耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因分型研究

目的明确本地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的基因型别及其分布规律,探讨MR-SA菌株进化及遗传特性。方法收集2009年1月—2012年1月鄂尔多斯中心医院门诊及住院患者非痰标本分离的MRSA菌株61株,应用SCCmec基因分型和葡萄球菌A蛋白基因多态性分析(spa)方法进行基因分型。结果应用SCCmec的方法分离的MRSA以SCCmecⅡ、Ⅲ型为主,分别占50.8%和44.3%;应用spa的方法分离的MRSA以t030和t002为主,分别占39.3%和34.4%。结论本地区分离MRSA以SCCmecⅢ-t030和SCCmecⅡ-t002为主。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌基因分型研究

目的 了解本地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)流行株的来源和遗传背景.方法 回顾分析华西医院127例MRSA感染者的病例资料,用SCCmec多重PCR技术、葡萄球菌A蛋白(spa)分型技术和多位点测序分型技术对其中10株MRSA临床分离株进行基因分型,并检测其杀白细胞毒素基因.结果 病例资料显示127株MRSA中3株为社区获得性MRSA(CA-MRSA),其余均为医院获得性MRSA(HA-MRSA).进行分型研究的10株MRSA中,7株HA-MRsA为SCCmecⅢ-ST239-PVL(一),呈现高度的克隆一致性,spa分型进一步显示4株为t030,另外3株为t037;CA-MRSA s19165分型为ST8-t008,与USA300属同一克隆,并且携带SCCmecⅣa和PVL基因,符合USA300一般基因特征.另外2株CA-MRSAs5301、s29635均为SCCmecⅣa-ST59-t437,与我国其他地区的报道不同.结论 该院分离的MRSA仍以医院获得性为主(124/127),HA-MRSA呈现高度的克隆一致性,并与我国的主要流行株为同一克隆;分离到与美国主要CA-MRSA流行株USA300相同克隆的菌株,另外分离到的CA-MRSA ST59-t437克隆株在我国其他地区未有报道.MLST和spa分型技术是金黄色葡萄球菌分子流行病学研究的更为简便快速的方法.     

乌鲁木齐地区金黄色葡萄球菌分离株的分子分型与耐药性分析

目的 了解乌鲁木齐地区金黄色葡萄球菌临床分离株的分子特征及其对临床常用抗生素的耐药情况.方法 收集2010年6月至2012年12月期间乌鲁木齐地区一所大型综合医院临床分离的86株金黄色葡萄球菌,在鉴定区分耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(methicillin-susceptible Staphylococcus aureus,MSSA)的基础上,应用SCCmec分型、spa分型、多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)、脉冲场凝胶电泳分型(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)、agr分型等葡萄球菌分子分型方法进行分析,检测pvl毒力基因的携带率,检测菌株对苯唑西林、红霉素、四环素等13种临床常用抗生素的耐药性,分析菌株的耐药情况及耐药基因.结果 86株金葡菌中31株为MRSA,55株为MSSA.31株MRSA分为8种spa型和7种ST型,优势流行克隆为ST239-MRSA-Ⅲ-t030 (71％,22/31).55株MSSA分为23种spa型、16种ST型和8个PFGE聚类组,agrⅠ型占56.4％ (31/55).MSSA菌株的pvl毒力基因检出率为49.1％ (27/55),MRSA为38.7％(12/31).药敏结果显示31株MRSA均为多重耐药(multidrug-resistant,MDR)菌株,55株MSSA中有31株为MDR菌株.结论 乌鲁木齐地区流行的MRSA以ST239-MRSA-Ⅲ-t030为主,而MSSA表现出较高遗传多样性,发现有t11413,ST121等新的型别流行.     

