DIGFA、ELISA与IHA平行检测血吸虫病流行区居民血清抗体的应用价值

目的探讨斑点金免疫渗滤法(DIGFA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)与间接红细胞凝集试验(IHA)在日本血吸虫病流行区平行检测居民血清抗体的应用价值。方法采用DIGFA、ELISA和IHA平行检测粪检血吸虫虫卵阳性血清、健康人群及其它3种寄生虫感染人群血清、血吸虫病流行区居民血清,并对检测结果进行统计分析。结果DIGFA、ELISA和IHA检测100例粪检血吸虫虫卵阳性血清的敏感性均为96.0%;检测188例健康人群及其它3种寄生虫感染人群血清的特异性分别为98.9%、96.8%和97.3%;平行检测血吸虫病流行区居民血清抗体的阳性率分别为9.35%(102/1091)、11.54%(125/1083)和11.00%(120/1091),检测结果在统计学上无显著性差异(P>0.05)。结论DIGFA、ELISA和IHA敏感性高、特异性强,交叉反应少,平行检测血吸虫病流行区居民血清抗体的阳性检出率较为符合。     

血吸虫病不同流行程度流行区IHA法阳性诊断阈值的研究

目的 探讨日本血吸虫病不同流行程度流行区IHA法的阳性诊断阈值。方法 选择江西省鄱阳湖区湖沼型血吸虫病流行区2个县（余干和星子）共55个自然村作为研究现场,对5岁以上常住居民采用病原学方法（Kato?Katz法+尼龙绢集卵孵化法）和血清学方法（IHA法）进行平行检测;检测结果采用相关分析和ROC曲线等方法分析,计算不同流行程度流行区IHA抗体水平阳性临界值。结果 血吸虫病流行区人群粪检阳性率与人群IHA血吸虫病特异性抗体水平分布趋势一致（r = 0.588, P ＜ 0.05）,与IHA阳性人群抗体水平无相关性（r = 0.221,P ＞ 0.05）;流行区2008-2011年连续4年血吸虫粪检阴性人群的IHA阳性抗体水平呈逐年下降趋势,年间差异有统计学意义（F = 3.650,P ＜ 0.05）,2008-2011年中任意1年血吸虫粪检阳性人群的IHA阳性抗体水平在4年内均维持较高水平且年间差异无统计学意义（F = 2.461,P ＞ 0.05）。流行村人群粪检阳性率< 1%、1%～5%和> 5%时,对应IHA的阳性诊断阈值分别为1∶80、1∶20和1∶10时,可提高IHA检测结果的特异性。结论 不同程度流行区采用IHA筛查血吸虫病或选择化疗对象时,可考虑选择不同的IHA阳性诊断阈值。     

胶体染料试纸条法(DDIA)诊断湄公血吸虫病的研究

目的评价胶体染料试纸条法诊断湄公血吸虫病的应用价值.方法制备以日本血吸虫虫卵可溶性抗原为抗原的胶体染料试纸条试剂盒(DDIA kit).采用该试剂盒检测来自柬埔寨湄公血吸虫病流行区的34例粪检阳性者和170例粪检阴性者,近年来经吡喹酮治疗后不同年份的人群122例,以及114例来自非血吸虫病流行区的健康人;同时对来自老挝湄公血吸虫病流行区的70例粪检阳性者和60例猫后睾吸虫感染者进行检测.对其中部分样本还采用日本血吸虫SEA-ELISA进行对照检测.结果 DDIA试剂盒检测湄公血吸虫病的敏感性为97.1%(33/34)(柬埔寨)和98.6%(69/70)(老挝),与ELISA的检测结果相一致.对非流行区健康人的特异性为100.0%.结论日本血吸虫DDIA试剂盒具有快速、简便、不需任何仪器设备等优点,同样适用于对湄公血吸虫病的现场大规模筛查.     

