高敏乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸定量检测性能评价

目的 评价磁珠法核酸提取的HBV-DNA定量试剂（以下简称“磁珠法”）性能是否符合ISO15189实验室认可及临床诊断要求。方法 使用高敏乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸定量检测试剂盒（湖南圣湘生物科技有限公司）,采用磁珠法提取核酸进行正确度、精密度、线性范围、可报告范围、抗干扰能力等的检测性能评价。结果 磁珠法定量检测HBV-DNA项目重复性精密度<3/5TEa,中间精密度<4/5TEa(以室间质评评价界限靶值对数值±0.4作为允许总误差（TEa）,正确度与室间质评结果靶值偏倚的绝对值<7.5%;线性范围a值在1±0.05范围内,相关系数r²≥0.95;可报告范围偏倚的绝对值≤20%,抗干扰实验结果与正常标本的检测结果在±0.4 Log内。结论 高敏乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸定量检测符合临床的检测需求。     

自建HBV-DNA实时荧光定量PCR检测系统性能验证方法及结果分析

目的探讨自建乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)实时荧光定量PCR检测系统性能验证的方法和程序,充分了解其检测性能,评估并确认分析性能是否符合预期用途。方法参考美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)颁布的EP系列文件及中国合格评定国家认可委员会(CNAS)对实验室检测系统评估的要求,对实验室自建的HBV-DNA实时荧光定量PCR检测系统进行精密度、正确度、线性范围、检测下限等性能参数的验证和评价。结果 HBV-DNA定量检测低值和高值的批内精密度CV分别为3.4%和1.8%,总精密度CV分别为3.8%和1.8%。正确度初次验证有两项不符合要求,经厂家校准后重新验证符合要求。线性回归方程为Y=0.997X+0.012,R2=0.999,线性范围为500-108IU/ml。检测下限为500 IU/ml。结论自建HBV-DNA实时荧光定量PCR检测系统的性能符合要求,能够应用于临床检测。     

HBV-DNA荧光定量PCR检测的室内质控研究

目的研究HBV-DNA荧光定量PCR检测室内质控管理体系。方法自制HBV-DNA阳性质控血清,连续测量20次,计算均值、标准差和变异系数,从第3次开始利用即刻法进行质控,20次以后利用质控图法进行质控。结果自制阳性质控血清均一性和准确度均达到实验要求,用即刻法检测3～20次质控结果均小于N2S数值,在控制范围内,用质控图法检测HBV-DNA室内质控对数值的均值为5.54,标准差为0.22,CV为3.9%,稳定性好,有临床应用价值,质控图利用EXCEL表格标示出警告限和失控限,有利于动态监控质控结果。结论联合即刻法和质控图法对于应用荧光定量PCR的方法进行HBV-DNA检测的室内控制切实可行。     

实时荧光定量聚合酶链式反应室内质控方法的研究

目的 探讨能应用于监测实时荧光定量PCR室内质控的方法.方法 用Taqman实时荧光定量PCR法检测2009年4月?5月的血清HBV-DNA,计算每天的阳性质控结果、标准曲线的斜率、截距和相关系数(r)及相关结果的均值(x)、标准差(s)和变异系数(cv).结果 2009年4月份阳性质控的x、s和cv分别为3.193、0.182和5.700%;斜率的x、s和cv分别为0.274、0.015和5.470%;截距的、s和cv分别为12.735、0.352和2.760%;相关系数的x、s和cv分别为0.997、0.004和0.400%.2009年5月份阳性质控的面x、s和cv分别为3.251、0.213和6.550%;斜率的x、s和CV分别为0.274、0.016和5.840%;截距的x、s和cv分别为12.768、0.379和2.970%;相关系数的x、s和cv分别为0.995、0.005和0.500%.结论 Taqman实时荧光定量PCR法检测HBV-DNA实验中,可同时使用阳性质控品均值、斜率和截距作为监测手段实施室内控制,以便更好地为临床提供准确可靠的结果.     