成都地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec基因分型的研究

目的研究成都地区2013至2014年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的SCCmec基因分型,了解本地区现阶段主要流行株的分子流行病学特征及耐药现状。方法采用PCR方法对86株MRSA菌株的SCCmec进行基因分型;采用微量肉汤稀释法对86株MRSA进行药敏试验。结果 86株MRSA的基因分型为:SCCmecⅠ型3株,SCCmecⅡ型5株,SCCmecⅢ型63株,SCCmecⅣ型3株,SCCmec V型1株,未分型11株。SCCmecⅡ、Ⅲ型MRSA菌株对大多数抗菌药物均呈不同程度耐药。结论目前成都地区MRSA菌株的SCCmec基因型呈多态性分布,其中Ⅲ型仍为主要流行菌株;Ⅲ型MRSA菌株的耐药表型随时间的迁移而发生改变。     

老年病房耐甲氧西林金黄色葡萄球菌葡萄球菌染色体mec基因盒基因型和杀白细胞素基因的检测及特点

目的 了解复旦大学附属华东医院老年科临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)葡萄染色体mec基因盒(SCCmec)的分布和杀白细胞毒素(PVL)基因的携带状况.方法 收集复旦大学附属华东医院老年科病房2011年2-7月从临床标本中分离的不重复MRSA共57株.运用多重聚合酶链反应检测金黄色葡萄球菌16S rRNA基因、PVL基因和mecA基因,并同时检测SCCmec的基因型及亚型.采用琼脂稀释法进行13种药物的药物敏感试验.结果 57株MRSA中,SCCmec Ⅰ型1株(1.8％),SCCmec Ⅰ A型5株(8.7％),SCCmecⅡ型30株(52.6％),SCCmecⅢ型15株(26.3％),SCCmecⅢA型2株(3.5％),4株(7.0％)未能分型.57株MRSA中,PVL基因均为阴性.MRSA菌株最敏感的药物为万古霉素和利奈唑胺(敏感率均为100.0％),其次为呋喃妥因和甲氧苄啶-磺胺甲(哑)唑(98.2％、96.5％).结论 复旦大学附属华东医院老年科临床分离的MRSA呈多重耐药,其SCCmec型别主要以SCCmecⅡ型和SCCmecⅢ型为主,未发现PVL基因阳性菌株.     

医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌Spa和SCCmec分型研究

目的 对医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)A蛋白(Spa)和葡萄球菌mec基因盒(SCCmec)分型同源性研究,为预防和控制医院感染提供依据.方法 采用药敏纸片法(K-B法)、SCCmec分型及Spa分型技术,收集自2013年8月至2014年4月80株HA-MRSA,进行药敏试验和同源性分析,并检测毒力基因杀白细胞毒素(pvl)基因和毒性休克综合征(tsst)基因.结果 药敏结果显示,80株HA-MRSA对青霉素、氨苄西林/舒巴坦、亚胺培南均耐药,对环丙沙星耐药率为90.0％,对克林霉素耐药率为58.8％,对复方磺胺类对药率为13.8％,对万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁均敏感.SCCmec分型结果显示,80株MRSA中SCCmecⅡ型占73.75％、SCCmecⅢ型(13.75％)、SCCmec V型(12.5％).Spa分型,28株为t2460型(35％)、9株为t002型(11％)、6株为t030型(8％)、7株为t632型(9％)、5株为t037型(6％),其他Spa型相对分散.pvl基因阳性率为7.5％(6株),tsst基因为阴性.结论 HA-MRSA SCCmec分型以Ⅱ为主,Spa分型以t2460型为主,有较高的同源性;HA-MR-SA对多种药物具有较高的耐药性并且存在多重耐药.     

医院获得性感染中出现携带SCCmecⅣ/Ⅴ的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌

目的 研究某院临床分离的医院获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(HA-MRSA)的葡萄球菌染色体mec盒(SCCmec)分型及分子流行病学特征.方法 收集中南大学湘雅医院2012年1月~2012年12月临床分离的71株HA-MRSA,采用多重PCR进行SCCmec分型,PCR检测PVL毒素基因,并用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株间的同源性.结果 71株HA-MRSA以SCCmecⅢ型为主,占69.0%(49/71),其次为SCCmecⅣ型、SCCmecⅤ型和SCCmecⅡ型,分别占14.1%(10/71)、4.2%(3/71)和4.2%(3/71),另有6株(8.5%)菌株未能分型.HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA感染者年龄显著低于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA感染者,携带PVL基因阳性率显著高于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA感染者,而两者入院至检出菌株的时间及住院天数均未见明显差异.HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA对左旋氧氟沙星、环丙沙星、利福平、庆大霉素、四环素等的耐药率均显著低于HA-SCCmecⅠ/Ⅱ/ⅢMRSA(P<0.05).13株HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA菌株在55%的相似度水平形成一个大的组群.按照≥85%的相似度,这些菌株共形成3个PFGE簇以及4个单一菌株的PFGE型.结论 在国内首次发现携带SCCmecⅤ型的HA-MRSA菌株,HA-SCCmecⅣ/ⅤMRSA已有在医疗机构传播的趋势,并成为医院内感染的重要来源.     

