用彗星试验检测污灌区粮食有机提取物对大鼠原代肝细胞DNA的损伤

[目的]研究污灌农产品有机提取物对大鼠原代肝细胞DNA的损伤.[方法]选取A、B两类污灌农田玉米为研究对象,地下水灌溉的玉米为对照(C),采用超声振荡法提取玉米中的有机污染物,并用彗星试验检测玉米有机提取物对大鼠原代肝细胞DNA的损伤情况.[结果]A、 B、 C各组玉米有机提取物均可导致DNA迁移长度增加,拖尾率增高;A、 B与C组相同染毒剂量比较,DNA迁移长度增加,拖尾率增高.[结论]A、 B两类污灌区与对照区玉米中均含有DNA损伤物质,且污灌区玉米所含有机物的毒性要强于对照组.     

某污灌区蔬菜有机提取物对大鼠肝细胞DNA的损伤

为探讨污灌区蔬菜有机提取物对大鼠肝细胞DNA的损伤,采集某污灌农田生长的大白菜、菜花、萝卜样品,同时,采集远离污灌区、采用地下水灌溉的农田(对照区)生长的大白菜样品,采用彗星实验检测蔬菜样品有机提取物(相当于蔬菜干样0.12、0.24、0.36 g/rn1)对清洁级SD雄性大鼠肝细胞DNA的损伤。结果显示,4种蔬菜样品有机提取物DNA拖尾率高于阴性溶剂对照(P<0.05),污灌区大白菜、菜花、萝卜样品有机提取物DNA平均迁移长度和拖尾率高于对照区大白菜(P<0.05)。4种蔬菜样品有机提取物在一定程度上对大鼠肝细胞DNA造成损伤,表明样品中含有致DNA损伤的物质,存在一定的遗传毒性。污灌区蔬菜样品有机物对肝细胞DNA的损伤强于对照区。说明污灌区部分蔬菜已受到一定程度的有机物污染。     

某污灌区粮食中有机污染物对小鼠的遗传毒性研究

[目的]研究污灌农产品中有机提取物对小鼠的遗传毒性. [方法]选取某污灌农田玉米为研究对象,地下水灌溉的玉米为对照,采用超声振荡法提取玉米中的有机污染物,以灌胃的方式对小鼠进行染毒,用单细胞凝胶电泳实验和微核试验检测玉米有机提取物对小鼠DNA的损伤情况. [结果]单细胞凝胶电泳实验:与试剂对照组比较,污灌区低剂量组拖尾长度增加(P<0.05);污灌区高剂量纽拖尾率、拖尾长度均增高(P<0.05),且污灌区高剂量组拖尾率高于对照区相同染毒剂量组.微核试验:污灌区低剂量组、高剂量组微核率均高于试剂对照组及对照区相同染毒剂量组(P<0.05).[结论]该污灌区玉米有机提取物中含有致小鼠遗传毒性的有机污染物.     

污灌蔬菜中有机污染物致小鼠的遗传损伤与氧化损伤

[目的]研究污灌农产品有机提取物对小鼠的遗传损伤及其氧化损伤机制.[方法]选取某污灌农田产出的大白菜为研究对象,地下水灌溉的大白菜为对照,采用超声振荡法提取白菜中的有机污染物,对小鼠灌胃染毒后,进行单细胞凝胶电泳实验和微核试验及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、各胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力和丙二醛(MDA)含量的测定. [结果]与试剂对照组比较,对照区高剂量组的拖尾率增高、T-SOD活力降低(P＜0.05);污灌区拖尾率和拖尾长度和微核率均增高,且高于对照区(P＜0.05):污灌区T-SOD和GSH-PX活力均降低(P＜0.01和P＜0.05),且低于对照区(P＜0.05). [结论]该污灌区白菜中有机提取物中含有致小鼠遗传毒性及氧化损伤的有机污染物,其毒性强于对照区. 对小鼠灌胃染毒后,进行单细胞凝胶电泳实验和微核试验及总超氧化物歧化酶(T-SOD)、各胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力和丙二醛(MDA)含量的测定. [结果]与试剂对照组比较,对照区高剂量组的拖尾率增高、T-SOD活力降低(P＜0.05);污灌区拖尾率和拖尾长度和徽核率均增高,且高于对照区(P＜0.05):污灌区T-SOD和GSH PX活力均降低(P＜0.01和P＜0.05),且低于对照区(P＜0.05). [结论]该污灌区白菜中有机提取物中含有致小鼠遗传毒性及氧化损伤的有机污染物,其毒性     