AD7c-NTP定量检测试剂盒的性能验证及评价

目的:验证及评价深圳市安群生物工程有限公司研发生产的AD7c-NTP(酶联免疫吸附法)定量检测试剂盒的性能.方法:依据临床实验室标准协会(CLSI)批准的EP15-A2文件方法验证精密度及准确度,EP6-A文件方法验证线性范围,C28-A3文件方法验证生物学参考区间.结果:精密度方面:高、低浓度尿液样本批内检测结果CV分别为9.50％和4.99％,批间CV分别为13.54％和10.89％,均小于15％;准确度中:AD7c-NTP阳性质控品5次检测均值为6.512 ng/mL,标准差为0.26,CV为3.94％;分析灵敏度方面:试剂盒低值校准品A重复检测20次,浓度均值C校准品A+2SD校准品A为0.086 ng/mL,光密度均值OD校准品A+ 2SD校准品A为0.013,代入标曲中对应的浓度值为0.087 ng/mL;线性范围方面:高、低浓度混合尿液样本预期值与实测值的相关系数r为0.996;生物学参考区间方面:20份健康人尿样AD7c-NTP检测值范围为0.07 ～0.92 ng/mL.结论:深圳市安群生物工程有限公司研发的AD7c-NTP定量检测试剂盒的精密度、准确度、分析灵敏度、线性范围和生物学参考范围均达到了临床应用的实验要求,各性能指标的验证方法均可为相关实验室提供参考.     

两种新生儿苯丙氨酸定量检测试剂盒的性能比较

目的对比分析两种酶法苯丙氨酸定量检测试剂盒的性能,为行业标准制定和临床应用提供参考。方法分别对两种试剂盒进行外观检查,线性、特异性、空白限、准确度和精密度验证,以及临床样本验证。结果两种苯丙氨酸定量检测试剂盒外观和物理检查符合要求,两种试剂盒线性回归系数均高于标准要求。试剂盒A检测特异性质控品的检测浓度为0.49 mg/d L,试剂盒B检测特异性质控品的检测浓度为0.89 mg/d L,均小于各自的临界值,满足拟定标准要求。试剂盒B的准确性略差于拟定标准要求。试剂盒A、B的空白限分别为0.558 9 mg/d L和0.945 2 mg/d L,均不大于拟定标准要求的1.0 mg/d L。两种试剂盒的精密度均满足拟定标准要求,临床样本检测相关性较好(r=0.990 3)。结论两种试剂盒均能满足拟定标准要求,基本符合临床需要。     

基于自动化提取HCV RNA荧光定量检测系统的性能验证

目的　基于Stream SP96 全自动核酸提取仪、ABI7500 实时荧光定量PCR仪对丙型肝炎病毒（HCV）RNA 定量检测系统的性能指标进行验证。方法　依据《临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证》WS/T 420-2013 性能 验证方案,采用Stream SP96 全自动核酸提取平台及ABI7500 荧光定量PCR仪检测HCV RNA,对其准确度、精密度、线性 区间、检测限、定量限和抗干扰能力等进行方法学性能验证。结果　低、高浓度标准物质的均值与靶值的误差分别为 0.20 和 0.25,均小于靶值对数值±0.4 log;低浓度样本的批内、批间不精密度变异系数值分别为 0.79%、1.01%,高浓度样本的 批内、批间不精密度变异系数值分别为 0.52%、1.22%,均<5%;线性相关系数r>0.980,线性区间可达 20~1.0×10 8 ,呈良好 线性（R 2 =0.997 3）;检出限为 20 IU/mL,最低定量限为 50 IU/mL;含胆红素（300 mg/L）、血红蛋白（300 g/L）、甘油三酯 （3 000 mg/L）的干扰物质对样本检测结果无影响。结论　HCV RNA 实时荧光PCR定量法检测系统准确度、精密度、线 性范围、检出限、定量限、抗干扰能力均符合厂家声明,能够满足临床对HCV RNA定量检测的需求。     

3种HBV DNA荧光定量PCR试剂检测结果比较

目的 比较及评价3种HBV-DNA荧光定量PCR试剂检测结果的差异.方法 同时用3种HBV-DNA荧光定量PCR试剂对已知结果的质控血清、标准品及本院79份HBsAg阳性的临床标本进行检测,并对检测结果进行比较分析.结果 试剂A、B、C检测阳性率分别为41.77%(33例)、45.57%(36例)和41.77%(33例).3种方法结果一致者66例,总符合率83.54%.试剂A、B与试剂C检测结果相比差异有统计学意义(P<0.05),试剂A与B检测结果相比差异无统计学意义(P>0.05).试剂A与C的灵敏度、特异性均为77.78%、88.37%;试剂B灵敏度为89.66%、特异性80.00%.结论 试剂A与B总体性能优于试剂C,适于临床检测与筛查.实验室必须选择质量好且符合自己实验室要求、与本实验室仪器相匹配的试剂以保证检验质量.     

