复发性生殖器疱疹患者外周血T细胞亚群及Th1/Th2型细胞因子的模式

目的分析复发性生殖器疱疹 ( RGH)患者外周血中 T细胞亚群及 Th1/Th2型细胞因子网络的偏移及其在发病机理中的作用。方法采用三色和双色荧光抗体染色技术经流式细胞仪检测 2 0例 RG H患者和正常对照组外周血 T细胞亚群及 CD4 + T、CD8+ T细胞内 4种细胞因子染色阳性细胞百分率。结果 RGH患者 CD3+ T细胞、CD4 + T细胞、CD4 + T/CD8+ T明显低于正常对照水平 ( P<0 .0 0 1) ;IL- 2、IFN- r、IL- 12阳性细胞百分率均显著降低 (分别为 CD4 + T:P<0 .0 0 1,CD8+ T:P<0 .0 5) ;IL- 4阳性细胞则明显升高 ( CD4 + T:P<0 .0 5,CD8+ T:P<0 .0 0 1)。结论 RGH患者存在 T细胞亚群和 Th1、Th2细胞分泌细胞因子交互作用失衡 ,后者表现为 Th2型细胞因子( IL - 4)产生过多 ,而 Th1型细胞因子 ( IL - 2、IL - 12、IFN - r)产生过少 ,Th1/Th2失衡在 RGH的发病机制中可能具有重要的作用。     

结核感染与发病状态下相关细胞因子、T细胞亚群的变化及临床应用研究

目的 :对结核菌感染免疫应答过程中相关细胞因子、T细胞亚群的变化情况进行观察研究 ,并使之应用于临床。方法 :分别采用ELISA、APAAP、单向琼脂免疫扩散等方法对相关免疫指标进行检测。结果 :结核菌感染者T细胞亚群CD3+T细胞、CD4 +细胞、sIL 2R水平、特异结核循环免疫复合物增高 ;肺结核患者CD4 +T细胞降低 ,IL 2活性下降 ,mIL 2R表达明显降低 ,TNF α水平降低 ,CD8+细胞升高 ,sIL 2R明显升高 ,IL 4、IL 10水平均增高 ,且进展期较好转期更为明显。结论 :IL 2、IL 4、IL 10、TNF α、sIL 2R和T细胞亚群在免疫应答过程中具有重要的作用 ,以上免疫指标可判断结核感染、发病和病情变化情况     

特发性血小板减少性紫癜患儿T细胞免疫功能的变化

目的探讨T淋巴细胞亚群以及Th1/Th2相关细胞因子在特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的变化.方法用PMA、 ionomycin作刺激剂,刺激全血中淋巴细胞表达细胞因子,以monensin阻断细胞因子分泌至胞外,应用两种免疫荧光抗体同时标记淋巴细胞的膜表面特异的分子和表达被阻滞在细胞内的细胞因子,流式细胞仪进行检测和分析.结果 ITP患儿外周血CD4+降低,CD8+升高,CD4+/CD8+降低.ITP患儿IFN-γ血清表达升高,Th1细胞占20.66%±2.82%,IL-4表达降低,Th2细胞占4.55%±2.33%,Th1/Th2的比值为4.78±0.66,明显高于健康儿童的1.43±0.19(P<0.05).结论 ITP患儿T淋巴细胞亚群表达的比例失调,IFN-γ产生增多,IL-4减少,提示辅助性T淋巴细胞亚型(Th1/Th2)失调.     

Th应答模式在慢性HBV感染与治疗过程中的表现

198 6年发现小鼠CD+ 4 T细胞可根据细胞因子分泌情况的不同分为两个亚群 ,即Th1(Thelpcell,辅助性T细胞 )和Th2亚群 ,自此人们开始了对Th应答模式的研究。 1991年Maggi等[1] 在研究人的体外T细胞克隆时亦发现了Th1和Th2的存在 ,其分泌形式与小鼠大致相似 ,还证明在人体内也存在相同情况[2 ] 。1　Th应答模式在慢性乙肝感染过程中的表现Th1主要分泌IL 2、IFN γ、TNF β等细胞因子 ,从而诱发细胞免疫反应 ,诱导迟发型超敏反应 ;Th2主要产生IL 4、IL 5、IL 6、IL 10、IL 13等细胞因子 ,刺激B细胞增生 ,产生相应抗体 ,诱发体液免…     

