人早孕期外周及蜕膜CD4~+CD25~+调节性T细胞变化

正常生理妊娠类似于同种异体移植,妊娠的维持有赖于母-胎免疫耐受的形成,妊娠失败也多因母体对胚胎的免疫排斥所致。CD4+CD25+调节性T细胞是一群重要的具有免疫抑制功能的T细胞亚群。研究证实,该类细胞抑制CD4+CD8+T细胞活化及增殖,它在防止自身免疫性疾病的发生、诱导移植耐受等方面发挥重要的作用[1～4],但有关其在人母-胎免疫调节中的作用尚缺乏系统研究。为探讨调节性T细胞在人母-胎免疫调节中的作用,本研究采用流式细胞术分别对正常生育期妇女黄体期外周血、正常人早孕期外周血及蜕膜淋巴细胞CD4+CD25+T细胞进行了分析研究。1材…     

CD4+CD25+调节性T细胞在母-胎免疫耐受中的作用

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Regulatory T cell，Treg）是最近被人们认识的一类重要的具有免疫调节功能的T细胞亚群，其功能障碍可能与自身免疫性疾病密切相关；并且参与维持外周T细胞内环境稳定；在移植耐受中其也起着关键作用。近年研究发现，在妊娠的各个时期，母体外周血、     

介导CD4+CD25+调节性T细胞发育与功能的一个关键基因--Foxp3

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是天然产生的调节性T细胞的重要亚群之一，在维持免疫系统稳态中发挥重要的作用。目前有关CD4^＋CD25^＋调节性T细胞分化发育的确切机制还不清楚。最近的研究发现Foxp3基因与CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分化发育和免疫调节功能的关系密切，进而提示Foxp3可能是CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的一个特征性标志。     

CD4+CD25+调节性T细胞与系统性红斑狼疮病情活动性关系的研究

目的：检测系统性红斑狼疮患者外周血CD4^＋CD25^＋、CD4^＋CD8^＋调节性T细胞亚群，探讨其与疾病活动性、肾脏损伤、血清抗ds-DNA抗体及免疫球蛋白和补体C3含量的关系。方法：采用流式细胞术检测北京协和医院住院和门诊SLE患者（n=37）外周血CD4^＋CD25^＋T、CD4^＋CD8^＋T细胞群比例，以15例RA和15例SS组成自身免疫性疾病对照，30例健康体检者作为正常对照，观察调节性T细胞亚群与SLE患者疾病活动性指标SLEDAI、IgG、C3及血清抗ds-DNA抗体的关系。结果：①疾病活动期SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞群比例显著低于正常对照组（P〈0.01），疾病稳定期和风湿性疾病对照组与正常对照组结果差异无统计学意义。疾病活动期和稳定期SLE患者CD4＋CD8＋T细胞群比例都略高于正常对照组，但未发现结果差异有统计学意义（P〉0.05）。②疾病活动期SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞比例及CD4^＋CD25^＋/CD4^＋值显著低于稳定期患者（P〈0.01）。SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋/CD4^＋值与SLEDAI、补体C3呈低度相关（r分别为-0.491、0.368，P〈0.05），CD4^＋CD25^＋T细胞数量与SLEDAI呈负相关（r=-0.578，P〈0.05）。③SLE并发肾病组外周血CD4^＋CD25^＋T细胞群比例及CD4^＋CD25^＋/CD4^＋值显著低于非肾病组（P〈0.01；P〈0.05）。同一SLE患者治疗前后CD3^＋CD4^-CD8^-细胞和NK细胞降低，CD4^＋CD25^＋细胞、CD4^＋CD25^＋/CD4^＋值及CD8^＋T细胞增加，但未发现这些结果差异有统计学意义。本次研究未发现NK细胞、CD4^＋CD8＋T细胞、CD4^＋CD25^＋T细胞群比例在ds-DNA＋组与ds-DNA-组之间结果差异有统计学意义。结论：SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞群比例与SLEDAI成负相关，与肾脏的损害也有密切关系，但与血清抗ds-DNA抗体产生的关系不明显。活动期SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞减少，稳定期CD4^＋CD25^＋T细胞比例回升，因此推测CD4^＋CD25^＋T细胞的变化可能是导致疾病发生和病情发展及相关器官（如肾脏）损伤的关键环节之一。     

