南昌市艾滋病患者合并人芽囊原虫感染情况及危险因素分析

目的　了解江西省南昌市艾滋病患者人芽囊原虫感染状况及其危险因素。方法　2016年5—9月采用横断面调查法对南昌市艾滋病患者进行问卷调查,并采集调查对象粪便,采用PCR法检测粪便基因组中人芽囊原虫DNA以判定感染状况;同时采集调查对象血液样本,检测其中CD4+ T淋巴细胞数量。采用单因素分析和多因素logistic回归分析对南昌市艾滋病患者人芽囊原虫感染的危险因素进行分析。结果　2016年5—9月在南昌市累计调查艾滋病患者505例,人芽囊原虫感染率为4.16%。单因素分析结果显示,与南昌市艾滋病患者感染人芽囊原虫有关的危险因素包括职业（[χ2] = 8.595,P = 0.049）、受教育程度（[χ2] = 14.494,P = 0.001）、日常饮用水类型（[χ2] = 10.750,P = 0.020）、感染HIV途径（[χ2] = 8.755,P = 0.026）、是否接受抗HIV治疗（[χ2] = 23.083,P = 0.001）;多因素logistic回归分析显示,日常直接饮用自来水是南昌市艾滋病患者感染人芽囊原虫的危险因素[比值比（odds ratio,OR） = 7.988,95%可信区间（confidential interval,CI）：（1.160,55.004）],接受抗HIV病毒治疗是人芽囊原虫感染的保护因素[OR = 0.183,95% CI：（0.049,0.685）]。结论　南昌市艾滋病患者人芽囊原虫感染率为4.16%。日常直接饮用自来水是南昌市艾滋病患者感染人芽囊原虫的危险因素,接受抗HIV治疗是保护因素。     

安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染 流行特征及危险因素

目的　调查安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染情况及其危险因素。方法　2016年采用横断面调查方法对安徽省阜阳市HIV/AIDS感染者进行问卷调查，收集调查对象一般人口学信息、社会经济状况、生产生活方式信息。采集调查对象粪便，通过PCR方法检测粪便基因组中人芽囊原虫DNA以判定感染状况；同时采集调查对象血液，检测其中CD4+T淋巴细胞数量和HIV病毒载量。采用单因素分析和多因素logistic回归分析对HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染的危险因素进行分析。结果　本研究共招募398名HIV/AIDS病例，平均年龄为49.3岁、平均体重为55.9 kg、平均身高为164.4 cm。人芽囊原虫感染率为6.78%，不同性别（[χ2] = 1.589，P = 0.207）、受教育程度（[χ2] = 0.508，P = 0.776）、婚姻（[χ2] = 0.419，P = 0.811）和职业（[χ2] = 2.744，P = 0.615）患者感染率差异均无统计学意义。人芽囊原虫感染者和非感染者年龄（t = 0.370，P = 0.712）、身高（t = 1.587，P = 0.113）、体重（t = 0.516，P = 0.606）、CD4+ T淋巴细胞数量（t = 1.187，P = 0.230）和HIV病毒载量（t = 0.193，P = 0.496）差异均无统计学意义。饮用非自来水[OR = 6.554， 95% CI：（1.876，22.903）]和养狗[OR = 5.895，95% CI：（2.017，17.225）]是HIV/AIDS患者感染人芽囊原虫的危险因素。结论　安徽省阜阳市HIV/AIDS患者人芽囊原虫感染率较高，饮用非自来水和养狗是该人群人芽囊原虫感染的危险因素。     

3种ELISA试剂盒检测片形吸虫病的效果评价

目的 目的 评价3种人体片形吸虫病ELISA试剂盒的检测效果。方法 方法 采用本研究室大片吸虫抗原、 肝片吸虫成虫可溶性抗原包被的人体片形吸虫病ELISA试剂盒 （Fg?ELISA和Fh?ELISA） 及德国DRG公司生产的人体片形吸虫IgG抗体 ELISA试剂盒 （DRG?ELISA）, 分别检测26份大片吸虫患者血清、 180份其他寄生虫病患者血清和26份健康人血清, 评价3 种检测试剂盒的检测效果。 结果 结果 Fg?ELISA、 Fh?ELISA 和DRG?ELISA 3种检测盒的敏感性分别为100.0%、 80.8%（95% CI： 65.7%～95.9%） 和100.0%, 特异性分别为87.9%（95% CI： 83.5%～92.4%）、 85.0% （95% CI： 80.1%～89.9%） 和83.5% （95% CI： 78.4%～88.6%）, 约登指数分别为0.88、 0.66和0.84。其中, Fg ?ELISA检出率（100%）明显高于Fh?ELISA （80.8%） （P < 0.05）; Fg?ELISA 检测26例大片吸虫病患者血清的吸光度 （A） 绝对值 （A/ CO） 为1.70, 明显高于Fh?ELISA的 1.18（P < 0.000 1）。结论 结论 Fg?ELISA试剂盒检测效果较好, 且成本相对较低, 比Fh?ELISA和DRG?ELISA两法更适宜用于我国西南大片吸虫病流行区临床样本检测及大规模筛查。     