外周血T细胞亚群及Th17细胞/Treg细胞比值在乙肝病毒感染者诊断中的价值

目的:探讨外周血T细胞亚群及Th17细胞/Treg细胞比值在乙肝病毒感染者诊断中的价值。方法:选取193例乙肝病毒感染者,包括无症状HBV携带者47例,急性乙肝42例,慢性乙肝63例,原发性肝癌41例,同期,选取健康者45例作为正常对照组。利用流式细胞仪对外周血T淋巴细胞亚群、Th17细胞和Treg细胞进行检测。结果:与正常对照组相比,急性乙肝、慢性乙肝和原发性肝癌外周血CD3~+、CD4~+和CD4~+/CD8~+均降低,而CD8~+升高(P<0.05);与急性乙肝相比,慢性乙肝和原发性肝癌外周血CD3~+、CD4~+和CD4~+/CD8~+均降低,而CD8~+升高(P<0.05);与慢性乙肝相比,原发性肝癌外周血CD3~+、CD4~+和CD4~+/CD8~+均降低,而CD8~+升高(P<0.05);与正常对照组相比,慢性乙肝和原发性肝癌外周血Treg细胞、Th17细胞和Th17/Treg比值均升高(P<0.05);与慢性乙肝相比,原发性肝癌外周血Treg细胞、Th17细胞和Th17/Treg比值均升高(P<0.05);Pearson相关分析显示,不同乙肝感染组患者外周血Treg和Th17细胞呈正相关(r=0.410,P<0.05),不同组患者外周血CD4~+/CD8~+比值和Th17/Treg比值呈负相关(r=-0.357,P<0.05)。结论:随着乙肝患者病情进展,外周血CD3~+、CD4~+和CD4~+/CD8~+均降低,而CD8~+升高,且Th17/Treg比值均升高,外周血T细胞亚群及Th17/Treg比值监测可为评估乙肝患者病情及预后提供参考。     

CD4+T细胞在抗肿瘤过继性免疫治疗中作用的分析

目的：观察并分析CIK细胞中CD4+T细胞的Th1/Th2亚群分布情况。方法采用体外试验大规模扩增CIK细胞,采用磁珠法对其中的CD4+T细胞进行纯化处理。然后采用荧光定量RT-PCR、ELISA以及胞内染色法对培养前后Th1/Th2类细胞因子的基因表达变化和分泌量、Th1/Th2细胞亚群定的比例进行检测。结果富集CD4+T细胞的纯度高达96%,在CIK细胞中,Th2亚群较PBMC显著降低,而Th0和Th1亚群的比例显著升高（P<0.05）。在CD4+TCIK细胞中,TGF-β和IL-10等Th2类细胞因子的分泌量明显降低（P<0.05）,而IFN-γ和IL-2等Th1类细胞因子的分泌量明显增高（P<0.05）。结论CIK细胞中的CD4+T细胞具有明显的Th1优势,有利于推动抗肿瘤免疫反应的发展。     

过敏性腹泻小鼠大肠黏膜中T细胞亚群的表达与Th1/Th2型细胞因子的关系

目的 检测小鼠过敏性腹泻模型大肠黏膜中T细胞亚群的表达和血清中Th1型细胞因子(IFN-γ)、Th2型细胞因子(IL-4)和OVA-IgE水平,探讨腹泻小鼠大肠黏膜中T细胞亚群的表达特点与Th1/Th2型细胞因子的关系.方法 雌性BALB/c小鼠20只随机分成两组,即对照组和实验组.采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中IFN-γ,IL-4及OVA-IgE的水平,取大肠组织HE染色观察大肠组织病理改变,免疫组织化学染色观察T细胞亚群的表达情况.结果 与对照组相比,实验组小鼠非特异性炎症反应明显,上皮不规则排列,腺区存在大量白细胞(WBC)浸润,固有层可见大量嗜酸性粒细胞(EOS)浸润.CD3,CD4,CD8免疫组织化学染色显示,与对照组相比,肠黏膜固有层可见大量CD3+,CD4+,CD8+细胞.实验组IL-4,OVA-IgE分泌水平明显升高,IFN-γ分泌水平和IFN-γ/IL-4比值显著降低(P<0.01).嗜酸粒细胞百分比与CD4+/CD8+比值呈显著正相关(P<0.05).结论 过敏性腹泻小鼠大肠黏膜局部CD4+T细胞亚群明显增加,CD4/CD8细胞比例失衡,并与Th1/Th2型细胞因子向Th2型漂移及EOS浸润程度相关.     