异质性万古霉素中介的金黄色葡萄球菌的分子特征

摘要：目的了解我院异质性万古霉素中介的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分布及分子学特征。方法对2015年10月至2016年5月我院临床分离的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,采用菌群分析策略-曲线下面积法(PAP-AUC)筛选异质性万古霉素中介的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;采用多重PCR法对hVISA进行agr、spa、SCC基因分型测定,对PCR产物进行测序确定spa分型。结果分离的79株MRSA经筛选获得9株h VISA;9株hVISA中有7株为agr-Ⅰ型,2株为agr-Ⅲ型;有6种spa克隆型,包括t437(4株),t114(1株)、t2310(1株)、t14062(1株)、t030(1株)、t16472(1株)。SCCmec分型以Ⅳa型为主,占55.56%,其次为Ⅲ型33.33%、Ⅱ型11.11%。结论我院hVISA检出率为11.39%,呈多克隆流行。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MLST 联合SCCmec 基因分型与耐药性分析

目的 了解滨州医学院附属医院MRSA 菌株多位点序列分型（MLST）联合SCCmec 基因型分布 和各种基因型的耐药特征。方法 采用聚合酶链反应（PCR）对MRSA 菌株进行MLST 联合SCCmec 基因分型； 采用WalkWAY96PLUS PC33 药敏板检测MRSA 抗菌药物敏感性。结果 SCCmec 基因分型结果以Ⅲ型为 主（63/67 株，占94.03%），MLST 分型共检测出6 种基因型：ST 88、ST 121、ST 221、ST 82、ST 239 及ST 399， 其中以ST 239（61/67，91.04%）为主，耐药性分析显示SCCmec Ⅲ型MRSA 菌株表现为多重耐药。结论 ST239-MRSA-SCCmec Ⅲ型菌株为鲁北地区MRSA 主要流行菌株，该型菌株对多种抗生素呈多重耐药； MLST 联合SCCmec 基因分型方法是MRSA 遗传背景研究简便快速的方法。     

痤疮感染金黄色葡萄球菌分子分型及毒力特征

目的：了解痤疮感染金黄色葡萄球菌的分子类型、毒力及耐药特征,为防治金葡菌感染提供依据。方法收集门诊分离自痤疮患者的31株金葡菌菌株,采用PCR方法鉴定MRSA菌,利用spa、SCCmec、MLST等分型方法对MRSA菌进行分子分型,检测pvl等17种毒力基因,同时测定所有细菌对苯唑西林等17种药物的敏感性,分析金葡菌分型特征、毒力特征及耐药情况。结果31例金葡菌中有17株为MRSA菌,所有MRSA菌株可分为3种SCCmec型,4种spa型,3种ST型。14株MSSA菌可分为5种ST型和spa型。所有金葡菌均携带有多种毒力基因,溶血素基因及seg基因携带率最高。结论分离自痤疮金葡菌均携带有多种毒力基因,主要的感染克隆为MRSA-ST239-Ⅲ以及MSSA-ST121,对多种抗生素耐药。     

三株社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因分型研究

目的 了解西南地区社区获得性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(CA-MRSA)流行株的基因特征.方法 用葡萄球菌盒式染色体(SCCmec)多重PCR分型技术、葡萄球菌A蛋白基因(spa)分型技术和多位点测序分型(MLST)技术对3株分离自临床的CA-MRSA(s35301、s29635、s19165)进行基因分型,并检测其杀白细胞毒素(PVL)基因.结果 3株MRSA的mecA基因(147 bp)全部为阳性扩增,还同时扩增出750 bp左右的片段,该产物经测序后证实为SCCmecⅣa型.spa分型:s35301、s29635为t437,s19165为t008.MIJST分型:s35301、s29635为ST59型,s19165为ST8型.s19165、s35301 PVL基因扩增阳性,s29635 PVL基因扩增阴性.结论 西南地区分离到CA-MRSA ST8-t008克隆株及ST59-t437克隆株.应注意控制CA-MRSA感染及传播.     

