南方红豆杉多糖对宫颈癌细胞增殖及凋亡的影响

〔摘 要〕 目的：探究南方红豆杉多糖对宫颈癌 HeLa 细胞株增殖、凋亡的影响及其作用机制。方法：经体外培养并取 对数生长期人宫颈癌 HeLa 细胞，分别予以不同浓度红豆杉多糖（30、60、90、120 μmol·L-1），将其设为四组，并设对照 组加入等量 0.9 % 氯化钠溶液。应用 MTT 法检测细胞增殖情况，流式法检测细胞凋亡情况，Western blot 法检测 Survivin、 Caspase–3、Bcl–2、P53 蛋 白 表 达 情 况。 结果： 与 对 照 组 相 比，30 μmol·L-1 组、60 μmol·L-1 组、90 μmol·L-1 组、 120 μmol·L-1 组的宫颈癌 HeLa 细胞增殖抑制率、细胞凋亡率显著升高，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。P53 蛋白表达 量明显升高，Survivin、Bcl–2、Caspase–3 蛋白表水平显著降低，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）。结论：南方红豆杉多糖 可抑制宫颈癌 HeLa 细胞增殖，促进细胞凋亡，其作用机制可能与下调 Survivin、Bcl–2、Caspase–3 表达，上调 P53 表达有关。     

苦参碱对结肠癌 HT29 细胞增殖及凋亡的临床研究

〔摘 要〕 目的：探讨苦参碱对结肠癌 HT29 细胞增殖及凋亡的影响，并分析其作用机制。 方法：选取 2020 年 1 月至 2021 年 3 月间于中国医学科学院肿瘤医院山西医院行结肠癌治疗的 100 例患者的资料进行分析，其中运用 mFOLFOX6 方 案治疗的 50 例纳入对照组，另 50 例在 mFOLFOX6 方案治疗的中后期联合使用苦参碱治疗的纳入观察组。运用 Western blot 法检测两组患者 B 细胞淋巴瘤 –2 抗凋亡蛋白（Bcl–2）、Bcl–2 相关蛋白 X（Bax）、半胱氨酸蛋白酶 –3（Caspase–3） 及表皮生长因子受体（EGFR）水平，以分析苦参碱对 HT29 细胞增殖、凋亡的影响；并比较两组患者癌胚抗原（CEA）、 糖类抗原 19–9（CA19–9）及血管内皮生长因子（VEGF）水平在治疗前后的变化，以分析治疗效果。 结果：治疗后， 观察组患者的 Bcl–2、EGFR 水平均低于对照组，Bax 和 Caspase–3 水平均高于对照组，差异均具有统计学意义（P ＜ 0.05）； 观察组患者 CEA、CA19–9 及 VEGF 水平均低于对照组，差异均具有统计学意义（P ＜ 0.05）。 结论：苦参碱具有一定的 抗肿瘤作用，其可以抑制结肠癌 HT29 细胞的增殖，诱导其凋亡，并通过调节 Bcl–2/Bax、EGFR 和 Caspase–3 等相关信号 通路来发挥其作用。     

和厚朴酚联合三氧化二砷诱导骨髓瘤细胞凋亡的作用机制

〔摘 要〕 目的：探究和厚朴酚（HNK）联合三氧化二砷（As2O3）诱导人多发性骨髓瘤 RBMI8226 细胞株的凋亡作用机制。 方法：不同浓度的 HNK、As2O3 单药作用于细胞 24 h、48 h、72 h 后，采用 CCK–8 法检测细胞增殖抑制率；应用 Annexin V–FITC/PI 双染及 PI 单染法流式细胞术检测各处理组细胞凋亡和周期分布情况；采用 Western blot 法检测细胞中 Bcl–2、 Bax、Caspase–3 蛋白表达水平。结果：HNK 与 As2O3 单药对 RBMI8226 细胞增殖具有抑制作用，呈时间和剂量依赖性； HNK 与 As2O3 单药能有效诱导细胞凋亡，两药联合后对细胞的诱导凋亡作用较单药显著，差异具有统计学意义（P ＜ 0.05）； HNK 和 As2O3 单药可使骨髓瘤细胞阻滞在 S 期，两药联合可增强诱导细胞分化作用，使细胞由 G1、G2 期进入 S 期，差异 具有统计学意义（P ＜ 0.01）。联合用药时能够降低细胞的 Bcl–2 水平、增加 Caspase–3 以及 BAX 水平表达。结论：HNK 及 As2O3 联合对人多发性骨髓瘤 RBMI8226 细胞株具有协同杀伤作用，该作用可能通过激活凋亡相关信号通路来诱导凋亡。     

