实验性糖尿病视网膜病变超微结构改变与 碱性成纤维细胞生长因子表达

目的探讨实验性糖尿病大鼠视网膜病变超微结构改变与碱性成纤维细胞生长因子( basic fibroblast growth factor, bFGF )表达的关系。方法用链脲佐菌素 (streptozotocin, STZ)建立糖尿病大鼠模型，随机分为正常对照组，糖尿病1、3、5个月组。分别行视网膜超微结构的透射电镜观察及视网膜石蜡切片上bFGF原位杂交、免疫组织化学检查。结果透射电镜观察：正常对照组大鼠视网膜血管未见异常，糖尿病1个月大鼠视网膜血管基底膜节段性增厚，内皮细胞肿胀，指状突明显，周细胞异染色质分布不均，可见肿胀的线粒体；3个月大鼠可见视网膜血管内皮细胞肿胀明显加重，管腔狭窄几乎接近闭塞；5个月大鼠视网膜血管基底膜明显厚薄不均，有些明显增厚，有些断裂甚至缺失。糖尿病大鼠视网膜bFGF原位杂交及免疫组织化学染色均从糖尿病3个月时开始有表达。糖尿病3个月时bFGF原位杂交的阳性率为 77.8%，免疫组织化学染色阳性率为 55.6%，糖尿病5个月时均增加到88.9 %。结论STZ大鼠视网膜超微结构改变在先，视网膜中bFGF的表达要晚于超微结构的改变。(中华眼底病杂志,2003,19:348-351)     

STZ糖尿病大鼠视网膜病变模型的评价

目的　评价链脲佐菌素 (STZ)糖尿病大鼠视网膜病变动物模型。方法　建立糖尿病大鼠模型 ,随机分为正常对照组 (M ) ,糖尿病 1个月组 (M1)、3个月组 (M3 )、5个月组 (M5)。分别进行视网膜铺片、石蜡切片及透射电镜超微观察。结果　普通石腊切片 :M、M1未见异常改变 ,从M3 开始出现异常改变 ,以M5最明显。表现为视网膜水肿 ,尤其内核层。细胞排列紊乱 ,内核层血管周围水肿更明显 ,节细胞数量减少 ,静脉扩张、渗出 ,并有出血。视网膜消化铺片 :( 1)周细胞数量 :M1与M相比无差别 (P >0 0 5 ) ,而M3 及M5与M相比明显减少 (P <0 0 1)。 ( 2 )毛细血管形态 :以M5时病变最重 ,可见毛细血管栓塞 ,无细胞毛细血管及毛细血管无灌注。透射电镜观察 :M未见异常改变 ,从M1开始出现异常改变 ,以M5最明显。表现为基底膜节段性增厚、断裂缺失 ,内皮细胞肿胀变形 ,向管腔内指状突起 ,异染色质浓集居边 ,周细胞核异染色质浓集居边 ,线粒体肿胀变性 ,甚至呈空泡状 ,视细胞外节盘膜结构紊乱 ,内节线粒体肿胀。结论　STZ糖尿病大鼠视网膜病变可以作为人类糖尿病视网膜病变的背景期病理改变的模型。     

视网膜消化铺片的免疫荧光染色探讨

目的：探讨视网膜消化铺片联合免疫荧光染色技术的可行性。方法：正常Wistar大鼠和链尿佐菌素（Streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病2周大鼠各5只。经心脏灌注后，取右眼视网膜作胰酶消化铺片，并在铺片上进行血管细胞粘附分子－1（Vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)单克隆抗体免疫荧光染色。结果；大鼠视网膜消化铺片可以清晰看到视网膜血管走行、分布、正常大鼠未见VCAM－1阳性表达，糖尿病2周组视网膜血管壁见VCAM－1阳性细胞表达。结论：视网膜血管铺片联合免疫荧光染色技术是可行的。     

