强脉冲光对UVB照射后人皮肤成纤维细胞金属基质蛋白酶-1、金属基质蛋白酶-3表达的影响

目的 观察强脉冲光(IPL)照射人皮肤成纤维细胞后金属基质蛋白酶-1(MMP-1)、金属基质蛋白酶-3(MMP-3)表达的变化,探讨强脉冲光嫩肤的分子生物学机制.方法 原代培养人皮肤成纤维细胞,分为三组:A组(正常对照组):无UVB照射无IPL照射;B组(UVB照射组):采用UVB(20 mJ/cm2)照射成纤维细胞;C组(UVB+IPL照射组):先用UVB(20 mJ/cm2)照射成纤维细胞,24 h后再用强脉冲光照射成纤维细胞.培养48 h后采用免疫组化检测细胞中MMP-1、MMP-3的表达.结果 UVB照射后成纤维细胞中MMP-1及MMP-3表达较对照组显著升高(P＜0.05),C组成纤维细胞MMP-1及MMP-3表达较B组显著降低.结论 强脉冲光能显著抑制UVB导致的成纤维细胞MMP-1、MMP-3的表达升高,可能通过该机制改善光老化中皱纹的形成.     

强脉冲光对人体皮肤成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA表达水平的影响

目的 研究强脉冲光(IPL)照射对人皮肤成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA表达水平的影响.方法 用强脉冲光对目标皮肤进行连续照射,在照射前及照射后取照射部位皮肤组织,应用实时荧光定量PCR法测定各时间点成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA的表达水平.结果 连续的强脉冲光照射可以显著提高Ⅰ型前胶原mRNA的表达水平.照射2,3次后皮肤成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA表达[(7.9±1.7)×10-4、(11.1±2.4)×10-4]明显高于照射前[(2.1±0.7)×10-4],P＜0.05.结论 强脉冲光可促进皮肤成纤维细胞Ⅰ型前胶原mRNA的表达,证实了强脉冲光的除皱作用.     

Ellipse Flex强脉冲光对某些面部皮肤疾病的治疗效果

目的探讨Ellipse Flex强脉冲光对黄种人某些面部皮肤疾病的治疗效果。方法采用丹麦DDD公司生产的第2代强脉冲光子嫩肤仪对色斑、细小皱纹、毛孔粗大、毛细血管扩张等良性皮肤疾病进行强脉冲光治疗,每5次为1个疗程,每次治疗间隔4周。结果349例中148例（42.4%）痊愈,118例（33.8%）显效,52例（14.9%）有效,总有效率91.17%;5例出现色素沉着,2例出现表皮灼伤,均未做特殊处理自然恢复。结论Ellipse Flex强脉冲光子嫩肤仪用于面部皮肤美容,效果明显、安全,是一种无创、非剥脱性的治疗方法。     

皮肤持续扩张后软组织的形态学改变

目的：研究持续醒压扩张术对皮肤软组织结构的影响。方法：白色小家猪１２只,分成持续压扩张组和常规同断扩张组,每组６只,各动物于完成扩张后第３日取材作组织学检查。结果：两实验组扩张后表皮变厚,颗粒细胞了却 增厚明显。真皮层变薄程度相同,胶原纤维排列松散,特殊染色发现真皮层弹力纤维和网状纤维大量增生,皮肤附件外膜细胞和平滑肌细胞内肌动蛋白增多,持续扩张组真皮内成纤维细胞和毛细胞管密度均高于常规组（Ｐ〈０     

β-氨基丙腈对兔胆管良性狭窄的作用

目的观察β-氨基丙腈（BAPN）对兔胆管良性狭窄形成的影响。方法通过钳夹法建立兔胆管狭窄模型,并给予BAPN腹腔内注射处理,半月后行胆管造影,测量胆管直径;行血清总胆红素和直接胆红素含量测定;取钳夹段胆总管组织进行病理学检查,测量胆管壁厚度、镜下观察病理改变及高倍镜下成纤维细胞单位面积密度计数。结果造影显示对照组钳夹部位见狭窄环,以上胆管明显扩张,实验组胆管扩张不明显。实验组血清总胆红素和直接胆红素无明显升高。病理示对照组成纤维细胞增生活跃,胆管壁显著纤维化增厚,炎性细胞广泛浸润,VanGieson染色见胆管黏膜下大量胶原纤维增生,排列致密紊乱,实验组胆管壁增厚不明显,成纤维细胞增生少,VanGieson染色见胆管黏膜下胶原纤维增生不明显,排列较为整齐。结论良性胆管狭窄主要病理变化是胆管壁成纤维细胞增殖旺盛并胶原纤维过度增生;BAPN可以抑制胆管成纤维细胞的过度增殖和胶原纤维的交联,对胆管良性狭窄起到一定预防作用。。     