抗SEA鸡卵黄抗体ELISA用于大山区血吸虫病诊断的研究

目的评价抗SEA鸡卵黄抗体(anti-SEAIgY)ELISA用于大山区血吸虫病诊断的效果。方法对大山区血吸虫病流行区506位居民进行粪检,同时用anti-SEAIgY-ELISA(以IgY作为捕捉抗体,以酶标NP28-5B为检测抗体)和血吸虫抗体ELISA检测试剂盒(SEA-ELISA)对其血清进行检测,评价anti-SEAIgY-ELISA的敏感性。实验设非流行区200份血清作对照以确定方法的特异性。结果 anti-SEAIgY-ELISA和SEA-ELISA与粪检的阳性符合率分别为92.68%(152/164)和89.02%(146/164),特异性分别为99.00%(198/200)和95.00%(190/200),差异均无统计学意义(P均0.05);在粪虫卵孵化阴性人群,anti-SEAIgY-ELISA和SEA-ELISA阳性率分别为31.00%(106/342)和83.63%(286/342),差异有统计学意义(P0.05)。结论 anti-SEAIgY ELISA可用于大山区血吸虫病诊断。     

日本血吸虫IgG抗体检测试剂盒的现场应用评价及质控分析

目的评价日本血吸虫IgG抗体检测试剂盒在血吸虫病流行区的应用效果。方法在云南省洱源县2个血吸虫病流行村选择505例常住居民作为检测对象,采用尼龙绢集卵孵化法进行血吸虫病病原法检测。采用Levey-Jennings(L-J)质控图法对整个试验过程进行质量控制。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对调查对象进行日本血吸虫IgG抗体检测,并对检测结果进行分析。结果505名检测对象中,ELISA法查出IgG抗体阳性者290例,阳性率为57.43%;质控血清A和质控血清B检测结果均在L J质控图可控范围内,ELISA检测结果可信。尼龙绢集卵孵化法查出虫卵阳性者20例,阳性率为3.96%。ELISA与粪检的阳性符合率为90.00%。结论日本血吸虫IgG抗体检测试剂盒有较好的稳定性、可靠性,适于现场血吸虫病人的筛查。     

日本血吸虫抗独特型抗体NP30抗体检测法在云南大山区应用效果的评价

目的评价日本血吸虫抗独特型抗体NP30抗体检测法在云南大山区血吸虫病流行现场的应用效果.方法对云南大山区血吸虫病流行区的506位居民进行粪检,同时用NP30抗体检测法和血吸虫抗体ELISA检测试剂盒(SEA-ELISA)分别对其血清进行检测,评价NP30抗体检测法的敏感性;同时检测非流行区的100份血清确定其特异性.结果 NP30抗体检测法和SEA-ELISA法的粪检阳性符合率分别为87.80%(144/164)和84.76%(139/164);两者的特异性分别为96.00%(96/100)和94.00%(94/100),差异均无显著性(P均＞0.05),但在粪孵阴性人群血清样本中,NP30抗体检测法和SEA-ELISA法的检出率分别为44.15%(151/342)和70.47%(241/342),差异有显著性(P＜0.05).结论 NP30抗体检测法可用于云南大山区血吸虫病筛查.     

鄱阳湖区血吸虫病人免疫状态研究Ⅱ血吸虫病人细胞免疫特征分析

目的观察鄱阳湖区血吸虫病低度流行区日本血吸虫病人细胞免疫特征。方法以鄱阳湖区血吸虫病流行区粪检阳性病人为研究对象,并以连续3年粪检阴性人群为对照,采用流式细胞术检测外周血CD4+、CD8+T细胞及CD4+CD25+Treg细胞。以可溶性血吸虫成虫抗原(SWA)和可溶性虫卵抗原(SEA)分别刺激外周血单个核细胞,采用酶联免疫吸附试验检测培养上清中IFN-γ和IL-10水平。结果日本血吸虫粪检阳性人群CD4+CD25+Treg细胞水平为(5.99±1.60)%,高于粪检阴性人群的(5.04±1.64)%,差异有统计学意义(t=3.261,P<0.01)。粪检阳性人群治疗1年后,IFN-γ水平显著提高,SEA刺激下,治疗前、后平均水平分别为121.97、2 564.03 pg/ml;SWA刺激下,治疗前、后平均水平分别为102.89、646.26 pg/ml。IL-10水平显著降低,SEA刺激下,治疗前、后平均水平分别为294.75、122.43 pg/ml;SWA刺激下,治疗前、后平均水平分别为110.10、31.85 pg/ml。结论人体感染血吸虫后诱导CD4+CD25+Treg细胞增多是引起细胞免疫应答下调的原因之一。     