糖尿病大鼠视网膜中血管内皮生长因子的表达

目的 利用糖尿病大鼠动物模型，通过大鼠视网膜中血管内皮生长因子(vascular endothellal growth fac—tor，VEGF)的表达情况，探讨VEGF在糖尿病视网膜病变(Diabetlc Retinopathy，DR)发展过程中作用机理。方法 复制链脲佐菌素(Streptozocin，STZ)糖尿病大鼠动物模型，取不同组、不同时期大鼠视网膜，利用免疫组织化学及原位杂交方法，检测VEGF蛋白质及mRNA的表达情况。结果 正常对照组(H)、血糖恢复组及糖尿病1月组(H1)大鼠视网膜均无VEGF蛋白质及mRNA的阳性表达。糖尿病3月组(M3)未见VEGF mRNA表达，而在内核层及节细胞层VEGF蛋白表达阳性(34％)，此表达与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性细胞相同。糖尿病5月组(M5)VEGFmRNA表达阳性率为67％，表达位于视网膜各层，内界膜中的表达与GFAP免疫组化阳性分布相同，VEGF蛋白质表达强阳性(89％)，主要位于内核层、节细胞层的细胞及血管上。结论 VEGF在STZ大鼠视网膜中的表达与病程相关，而且VEGF的产生存在着自分泌和旁分泌多种途径。     

VEGF与糖尿病视网膜病变早期的关系

目的：研究糖尿病大鼠视网膜病变早期与VEGF的关系。方法：建立糖尿病大鼠模型，随机分为正常对照组(M)，糖尿病一月组(M1)、三月组(M3)、五月组(M5)。分别在视网膜石蜡切片上行VEGF原位杂交、免疫组化、并分别对视网膜血管进行透射电镜观察。结果：石蜡切片中VEGF原位杂交：仅M5表达为67％。VEGF免疫组化：M3表达为34％，M5表达为89％。血管的透射电镜观察：M未见异常改变，从M1开始出现异常改变，以M5最明显。表现为基底膜节段性增厚、断裂缺失，内皮细胞肿张变形，向管腔内指状突起，异染色质浓集居边，周细胞核异染色质浓集居边，线粒体肿胀变性，甚至呈空泡状。结论：糖尿病视网膜病变时血管器质性改变在先，而生长因子表达在后。     

核因子-κB在糖尿病大鼠视网膜中的表达及意义

目的 观察核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在大鼠糖尿病早期视网膜中的表达及其在糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)发病过程中的作用.方法 清洁级健康成年雄性Wistar大鼠110只,随机分为正常对照组(NC组,24只)和糖尿病造模动物组(DM组,86只).大鼠腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发糖尿病模型,取成模的72只大鼠随机分为2周、4周、12周和20周组,每组各18只.到上述各时间点后分别取DM组大鼠6只和NC组大鼠2只并处死,免疫印记法观察NF-κB蛋白在不同病程糖尿病大鼠视网膜的表达,采用免疫组织化学法观察NF-κB在不同病程糖尿病大鼠视网膜组织和血管的表达.结果 NC组正常大鼠视网膜中NF-κB p65的蛋白质水平非常低,为17.72±8.57,DM组糖尿病诱导成功后2周NF-κB p65蛋白质表达为38.45±12.37,并随时间的延长其表达增加,4周时的免疫印记反应强度最高为89.41±19.79,各时间点蛋白质表达比NC组明显增强(均为Jp<0.01).DM组大鼠糖尿病诱导成功后2周,视网膜表层血管即散在出现NF-κB阳性染色颗粒,4周时在视网膜内核层及内核层血管均出现NF-κB阳性染色细胞,为胞核染色,并随着病程的延长,12周时在视网膜表面血管、内核层、内核层血管和外丛状层均出现大量阳性染色细胞;NC组大鼠视网膜血管铺片没有NF-κB表达.DM组大鼠糖尿病诱导成功后2周,视网膜血管壁出现散在NF-κB阳性染色颗粒,以后随病程延长,NF-κB阳性细胞逐渐增多,12周时最多,以后保持不变.结论 NF-κB在DR发生发展过程中可能起重要作用.     