CD4~+CD25~+ Treg的免疫调节作用机制以及临床研究进展

CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+Treg)是一个具有独特免疫调节功能的T细胞亚群,它不仅能够抑制自身免疫性疾病的发生,而且可能参与诱导移植耐受以及肿瘤免疫的调节,在维持机体内环境的稳定中起重要作用。文章旨在对近两年关于CD4+CD25+Treg的免疫调节作用机制以及临床研究进展作一综述。     

CD4+ CD25+调节性T细胞对树突状细胞的杀伤作用

目的 探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞是否对树突状细胞发挥免疫调节作用及其可能的机制。方法 用MACS（magnetic cell sorting）从BALB／c小鼠静息T细胞分离纯化CD4^＋CD25^＋T细胞，体外细胞增殖实验观察其对CD4^＋CD25^＋T细胞的免疫抑制作用；GM-CSF／IL-4培养自体小鼠骨髓来源DC，FACS（fluorescence-activated cell sorting）鉴定其表面分子特性；以CD3／CD28单克隆抗体活化CD4^＋CD25^＋调节性T细胞，FACS体外杀伤实验研究其对自体DC的调节作用，并观察穿孔素抑制剂EGTA对上述作用的影响。结果 用MACS法成功分离出CD4^＋CD25^＋T细胞，纯度可达98％，特异性表达而Faxp3基因，能明显抑制CD4^＋CD25^＋T细胞的体外增殖；骨髓来源的DC表达CDllc、MHCⅡ及少量协同刺激分子CD80、CD86；FACS体外杀伤实验证实以CD3／CD28抗体体外活化的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞对自体DC有显著杀伤作用（P〈0．05），穿孔素抑制剂EGTA能部分抑制该杀伤效应（P〈0．05）。结论 CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可通过杀伤作用对自体DC发挥免疫调节作用，穿孔素／颗粒酶杀伤途径可能参与其中。     

肺癌患者CD4+CD25+Treg的检测及临床意义

Sakaguchi等自1995年报道CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Tegulatory Tcells，Treg）是一群具有免疫调节作用的细胞群以来，近几年CD4^＋CD25^＋Treg在肿瘤、免疫性疾病中的作用已有研究。我们采用流式细胞术，对42例肺癌患者外周血淋巴细胞中CD4^＋CD25^＋Treg进行检测，研究肺癌患者CD4^＋CD25^＋Treg的变化及其与肿瘤生物学行为的关系。     

CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋调节性T细胞在与原因不明反复自然流产的相关性研究

目的探讨外周血中CD4＋CD25＋FOXP3＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr）在原因不明反复自然流产（URSA）发病中的作用。方法应用三色荧光标记流式细胞术检测21例原因不明反复自然流产妇女（URSA组）、20例正常妊娠妇女（正常对照组）外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr及T细胞亚群水平的表达情况。结果URSA组妇女外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr表达率为（1.36±0.61）%,明显低于正常对照组（5.59±1.02）%,两组比较差异显著（P（0.05）,但两组相比较外周血中T细胞亚群CD3^＋、CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋/CD8^＋水平无显著差异（P（0.05）。结论原因不明反复自然流产的发生可能与患者外周血中CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋Tr数量减少有关。     