应用强脉冲光治疗面部皮肤色斑并改善皮肤整体状况

目的：探讨应用强脉冲光（IPL）治疗面部皮肤色斑及改善皮肤整体状况的疗效。方法：对474例面部色斑患者采用强脉冲光子嫩肤仪进行治疗。结果：色斑治疗有效率,患者评价89.0%,医生评价89.7%,医患双方评价合并后89.3%;面部皮肤状况整体改善率,患者评价94.7%,医患双方评价95.0%,医患双方评价合并后94.8%。疗效肯定,并发症发生率低（1.5%）。结论：应用IPL技术治疗面部皮肤色斑及改善皮肤状况,效果满意,治疗过程无创伤,无痛苦,无结痂,无色素沉着,不需休假,是一种安全、有效和方便的治疗方法。     

强脉冲光治疗雀斑

目的 应用强脉冲光治疗面部雀斑，观察强脉冲光对面部雀斑的治疗效果。方法采用波长550—950砌的强脉冲光对195例雀斑患者的照射治疗，治疗期问所有患者没有采用任何药物配合治疗，治疗后除了加强保湿及防晒外，无需作特别护理。每次治疗前后用数码相机记录影像。结果 根据每例患者治疗前后的对比照片，进行临床疗效评价。受治患者有不同程度的改善，总有效率达到100％，治疗后半年内无明显复发。结论 强脉冲光治疗面部雀斑，具有操作简单、损伤小、疗效确切等优点，优于传统方法，是一种具有应用前景的新技术。     

基质金属蛋白酶-3、层粘连蛋白及Ⅲ型胶原在人眼翼状胬肉组织中的表达及意义

目的检测人眼翼状胬肉组织中基质金属蛋白酶-3(MMP-3)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型胶原(col Ⅲ)及胶原纤维和弹力纤维的表达。方法应用S-P免疫组织化学染色方法检测15例翼状胬肉组织及8例正常球结膜组织中MMP-3、LN、col Ⅲ的免疫学定位及表达情况，用Masson及VG染色法检测各标本中胶原纤维及弹力纤维的分布情况。结果HE染色：翼状胬肉组织上皮下基质中存在结缔组织的增生和血管形成；基质浅层存在一无定形物质透明区及粗糙的颗粒样嗜酸性物质，在翼状胬肉体部深层基质中存在粗糙的纤维组织；正常球结膜组织细胞排列整齐；基质为疏松结缔组织，胶原纤维平行排列，其间可见成纤维细胞，散在少量中性粒细胞、毛细血管；Masson染色：翼状胬肉浅层基质中存在致密的胶原纤维染色，深层基质中的胶原纤维存在变性样改变；VG染色：翼状胬肉组织深层基质中存在大量变性的胶原纤维，其间夹杂黑色的弹性纤维；免疫组化染色法：MMP-3在翼状胬肉上皮细胞中呈强表达，成纤维细胞中呈中等强度表达，血管内皮细胞中未见表达；LN在血管壁中呈强表达，在上皮细胞基底膜中呈中等强度表达，在整个基质中未见明显表达；col Ⅲ在整个翼状胬肉基质中呈强表达。结论翼状胬肉组织中ECM的成分较正常球结膜发生改变，有大量的弹性纤维变性、胶原纤维增生及新生血管形成；col Ⅲ在翼状胬肉组织中表达增加，LN及胶原纤维可能对翼状胬肉中血管形成、细胞粘附和迁移及ECM重建起作用；MMP-3在翼状胬肉组织中表达增加，其对ECM成分的降解作用可能有助于翼状胬肉的形成和向角膜中央侵袭。     