高原地区T淋巴细胞亚群中CD分子百分率和IL-2水平变化在COPD发病中的意义

目的 探讨高原地区T淋巴细胞亚群中CD分子百分率和IL-2水平变化在慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的意义.方法 应用间接荧光免疫法及双抗体夹心ABC-ELISA法,测定居住于2500 m以上的COPD患者急性发作期、缓解期患者和健康对照者静脉血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+、NK细胞百分率及IL -2水平.结果 ①急性期患者CD3+、CD4+百分率及CD4 +/CD8+比值显著降低(P＜0.05),CD8+、NK细胞百分率明显升高(P＜0.05),IL -2水平显著降低(P＜0.05);②缓解期患者CD3+、CD4+百分率降低(P＜0.05),NK细胞百分率略升(P＜0.05),IL -2水平降低(P＜0.05),CD8+细胞百分率略升、CD4 +/CD8+比值略降(差异无统计学意义);③急性期与缓解期相比,患者CD3+、CD4+百分率及CD4+/CD8+比值均有降低(P＜0.05),CD8+、NK细胞百分率均升高(P＜0.05),IL-2水平显著降低(P＜0.05).结论 T细胞亚群中的CD3+、CD4+百分率及CD4+/CD8+比值均降低时,IL-2水平降低提示COPD患者处于急性期和缓解期;CD8+、NK细胞百分率升高提示急性期.     

齿密螺旋体免疫抑制作用的实验研究

目的　了解齿密螺旋体对小鼠T淋巴细胞亚群以及T细胞中IL 2mRNA表达水平及活性的影响作用。方法　采用流式细胞仪观察齿密螺旋体对小鼠模型外周血T淋巴细胞亚群的影响 ;以RT PCR和凝胶图像吸收度分析系统检测齿密螺旋体对小鼠脾脏T细胞IL 2mRNA表达的影响。结果　注射齿密螺旋体超声破碎液的小鼠脾细胞中的CD4 + T细胞阳性百分数明显下降 (P <0 .0 5 ) ,CD8+ T细胞则明显升高 (P <0 .0 5 ) ,CD4 + /CD8+ T细胞比值显著降低 (P <0 .0 1) ;齿密螺旋体能在转录水平抑制静息T细胞IL 2mRNA的表达 ,并抑制T细胞培养上清液中IL 2样活性。结论　①激活CD8+ T细胞活性的功能 ,同时造成CD4 + T细胞百分数相对下降 ;改变CD4 + T、CD8+ T两亚群间的平衡。②齿密螺旋体具有抑制静息T细胞IL 2mRNA的表达 ,降低T细胞培养上清中IL 2分泌水平     

不明原因复发性流产母胎界面蜕膜组织NK细胞及T淋巴细胞亚群的变化

目的:研究不明原因复发性流产发生时母胎界面蜕膜组织中(1)CD4~+T细胞及CD8~+T细胞的变化;(2)子宫自然杀伤细胞CD56~+CD16~+NK细胞的变化;(3)CD4~+辅助性T细胞Th1、Th2及其细胞因子的变化,探讨不明原因复发性流产发生机制。方法:采用流式细胞技术分别检测正常早孕实施计划生育手术妇女30例(正常早孕组)和不明原因复发性流产妇女30例(URSA组)母胎界面蜕膜组织中CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD56~+CD16~+NK细胞、Th1及Th2细胞所分泌的细胞因子数量的百分比。结果:(1)URSA组患者CD4~+T细胞、CD56~+CD16~+NK细胞百分比明显高于正常早孕组,CD8~+T细胞百分比明显低于正常早孕组(P<0.05);(2)URSA组Th1细胞、Th1/Th2比率明显高于正常早孕组(P<0.01)。结论:母胎界面局部T淋巴细胞亚群、子宫自然杀伤细胞亚群比例的改变及Th1细胞增多与不明原因复发性流产相关。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群比例和Th1/Th2细胞因子水平检测及其临床意义