污灌土壤中有机污染物对小鼠的DNA损伤与氧化损伤效应

[目的]研究污灌土壤中有机污染物对小鼠的遗传毒性和氧化损伤效应.[方法]选取某污灌农田土壤为研究对象,地下水灌溉农田的土壤为对照,采用超声振荡法提取土壤中的有机污染物,对小鼠灌胃染毒后,进行单细胞凝胶电泳实验和总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力和丙二醛(MDA)含量的测定.[结果]与试剂对照组比较,污灌区低剂量组、高剂量组拖尾率均增高(P＜0.05),与对照区相同染毒剂量组比较,污灌区低剂量组、高剂量组拖尾率均增高(P＜0.05);与试剂对照组比较:对照区高剂量组的T-SOD活力和GSH-PX活力降低,污灌区各组的T-SOD活力、GSH-PX活力均降低(P＜0.05),与对照区相同染毒剂量组比较:污灌区高剂量组T-SOD活力降低(P＜0.05).[结论]该污灌区土壤有机提取物中含有致小鼠遗传毒性和氧化损伤的有机污染物.     

某污灌区大白菜中有机提取物对小鼠的遗传毒性

[目的]研究污灌区大白菜有机提取物对小鼠的DNA损伤.[方法]以某污灌农田产出的大白菜为处理因素(下称"污灌区"),地下水灌溉的大白菜为对照(下称"对照区"),采用超声振荡法提取白菜中的有机污染物,灌胃法染毒.小鼠共分5组:试剂对照组(二甲亚砜)、对照区低剂量组、对照区高剂量组、污灌区低剂量组及污灌区高剂量组.每日染毒1次,连续染毒2周.用单细胞凝胶电泳实验和徼核试验检测白菜有机提取物对小鼠的DNA损伤情况.[结果]单细胞凝胶电泳实验:与试剂对照组比较,污灌区低剂量组拖尾长度增加(P＜0.05);污灌区高剂量组拖尾率、拖尾长度均增加(P＜0.05);且污灌区高剂量组拖尾率高于对照区高剂量组.微核试验:污灌区高剂量组微核率高于试剂对照组(P＜0.05). [结论]该污灌区白菜中含有致小鼠遗传毒性的有机污染物.     

绿茶浸出液对水中有机污染物致DNA损伤的抑制作用

目的探讨绿茶浸出液能否抑制水中有机污染物对细胞DNA的损伤。方法 固相萃取水中有机物,用绿茶浸出液与有机提取物以不同方式处理(同时处理、绿茶预处理、绿茶后处理)大鼠肝细胞后,采用单细胞凝胶电泳实验检测细胞,观察DNA迁移长度及拖尾细胞百分率,并检测培养液中丙二醛含量。结果同时处理组和绿茶预处理组的结果显示绿茶浸出液浓度在0.5、5、50μg/ml时可缩短DNA迁移长度,与水样对照组比较,差异有非常显著意义(P<0.01),拖尾细胞百分率和培养液中丙二醛含量的变化与此一致;后处理组细胞损伤明显加重,分水样对照组比较,差异有显蓍性(P<0.01)。结论绿茶浸出液对水中有机提取物致肝细胞DNA的损伤有保护作用,且在一定的浓度范围内呈剂量一反应关系。机制可能是抑制水中有机提取物对细胞的氧化损伤。     

亚硝酸钠对大鼠睾丸支持细胞DNA损伤的研究

[目的]观察亚硝酸钠对大鼠睾丸支持细胞DNA的损伤作用.[方法]采用冷胰酶消化法分离培养大鼠睾丸支持细胞,采用单细胞凝胶电泳法检测亚硝酸钠对大鼠睾丸支持细胞DNA的损伤作用.试验共设6个剂量组,亚硝酸钠终浓度分别为1.5μg/ml、15μg/ml、150μg/ml和1500μg/ml,同时设PBS阴性对照组和丝裂霉素C阳性对照组(20μg/ml).[结果]当亚硝酸钠剂量为15μg/ml时,可引起支持细胞拖尾率的增加,与阴性对照组相比,其差异有统计学意义(x2=18.320, P=0.000),但共尾长、尾/头(长)、尾距等较为客观的距离指标与阴性对照组相比,则在亚硝酸钠剂量达150μg/ml时,差异才有统计学意义,随着染毒剂量的增加,DNA损伤程度明显加重,存在明显的剂量-效应关系.[结论]亚硝酸钠具有损伤睾丸支持细胞DNA的作用,并且在染毒剂量为150μg/ml时,能观察到明显的损伤效应.     