脉冲染料激光调节TGF-β1/Smad3信号通路促进成纤维细胞凋亡改善瘢痕增生的机制研究

目的:观察脉冲染料激光(PDL)对增生性瘢痕的预防及治疗的有效性,比较治疗前后的瘢痕组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3基因的表达情况,探讨PDL治疗增生性瘢痕的机制。方法:以兔耳增生性瘢痕模型为研究对象,检查上皮化后和增生性瘢痕形成后PDL治疗对瘢痕的瘢痕增生指数(SEI)、瘢痕内成纤维细胞密度、胶原纤维面积、细胞凋亡、胶原蛋白Ⅰ/Ⅲ比值以及TGF-β1、Smad3表达的改变情况。结果:上皮化后创面接受PDL治疗后,SEI、成纤维密度指标、胶原纤维面积均保持平稳低水平(P0.05);细胞凋亡率随天数增加明显上升(P0.05);胶原蛋白Ⅰ/Ⅲ比值、TGF-β1、Smad3表达均无明显改变(P0.05)。瘢痕形成后接受PDL治疗,SEI、成纤维密度指标、胶原纤维面积、胶原蛋白Ⅰ/Ⅲ比值、TGF-β1、Smad3表达随天数增加均呈下降趋势(P0.05);细胞凋亡率随天数增加明显上升(P0.05)。结论:PDL治疗通过下调TGF-β1/Smad3信号通路表达,促进瘢痕内成纤维细胞凋亡,从而预防及改善瘢痕增生。     

丝裂霉素C治疗准分子激光屈光性角膜切削术后角膜上皮下雾状混浊的实验研究

目的：探讨丝裂霉素C治疗准分子激光屈光性角膜切削术治疗（PRK）后膜上皮下雾状混浊（haze)的作用。方法：对54只新西兰白兔双眼行PRK,随机分为4组,术中一次性应用0．008％丝裂霉素C（I组）,术后给予0．02％丝裂霉素C点眼（Ⅱ组）及0．1％塞地米松点眼（Ⅲ组）,术后平衡盐液点眼作为对照（Ⅳ组）,并行裂隙灯,角膜内皮镜,光镜,电镜检查,结果：术后4周,8周,Ⅰ组haze最轻（与对照组比较P＜0．01）;Ⅱ组与Ⅲ组角膜haze程度相同（P＞0．05）,均较Ⅳ组为轻（P＜0．05）,但较Ⅰ组为重（P＜0．05）。光镜及电镜检查表明：Ⅳ组术区角膜上皮细胞过度增生,前基质成纤维细胞增生活跃,纤维排列明显紊乱;Ⅰ、Ⅱ组及Ⅲ组上皮细胞和前基质成纤维细胞的增生以及胶原纤维合成均受抑制,纤维排列较整齐,其中以Ⅰ组最为明显,纤维排列整齐。结论：丝裂霉素C减轻PRK术后角膜haze,且无明显副作用,可望成为防治角膜haze的一种新药。     

强脉冲光对皮肤热休克蛋白70表达的影响

目的观察强脉冲光对皮肤热休克蛋白70表达的影响，探讨光子嫩肤的分子生物学机制方法选择15只SD大鼠，每只选3个部位用强脉冲光照射，采用同一照射参数，能量密度34J／cm^2，分为3个脉冲，脉宽各为4、5、6ms，脉冲延时为20及25ms照射后第1、3、5、7、15、30天分别于治疗及非治疗部位切取皮肤样本，免疫组化染色，观察：结果照射部位第1天皮肤表皮、皮脂腺细胞、毛细血管内皮细胞均呈阳性染色，第7天达高峰，第15天染色渐弱，第30天染色基本消失．非治疗部位染色阴性。结论强脉冲光照射皮肤后可引起热休克蛋白70表达的增加，提示热休克蛋白70在光子嫩肤过程中起一定作用。     

Distribution and change of collagen types I and III and elastin in developing leg muscle in rat

The distribution of collagen types I and III and elastin in the developing leg muscles were studied by immunohistochemistry in rat. From 0-day to 8-weeks old, the size of the gastrocnemius and plantaris muscles increased. The muscle connective tissue developed in the order of epimysium, perimysium and finally endomysium. The epimysium contained a considerable amount of collagen types I and III and some elastin in the neonates. These components in the epimysium remained almost unchanged in their distribution during development. The perimysium had little collagen type I and III or elastin at 0 day. Collagen type I and elastin slightly increased around 2 and 1 week, respectively, and returned to the previous levels. Collagen type III, however, increased and became abundant after 1 week. In the endomysium, the amounts of collagen type I and elastin were slight during postnatal growth, while collagen type III gradually increased after 2 weeks. The intramuscular tendons consistently showed intense reactivity for collagen type I and weak staining for elastin, whereas the staining for collagen type III decreased after 1 week and was finally restricted to the surface of intramuscular tendons. This study clearly demonstrated that the distribution of collagens, but not of elastin, significantly changed during development. The increase in collagen type III in the perimysium and endomysium, and its decrease in the intramuscular tendons probably reflect functional demands imposed on these connective tissues, i.e., shear forces in the former two and tensile loading in the latter.     