肺结核感染金黄色葡萄球菌的基因分型及耐药研究

目的通过对肺结核患者分离出的金黄色葡萄球菌进行基因谱型和药敏检测研究,了解肺结核并发金黄色葡萄球菌的院内流行状况。方法对,晦床分离出的30株金黄色葡萄球菌进行药敏试验和SCCmec基因盒的多重PCR检测。结果药敏结果显示30株金黄色葡萄球菌对青霉素和甲氧西林的耐药率最高。甲氧西林的耐药率达到62．8％。MecA阳性菌株SCCmec的分型显示均为Ⅱ型或Ⅲ型,且所占比例相近,未见Ⅰ型和Ⅳ型。结论肺结核患者并发金黄色葡萄球菌耐药性普遍,MecA基因介导的MRSA在分离菌株分型以Ⅱ型或Ⅲ型为主。     

Genotypic Characterization of Methicillin-resistant Staphylococcus aureus Isolated from Pigs and Retail Foods in China

Objective To investigate the genotypic diversity of Methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) isolated from pigs and retail foods from different geographical areas in China and further to study the routes and rates of transmission of this pathogen from animals to food. Methods Seventy-one MRSA isolates were obtained from pigs and retail foods and then characterized by multi-locus sequencing typing (MLST), spa typing, multiple-locus variable number of tandem repeat analysis (MLVA), pulsed-field gel electrophoresis (PFGE), and antimicrobial susceptibility testing. Results All isolated MRSA exhibited multi-drug resistance (MDR). Greater diversity was found in food-associated MRSA (7 STs, 8 spa types, and 10 MLVA patterns) compared to pig-associated MRSA (3 STs, 1 spa type, and 6 MLVA patterns). PFGE patterns were more diverse for pig-associated MRSA than those of food-associated isolates (40 vs. 11 pulse types). Among the pig-associated isolates, CC9-ST9-t899-MC2236 was the most prevalent clone (96.4%), and CC9-ST9-t437-MC621 (20.0%) was the predominant clone among the food-associated isolates. The CC9-ST9 isolates showed significantly higher antimicrobial resistance than other clones. Interestingly, CC398-ST398-t034 clone was identified from both pig- and food-associated isolates. Of note, some community- and hospital-associated MRSA strains (t030, t172, t1244, and t4549) were also identified as food-associated isolates. Conclusion CC9-ST9-t899-MC2236-MDR was the most predominant clone in pigs, but significant genetic diversity was observed in food-associated MRSA. Our results demonstrate the great need for improved surveillance of MRSA in livestock and food and effective prevention strategies to limit MDR-MRSA infections in China.     

无菌部位金黄色葡萄球菌耐药性及分子流行病学特征

目的:了解无菌部位分离的金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物的耐药性及分子流行病学特征,为临床预防和控制其感染以及合理使用抗菌药物提供实验依据。方法:收集2011年8月至2012年6月某三甲医院无菌部位分离的非重复金黄色葡萄球菌50株。VITEK-2微生物分析系统进行菌株鉴定,PCR检测耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)杀白细胞毒素(PVL)基因,多重PCR对MRSA进行SCCmec基因分型。结果:在18种抗菌药物中,青霉素和红霉素的耐药率最高,分别为90.0%和62.0%;尚无对万古霉素、替加环素、替考拉宁、利奈唑胺、达托霉素的耐药菌株。50株金葡菌中,MRSA 15株(30.0%),MSSA35株(70.0%),MRSA对12种抗菌药物的敏感率明显低于MSSA。15株MRSA中,SCCmecⅢ型11株(73.3%),SCCmecⅣ型4株(26.7%),PVL基因扩增均为阴性。结论:该院无菌部位分离的金黄色葡萄球菌以MSSA为主;MRSA对抗菌药物呈多重耐药性,且以SCCmecⅢ型为主。     