胰岛素控制血糖对糖尿病大鼠早期视网膜血管的影响

目的:探讨胰岛素控制血糖对糖尿病早期大鼠视网膜血管形态改变和血管内皮细胞生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:实验动物Wistar大鼠分正常对照组、糖尿病组、糖尿病血糖严格控制组和糖尿病血糖非严格控制组。链尿佐菌素(Streptozotocin,STZ)诱导糖尿病动物模型,动物成模3周后糖尿病血糖严格控制组及血糖非严格控制组大鼠予胰岛素治疗,20d后处死,行Fluorescein isothiocyanate-dextran(FITC-Dextran)灌注视网膜血管铺片观察大鼠视网膜血管形态变化,并行VEGF免疫荧光染色观察大鼠视网膜VEGF的表达改变。结果:FITC-Dextran灌注示糖尿病血糖非严格控制组大鼠视网膜浅层血管多处荧光素聚集,不均匀分布,深层毛细血管局部扩张、迂曲;血糖严格控制组视网膜血管管径较均匀一致,无局部扩张或狭窄。糖尿病血糖非严格控制组VEGF高表达,血糖严格控制组较糖尿病组、血糖非严格控制组视网膜VEGF表达下降,统计学比较具有显著性差异(P<0.05)。结论:胰岛素治疗严格控制血糖至正常水平可以降低糖尿病早期大鼠视网膜VEGF的表达、减轻视网膜血管损害;血糖波动会加重糖尿病视网膜病变的发展。眼科学报2007;23:205-211.     

链脲佐菌素诱发糖尿病大鼠模型视网膜形态学改变的观察

目的 研究链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发SD大鼠糖尿病的视网膜形态学改变,为STZ诱发的糖尿病大鼠作为糖尿病视网膜病变动物模型提供依据.方法 20只成年SD大鼠随机分为2组,A组用STZ腹腔注射法诱发糖尿病,B组作为正常对照.用葡萄糖氧化酶法在建模后1 d、2 d、3 d、1周、2周、3周、4周连续测定大鼠血糖,在建模当天及建模后1周、2周、3周、4周用电子天平连续测量大鼠体质量,判断糖尿病发生的有效性和稳定性.通过临床和实验方法(包括裂隙灯检查,直接、间接眼底镜检查,4周时行组织切片、视网膜血管铺片、透射电镜等方法)检查大鼠眼前后节的病理改变.结果 A组大鼠血糖在注射STZ后1 d达到(33.9±1.7)mm01.L-1,在4周时达到(41.6±4.5)mmol.L-1,而B组始终低于16.7 mmoI.L-1.从建模之后,A组大鼠的体质量与B组相比,增长缓慢,有显著统计学意义.临床检查,A组1只糖尿病大鼠在4周时发生了白内障,B组大鼠眼前后节没有明显改变.发病4周时,组织学检查显示,A组大鼠视网膜厚度要薄于B组,透射电镜显示A组大鼠视网膜各层结构有明显的病理改变包括膜盘间隙扩大、排列紊乱、内外核层细胞疏松等,血管铺片显示4周A组大鼠视网膜毛细血管周细胞数量减少.结论 用STZ方法建立糖尿病模型是有效的,发病4周时糖尿病大鼠已经有较明显的视网膜形态学改变,能够作为糖尿病视网膜病变模型用于临床和科研.     

细胞凋亡与STZ糖尿病大鼠视网膜微血管病变关系

目的探讨细胞凋亡与STZ糖尿病大鼠视网膜微血管病变之间的关系。方法建立糖尿病大鼠动物模型,随机分为糖尿病3月组(DM3)及6月组(DM6),制备视网膜消化铺片,采用核苷酸末端转移酶介导DUTP缺口翻译法(TUNEL)检测视网膜毛细血管细胞凋亡变化,PAS染色及图像分析,动态观测视网膜微血管形态的改变。同时设立正常对照组。结果3月时糖尿病大鼠视网膜微血管周细胞发生细胞凋亡,周细胞数目减少,对照组及DM3组周细胞数目分别为(6.71±0.45)个及(6.17±0.45)个,2组比较差异具有显著性(P<0.01);6月时细胞凋亡呈增加趋势,DM6组及对照组周细胞数分别为(5·66±0·60)个及(6.52±0.40)个(P<0.01);与DM3组相比DM6组周细胞数目明显减少(P<0.01)。内皮细胞各组间差异均无显著性(P>0.05)。无细胞毛细血管数目增多。结论糖尿病大鼠视网膜周细胞凋亡呈增加趋势,并与微血管病变有关。     