目的：研究各型乙型肝炎患者和健康者外周血T淋巴细胞亚群和Th1/Th2细胞因子水平变及其临床意义,为诊断、治疗疾病提供实验依据。方法：采用流式细胞仪检测34例乙型肝炎患者（其中慢性乙型肝炎中度组14例,慢性乙型肝炎重度组7例,重型乙型肝炎组8例,急性乙型肝炎组5例）和20例健康对照者(对照组)的外周血CD3+、CD4+和CD8+T细胞占淋巴细胞的比率;采用酶联免疫吸附技术（ELISA）夹心法检测研究对象血清中IL-2、IL-4及IFN-γ水平的变化。结果：对照组比较,急性乙型肝炎患者外周血CD3+、CD4+T淋巴细胞、血清IL-2、IFN-γ水平明显升高（P<0.05）;重型乙型肝炎患者CD3+、CD8+T淋巴细胞数量下降（P<0.05）,IFN-γ水平升高（P<0.05）;慢性乙型肝炎患者的IL-4和IFN-γ水平明显升高（P<0.05）。结论：Th1细胞因子在乙型肝炎病毒(HBV)感染的疾病发展中可能起一定的作用,HBV感染慢性化可能与Th2细胞因子增高有关。     

Th细胞极化群体在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

目的　了解慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者外周血中辅助性T细胞（Th）内干扰素-γ（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）和转化生长因子-β（TGF-β）的表达情况,以测定Th1/Th2 /Th3细胞的百分数,探明Th细胞各极化群体在慢性HBV感染中的作用.方法　常规分离外周血单个核细胞（PBMC）,在佛波脂（PMA）、钙离子导入剂伊屋诺霉素Ionomycin、细胞内转运阻断剂莫能星Monensin的刺激下,采用流式细胞分析术（FACS）对慢性HBV感染者外周血单个Th细胞内IL-4、IFN-γ和TGF-β的表达进行分析.结果　正常对照组,2.3%-18.6%的CD4+T细胞为Th1细胞,0.9%-9.2%为Th2细胞；0.7%-7.1%的细胞仅表达TGF-β, 为Th3细胞.在慢性HBV感染者外周血单个CD4+T细胞中,以Th0细胞居多；而Th1细胞则随着慢性乙型肝炎肝脏炎症活动的加剧而明显增多,在炎症活动明显的慢性乙型肝炎,其Th1百分数明显高于炎症活动呈静止状态的慢性乙型肝炎；Th2细胞在慢性HBV感染的不同阶段则较为恒定(P>0.05),但明显高于对照组(P<0.05).Th3细胞的百分数则随着肝组织炎症活动的加剧,其比例也明显减少(P<0.05),在无症状携带者（AsC）组,Th3细胞的百分数远高于慢性乙型肝炎组及对照组(P<0.05) .Th3细胞重叠于Th2细胞之中.结论　Th1细胞类因子与炎症活动呈正相关,Th2细胞可能与HBV感染的慢性化相关联.而Th3细胞与Th2细胞协同发挥负性免疫调节作用,并可能与慢性HBV感染的免疫耐受状态相关联.     