基于多组学探讨川陈皮素调控脂质合成氧化逆转胃癌顺铂耐药的机制

目的 运用脂质代谢组学和网络药理学寻找川陈皮素对胃癌顺铂耐药细胞（AGS-DDP）的核心靶点，并结合细胞实验进一步探究川陈皮素逆转胃癌顺铂耐药的机制。方法 采用UPLC-Orbitrap质谱系统进行非靶向脂质组学分析。利用GENE Card、TCMSP数据库挖掘川陈皮素和甘油磷脂代谢通路的潜在靶点，通过微生信在线作图工具平台整合二者的交集靶点，并进行基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes，KEGG）通路富集分析，通过STRING数据库绘制蛋白质-蛋白质相互作用（protein-protein interaction，PPI）网络，运用Cytoscape软件将川陈皮素的核心靶点可视化。川陈皮素给药后，通过CCK-8法检测AGS和AGS-DDP细胞的存活率；流式细胞术检测AGS-DDP细胞的凋亡情况；划痕实验检测AGS-DDP细胞的迁移能力；Western blotting检测AGS-DDP细胞的B淋巴细胞瘤-2（B-cell lymphoma-2，Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein，Bax）、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（peroxisome proliferators-activated receptor γ，PPARγ）和三磷酸腺苷柠檬酸裂解酶（adenosine triphosphate citrate lyase，ACLY）蛋白表达。结果 AGS和AGS-DDP细胞通过脂质组学分析检测得到31个亚类中的1450个差异的脂质化合物，主要富集在甘油磷脂代谢通路，对川陈皮素潜在靶点进行KEGG富集分析结果显示川陈皮素具有逆转铂类耐药的潜力。细胞实验结果显示，与对照组比较，川陈皮素剂量相关性地抑制AGS-DDP细胞的存活率（P<0.05、0.01），增加AGS-DDP细胞对顺铂的敏感性（P<0.05），且能诱导AGS-DDP细胞凋亡并抑制其迁移能力（P<0.05、0.01）。Western blotting实验结果显示川陈皮素组Bax、E-cadherin蛋白表达水平显著升高（P<0.05、0.01），Bcl-2、N-cadherin、Vimentin、ACLY和PPARγ蛋白表达水平均显著降低（P<0.05、0.01）。结论 AGS和AGS-DDP细胞的差异脂质代谢产物主要富集在甘油磷脂代谢通路，川陈皮素通过调控脂质合成氧化关键基因抑制AGS-DDP细胞增殖、迁移，最终逆转胃癌顺铂耐药。     

淫羊藿苷对食管癌细胞EC9706增殖与凋亡的影响

目的:探讨淫羊藿苷(icariin,ICA)对食管癌细胞EC9706增殖的影响,明确其作用机制。方法:ICA(40,160,640 nmol·L^-1)作用EC9706细胞48 h后,应用CCK8法检测EC9706细胞增殖;应用Hoechest33342染色和荧光显微镜检测细胞凋亡;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA表达;应用免疫印迹法检测Bax,Bcl-2的蛋白表达。结果:ICA能显著抑制EC9706细胞增殖;ICA作用EC9706细胞出现细胞凋亡形态学改变;免疫印迹结果显示Bax蛋白表达减少,而Bcl-2蛋白表达增多。结论:ICA能显著抑制人食管癌EC9706细胞增殖,其凋亡作用机制可能与上调Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白的表达相关。     