视网膜血管铺片技术的改进及在糖尿病视网膜病研究中的运用

目的：改进视网膜血管铺片的制备方法，并用于糖尿病视网膜病的研究。 方法：分别用胰蛋白酶消化法及胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法制备视网膜血管铺片，比较铺片成功率。一次性腹腔注射STZ诱导糖尿病大鼠模型，成模13wk时以胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法制备视网膜血管铺片，行HE染色观察血管形态改变，免疫组织化学染色方法观察RAGE、ICAM-1的表达。 结果：胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法较胰蛋白酶消化组铺片成功率高（80％vs53．3％，P〈0．05），能显示清晰、完整的视网膜血管网。糖尿病大鼠视网膜无细胞毛细血管较正常大鼠增加2．67倍，毛细血管RAGE及ICAM-1免疫活性分别上调1．26倍，1．43倍（P〈0．001）。 结论：胃蛋白酶-胰蛋白酶联合消化法是一种稳定的重复性好的视网膜血管铺片技术，可用于糖尿病视网膜病变的研究。     

重组腺相关病毒载体介导的色素上皮衍生因子对糖尿病大鼠视网膜的影响

目的以重组腺相关病毒载体（rAAV）介导色素上皮衍生因子（PEDF）转染糖尿病大鼠视网膜，观察其表达及其对血管内皮生长因子（VEGF）和视网膜微血管的影响。方法 雄性 Wister大鼠链脲佐菌素腹腔注射诱导糖尿病模型。随机分为1（DM1）、3（DM3）、6（DM6）个月组。右眼玻璃体注射rAAV2-CMV-hPEDF作为治疗组，左眼注射rAAV2-CMV-GFP作为自身对照眼。正常大鼠右眼假注射，左眼不注射。应用半定量逆转录聚合酶链反应和Western blot测定VEGF和PEDF的mRNA和蛋白的表达情况，应用视网膜血管铺片观察视网膜微血管的变化。结果注射后大鼠治疗眼视网膜hPEDF mRNA表达不断增强，持续到6个月，达到顶峰。PEDF蛋白表达亦不断增加，与同时间点对照眼相比差异有统计学意义（t=4.292，10.721，16.692；P＜0.01）。治疗组各时间点视网膜VEGF mRNA及蛋白表达量相互间无统计学意义（t=1.621，0.698，0.758；P＞0.05），均显著高于正常对照组（t=5.171，6.857，7.542；P＜0.05），但与同时间点自身对照眼相比表达显著降低（t=2.343，3.263，4.455；P＜0.01）。糖尿病大鼠治疗眼与自身对照眼视网膜微血管形态在1个月时与正常对照组视网膜相比无显著差异，但3个月与6个月时治疗眼与自身对照眼相比视网膜毛细血管损伤改变明显减轻。结论 rAAV2-CMV-hPEDF玻璃注射可增加糖尿病大鼠视网膜PEDFmRNA和蛋白水平表达，改善其早期视网膜微血管的损害，并抑制VEGF的表达，其调节在mRNA水平。 （中华眼底病杂志，2008，24：259-264）     

细胞凋亡在STZ诱导糖尿病大鼠早期视网膜病变中的作用机制

目的观察链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠早期视网膜细胞凋亡情况及血管形态变化,分析细胞凋亡在糖尿病早期的作用机制。方法Wistar大鼠随机分为实验组及对照组各28只,实验组一次性腹腔注射1%STZ诱发糖尿病模型,成模后4、8、16、24周行视网膜形态学检测,TUNEL法原位检测凋亡细胞。结果实验组大鼠早期视网膜血管无明显变化,24周时出现内界膜水肿,各层细胞排列不整,视网膜部分血管管径粗细不一。TUNEL阳性细胞最早于发病4周时出现在视网膜神经节细胞（RGCs）,数量呈时间信赖性,至24周时涉及到内核层的双极细胞、血管内皮细胞、周细胞等,凋亡指数与对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）。视神经节细胞层的凋亡指数明显高于内核层细胞（P〈0.05）。结论糖尿病所致的视网膜凋亡的损伤要远远早于微血管病变的发生,对抗凋亡的发生机制有可能成为预防及治疗糖尿病视网膜病变（DR）的新策略。     