温室土壤有机提取物遗传毒性研究

[目的]检测温室土壤中有机提取物的遗传毒性作用. [方法]以小鼠为实验动物,共分5组:阴性对照组(二甲亚砜)、阳性对照组(环磷酰胺)及土壤有机提取物低、中、高剂量组,染毒剂量分别为5、15和30g土壤干重/(kg小鼠体重·d),染毒方式为每日灌胃1次,连续染毒4周.用胞质分裂阻滞微核细胞试验和彗星试验分别检测有机提取物所致小鼠外周血淋巴细胞的染色体损伤作用和外周血细胞的DNA损伤作用. [结果]有机提取物剂量与微核率具有较明显的剂量-效应关系,显著高于阴性对照组;随着有机提取物作用剂量的增加,彗星尾长、尾部DNA含量和Olive尾矩显著升高. [结论]温室土壤中有机提取物可以诱使小鼠发生染色体和DNA损伤.     

污灌玉米中有机污染物对小鼠的遗传毒性及氧化损伤作用

[目的]研究污灌玉米中有机污染物对小鼠的遗传损伤及其氧化损伤机制。[方法]选取某污灌农田产出的玉米为研究对象,地下水灌溉的玉米为对照,采用超声振荡法提取玉米中的有机污染物,对小鼠灌胃法染毒（共分为5组,每组8只：试剂对照组、对照区低剂量组、对照区高剂量组、污灌区低剂量组、污灌区高剂量组）。每日染毒1次,染毒剂量：低剂量组相当于10g玉米干重／（kg·d）,高剂量组相当于60g玉米干重／（kg·d）。连续染毒2周后,进行单细胞凝胶电泳试验、微核试验并测定总超氧化物歧化酶（T—SOD）活力、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活力和丙二醛（MDA）含量。[结果]与试剂对照组比较,对照区各组的T-SOD活力均降低（P〈0．05）;污灌区拖尾率、拖尾长度及微核率均增高,且高于对照区（P〈0．05）;污灌区T—SOD和GSH-PX活力均降低（P〈0．05和P〈0．01）,且低于对照区（P〈0．05）。[结论]该污灌区玉米有机提取物中含有致小鼠遗传毒性及氧化损伤的有机污染物,其毒性强于对照区。     

污灌土壤中有机污染物对小鼠肝肾组织的氧化损伤

[目的]研究污灌土壤中有机污染物对小鼠肝肾组织的氧化损伤。[方法]选取某污灌农田土壤为研究对象（下称“污灌区”）,地下水灌溉农田的土壤为对照（下称“对照区”）,采用超声振荡法提取土壤中的有机污染物,对小鼠实验灌胃法染毒,共分为5组：试剂对照组（用二甲基亚砜染毒）,对照区低、高剂量组,污灌区低、高剂量组,每日染毒1次,连续染毒2周。测定肝、肾组织的总超氧化物歧化酶（T-SOD）,丙二醛（MDA）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）。[结果]污灌区高剂量组肝组织的MDA含量（中位数为1．18nmol／mg）,GSH-Px活性（中位数为239．97U／mg蛋白质）,低、高剂量组T-SOD活性（中位数分别为119．70U／mg蛋白质和76．72U／mg蛋白质）及肾组织的GSH-Px活性（中位数为133．12U／mg白质）均低于试剂对照组（P〈0．05或P〈0．01）。[结论]该污灌区土壤有机提取物可导致小鼠肝肾组织的氧化损伤。     