日本血吸虫病免疫检测试剂IgG抗体冻干质量控制品的制备

目的 制备日本血吸虫病免疫检测试剂IgG抗体质量控制品。 方法 收集湖北省血吸虫病流行区粪检筛查血吸虫感染病人血清和无疫水接触史、无血吸虫感染史且粪检阴性人群血清,用取得中华人民共和国医疗器械注册证的检测试剂进行检测,制成冻干质量控制品。 结果 共筛选出12份阳性质控品、1份灵敏度质控品、1份精密度质控品和10份阴性质控品;阳性质控品根据ELISA法检测血清效价不同,分为强、中、弱阳性质控品。经12个月实际储存条件及破坏稳定性实验,该质控品稳定性可达1年。 结论 所制备的冻干质控品使用方便,结果稳定,可以满足日本血吸虫病诊断试剂实验室质量控制需求。     

金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的　评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA-kit）用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法　采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清、非流行区人群血清、疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果　DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96.8%，对非流行区健康人群的特异性为100%；该法检测疫区居民血清508份，抗体阳性检出率为35.6%，在Kato法粪检阳性的81人中，其中抗体阳性79人，阳性符合率为97.5%；检测血吸虫病已控制地区人群血清，抗体阳性率为4.6%；根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性，计算其Youdens指数为0.926。上述各项结果与ELISA比较，差异无显著性（P>0.05）。结论　DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性，且方法简便、快速，胶体金标记物制备容易，试剂稳定，运送方便，在现场和临床诊断更具有优越性。     

NP30/抗体检测试剂盒在云南大山区型血吸虫病流行区的现场应用

目的用NP30/抗体检测试剂盒在大山区型血吸虫病流行区筛查病人,评价其应用价值。方法在云南省大山区型血吸虫病流行区,选择3个自然村作为现场,随机抽取10～70岁的村民作为调查对象,进行血吸虫病病史个案调查;收集粪便,作毛蚴孵化检查;静脉采血,分离血清,分别采用NP30/抗体检测试剂盒和酶联免疫吸附试验试剂盒（SEA/ELISA法）检测特异性IgE和总IgE抗体。结果3个村共筛查村民506人,粪便毛蚴孵化阳性164例,阳性率为32.41%;NP30和SEA/ELISA的阳性率分别为58.30%和75.10%。在164例粪检阳性血清样本中,NP30和SEA/ELISA的阳性符合率分别为87.80%和84.76%。在342例粪孵阴性血清样本中,NP30和SEA/ELISA的阳性率分别为44.15%和70.47%。结论NP30/抗体检测试剂盒具有较高的敏感性和特异性,可用于大山区型血吸虫病流行区病人筛查。     