体外孵育的非酶糖基化终产物诱导正常大鼠类糖尿病性视网膜血管病变研究

目的　探讨外源性非酶糖基化终产物 (advancednon enzymaticglycationendproducts ,AGE)在血管壁的沉积与糖尿病性视网膜血管病变之间的关系。方法　将 16只健康两月龄SD大鼠 ,随机分为 4组 ,每组 4只鼠。正常对照组不做任何处理 ;糖尿病对照组应用AGE制作糖尿病模型 ;血清白蛋白 (ratserumalbumin ,RSA)组每日自鼠尾静脉注射RSA(4 0mg kg体重 ) ,连续注射 2周 ;AGE RSA组注射AGE RSA ,注射方法、剂量与RSA组相同。 2周后观察各组鼠视网膜毛细血管周细胞密度变化。结果　注射RSA组鼠视网膜毛细血管周细胞数平均为 (5 80± 0 4 8)个 每油镜视野 ,注射AGE组为(4 31± 0 34)个 每油镜视野 ,显示实验组毛细血管周细胞密度低于对照组 ,差异有显著意义 (F =7 16 4 ,P <0 0 1)。结论　外源性AGE注入正常大鼠会引起类糖尿病性视网膜血管病变 ,AGE可能是糖尿病性视网膜血管病变的独立致病因素之一。     

地塞米松对糖尿病大鼠视网膜血管内白细胞聚集、血管通透性及细胞间粘附因子-1表达的影响

目的 探讨糖尿病大鼠玻璃体腔注射地塞米松对视网膜血管内白细胞聚集、血管通透性及细胞间黏附因子(ICAM)-1表达的影响。 方法 72只Brown-Norway大鼠分为对照组、糖尿病组、糖尿病＋生理盐水组和糖尿病＋地塞米松组共4组，每组各18只大鼠。除对照组外其余大鼠行链脲佐菌素腹腔注射制造糖尿病模型。糖尿病+生理盐水和糖尿病+地塞米松组大鼠玻璃体腔分别注射10 μl生理盐水和10 μl地塞米松(5 μg/ml)。用吖啶橙血管造影和伊文思蓝方法分别检测白细胞聚集和血管通透性改变情况。以荧光定量多聚酶链式反应和酶联免疫吸附实验检测视网膜中ICAM -1的表达。 结果 注射地塞米松后，大鼠视网膜血管内白细胞聚集减少，血管通透性降低，ICAM-1表达减少。4组大鼠视网膜ICAM-1 mRNA和蛋白量分别为0.43±0.07、0.76±0.21、0.74±0.18、0.55±0.13和（37.90±4.56）、（76.74±6.68）、（74.32±7.11）、（39.61±4.47）pg/mg。 结论 地塞米松能减少糖尿病大鼠视网膜血管内白细胞聚集，降低血视网膜屏障通透性。其机制可能是通过其抑制ICAM-1的表达起作用。 (中华眼底病杂志,2007,23:273-276)     