某污灌区蔬菜有机提取物对小鼠肝肾组织的氧化损伤作用

目的 研究某污灌区蔬菜中有机提取物对小鼠肝、肾组织的氧化损伤作用.方法 于2007年5月,选取某污灌农田出产的大白菜为研究对象,地下水灌溉农田出产的大白菜为对照,采用超声振荡法提取白菜中的有机污染物.将40只健康清洁级昆明小鼠按体重随机分为5组,分别为对照组(二甲亚砜),对照区低剂量组、对照区高剂量组、污灌区低剂量组、污灌区高剂量组,雌雄各半.高、低剂量组染毒剂量(以白菜干重计)分别为60、10g/(kg·d).采用灌胃方式进行染毒,每日1次,灌胃容量为5 ml/kg,连续染毒2周.于第15天称重、处死小鼠,测定肝、肾组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和丙二醛(MDA)含量.结果 各组小鼠体重变化差异无统计学意义(P＞0.05).与溶剂对照组比较,污灌区高、低剂量组肾脏系数和肝组织中MDA含量及高剂量组肝组织中T-SOD活力均降低,污灌区高、低剂量组肾组织中T-SOD活力、污灌区高剂量组肾组织中MDA含量均降低,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).与对照区高剂量组比较,污灌区高剂量组肾组织中MDA含量降低,差异有统计学意义(P＜0.05).而各组肝、肾组织中GSH-Px活力间比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 该污灌区白菜有机提取物对小鼠肝、肾组织可产生氧化损伤作用.

Abstract：

Objective To study the hepatic and renal oxidative damage induced by the organic extracts of Chinese cabbage from sewage irrigation area on mice. Methods Organic extracts were obtained from Chinese cabbage from pollution area and control area,the organic pollutants were extracted by using supersonic method. Mice were divided into five groups: reagent control group,low-dose control group,high-dose control group,low-dose sewage irrigation group and high-dose sewage irrigation group,and treated with the extracts at the doses (dry weight of vegetable) : low-dose was 10 g/( kg·d), high-dose was 60 g/( kg·d), though gavage.once a day for 14 consecutive days. MDA,T-SOD,GSH-Px in the liver were determined. Results Compared with the reagent control group,kidney organic index and MDA,T-SOD in liver and kidney in the sewage irrigation groups decreased significantly (P<0.05 or P<0.01). Conclusion Organ extracts of Chinese cabbage from sewage irrigation area can induce hepatic and renal oxidative damage in mouse.     

武汉市饮用水中有机提取物对HepG2细胞DNA的损伤作用

目的研究武汉市生活饮用水中有机提取物对人肝肿瘤HepG2细胞DNA损伤作用。方法用XAD-2/8复合树脂(XAD-2和XAD-8树脂等体积混合)等比富集武汉市生活饮用水中有机污染物,应用慧星试验检测有机提取物的遗传毒性。结果该市不同水源、不同水文期下饮用水中有机提取物对HepG2细胞均产生不同程度的DNA损伤作用。同一水文期不同水源比较,在剂量10和30ml/ml下,汉江水源末梢水有机提取物致DNA损伤程度大于长江水源(P0.05);同一水源不同水文期时比较,在剂量10和30ml/ml下,枯水期有机提取物致DNA损伤程度大于丰水期(P0.05)。结论武汉市主要水源汉江和长江的氯化饮用水有机提取物对HepG2细胞DNA均有损伤作用,损伤作用的严重程度从大到小为汉江水长江水,枯水期丰水期。     

某污灌区土壤有机污染物成分分析

[目的]了解污灌区土壤中有机物污染现状，为研究污灌区土壤污染特征提供实例。[方法]选取某污灌区土壤为研究对象，采用超声振荡法提取土壤中的有机污染物，用气相色谱．质谱联用仪（GC-MS）对土样定性定量分析。[结果]该污灌区土壤有机污染物的成分主要为胺类、烷烃类、苯系物及多环芳烃。[结论]该污灌区存在一定程度的有机物污染。     