Th细胞极化群体在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用

目的　了解慢性乙型肝炎病毒 (HBV)感染者外周血中辅助性T细胞 (Th)内干扰素 γ(IFN γ)、白细胞介素 4 (IL 4 )和转化生长因子 β(TGF β)的表达情况 ,以测定Th1/Th2 /Th3细胞的百分数 ,探明Th细胞各极化群体在慢性HBV感染中的作用。方法　常规分离外周血单个核细胞 (PBMC) ,在佛波脂 (PMA)、钙离子导入剂伊屋诺霉素Ionomycin、细胞内转运阻断剂莫能星Monensin的刺激下 ,采用流式细胞分析术 (FACS)对慢性HBV感染者外周血单个Th细胞内IL 4、IFN γ和TGF β的表达进行分析。结果　正常对照组 ,2 3% - 18 6 %的CD4 + T细胞为Th1细胞 ,0 9% - 9 2 %为Th2细胞 ;0 7% - 7 1%的细胞仅表达TGF β ,为Th3细胞。在慢性HBV感染者外周血单个CD4 + T细胞中 ,以Th0细胞居多 ;而Th1细胞则随着慢性乙型肝炎肝脏炎症活动的加剧而明显增多 ,在炎症活动明显的慢性乙型肝炎 ,其Th1百分数明显高于炎症活动呈静止状态的慢性乙型肝炎 ;Th2细胞在慢性HBV感染的不同阶段则较为恒定 (P >0 0 5 ) ,但明显高于对照组 (P<0 0 5 )。Th3细胞的百分数则随着肝组织炎症活动的加剧 ,其比例也明显减少 (P <0 0 5 ) ,在无症状携带者(AsC)组 ,Th3细胞的百分数远高于慢性乙型肝炎组及对照组 (P <0 0 5 )。Th3细胞重叠于Th2细胞之中。结     

Hepatitis B surface antigen-specific CD8-positive T cell clones. Antigen specificity and interleukin-2 production.

Clones of hepatitis B surface antigen-reactive CD8+ and CD4+ T cells were obtained from peripheral blood mononuclear cells (PBM) of a hepatitis B immunized individual whose PBM proliferated when cultured with hepatitis B surface antigen (HBsAg). Lymphocytes were activated by culturing for 2 weeks with HBsAg and high concentrations of interleukin-2 (IL-2), then cloned in the presence of irradiated HBsAg-activated PBM and autologous Epstein-Barr virus (EBV)-transformed B cells, together with antigen and IL-2. All clones examined proliferated in an antigen-specific manner. Of 7 clones examined by flow cytometry, 4 were CD4+, CD8-; and 3 were CD4-, CD8+. Several clones produced IL-2 activity after stimulation with hepatitis B surface antigen. Since development of CD8+ T-cell clones specific for soluble antigens is difficult, the high frequency with which CD8+ cells were cloned in these experiments suggests that the cloning strategy employed might have general use for development of CD8+ clones. Availability of hepatitis B virus specific T cell clones of different phenotypes may help elucidate mechanisms of immunotolerance in hepatitis B infection.

     

支气管哮喘淋巴细胞亚群变化的观察

应用抗人T细胞单克隆抗体CD系列对支气管哮喘发作期、缓解期及脱敏治疗半年以上者共63例进行了检测及比较分析,发现支气管哮喘发作期外周血CO_3、CD_8细胞减少,CD_4/CD_3比值增高。在缓解期和脱敏治疗后CD_8、CD_4/CD_8比值均恢复,CD_3仍较正常减低。外源性嗜喘发作期T细胞亚群改变较内源性哮喘更明显,并且其血清总IgE与CD_8变化呈负相关,与CD_4/CD_8比值变化呈正相关。本文结果指示T细胞亚群的异常变化在支气管哮喘发病中起着重要作用。     

IL-12 IL-18对乙型肝炎患者Th_1/Th_2亚群的影响

目的探讨IL-12I、L-18对乙型肝炎患者Th1/Th2亚群的影响。方法常规分离人外周血单个核细胞(PBMC),在培养基中分别加入IL-12、IL-18和植物血凝素(PHA)培养72 h。用ELISA方法检测上清中IFN-γ、IL-4的含量。结果IL-12联合PHA或IL-18联合HA诱导下,乙型肝炎患者的IFN-γ水平明显高于对照组;IL-12联合PHA诱导下,乙型肝炎患者IL-4水平降低;IL-18联合PHA诱导下轻度患者明显降低;IL-12、IL-18联合PHA诱导下,乙肝患者的IFN-γ水平明显高于对照组,IL-4水平有降低趋势。结论IL-12、IL-18能够诱导乙型肝炎患者PBMC中Th2细胞向Th1细胞转化;而且IL-12的体外作用要强于IL-18。     