华支睾吸虫病患者粪便虫卵核糖体DNA内转录间隔区序列分析

目的 通过PCR方法扩增华支睾吸虫病患者粪便虫卵核糖体DNA （ribosomal DNA,rDNA）内转录间隔区（internal transcribed spacer,ITS）序列进行分析,探讨其用于华支睾吸虫感染检测的价值. 方法 提取2例华支睾吸虫患者粪便中的虫卵DNA作模板,以rDNA ITS基因片段为目的片段进行PCR扩增,对扩增片段进行测序分析. 结果 从2例患者粪便虫卵样本中均扩增出1 123 bp的条带,经序列比对确定患者粪便中的虫卵为华支睾吸虫卵.测序分析发现本研究的两个样本与中国黑龙江分离株（KF740425）相似性为100％. 结论 本研究从2例华支睾吸虫病患者粪便虫卵中成功扩增出rDNA ITS基因,为从分子生物学角度检测华支睾吸虫病提供了资料.     

三氟乙酰伯氨喹对鼠疟红内期原虫作用

参照ＷＨＯ推荐的“４ｄ抑制性试验法”给药，并采用延长疗效的观察期和取血再转种的方法证明：三氟乙酰伯氨喹２０ｍｇ／ｋｇ·ｄ×４ｄ能完全清除血内的伯氏疟原虫ＡＮＫＡ株；对抗氯喹伯氏疟原虫ＮＳ系和抗咯萘啶伯氏疟原虫ＲＰ系亦显示有不同程度的抑制作用，但疗效明显较差，与用伯氨喹相似。提示，８－氨基喹啉类药物与氯喹、咯萘啶等红内期杀灭剂有一定的交叉抗性。     

应用PCR和体外培养技术诊断1例人芽囊原虫基因3型感染病例

<正>患儿,男,10岁,广西灌阳县人。2013年无明显诱因下出现不成形暗红色大便,量多,伴头晕,腹痛腹泻,至当地医院就诊,予止血,护胃,补液,输注悬浮红细胞等治疗后好转。2014年7月、8月均有类似发作史,于外院行胃镜检察未见上消化道明显异常,肠镜示回肠末端、回盲瓣黏膜炎症改变,病理诊断黏膜慢性炎症。2014年12月因腹痛、腹泻被上海市瑞金医院收治入院。查体:体温36.4℃,一般情况良好,     

咯萘啶、阿莫地喹、甲氟喹及青蒿素对伯氏疟原虫的疗效

用4天抑制试验法给感染伯氏疟原虫ANKA株小鼠灌胃咯萘啶12.5mg/kg·d或阿莫地喹25mg/kg·d均能完全杀灭原虫;甲氟喹25mg/kg·d或青蒿素100mg/kg·d虽有抑制作用但治愈率仅为50％及0％。咯萘啶12.5mg/kg·d对中度抗氯喹的NS系原虫亦有明显作用,洽愈率70％,而阿莫地喹100mg/kg·d、甲氟喹100mg/kg·d及青蒿素200mg/kg·d均无治愈鼠,示后3种药与氯喹有不同程度的交叉抗性。上述剂量的阿莫地喹、甲氟喹和青蒿素对高度抗咯萘啶的伯氏疟原虫无明显抑制作用,示它们与咯萘啶有交叉抗性。     