血细胞分析仪性能监控体系的建立

目的 建立血细胞分析仪性能监控体系,保证所有检测结果准确可靠.方法 依据ISO/15189要求对实验室的血细胞分析仪建立性能监控体系,包括背景计数、携带污染率、精密度、室内质控、线性检测、仪器校准、准确度、不同仪器和不同检测模式间新鲜全血比对、仪器维护保养等9项指标进行监控,对各项指标均有明确规定,具有一定的可操作性.结果 各仪器的背景计数、携带污染率,精密度均符合仪器要求;日间精密度CV＜1/3 CLIA'88;线性范围满足临床要求,相关系数r均＞0.990;小比对结果显示各参数之间相对偏差＜1/2 CLIA'88;仪器间和不同检测模式间各参数比对结果的相关系数r均＞0.975,各参数在医学决定水平处预期偏倚均未超出要求范围;卫生部及广东省临检中心室间质评结果均为100%.结论 建立血细胞分析仪性能监控体系,保证不同仪器及同一仪器不同检测模式检测结果的一致和准确,有利于实验室的规范化管理.     

甲型肝炎病毒IgM抗体酶免试剂盒临床应用评价

目的采用酶联免疫方法对准备新引进的和实验室现使用的两种甲型肝炎病毒(HAV)IgM抗体酶免试剂盒进行临床应用准确性和精密度评价。方法采用卫生部临检中心已明确预期阴、阳结果的HAV—IgM抗体质控血清，进行HAV—IgM抗体酶免试剂盒临床应用准确性评价；用含量2NCU／ml的定值血清进行批内和批间精密度评价；并对134例患者血清同时检测．对比分析。结果待评价的和现使用的HAV—IgM抗体酶免试剂盒检测质控血清符合率均为98％，批内精密度CV为9．09％和8．27％．批间精密度CV为15．17％和16．31％。均可以接受。结论所评价的HAV—IgM抗体酶免试剂盒其灵敏度、特异性、总符合率均较高．与现使用的试剂盒基本一致。     

免疫透射比浊法CRP检测试剂盒的性能评价

目的 评价日本（ITARON）CRP试剂盒检测C反应蛋白（CRP）的可靠性。方法分别用ITARON试剂盒与西班牙BioSystems试剂盒、德国Human试剂盒同时对50例临床标本进行检测，并通过线性试验、准确性试验、重复性试验对IATRON试剂进行评价。结果IATRON与其它两种进口试剂的相关系数均为0．998，差异无显著性（P〉0．05）；用IATRON试剂盒检测二种质控物的相对误差分别为3．33％及0．29％；重复性试验显示批内变异系数为2．48％，批间变异系数为2．72％；线性试验显示检测浓度在10mg／dl以内呈良好线性。结论 IATRON试剂测定CRP浓度具有较好的精密度，结果准确可靠，其性能符合临床使用要求。     

化学发光法测定CA50及CA242方法学评价*

目的：对科美CHEMCLIN 1500全自动化学发光免疫分析仪检测肿瘤相关抗原50（CA50）、肿瘤相关抗原242（CA242）的分析性能进行方法学验证。方法：参照美国临床实验室标准化委员会（NCLLS）EP文件要求,应用科美CHEMCLIN 1500全自动化学发光免疫分析仪定量测定CA50、CA242,评价检测CA50、CA242的精密度、正确度、检出限和分析测量范围。结果：CA50、CA242批内精密度变异系数均＜15%,批间精密度变异系数均＜15%;测定CA50、CA242定值校准品与靶值的偏倚＜5%,正确度满足判断标准;CA50、CA242检出限分别为0.68 U/mL、0.56 U/mL;CA50浓度在19.43～131.55 U/mL范围内其测定的线性相关系数r2为0.9895,CA242在15.86～191.25 U/mL范围内其测定的线性相关系数r2为0.9971。结论：本次研究所验证的科美CHEMCLIN 1500全自动化学发光免疫分析仪检测CA50、CA242的精密度、正确度、检测限、线性范围均与厂家声称值一致,表明该检测系统具有精密度好、正确度高、良好的线性等优点,能够满足临床检测的性能要求。     