CD4+CD25high调节性T细胞在异基因造血干细胞移植后的重建及其与aGVHD的相关性

目的：研究CD4^＋ CD25^high调节性T细胞在异基因造血干细胞移植后的重建情况及其与aGVHD相关性。方法：应用流式细胞技术及实时定量PCR技术检测22例异基因造血干细胞移植物中及移植后不同时期外周血中CD4^＋ CD25^＋T细胞和CD4^＋ CD25^highT细胞占CD4^＋T细胞的比例（CD4^＋ CD25^＋/CD4^＋、CD4^＋ CD25^high/CD4^＋）、CD4^＋ CD25^highT细胞与CD4^＋ CD25^＋T细胞之比（CD4^＋ CD25^high/CD4^＋ CD25^＋）以及FOXP3基因的表达。结果：①aGVHD组移植物中CD4^＋ CD25^high/CD4^＋及CD4^＋ CD25^high/CD4^＋ CD25^＋比例均显著低于无aGVHD组（P〈0.05）。②移植后早期,两组外周血中的CD4^＋ CD25^＋/CD4^＋比例均较移植物中者显著升高,在aGVHD组CD4^＋ CD25^high/CD4^＋及CD4^＋ CD25^high/CD4^＋ CD25^＋比例亦较移植物中者显著升高,而在无aGVHD组两者无显著升高,且低于aGVHD组。③移植后两组的FOXP3的表达均逐渐升高,但至移植后6个月仍低于健康对照组（P〈0.05）。aGVHD组移植后外周血FOXP3的表达低于无aGVHD组（P〈0.05）。结论：①移植后早期外周血CD4^＋ CD25^high调节性T细胞发生活化和增殖,有利于维持免疫稳态和控制aGVHD;②移植物中CD4^＋ CD25^high调节性T细胞的比例及其与活化的CD4^＋效应性T细胞之比可能影响aGVHD的发生;③aGVHD可影响CD4^＋ CD25^high调节性T细胞的数量或FOXP3的表达。     

CD4+CD25+T细胞在CD8+T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用

实验旨在研究CD4^＋CD25^＋T细胞在CD8^＋T细胞抗肿瘤免疫中的调节作用。将小鼠脾脏中分离的单个核细胞分为两组．即去除CD4^＋CD25^＋T细胞组和未去除CD4^＋CD25^＋T细胞组,测定树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽刺激不同T细胞增殖活性、细胞因子IFN一1分泌,以及多肽特异性CD8^＋T细胞对同源性胃癌细胞株MFC的杀伤活性。结果显示预先去除未致敏T细胞中的CD4^＋CD25^＋T细胞,所诱导的特异性CD8^＋CTL对肿瘤细胞免疫应答增强,表现为反应性T细胞对树突状细胞提呈的肿瘤抗原多肽增殖反应增强,IFN-γ分泌量提高及CD8＋T细胞对MFC杀伤活性增强。这些结果表明。预先去除未致敏T细胞中的CD4^＋CD25^＋T细胞,肿瘤抗原多肽修饰的树突状细胞肿瘤疫苗效能可明显增加。CD4^＋CD25^＋T细胞在CD8^＋T细胞抗肿瘤免疫中起下调作用。     

CD4+CD25+调节性Treg细胞与急性移植物抗宿主病

CD4+CD25+Treg细胞是调节性T细胞的一个重要亚群,具有免疫无能和免疫抑制的特性,在防止自身免疫病发生、诱导移植耐受及调节肿瘤免疫方面起着重要作用。急性移植物抗宿主病(aGVHD)是异基因造血干细胞移植后最严重的并发症。近年来,有关CD4+CD25+Treg细胞与aGVHD关联性的研究取得了很大的进展,特别是该类细胞可有效地降低aGVHD的发生及作为aGVHD风险预测的一项重要指标。本文就CD4+CD25+Treg细胞的特性、免疫调节作用机制及CD4+CD25+Treg细胞与aGVHD的关联性的一些研究进展作一综述。     