慢性乙型肝炎患者外周血CD4~+IL-17A~+IFN-γ~+T细胞的变化及临床意义

目的研究CD4+IL-17A+IFN-γ+T细胞在慢性乙型肝炎患者中的作用及意义。方法采用流式细胞术检测40例慢性HBV感染患者和15例健康志愿者外周血CD4+IL-17A+IFN-γ+T细胞数量,同时采用ELISA法检测血清IL-17A和IFN-γ含量。结果慢性HBV感染重型患者(CSHB)外周血中CD4+IL-17A+IFN-γ+T细胞含量和血清IL-17A含量最高,与慢性HBV感染轻、中度患者(CHB-LM)和慢性HBV感染无症状携带者(AsC)及健康志愿者(HV)比较差异有统计学意义(P均0.05)。CSHB和CHB-LM患者血清IFN-γ含量均明显低于AsC组和HV组,差异有统计学意义(P均0.05),AsC组和HV组患者IFN-γ含量差异无统计学意义(P0.05)。Pearson相关性分析显示,慢性HBV轻、中度患者及慢性HBV重型患者血清IL-17A水平与CD4+IL-17A+IFN-γ+T细胞含量呈正相关(P均0.05)。慢性HBV无症状携带者,慢性HBV轻、中度患者和慢性HBV重型患者血清IFN-γ含与血清IL-17A含量及外周血CD4+IL-17A+IFN-γ+T细胞含量均无明显相关性(P均0.05)。结论CD4+IL-17A+IFN-γ+T细胞在慢性乙型病毒性肝炎不同疾病阶段存在差异,可能在HBV发生、发展过程中发挥重要作用。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的测定分析

目的：探讨淋巴细胞亚群(T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞及T细胞亚群)在慢性乙型肝炎患者外周血中的变化意义。方法：通过流式细胞技术比较分析56例慢性乙型肝炎患者及30例键康正常人的外周血淋巴细胞亚群。结果：与正常对照组相比，慢性乙型肝炎患者组外周血CD3^ CD4^ 细胞降低，淋巴细胞CD4^ /CD8^ 比值下降。结论：慢性乙型肝炎患者细胞免疫功能紊乱，存在辅助性T细胞减少及辅助性T细胞和细胞毒性T细胞比例失衡等异常表现。     

慢性肝病患者T淋巴细胞亚群、IL-10和IL-12变化的意义

目的：观察慢性肝病患者T淋巴细胞亚群、IL-10和IL-12与临床表现的关系。 方法：采用双抗体夹心ELISA法与抗体致敏的红细胞花环试验法,对68例慢性乙肝病毒性肝病患者T淋巴细胞亚群、IL-10和IL-12进行平行测定。 结果：不同临床类型慢性肝病患者CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺明显低于对照组,而CD8⁺明显高于对照组;慢性肝炎组IL-10、IL-12明显高于对照组;慢性HBeAg阳性肝炎患者CD4⁺、CD4⁺/CD8⁺及IL-12明显低于HBeAg阴性患者,CD8⁺及IL-10明显高于HBeAg阴性患者。 结论：慢性乙肝病毒性肝病患者细胞免疫功能低下,免疫调节紊乱,IL-10、IL-12水平及T淋巴细胞亚群变化与患者HBV携带状态即HBV的复制活跃程度有关。     

Preliminary study on HBsAg-specific T cell clones

Clones of HBsAg-reactive CD8+ and CD4+ T cells were obtained from PBM of a hepatitis B immunized individual whose PBM proliferated when cultured with HBsAg. Lymphocytes were activated by culturing for 2 weeks with HBsAg and high concentrations of IL-2, then cloned in the presence of irradiated HBsAg-activated PBM and autologous EBV-transformed B cells, together with antigen and IL-2. All clones examined exhibited proliferation in an antigen-specific manner. Of 7 clones examined by flow cytometry, 4 were CD4+, CD8-; and 3 were CD4-, CD8+. Several clones produced IL-2 activity after stimulation with HBsAg. Since development of CD8+ T-cell clones specific for soluble antigens has been difficult, the high frequency with which CD8+ cells were cloned in these experiments suggests that the cloning strategy employed may have general use for development of CD8+ clones, Availability of HBV-specific T cell clones of different phenotype may help elucidate the mechanisms of immunotolerance in HB infection.