实验性糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡和微血管改变及结缔组织生长因子的表达

目的 研究糖尿病大鼠视网膜凋亡细胞和结缔组织生长因子(CTGF)表达情况及其在微循环改变中的作用.方法 实验研究.55只成年雄性Wistar大鼠,以随机数字表法,随机分为正常对照(CON)组(10只鼠)和糖尿病(DM)组(45只鼠).根据病程不同,将存活的30只DM组大鼠再分为2个月组(DM2)、4个月组(DM4)及6个月组(DM6),每组各10只鼠.用末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测视网膜凋亡细胞,用免疫组织化学法测定CTGF表达水平,以视网膜消化铺片过碘酸雪夫(PAS)染色法观察视网膜血管改变情况.观察并比较不同病程的DM大鼠视网膜凋亡细胞及CTGF表达情况、视网膜微血管形态变化及周细胞数量变化.对各组大鼠视网膜的细胞凋亡指数、CTGF表达阳性率及血管周细胞数量进行比较采用LSD-t检验法,两变量间的相关性分析采用线性相关法.结果 CON组大鼠视网膜细胞凋亡和CTGF表达均阴性.DM2组、DM4组、DM6组大鼠视网膜细胞凋亡指数分别为0.05±0.01、0.25±0.03及0.52±0.02;组间两两比较,差异均有统计学意义(DM2与DM4组比较t=21.432,DM2与DM6组比较t=50.843,DM4与DM6组比较t=29.410;P<0.05),表明随DM病程延长,视网膜凋亡指数逐渐增加.DM2组、DM4组、DM6组大鼠视网膜CTGF表达阳性率分别为(22.79±2.99)%、(41.73±2.59)%、(55.27±2.68)%,组间两两比较,差异均有统计学意义(DM2与DM4组比较t=15.345,DM2与DM6组比较t=26.316,DM4与DM6组比较t=10.971;P<0.05),表明随DM病程延长,视网膜CTGF表达水平逐渐增高.CON及DM2组大鼠视网膜血管走形良好,DM4组大鼠视网膜部分血管渐变僵硬、狭窄;DM6组大鼠视网膜血管主干僵硬,部分微血管狭窄明显.与CON组视网膜血管周细胞数量对比,DM2组未见明显变化;随病程延长,DM4组和DM6组大鼠视网膜血管周细胞数量较CON组逐渐减少,差异均有统计学意义(t=3.367,6.667;P<0.05).DM大鼠视网膜细胞凋亡指数与CTGF阳性表达水平呈显著正相关(r=0.958,P<0.05),凋亡指数和CTGF阳性表达水平与视网膜血管周细胞数量均呈显著负相关(r=-0.540,-0.595;P<0.05).结论 在DM大鼠视网膜组织中,凋亡细胞和致纤维化因子CTGF的产生均早于微循环血管走形及周细胞的改变.(中华眼科杂志,2011,47:521-526)

Abstract：

Objective To study the cell apoptosis and the expression of connective tissue growth factor (CTGF) in the retina of diabetic rats and to explore their contributions to the changes of microcirculation. Methods It was a experiment study. Fifty-five adult male Wistar rats were divided into two groups, normal control group (CON,10 rats) and diabetes mellitus group (DM, 45 rats). The 30 surviving rats in the DM group were further divided into 3 groups based on the time of observation, 2 month (DM2), 4 month (DM4) and 6 month (DM6) groups, with 10 rats in each group. Cell apoptosis was detected by TdT-mediated dUTP nick end labeling (TUNEL). Expression of CTGF was determined by immunohistochemical study. Retinal vessels were observed by retinal digest stretched periodic acid Schiff (PAS) staining. Results Immunohistochemical staining and TUNEL staining revealed negative results in normal control group. Retinal cell apoptosis index increased gradually from DM2 to DM6, the differences between any two groups were statistically significant (t2-4,2-6,4-6=21.432, 50.843, 29.410;P<0.05). Expression of CTGF in the retina increased from DM2-DM6, the differences between any two groups were statistically significant (t2-4,2-6,4-6=15.345, 26.316, 10.971;P<0.05). PAS staining of retinal blood vessels obtained negative results in the CON and DM2 groups. Part of retinal capillaries were slightly stiff and narrow in DM4 group. Retinal capillaries in DM6 group were trunk stiff and were narrowed obviously. The number of pericytes was reduced in DM4, and progressed following the course of diabetes. The number of pericytes in the DM2 group did not different from that in the CON group (t=0.875,P=0.387). The number of pericytes in the DM4 and DM6 group were significantly decreased as compared to the CON group (t=3.367,6.667;P<0.05). Retinal cellular apoptosis index had a significant positive correlation to the expression of CTGF (r=0.958,P<0.05). Number of pericytes was significantly correlated (negative correlation) with retinal cellular apoptosis index and the expression of CTGF (r=-0.540, -0.595; P<0.05). Conclusions The appearances of cellular apoptosis and fibrosing factor CTGF in the retina of diabetic rats occurred earlier than the changes of microcirculation and the number of capillary pericytes.     