人甲胎蛋白时间分辨免疫荧光分析试剂盒的研制

目的 研制人甲胎蛋白(hAFP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒。方法 采用双抗体夹心法建立AFP TRFIA试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价。结果 试剂盒的可测范围为1~1 000U/ml, 灵敏度为0.17U/ml,精密度良好,批内和批间的精密度分别为3.3%~5.9%,3.7%~ 6.5%。与CEA、CA12-5、CA19-9、CA15-3、白蛋白无交叉反应。稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年,37℃稳定7d。426份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0~12U/ml。用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测60份血清标本,其相关系数为0.995。结论 试剂盒各项指标(灵敏度、精密度、特异性、稳定性、准确度)均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒。     

人甲胎蛋白时间分辨免疫荧光分析试剂盒的研制

目的研制人甲胎蛋白(hAFP)时间分辨免疫荧光分析(TRFIA)试剂盒.方法采用双抗体夹心法建立AFP TRFIA 试剂盒,对试剂盒的各项指标进行评价.结果试剂盒的可测范围为l～1 000 U/ml,灵敏度为0.17 U/ml,精密度良好,批内和批间的精密度分别为3.3%～5.9%,3.7%～6.5%.与CEA、CA12-5、CA19-9、CA15-3、白蛋白无交叉反应.稳定性试验表明试剂可以在4℃稳定1年,37℃稳定7 d.426份正常血清标本测试该试剂盒的正常参考值范围是0～12 U/ml.用本试剂盒与国外同类试剂盒同时检测60份血清标本,其相关系数为0.995.结论试剂盒各项指标(灵敏度、精密度、特异性、稳定性、准确度)均达到临床检测要求,可替代国外同类产品试剂盒.     

两种C反应蛋白试剂盒在急性冠脉综合征患者中的应用比较

目的 探讨国产德赛C反应蛋白（CRP）试剂盒在贝克曼全自动生化仪上应用的可行性,以及在急性冠脉综合征（ACS）患者中的应用评估。方法 选择笔者医院冠心病重症监护治疗病房（CCU）30例ACS患者以及体检中心25例健康对照者,收集临床资料,用贝克曼库尔特（Beckman Coulter）公司的试剂盒与上海德赛试剂盒同时对上述55份临床血液标本在贝克曼仪器上进行检测,通过精密度试验、正确度试验、低值检测限、线性试验、生物参考区间验证试验以及干扰试验对德赛CRP试剂盒进行性能验证;同时比较分析两种试剂盒在30例ACS患者中的检测应用。结果 德赛CRP检测值的批内变异系数小于1/4CLIA''88,偏差小于1/2CLIA''88;德赛CRP的低值检测限为0.257mg/L;德赛与Beckman原装试剂盒的相关性良好（r=0.996）,检测结果比较,差异无统计学意义（P>0.05）;德赛CRP试剂盒在0.0~340.0mg/L范围内,线性良好;生物参考区间验证合格;一定程度的溶血、黄疸及脂血对检测结果无明显干扰;两种试剂盒在ACS患者中的检测结果比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 德赛CRP试剂盒在贝克曼仪器上的性能验证结果准确可靠,该试剂盒能安全可靠的应用于临床,尤其适用于ACS患者的疾病监测。     

sST2检测的性能评价及其在心力衰竭中的临床应用

目的对可溶性生长刺激表达基因2蛋白(soluble growth stimulating express gene 2,sST2)检测试剂盒的性能进行评价,并探讨sST2在心力衰竭中的临床应用。方法选取2015年8月—2016年8月确诊为心力衰竭的患者60例作为实验组和健康体检者50例作为对照组,检测两组sST2和N末端脑钠肽前体(N terminal pro B-type natriureticpeptide,NT-proBNP)浓度,探讨sST2水平与心力衰竭的临床联系,比较两指标对心衰的诊断价值和相关性分析。结果 sST2检测试剂盒批内精密度变异系数(coefficient of variation,CV)%分别为4.8%和2.8%,批间精密度CV%分别为5.9%和6.7%,线性范围为0~206.622 ng/mL。实验组sST2浓度为(52.63±9.38)ng/mL,与对照组(20.93±9.76)ng/mL相比,差异有统计学意义(P0.05);实验组sST2浓度与心功能分级和不同左心室射血分数(left ventricular ejectionfractions,LVEF)有关,Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级心衰患者的sST2浓度分别为(30.42±10.43)ng/mL、(38.10±12.61)ng/mL和(68.52±11.76)ng/mL,差异均有统计学意义(P0.05);LVEF0.5和LVEF0.5的患者sST2浓度分别为(39.41±10.32)ng/mL和(64.35±9.89)ng/mL,差异有统计学意义(P0.05);sST2浓度在心衰患者起病病因中差异无统计学意义(P0.05);实验组sST2和NT-proBNP相关系数为0.420,心衰患者sST2水平与NT-proBNP存在相关性。结论 sST2检测性能满足实验室检测要求。sST2作为一种新型血清标志物,可与NT-proBNP联合检测,提高对心衰的诊断价值。     