CD4+ CD25+调节性T细胞AICD机制的研究

目的探讨CD4^＋CD25^＋调节性T细胞活化诱导的细胞死亡（AICD）发生的机制。方法CD4^＋CD25^＋T细胞以磁性细胞分离器（MACS）从BALB／c小鼠或DO11．10小鼠的静息T细胞分离纯化。体外细胞增殖抑制实验证实其免疫调节作用。CD4^＋CD25^＋T细胞的AICD以CD3／CD28单克隆抗体活化或以特异性OVA323-339肽、抗原提呈细胞活化等两种方法获得。CD4^＋CD25^＋T细胞凋亡相关基因的表达通过实时定量PCR检测。流式细胞仪检测细胞的凋亡率。进一步观察FasL中和抗体、TRAIL中和抗体及caspase抑制剂zVAD-fmk对CD4^＋CD25^＋T细胞凋亡的影响。结果MACS成功分离CD4^＋CD25^＋T细胞，纯度可达98％，该细胞可特异性表达Foxp3基因，能明显抑制效应性T细胞的体外增殖。CD3／CD28抗体以及OVA特异性抗原活化8d的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞AICD达39％～45％。活化前后的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞死亡受体家族表达发生明显变化；FasL、TRAIL中和抗体及zVAD-fmk可明显抑制CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的凋亡。结论FasL／Fas及其他凋亡相关分子可能参与了CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的凋亡。     

CD4+CD25+调节性T细胞的生物学特性及功能

对自身抗原产生免疫耐受是防止发生自身免疫病的关键。自1995年日本学者Sakaguchi等首次报道CD4^＋CD25^＋调节性T（Treg）细胞以来，越来越多的研究证明这群T细胞在自身耐受的维持中发挥着重要的作用。CD4^＋CD25^＋调节性T细胞具有以下特点：①自身免疫防御作用；②自然条件下是处于无能（Anergy）状态；③抑制其他CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞的生物活性；④抑制活性是抗原非特异性的；⑤抑制方法可能通过细胞与细胞间直接接触，或经分泌抑制性细胞因子发挥免疫抑制效应；     

卵巢癌细胞培养上清诱导CD4+CD25-T细胞分化为CD4+CD25+调节性T细胞

目的研究卵巢癌细胞培养上清液是否能诱导外周血CD4^＋CD25^- T细胞转变为CD4^＋CD25^＋调节性T细胞。方法将外周血CD4^＋CD25^- T细胞分离后，对照组用CD3和CD28单抗活化，实验组在对照基础上加用卵巢癌细胞株SKOV3培养上清，72h后分离各组的CD25^＋和CD25^-T细胞，溴化脱氧尿嘧啶掺入标记法测定增殖能力及对静息的自体同源CD4^＋CD25^- T细胞的增殖抑制能力，流式细胞仪测定细胞糖皮质激素诱发型TNF受体（glucocorticoid-induced TNFR,GITR）与CTLA-4分子的表达，RT-PCR检测细胞卿mRNA的表达。结果与对照组相反，实验组的CD4^＋CD25^＋T细胞具有免疫抑制功能，自身增殖能力下降，GITR和CTLA-4分子的表达和CD4^＋CD25^＋调节性T细胞相似，并被诱导表达转录因子Foxp3 mRNA。结论卵巢癌细胞分泌的可溶性物质能诱导外周血CD4^＋CD25^-T细胞转化为CD4^＋CD25^＋调节性T细胞。     

环孢霉素A对OVA免疫TCR转基因DO11.10小鼠CD4+CD25+T细胞的影响

目的：研究免疫抑制剂Csh对处于免疫应答状态的小鼠脾脏调节性CD4^＋CD25^＋T细胞影响。方法：采用流式细胞术检测卵白蛋白（OVA）免疫的DO11．10小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞及其中Foxp 3^＋T细胞的变化。结果：OVA免疫后脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞占CD4^＋T细胞百分数及Foxp 3^＋T细胞占CD4^＋CD25^＋T细胞百分数均增加，显示CsA可明显减少正常及免疫应答状态下小鼠脾脏CD4^＋CD25^＋T细胞及CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞百分数。结论：CsA在抑制免疫应答的同时也可能抑制了免疫耐受的诱导。     

105 CD4+CD25+调节性T细胞和肿瘤免疫

近期研究发现一个有独特免疫调节功能的T细胞亚群CD4+CD25+调节性T细胞,不仅能抑制自身免疫性疾病发生,还可能参与肿瘤免疫的调节.这群细胞具有免疫无能和免疫抑制特性,通过与细胞直接接触发挥作用,而不依赖于其分泌的细胞因子.肿瘤环境中CD4+CD25+调节性T细胞比例增加,导致肿瘤免疫失调,去除这群细胞可有效诱导肿瘤免疫,为肿瘤治疗提供了一种新的方法.     