复方血栓通胶囊对糖尿病大鼠视网膜微血管改变的防治研究

目的观察复方血栓通胶囊对糖尿病大鼠视网膜微血管病变的干预效果。方法正常雄性Wistar大鼠作为正常对照组(N组)，链脲佐菌素（STZ）诱导Wistar大鼠糖尿病模型。将STZ诱导的糖尿病大鼠分为糖尿病对照组(DM组)和复方血栓通胶囊治疗组(FXST组)。DM组未接受其他任何治疗；FXST组按900 mg/kg的剂量，采用经食道灌胃给药方法给予复方血栓通颗粒胶囊进行治疗，每日1次。第20周时到达实验终点。行视网膜消化铺片，显微镜下观察微血管改变，计算内皮细胞/周细胞（E/P）比值，图象系统计算血管相对面积。并行透射电子显微镜检查，观察毛细血管基底膜厚度及周细胞、内皮细胞超微结构变化。结果视网膜消化铺片显示，20周时，DM组大鼠视网膜毛细血管纡曲，管径大小不一，出现节段性膨大、节段性管腔狭窄甚至闭塞，周细胞数目显著减少，E/P比值增高，血管相对面积增大，可见较多无细胞毛细血管、周细胞鬼影等。FXST组大鼠视网膜改变糖尿病对照组轻，E/P比值、血管相对面积均更接近于N组。透射电子显微镜检查显示，DM组大鼠毛细血管基底膜明显增厚，而FXST组相应的超微改变轻微。结论复方血栓通胶囊能有效地防治糖尿病大鼠视网膜微血管改变。 （中华眼底病杂志，2008，24：272-275）     

糖尿病大鼠视网膜血管内皮细胞生长因子及 碱性成纤维细胞生长因子的表达

目的研究糖尿病大鼠视网膜病变早期血管内皮细胞生长因子（VEGF）及碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）作用的关系。方法Wistar大鼠55只，建立糖尿病大鼠模型，随机分为正常对照组（10只），糖尿病1、3、5个月组（每组各15只）。每组分别在视网膜石蜡切片上行VEGF、bFGF原位杂交及免疫组织化学检测，以观察两者的表达情况。结果原位杂交检测结果显示，bFGF在糖尿病3个月组开始有表达，表达个体数百分比为77.8%， 5个月组表达个体数百分比为88.9%；VEGF在糖尿病3个月组无阳性表达，5个月组表达个体数百分比为66.7%。免疫组织化学检测结果显示，bFGF在糖尿病3个月组开始阳性表达，表达个体数百分比为55.6%，5个月组表达个体数百分比为88.9%； VEGF在3个月组表达个体数百分比为33.3%，5个月组表达个体数百分比为88.9%。结论糖尿病大鼠视网膜病变的VEGF表达出现在bFGF之后。(中华眼底病杂志,2005,21:37-40)     

Resveratrol blocks diabetes‐induced early vascular lesions and vascular endothelial growth factor induction in mouse retinas

Purpose: Vessel leakage and loss of pericytes are early signs of diabetic retinopathy (DR), which leads to vision loss. Upregulation of the vascular endothelial growth factor (VEGF) during diabetes plays a key role in mediating these vascular lesions. The aim of this study is to investigate the effects of resveratrol, a natural plant‐derived phytoalexin, on vascular damage and VEGF induction in mouse retinas of early diabetes. Methods: Diabetes was induced in C57BL/6 mice by five consecutive‐intraperitoneal injections of 55 mg/kg of streptozotocin (STZ). Animals injected with buffer only were used as controls. Beginning 1 month after the fifth injection of STZ or buffer, 20 mg/kg of resveratrol was administered by oral gavage daily for 4 weeks to diabetic and control mice, and all mice were killed 2 months after the injections. We assessed vessel leakage, pericyte loss and VEGF protein expression in mouse retinas of 2‐month diabetes compared with controls with or without resveratrol treatment. Results: Diabetes led to increase vessel leakage, pericyte loss and VEGF protein level in the mouse retinas compared with controls; however, these changes were effectively blocked by resveratrol treatment. Conclusion: Our data suggest that resveratrol is effective to decrease vascular lesions and VEGF induction in mouse retinas of early diabetes.