曼氏裂头蚴cDNA文库的构建及诊断候选抗原筛选

目的　构建曼氏裂头蚴cDNA文库,通过免疫筛选获得曼氏裂头蚴病诊断候选抗原基因。方法　提取曼氏裂头蚴虫体总RNA,反转录合成cDNA,连接噬菌体载体,经体外包装后构建曼氏裂头蚴SMART cDNA文库。用曼氏裂头蚴病患者血清免疫筛选cDNA文库,获得阳性克隆,测定阳性克隆插入片段的DNA序列,进行同源性分析并预测编码蛋白的结构和功能。结果　成功构建了曼氏裂头蚴cDNA文库,文库滴度为6.25 × 106 pfu/mL,重组率为100%,文库插入片段的平均长度大于1 100 bp。经免疫筛选获得12个阳性克隆,分为Sm⁃Ⅰ、Sm⁃Ⅱ、Sm⁃Ⅲ和Sm⁃Ⅳ4类,其代表克隆为Sm60⁃1、Sm58⁃1、Sm20⁃1、Sm22⁃3,插入片段长度分别为1 134、1 063、883、969 bp,编码蛋白分别与欧猥迭宫绦虫抗原多肽、胞质抗原、核糖体蛋白S4样蛋白和未命名蛋白具有较高同源性。结论　成功构建了曼氏裂头蚴SMART cDNA文库,获得了4类阳性克隆,为曼氏裂头蚴病诊断抗原的进一步研究奠定了基础。     

3种培养基中芽囊原虫生长状况观察

目的观察芽囊原虫在不同培养基中的生长状况,筛选合适的芽囊原虫培养方法。方法将10份芽囊原虫阳性粪便分别接种至Jone’s液、vitro液、1640 3种培养基中培养,选取生长情况良好、虫密度高的一份粪便传代培养后等量接种至3种不同的培养基中,每24 h计数虫体数量一次,连续观察10 d,并观察芽囊原虫的形态学变化和生长情况。结果10份粪便分别接种至3种培养基中培养,48 h后发现1640和Jone’s液中的虫密度高于vitro液。同一份粪便接种至3种不同培养基中连续观察10 d,结果表明3种培养基中虫体生长呈规律变化,均在接种后3、6、9 d出现生长高峰;Jone’s液中芽囊原虫密度最高。vitro液中观察到的虫体形态最清晰,且富有活力;Jone’s液中能观察到虫体多种繁殖状态。结论Jone’s液适于芽囊原虫的生长繁殖,可作为首选培养基;vitro液可作为观察芽囊原虫生长情况的首选培养基。     

肺孢子菌动物模型的建立及病原学和分子生物学检测技术研究

目的 目的 建立肺孢子菌动物模型, 并对肺孢子菌病原学和分子生物学检测技术进行研究。方法 方法 SD和Wistar大 鼠随机分为实验组和对照组, 实验组大鼠皮下注射地塞米松, 对照组皮下注射生理盐水。诱导8周后处死全部大鼠, 收 集其支气管肺泡灌洗液 （BALF） 和肺组织, 分别做涂片和肺印片, 染色后镜检。用FTA卡采集所有大鼠的BALF进行PCR 检测。对PCR产物进行测序, 利用BLAST软件将测序结果与GenBank数据库中的鼠源性肺孢子菌进行比对, 确定菌 种。结果 结果 共采集肺组织标本和BALF 各34份, 病原学检测显示实验组总感染率为29.2% （7/24）, 对照组感染率为0; 其 中SD和Wistar大鼠实验组感染率分别为25.0% （3/12） 和33.3% （4/12）, 差异无统计学意义 （P = 0.31）; 实验组SD大鼠肺印 片和BALF 肺孢子菌阳性检出率分别为25.0% （3/12） 和16.7% （2/12）, 差异无统计学意义 （P = 0.34）。实验组Wistar大鼠 肺印片和BALF 肺孢子菌阳性检出率分别33.3% （4/12） 和16.7% （2/12）, 差异无统计学意义 （P = 0.24）。用PCR方法共检 测28份大鼠BALF样本, 实验组阳性检出率为91.7% （26/28）, 对照组均为阴性。对PCR产物进行测序分析, 发现其与 GenBank 已登录的大鼠源肺孢子菌 （JX499145、 GU133622、 EF646865） 的同源性均为100%。结论 结论 通过皮下注射地塞米 松可以建立肺孢子菌动物模型, SD大鼠与Wistar大鼠在作为肺孢子菌动物模型的选择上无显著差别。在早期感染阶 段, 适宜用PCR法进行肺孢子菌检测, 病原形态学检测漏检率高。