malignant mesothelioma due to asbestos has genetic alterations in the p53 suppressor gene and in Ha- and Ki-ras oncogenes, we analyzed point mutations of these genes in paraffin embedded operative open biopsied samples of the primary tumor of malignant mesothelioma in twelve American patients. The genetic analysis was conducted by the PCR-SSCP (polymerase chain reaction single-strand conformation polymorphism) method in all patients and by sequencing analysis of DNA bases in the two patients with suspected gene mutation. The analysis of the p53 suppressor gene showed an amino acid converting mutation of exon 7 in one patient and a polymorphism of exon 6 in another patient; the former patient was a heavy smoker with a biphasic cell type. No genetic alteration was found in exons 1 and 2 of Ha- and Ki-ras oncogenes in any of the patients. The results suggest that the effects of asbestos on the p53 suppressor gene and Ha- and Ki-ras oncogenes in malignant mesothelioma are negligible. Further studies are needed to examine whether the observed mutation of the p53 suppressor gene is due to the combined effects of asbestos and smoking or to other unknown factors.     

程序化健康教育对预防婴幼儿单纯性热性惊厥再发的影响

目的:探讨程序化健康教育对预防小儿热性惊厥复发的意义。方法:制定热性惊厥健康教育工作流程,对观察组健康教育前后2次进行问卷测评,随访观察组及对照组惊厥再发率。结果:家长受教育前后对热性惊厥健康知识了解程度和两组热性惊厥再发生率有显著差异(P<0.05)。结论:程序化健康教育能提高患儿家长对预防小儿单纯性热性惊厥再发的认识,使其加强预防措施,从而降低了小儿单纯性热性惊厥的再发率。     

热性惊厥患儿血清胰岛素样生长因子-1水平的变化

目的:探讨热性惊厥患儿的血清胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平和临床意义。方法:用放免法检测10例热性惊厥患儿和对照组20例健康儿童的血清IGF-1水平。结果:热性惊厥患儿的血清IGF-1水平显著高于对照组(P<0.01)。结论:热性惊厥患儿急性期血清IGF-1升高,证明存在中枢神经细胞损伤。     

家族性高胆固醇血症患者低密度脂蛋白受体基因新突变

目的 分析一家族性高胆固醇血症(FH)家系低密度脂蛋白受体(LDLR)基因突变类型,明确其突变位点,探讨LDLR基因突变类型与其临床表型的关系以及FH发病的分子病理学机制.方法 先证者及家系成员进行血脂测定,并行心电图、心脏和全身大血管彩色多普勒超声等检查,之后采用聚合酶链反应(PCR)联合变性高效液相色谱(DHPLG)技术结合扩增产物直接序列分析,检测LDLR基因启动子和全部18个外显子片段,结果与GenBank公布的该基因正常序列比对,找出突变,并检索FH突变数据库(www.ucl.ac.uk/fh).采用PCR结合限制性内切酶技术,检测载脂蛋白B100(ApoB100)基因Q3500R位点突变,以排除家族性ApoB100缺陷症(FDB).结果 先证者LDLR基因第13外显子存在c.1864 G→A错义突变,使得所表达的氨基酸由天冬氨酸→天冬酰胺(Asp622Asn);该外显子同时发现c.1959 C→T(Val 653Val)同义突变.在其母亲及外祖母LDLR基因中均发现上述两种突变,其父亲及外祖父也发现Val653Val的同义突变.克隆测序验证上述两种突变.结论 国内首次发现Asp622Asn突变;该突变可能是FH发病的分子病理学基础,并导致其严重的临床表型.PCR联合DHPLC技术可用于FH可疑人群的确诊.     

血钠水平预测小儿单纯热性惊厥再发的实用价值

目的 探讨单纯性热性惊厥及惊厥再发与血钠浓度的关系;支持或否决血钠生化分析在热性惊厥及惊厥再发的临床价值。方法 从2004年2月到2005年8月观察、分析了160例年龄在6月龄～5岁急诊惊厥患儿的血钠水平,其中单次抽搐的单纯性热性惊厥130例,多次抽搐（再发）的单纯性热性惊厥30例,所有患儿均在静脉输液前抽出外周静脉血送血钠生化分析。结果 再发单纯性热性惊厥组比单发单纯性热性惊厥组血钠平均值低,两组间血钠值的比较,统计显示：t=3．6167,P＜0．01,差异有统计学意义。结论 支持国内外大多数学者的观点,即低血钠可能是同一次热性疾病中、24h内惊厥再发的诱因之一,临床上血钠浓度检测应作为热性惊厥病人的常规检查项目。     

石英的人类致癌性在DNA分子水平的证据

收集３６例石英粉尘作业工人肺癌（石英肺癌）的组织石蜡包埋物,提取其 Ｄ Ｎ Ａ,对 ｐ５３基因和 Ｋ ｒａｓ 基因进行了 Ｐ Ｃ Ｒ Ｓ Ｓ Ｃ Ｐ、 Ｐ Ｃ Ｒ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ及 Ｄ Ｎ Ａ 测序分析,发现具有完全有别于普通肺癌的特异基因突变谱。小细胞肺癌的 ｐ５３基因突变多发于第８外显子,腺癌的 ｐ５３基因突变率高。石英肺癌的 Ｋ ｒａｓ 基因突变未见一例发生于普通肺癌突变热点区第１２密码子上,相反发现多处非热点区突变,突变类型以 Ｇ→ Ｃ 突变为主。