RSK2通过调控人皮肤成纤维细胞的增殖与迁移促进皮肤创面修复

目的：探究RSK2对皮肤创面修复的影响及其可能机制。方法：采用Western blot与免疫荧光染色实验检测皮肤创伤组织中RSK2的表达差异。通过人原代真皮成纤维细胞（HDF）划痕实验、CCK-8增殖实验及Western blot实验,在细胞水平探究RSK2抑制剂Bix 02565对HDF的作用。通过HE染色、Masson染色与免疫荧光染色,在体内水平观察RSK2抑制剂对皮肤创面修复的影响。结果：Western blot及免疫荧光实验结果显示皮肤创伤并不影响皮肤成纤维细胞中RSK2总蛋白的表达,而在体外水平上利用Bix 02565抑制RSK2的活性可显著抑制成纤维细胞的增殖与迁移,抑制G1/S-特异性周期蛋白-D1（Cyclin D1）与纤维粘连蛋白（Fibronectin）的表达,在动物水平RSK2抑制剂可抑制成纤维细胞的增殖细胞核抗原（PCNA）与胶原纤维生成,抑制血小板-内皮细胞黏附分子（CD31）的表达,阻滞血管的新生,延缓小鼠皮肤创面修复速率。结论：RSK2可通过促进成纤维细胞的增殖与迁移、血管新生,进而促进皮肤创面修复。     

自体微粒皮移植减轻中厚供皮区瘢痕增生的临床研究

目的：寻找有效控制供皮区皮肤瘢痕的新方法。方法：将中厚皮供区创面分成两个区域，一处移植微粒皮，另一处覆盖油纱，观察中厚皮供区愈合后的瘢痕生成情况。结果：无论从瘢痕的充血、质地、隆起及瘙痒程度四方面，还是从胶原纤维和毛细血管的镜下特点看，微粒组均优于油纱组。结论：自体微粒皮移植能有效减轻中厚皮供区的瘢痕形成。不仅适合于中厚皮供区，还适合于深Ⅱ度烧伤削痂后创面。     

强脉冲光对皮肤热休克蛋白70表达的影响

目的 观察强脉冲光对皮肤热休克蛋白70表达的影响,探讨光子嫩肤的分子生物学机制。方法 选择15只SD大鼠,每只选3个部位用强脉冲光照射,采用同一照射参数,能量密度34J/cm²,分为3个脉冲,脉宽各为4、5、6ms,脉冲延时为20及25ms。照射后第1、3、5、7、15、30天分别于治疗及非治疗部位切取皮肤样本,免疫组化染色,观察。结果 照射部位第1天皮肤表皮、皮脂腺细胞、毛细血管内皮细胞均呈阳性染色,第7天达高峰,第15天染色渐弱,第30天染色基本消失,非治疗部位染色阴性。结论 强脉冲光照射皮肤后可引起热休克蛋白70表达的增加,提示热休克蛋白70在光子嫩肤过程中起一定作用。     

强脉冲光对人皮肤MMP-1、MMP-8及TIMP-1表达的影响

目的观察强脉冲光照射后人皮肤中基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及基质金属蛋白酶组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)的表达,探讨强脉冲光嫩肤的分子生物学机制。方法选择皮肤类型为Ⅲ～Ⅳ型志愿者,年龄大于20岁。制定个体化治疗方案,选择恰当的治疗参数,取560 nm/590 nm的滤光片,单/双/三脉冲的不同脉冲方式,脉宽为2.0～4.0 ms,脉冲延迟25～40 ms,能量密度16～20 J/cm2,治疗间隔3周,治疗次数3～4次,于治疗后2～3周在照射部位及非照射部位各切取1块皮肤样本,约5 mm×5 mm×5 mm大小,免疫组化染色,光镜下观察。结果照射后皮肤MMP-1、MMP-8及TIMP-1均有阳性表达,3周时的MMP-1、MMP-8表达弱于2周时的表达,而3周时的TIMP-1表达与2周时相比差异无统计学意义。非照射部位阴性染色。结论强脉冲光可增强人皮肤中MMP-1、MMP-8、TIMP-1的表达,后3者对皮肤重塑起一定的作用。     