二乙基亚硝胺对人胎肝干细胞的毒性效应

目的探讨二乙基亚硝胺(Diethylnirtosamine,DENA)对人胎肝干细胞的毒性效应,为评价其遗传毒性提供理论依据。方法用不同质量浓度DENA(0、450、900、1350、1800、2250μg/ml)处理人胎肝干细胞后,应用MTT法检测DENA对体外培养的人胎肝干细胞增殖的抑制作用及量效关系;通过单细胞凝胶电泳实验检测不同剂量DENA处理后人胎肝干细胞DNA的损伤情况;利用Hoechst 33258染色方法检测DENA诱导后人胎肝干细胞凋亡的情况。结果人胎肝干细胞经900、1350、1800μg/ml的DENA处理48 h后,细胞存活率低于阴性对照组,差异有显著性(P0.01);人胎肝干细胞经DENA处理24 h后,出现染色体固缩、浓染等细胞凋亡表现;单细胞凝胶电泳实验发现,当DENA为900和1350μg/ml时,具有致DNA断裂的作用,尾部DNA含量分别达到(18.44±4.99)%和(17.33±3.29)%,明显高于对照组的(0.015±0.004)%,差异有显著性(P0.01),但在1800和2250μg/ml时,彗星拖尾程度明显降低,差异有显著性(P0.01)。结论 DENA对人胎肝干细胞具有直接毒性效应,引起DNA损伤,具有潜在遗传毒性。     

用彗星实验和微核实验反映土壤有机污染物的联合毒性

目的 利用彗星实验和微核实验反映土壤有机污染物的联合毒性.方法 选取某污灌农田土壤为研究对象(下称“污灌区”),地下水灌溉农田土壤为对照(下称“对照区”),采用超声振荡法提取土壤中的有机污染物,用气相色谱质谱联用仪(GC/MS)对土壤中的有机物进行分析;采用灌胃的方式对小鼠进行染毒,用单细胞凝胶电泳实验和徽核试验检测土壤有机提取物的联合毒性.结果 污灌区土壤检出的主要污染物为烷烃类、苯系物及多环芳烃,有机污染物的种类及含量高出对照区数倍;与试剂对照组和对照区相同染毒剂量组比较,污灌区各组拖尾率、微核率均增高(P＜0.05).结论 该污灌区土壤已受到一定程度的有机物污染,且污染物对小鼠具有一定的毒性.     

乌鲁木齐市管网末梢水有机提取物对雄性小鼠氧化性及生殖毒性的效应

目的探讨乌鲁木齐市饮用水有机提取物对雄性小鼠的生殖毒性影响。方法选择清洁级雄性ICR小鼠40只(6～8周),分别分为对照(12.5ml/kgDMSO组)、低剂量组(1.25L水中有机提取物/kg组)、中剂量组(2.5L水中有机提取物/kg组)、高剂量组(5L水中有机提取物/kg组)4个剂量组。经口灌胃染毒方式进行染毒,每天1次,连续2周。通过单细胞凝胶电泳实验测定某市饮用水有机提取物对小鼠DNA的影响。结果随着饮用水有机提取物浓度的升高,睾丸彗星试验没有明显差异,小鼠睾丸组织中SOD和MDA的含量与阴性对照组比较差异无统计学意义。结论本实验未发现乌鲁木齐市管网末梢水有机提取物对雄性小鼠氧化性与生殖毒性有明显的影响     

溴虫腈对小鼠脾、肝、肾细胞DNA的损伤作用

[目的]探讨农药溴虫腈对小鼠脾、肝、肾细胞DNA是否有损伤作用及3种器官对溴虫腈的敏感性差异。[方法]溴虫腈按4.9、9.8、19.6mg/kg体重3个剂量,一次性灌胃染毒雄性小鼠,2 4h后用彗星试验检测3种脏器的彗星细胞率和彗星尾长。[结果]各剂量组的彗星细胞率和彗星尾长都显著增加(P <0 .0 5～P <0 .0 0 1) ;脾、肝、肾3种细胞的彗星细胞率及彗星尾长均具有剂量 反应或剂量 效应关系(前者r值依次为0 .9948,0 .9993 ,0 .9890 ,后者r值依次为0 .9999,0 .9999,0 .9898,P值均<0 .0 5 )。比较同剂量组不同器官之间的彗星细胞率,3个剂量组中均为肾细胞>肝细胞>脾细胞(P <0 .0 5～P <0 .0 1) ;比较同剂量组不同器官之间的彗星尾长,3个剂量组均为肾细胞>肝细胞>脾细胞(P<0 0 5 ) ,肝、脾细胞间差异无显著性。[结论]溴虫腈可诱发小鼠脾、肝、肾细胞DNA断裂损伤,肾细胞对溴虫腈致DNA断裂作用最为敏感。