胶体染料试纸条法免疫诊断试剂盒在大山区型血吸虫病流行区的现场应用

目的现场评价胶体染料试纸条法(DDIA)免疫诊断试剂盒在大山区型血吸虫病流行区筛查病人中的应用价值。方法在云南省大山区型血吸虫病流行区,选择3个自然村作为调查现场, 随机抽取10-70岁的村民作为调查对象,进行血吸虫病病史个案调查;收集粪便标本,采用改良 Kato-Katz法(1送3检)作病原学检查;静脉采血,分离血清,分别采用DDIA诊断试剂盒、酶联免疫吸附试验(ELISA)诊断试剂盒和环卵沉淀试验(COPT)诊断试剂盒进行血吸虫病免疫学诊断。结果 3个村共筛查村民659人,Kato-Katz法粪检阳性187例,阳性率为28．4％;DDIA、ELISA和 COPT的阳性率分别为70．9％,84．2％和54．9％;在187例粪检阳性者中,DDIA、ELISA和COPT 的阳性符合率分别为98．4％、96．8％和81．8％。结论 DDIA免疫诊断试剂盒在大山区型血吸虫病流行区现场大规模筛查病人中具有较高的敏感性和特异性。     

循环抗体与循环抗原组合检测诊断血吸虫病的应用观察

目的探讨血吸虫病循环抗原与循环抗体组合检测的诊断效能以及在血吸虫病疫区中的应用价值。方法采用夹心ELISA法和间接ELISA法对不同类型人群的血清标本进行循环抗原和抗SEAIgG抗体检测,比较抗原抗体组合检测的敏感性、特异性,以及在重疫区的检测效果。结果循环抗原与循环抗体平行检测敏感性和特异性分别为97.9%、92.2%;序列检测敏感性和特异性分别为76.0%、99.2%。对血吸虫病疫区粪检阳性人群平行检测阳性率为94.6%(35/37),序列检测阳性率为67.6%(25/37);疫区粪检阴性人群平行检测阳性率为69.8%(97/139),序列检测阳性率为39.6%(55/139)。结论组合检测方案中平行检测在重疫区对有效检出病人具有更高的应用价值。     

鄱阳湖区血吸虫病人免疫状态研究Ι血吸虫病人特异性同种型抗体特征分析

目的了解鄱阳湖区血吸虫病人特异性同种型抗体反应水平及特征。方法以可溶性虫卵抗原(SEA)和成虫抗原(AWA)为检测抗原,采用间接ELISA法检测血吸虫病流行区及非流行区人群血清中8种特异性同种型抗体(IgG、IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgE、IgM、IgA)水平。结果血吸虫病流行区粪检阳性人群特异性同种型抗体水平显著高于流行区粪检阴性人群和非流行区人群(P均<0.001),流行区粪检阴性人群除SEA和AWA特异性IgG2、IgG4和抗AWA IgE抗体外,其他同种型抗体水平均显著高于非流行区人群(P均<0.05)。流行区粪检阳性人群中,儿童SEA、AWA特异性IgM和SEA IgG1水平显著高于成人,AWA特异性IgG水平则显著低于成人(F=6.136,P=0.014);男性除AWA特异性IgG(F=4.677,P=0.032)和IgG1(F=5.55,P=0.020)显著高于女性外,其他抗体同种型之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。治疗3个月后,SEA抗原特异性IgG1、IgG3、IgG4抗体水平显著下降(P<0.001,P=0.029,P=0.044);治疗12个月后,除SEA特异性IgE、IgM和AWA IgG4、IgM外,其他抗体均显著低于治疗前水平(P均<0.05)。结论血吸虫病流行区粪检阳性人群血吸虫特异性同种型抗体水平显著高于流行区粪检阴性人群和非流行区人群,治疗12个月后,大部分同种型抗体水平显著下降;流行区粪检阴性人群血吸虫特异性抗体水平高于非流行区人群。抗体诊断试剂盒研制应注意阴性参考血清的选择。     

日本血吸虫抗体检测试剂盒(IHA法)的研制与应用

目的 目的 研制日本血吸虫抗体检测试剂盒 （IHA法）。方法 方法 按 《药品生产质量管理规范》 要求, 研究日本血吸虫抗 体检测试剂盒 （IHA法） 组成成份、 制备方法及程序, 并对研制的试剂盒进行诊断效果评价。结果 结果 研制的日本血吸虫抗体 检测试剂盒 （IHA法） 检测慢性血吸虫病患者敏感性为94.49%, 检测健康人群特异性为97.14%, Youden指数为0.92; 与并殖 吸虫和旋毛虫病患者血清交叉反应率分别为15.00%和10.00%。与市售日本裂体吸虫抗体检测试剂盒 （ELISA法） 和日本 血吸虫抗体检测试剂盒 （IHA法） 平行检测流行区居民血吸虫抗体的总体符合率分别为93.06%和92.25%。结论 结论 日本血 吸虫抗体检测试剂盒 （IHA法） 敏感性高、 特异性强, 适合疫区现场血吸虫病筛查, 具有推广应用价值。     