5-氟尿嘧啶对增生性瘢痕的作用研究

目的：探讨5‐氟尿嘧啶（5‐FU ）对兔耳增生性瘢痕组织的影响。方法建立兔耳外伤性皮肤早期瘢痕增生模型。将12只兔随机平均分为3组,设立生理盐水注射对照组（A组）、局部注射5‐FU组（B组）和局部涂抹5‐FU软膏组（C组）,观察各组瘢痕改变情况。60 d后空气栓塞法随机处死兔子,切取含创面的兔耳组织,分别进行苏木精‐伊红（HE）染色及Masson染色观察组织形态学变化及组织中细胞及胶原等的改变。Real‐time PCR及ELISA法检测TGF‐β、PDGF、bFGF和INF‐γ的表达水平。结果 HE和Masson染色显示,与A组和C组比较,B组真皮层变薄,成纤维细胞和胶原纤维数量较少,胶原纤维排列规则,无胶原结节或者胶原结节不明显。B组和C组TGF‐β、PDGF、bFGF、INF‐γmRNA表达水平和蛋白水平均显著低于A组,且B组效果好于C组。结论5‐FU对增生性瘢痕有治疗作用,瘢痕组织局部注射5‐FU比局部涂抹5‐氟尿嘧啶软膏更为有效。     

外用枸杞对小鼠皮肤及表皮郎格罕细胞影响的研究

目的:为了探讨枸杞对皮肤及表皮郎格罕细胞(Langerhans cell,LC)的影响。方法:将单味中药枸杞溶于硅霜中,外涂小鼠皮肤。结果:枸杞可促进小鼠表皮LC数量增多、表达la抗原功能增强;图像分析表明枸杞对真皮组织内胶原纤维、弹性纤维及DNA含量均有促进作用。结论:枸杞促进小鼠表皮LC数量增多,对皮肤免疫功能有增强作用。     

眼球壁小梁网主要由平滑肌纤维构成且不存在内皮细胞

目的 证明小梁网(TM)主要由平滑肌纤维而非胶原纤维构成,且不存在内皮细胞.方法 选用家兔、SD大鼠、小鼠各3只,新鲜眼球共18只,沿矢状面对半切开眼球,石蜡包埋,常规组织切片,每个标本选取5片,分别采用HE染色、VG染色、Masson染色、α-SMA及CD31免疫组化法染色,显微镜下观察,并扫描成数字切片.将TM与巩膜胶原纤维、睫状肌(平滑肌)细胞、血管内皮细胞进行对比观察.结果 HE染色:3种动物TM呈紫红色粗丝状结构,交织成网,与睫状肌纤维胞质染色高度一致;TM表面附着的"细胞"界限不清,核扁,细长,呈深紫色,其"胞质"与TM无明显界限;睫状肌为典型的平滑肌,按不同方向成束排列,纵切的细胞呈扁平状,胞质紫红色,核扁,细长;巩膜内胶原纤维呈红色,深染;成纤维细胞少,依附于胶原纤维,其长轴与胶原纤维长轴一致,轮廓不清,核细长呈线样,深紫蓝色;血管内皮细胞胞质呈淡紫色,核深染,由于切面原因而呈不同的形状,突于腔内.VG染色:TM呈淡红色细丝状,胶原纤维呈亮红色粗条状.Masson染色:TM呈红绿相间网格状结构,其中以红色结构为主;巩膜胶原纤维呈绿色波浪状;血管内皮细胞呈绿色扁平状;睫状体的平滑肌纤维呈紫红色.α-SMA免疫组化:TM部分呈强阳性反应,胞质呈棕黄色颗粒;巩膜内胶原纤维及血管内皮细胞呈阴性;睫状体内的平滑肌纤维呈强阳性.CD31免疫组化:三种动物染色结果虽略有差异,但均为阴性.结论 TM主要由平滑肌纤维构成,外周包绕微量胶原纤维(肌内膜),不存在内皮细胞.     

红鹿制剂延缓皮肤老化的研究

目的：研究红鹿制剂对老化皮肤的影响。方法：背部被剪去3 cm×3 cm毛的12只20月龄豚鼠被随机均分为给药组和对照组,给药组涂抹红鹿制剂,对照组涂抹化妆品基质,连续涂抹60 d;应用天狼猩红、HE染色和体视学技术分别观察和测定老化皮肤中Ⅲ型胶原的分布、表皮基底层细胞的分裂指数、角质层同表皮厚度的比例、真皮胶原纤维和微血管的体密度和成纤维细胞的数目。结果：乳头层的Ⅲ型胶原给药组明显多于对照组;基底细胞分裂指数给药组明显多于对照组（P<0.01）;乳头层处微血管的体密度给药组明显大于对照组（P<0.01）;乳头层处成纤维细胞数给药组明显多于对照组（P<0.01）,在网状层处给药组明显少于对照组（P<0.01）;角质层同表皮厚度的比例给药组显著低于对照组（P<0.01）;胶原纤维的体密度给药组显著低于对照组（P<0.05）。结论：红鹿制剂能延缓皮肤老化。