面向中药精制过程的中药水提液淀粉含量测定方法的改进与比较

目的?建立快速、准确的中药水提液中的淀粉含量测定方法。方法?针对中药水提液体系,对淀粉含量试剂盒方法进行方法学考察,以系统设计的淀粉模拟溶液为研究对象,比较碘显色法、酶水解法、优化后的试剂盒法3种方法的含量测定结果。结果?优化后的试剂盒法重现性良好,测试结果稳定。淀粉标准品模拟溶液精密度相对标准偏差RSD（n=6）为1.91%,测得各淀粉模拟溶液与水提液重复性相对标准偏差RSD（n=6）为1.82%~4.32%,平均加样回收率在99.18%~104.41%,RSD（n=9）为2.33%~4.94%。针对中药水提液体系淀粉含量检测的最佳方法为优化后的试剂盒法。结论?优化后所得的淀粉测定方法简单、高效,并具有较好的精密度及准确度,可为中药水提液中淀粉含量测定的方法研究提供依据。      

酶联荧光分析法在血清催乳素测定中的应用及其价值

①目的探讨酶联荧光分析法(ELFA)测定血清催乳素及其临床应用价值。②方法采用ELFA法测定不同浓度血清催乳素(PRL)的精密度、灵敏度、线性范围、回收率、标准曲线的稳定性及干扰因素。③结果ELFA法测定PRL的总CV值为3.2%~4.3%;分析灵敏度为0.5ng/mL,线性范围为0.5~200ng/mL,回收率为102.2%,标准曲线的稳定性为12天,高浓度的胆红素、血红蛋白和甘油三酯对对测定结果无显著性影响(P>0.05)。④结论ELFA法测定血清PRL操作简便,结果准确可靠,自动化程度高,且检测速度快,有较宽的线性范围和较高的精密度。     

N末端B型钠尿肽荧光层析法定量检测试剂盒评价

目的：对N末端B型钠尿肽（NT—proBNP）荧光层析法定量检测试剂盒进行评价。方法：随机选取24例高值样本（〉5000ng／L）、18例中值样本（2000～5000ng／L）、49例低值样本（〈2000ng／L），总计91例样本分别由对照化学发光法试剂盒及待评价的荧光层析法试剂盒进行检测。结果：待评价试剂盒与对照试剂盒检测结果阳性符合率、阴性符合率及总符合率100％；相关系数r=0．97，P〈0．05；待评价试剂盒检测高、中、低值标本的精密度分别是4．2％、4．6％及3．2％，均小于15％。结论：待评价的荧光层析法试剂盒性能达到预定要求，可考虑用于临床标本的NT—proBNP项目的检测。     

两种HBV—DNA荧光定量PCR检测试剂比较

目的比较及评价两种HBV—DNA荧光定量PCR试剂特异性、灵敏度、重复性及检测结果的相关性。方法用深圳匹基生物工程有限公司生产的两种HBV—DNA荧光定量PCR试剂（试剂A,试剂B）对已知结果的质控血清、标准品及本院154份HBsAg阳性的临床标本进行平行检测,比较两种试剂检测结果的特异性、灵敏度、重复性及结果的相关性。结果试剂A与试剂B的特异性均为100％,灵敏度分别为90．91％和95．45％,符合率分别为93．33％和96．67％;对强阳性、临界阳性标本,试剂A重复性试验批内CV值为3．16％、5．61％,批间为3．18％、6．32％。试剂B批内CV值为2．11％、5．36％,批间CV为3．58％、4．59％;两种试剂对临床标本的检测结果相关性良好（r=0．93、P〈0．01）,但试剂A检测的灵敏度和符合率均低于试剂B（P〈0．01）。结论试剂B总体性能优于试剂A,适于临床使用;试剂A有待校准及（或）改进。实验室必须选择质量好且符合自己实验室要求、与本实验室仪器相匹配的试剂以保证检验质量。