两种试剂盒快速检测斯氏狸殖吸虫抗体的研究

目的观察肺吸虫病金标渗滤试剂盒(DIGFA kit)和酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测斯氏狸殖吸虫抗体的敏感性和特异性。方法采用DIGFA kit和ELISA检测斯氏狸殖吸虫病流行区人群和病鼠血清抗体。结果 DIGFA和ELISA试剂盒检测斯氏狸殖吸虫病流行区人群和病鼠血清特异性抗体阳性率均为5.08%(54/1062)和100%(40/40);用两种试剂盒检测正常大鼠、旋毛虫病大鼠、血吸虫病兔和蛔虫病病人血清,除1例血吸虫病兔血清DIGFA出现阳性反应外,其他血清两种方法均为阴性。大鼠感染斯氏狸殖吸虫后第2周用两种方法检测抗体,阳性率分别为20.00%(8/40)和27.50%(11/40),第4周阳性率均达100%,并持续至第8周。结论 DIGFA试剂盒具有与ELISA试剂盒相同的敏感性和特异性,且有操作快速、简便、直观等特点,适合在基层和斯氏狸殖吸虫病流行地区推广使用。     

金标免疫渗滤法诊断试剂盒诊断血吸虫病的价值研究

目的：评价金标免疫渗滤法诊断试剂盒（DIGFA－kit)用于血吸虫病血清流行病学调查的价值。方法：采用DIGFA与ELISA单盲平行检测各期血吸虫病病人血清，非流行区人群血清，疫区人群血清和血吸虫病已控制地区人群血清共2304份。结果：DIGFA检测血吸虫抗体的敏感性为96．8％，对非流行区健康人群的特异性为100％，该法检测疫区居民血清508份，抗体阳性检出率为35．6％，在Kato法粪检阳性的81人中，其中抗体阳性79人，阳性符合率为97．5％；检测血吸虫病已控制地区人群血清，抗体阳性率为4．6％，根据DIGFA的敏感性和对非流行区人群的特异性，计算其Youden's指数为0．926，上述各项结果与ELISA比较，差异无显著性（P＞0．05），结论：DIGFA与ELISA有相似的敏感性和特异性，且方法简便，快速，胶体金标记物制备容易，试剂稳定，运送方便，在现场和临床诊断更具有优越性。     

血吸虫抗体（IgG）检测试剂盒（胶体染料法）临床诊断效能

目的评价血吸虫抗体(IgG)检测试剂盒(胶体染料法)对血吸虫病的临床诊断效能。方法采用血吸虫抗体(IgG)检测试剂盒(胶体染料法)对毛蚴孵化法或/和Kato-Katz法阳性(阳性金标准)的血吸虫病人血清371份,无血吸虫感染史、无血吸虫疫水接触史且粪检结果阴性者(阴性金标准)血清761份进行检测,计算试剂盒检测的阳性符合率(灵敏度)、阴性符合率(特异度)、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比和阴性似然比。结果血吸虫抗体(IgG)检测试剂盒(胶体染料法)检测结果与阳性金标准的符合率(灵敏度)为92.7%(95%可信区间为90.1%～95.3%),与阴性金标准的符合率(特异度)为98.7%(95%可信区间为97.9%～99.5%),阳性预测值和阴性预测值分别为97.2%和96.5%,阳性似然比和阴性似然比分别为71.3和0.07。结论血吸虫抗体(IgG)检测试剂盒(胶体染料法)对血吸虫病具有较好的诊断效能,可用于对血吸虫病的辅助诊断。     