TGF-β1参与肺癌CD4+CD25+调节性T细胞比例增高的机制初探

CD4^＋CD25^＋调节性T细胞在肿瘤免疫耐受机制中发挥的作用近来备受瞩目,多种肿瘤患者机体内外周血及肿瘤局部均有调节性T细胞的比例增高.TGF-β1是很强的免疫抑制因子,它能影响参与天然免疫和获得性免疫免疫细胞的增殖、活化和分化,抑制免疫调节性细胞因子的产生.在肺癌病变局部,TGF-β1是否在淋巴细胞被诱导分化为CD4^＋CD25^＋调节性T细胞过程发挥了作用,在本研究中试图作一初步探讨.     

手足口病患儿T淋巴细胞亚群与CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨外周血T淋巴细胞亚群及CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞在手足口病病人发病中的临床意义。方法采用流式细胞术检测了46例手足口病患者以及17例健康体检者外周血T细胞亚群CD3^＋、CD3^＋CD4ˉCD8^＋、CD3^＋CD4^＋CD8^＋、CD3^＋CD4^＋CD8ˉ与CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞水平。结果与正常对照组相比,手足口病患者组CD3^＋、CD3^＋CD4ˉCD8’、CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞的百分率降低（P值分别为0．008、0．050、0．025）。CD3^＋CD4^＋CD8^＋、CD3^＋CD4^＋CD8ˉ百分率以及CD4／CD8比值差异无统计学意义（P值分别为0．847、0．775、0．149）,以上各细胞亚群的百分率以及CD4／CD8比值在年龄与性别方面差异无统计学意义。结论手足口病患者CD3^＋CD4ˉCD8ˉ双阴性调节性T细胞、CD3^＋、CD3^＋CD4ˉCD8^＋异常变化提示其免疫功能异常。     

CD4+CD25+调节性T细胞在肿瘤免疫中的作用

CD4+CD25+调节性T细胞(Tr)是体内自然发生的调节性T细胞的重要亚群,具有无反应性和免疫抑制两大特性,主要通过与靶细胞的直接接触而起作用,其在体内不仅参与自身免疫性疾病、移植排斥反应等,还在肿瘤的发生、发展及免疫治疗中发挥重要作用.近几年来,Tr在肿瘤免疫中的作用倍受关注.     

自身免疫性肝炎CD4+CD25+high调节性T细胞的研究

目的探讨CD4^＋CD25^＋high调节性T细胞（Tr）在自身免疫性肝炎（AIH）发病中的作用。方法用流式细胞仪技术比较分析AIH患者16例、慢性乙型肝炎（CHB）22例及键康正常人20例外周血中的CD4^＋CD25^＋high细胞，同时用免疫组织化学法检测AIH和CHB患者肝组织Foxp3的表达情况。结果AIH组外周血中CD4^＋CD25^＋high／CD4^＋百分比显著低于正常组（P〈0、05）和CHB组（P〈O．01），并且CHB组显著高于正常组（P〈0．05）；同时AIH组外周血中CD4^＋ T细胞也显著高于CHB组（P〈0．01））；肝组织Foxp3^＋细胞主要分布于肝小叶内窦周隙、汇管区，AIH组肝组织Foxp3^＋表达显著低于CHB组（P〈0．01）。结论CD4^＋CD25^＋high Tr细胞下降可能是自身免疫性肝炎发病的原因之一。