Investigation of the prevalence of patients co-colonized or infected with methicillin-resistant Staphylococcus aureus and vancomycin- resistant enterococci in China: a hospital-based study

Background Nosocomial infection caused by methicillin-resistant Staphylococcus aureus （MRSA） and vancomycin-resistant enterococci （VRE） could lead to increased morbidity and mortality. In 2006, VRE nosocomial spread became a reality in our hospital since the first VRE nosocomial infection in 2003. Little is known about the prevalence of coexistence with VRE and MRSA in the patients. The primary objective of the study was to identify the molecular characteristics of epidemic MRSA clones in our hospital and the prevalence of the coexistence with MRSA and VRE in same patients during the 2-year period, 2006-2007. Methods The clinical features, laboratory test results, and therapeutic outcomes of 129 cases who isolated MRSA collected from January 2006 to December 2007 were retrospectively analyzed. Polymerase chain reaction （PCR） was used to determine mecA-femB type and staphylococcal cassette chromosome mec （SCCmec） type. All the participants were screened for clinical and microbiological data to identify the coexistence of VRE strains with MRSA. Results One hundred and twenty-nine MRSA isolates were included in the study： 71 （55%） from the intensive care unit, 35 （27.2%） from the surgical wards and 23 （17.8%） from the medical wards. The most frequent source of isolation of MRSA was sputum （76.7%）. From seven patients we isolated MRSA and VRE （E. faecium） simultaneously during their inpatient stay. One hundred and twenty-seven （127/129, 98.4%） MRSA isolates harboured SCCmec type Ⅲ, only 2 MRSA strains contained SCCmec type Ⅱ. All of the 129 MRSA isolates remained sensitive to vancomycin, teicoplanin and linezolid. Higher sensitivity rates were noted for chloramphenicol 99.2% （128/129）. Only 20.2% （26/129） of the MRSA isolates were sensitive to rifampin. All isolates presented resistance to multiple antimicrobial agents with high minimum inhibitory concentrations （MICs）, including： β-Iactams （penicillin, oxacillin, cefoxitin, and cefazolin）, tetracycline, erythromycin, gentamicin, and quinolones （ciprofloxacin, levofloxacin, and moxifloxacin）. Conclusions The predominant MRSA clone at Beijing Chaoyang Hospital from 2006 to 2007 had the type Ⅲ SCCmec element. All of the MRSA isolates were multiresistant to antimicrobial agents. Emergence of coexistence of MRSA and VRE in the same patient was not rare. Physicians should pay more attention to infections resulting from MRSA and VRE. Aggressive infection control measures should be taken to prevent the transmission of the multidrug resistance organism.     

儿童标本中分离MRSA的SCCmec基因分型及耐药性分析

目的 了解亳州地区儿童耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin resistant staphylococcus aureus,MRSA)的SCCmec基因分型及其耐药性。 方法 收集2018年12月—2019年3月亳州市人民医院儿科共6个病区临床分离的89株MRSA菌株,采用PCR方法对其进行SCCmec基因分型;VITEK 2 compact全自动微生物分析仪进行抗菌药物敏感性试验,并采用WHONET 5.6软件统计药敏结果并进行分析。 结果 89株MRSA以SCCmecⅣa型为主,占55.1%(49/89),其次SCCmecⅢ型12.4%(11/89),SCCmecⅡ型1.1%(1/89),未分型31.4%(28/89),未见SCCmecⅠ型和Ⅴ型;89株MRSA对青霉素均耐药,对红霉素、克林霉素均高耐药,耐药率分别为87.6%、62.9%,对喹诺酮类、庆大霉素、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑的耐药率均低于10%;而49株SCCmecⅣa型对红霉素、克林霉素的耐药率略升高,分别为91.8%、77.6%,对喹诺酮类药物耐药率4.1%,有所下降,而对甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、庆大霉素均敏感;以上菌株未发现对万古霉素、利奈唑胺、奎奴普丁/达福普汀及替加环素耐药。 结论 目前亳州地区儿童分离的MRSA主要以SCCmecⅣa型为主要流行株,对多种抗菌药物呈不同程度耐药。