日本血吸虫病常用诊断方法应用价值的评估Ⅱ IHA与Kato-Katz法结果的定量关系

目的分析IHA检测结果的群体特征与疫区疫情、传播状态或人群感染趋势的关系。方法采用Kato-Katz法（2粪6检）和IHA（定量检测）方法连续2年同时对1个血吸虫病疫区村常住居民进行调查,分析IHA的诊断效率、IHA阳性率和抗体水平变化与感染状态变化关系及血吸虫感染＂真阳性者＂和＂真阴性者＂的IHA抗体水平分布。结果以Kato-Katz法为金标准,IHA在疫区现场实际应用时,其敏感度较高,为77.27%～85.48%,阴性预测值〉94%;但特异度〈60%,且特异度随着年龄的增加而降低,在低年龄组人群（〈15岁人群）的特异度最高。IHA的人群抗体阳性率远高于粪检阳性率,但其年龄分布趋势与Kato-Katz法粪检阳性率的年龄分布一致。IHA的假阳性率为41.90%～44.56%,假阴性率为14.52%～22.73%。感染者（粪检阳性）治疗后,IHA的抗体阳性率下降缓慢,而且＂真阴性者＂和＂真阳性者＂的抗体水平分布有相当大的重叠。结论在我国目前疫情状态下,IHA在群体水平上更具应用价值,采用IHA对疫区人群查病宜注意同时存在＂扩大化疗对象＂和＂漏检传染源＂的问题,在目前血防＂达标＂进程中,现场应用免疫诊断方法时更应谨防其＂假阴性＂的出现。     

日本血吸虫抗体检测试剂盒（IHA法）早期诊断效果的初步评估

目的  初步评估日本血吸虫抗体检测试剂盒（IHA法）的早期诊断效果。 方法  建立日本血吸虫感染家兔模型,日本血吸虫抗体检测试剂盒（IHA法）及基于该试剂盒所使用的血吸虫天然蛋白抗原X的ELISA法 (抗原X-ELISA法) 检测感染前及感染后第1、2、3、4、5、6周兔血清,并比较两种方法的早期诊断效果。 结果  日本血吸虫抗体检测试剂盒（IHA法）检测感染前及感染后第1、2周兔血清的阳性率均为0,从感染后第3w开始阳性率均达到100%;抗原X-ELISA法检测日本血吸虫感染前正常兔血清的假阳性率为30.77%,检测感染后第1、2周兔血清的阳性率分别为0和16.67%,从感染第3周开始阳性率也达到100%。两种方法检测同一时间点兔血清的阳性率差异均无统计学意义（P＞0.05）。 结论  日本血吸虫抗体检测试剂盒（IHA法）在早期诊断日本血吸虫病方面具有一定的潜在价值。     

2006-2013年四川省蒲江县古佛村人群血吸虫抗体消长监测

目的了解山丘型血吸虫病轻疫区人群血吸虫病抗体水平的变化规律,为评价免疫诊断方法提供参考。方法选择四川省蒲江县古佛村,每年秋季用间接血凝试验(IHA)检查村民,血阳者再作Kato-Katz法检查。筛选出2006-2013年连续参加检查的人群,检查分析人群血吸虫抗体阳性率、抗体滴度、每克粪便虫卵数(EPG)等的变化情况。结果 2006-2013年有263人连续参加了血吸虫病检查,人群抗体阳性率从4.19%下降到1.83%,人群抗体滴度(GMRT)从1.29下降到1.07。抗体阳性者转归以阴转为主,滴度逐年降低;阴性者维持阴性为主。总血清阳性率与总感染率呈正相关(r=0.33,P0.05)。结论四川省蒲江县古佛村山丘型血吸虫病轻疫区人群血吸虫抗体阳性率维持在较高水平,应开发适用于不同流行程度疫区的血吸虫病免疫诊断试剂。