丹参饮加味方诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡及其机制研究

目的： 探讨丹参饮加味方体外诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的分子机制。 方法： 以丹参饮加味方120,240,480 mg·L^-1作用细胞24,48,72,96 h后,应用四甲基偶氮唑盐法（MTT）和流式细胞仪检测该方对胃癌SGC-7901细胞的抑制率和凋亡率的影响;采用免疫组化法检测丹参饮加味方对Bcl-2,Bax蛋白表达的影响。 结果： 与空白对照组相比,丹参饮加味方各组细胞抑制率、凋亡率明显升高（P<0.05）,Bax蛋白表达量显著增强（P<0.05）,Bcl-2蛋白表达量明显降低（P<0.05）。 结论： 丹参饮加味方能体外抑制胃癌细胞的生长,其诱导SGC-7901细胞凋亡的作用机制可能与上调Bax,下调Bcl-2蛋白的表达有关。     

猕猴桃多糖对前胃癌MFC细胞及其原位移植瘤细胞凋亡的影响

目的 探索猕猴桃多糖对前胃癌（MFC）细胞及其原位移植瘤细胞凋亡的分子机制。方法 采用MTT法检测猕猴桃多糖对MFC细胞增殖抑制率,Western blotting法检测MFC细胞Mcl-1、Bcl-2、Bak和Bcl-xl蛋白的表达;OB吻合胶粘贴法建立胃癌原位移植瘤模型,采用TUNEL法检测肿瘤组织中细胞凋亡情况,免疫组织化方法检测Bcl-2、Bax的表达情况。结果 MTT实验表明随着猕猴桃多糖质量浓度的增加对MFC细胞增殖的抑制作用增强,且随着作用时间的延长,其抑制作用增强;Western blotting实验表明猕猴桃多糖作用于MFC细胞24 h下调Mcl-1、Bcl-2、Bcl-xl蛋白的表达,上调Bak蛋白的表达;体内实验表明：与模型组比较,猕猴桃多糖中、高剂量组及5-氟尿嘧啶（5-Fu）阳性对照组中TUNEL检测细胞凋亡的平均阳性指数明显升高（P＜0.01）;各给药组均能够显著下调Bcl-2的表达、上调Bax的表达（P＜0.01）。结论 猕猴桃多糖能够诱导胃癌MFC细胞凋亡,下调MFC细胞Mcl-1、Bcl-2、Bcl-xl蛋白和上调Bax、Bak蛋白表达,提示猕猴桃多糖的抗肿瘤机制与其通过Bcl-2家族蛋白所参与的细胞凋亡途径有关。     

对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及Bcl-2，Bax和cleaved Caspase-3蛋白表达的影响

目的 研究对叶百部总生物碱对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）,Bcl-2相关X蛋白（Bax）和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（cleaved Caspase-3）蛋白表达的影响。方法 选择人肝癌SMMC-7721细胞,常规培养及传代,对叶百部总生物碱设置添加干预的质量浓度为50,75,112,167,250 mg·L^-1,另设置仅添加10%胎牛血清作为空白组。采用噻唑蓝（MTT）比色法和细胞克隆实验观察细胞增殖的作用,Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测3种凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax和cleaved Caspase-3的表达。结果 对叶百部总生物碱可抑制SMMC-7721细胞增殖,与空白组比较,细胞增殖抑制率显著升高（P<0.01）,作用24,48,72 h的50%细胞抑制浓度（IC₅₀）分别为（173.36±8.75）,（112.14±16.50）,（96.41±2.60） mg·L^-1,细胞集落形成抑制率显著升高（P<0.01）,存在浓度依赖性。与空白组比较,对叶百部总生物碱可促进细胞凋亡,SMMC-7721细胞凋亡数目和凋亡率显著增加（P<0.01）,在荧光正置显微镜下可观察到典型细胞凋亡形态,如亮蓝色细胞核染色,细胞质浓缩和细胞核固缩等。与空白组比较,抑凋亡蛋白Bcl-2表达显著下调（P<0.01）;与空白组比较,对叶百部总生物碱75,112,167,250 mg·L^-1促凋亡蛋白Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达显著上调（P<0.01）。结论 对叶百部总生物碱有很好的抑制SMMC-7721细胞增殖和促进凋亡的作用,其机制可能与抑制Bcl-2蛋白表达和促进Bax,cleaved Caspase-3蛋白表达有关。     

萝卜硫素介导Wnt/β-catenin信号通路诱导胃癌细胞凋亡的研究

[目的]探讨萝卜硫素对胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其对Wnt/β-连锁蛋白（Wnt/β-catenin）信号通路活化的影响。[方法]采用CCK8实验检测10、20、40 μmol/L萝卜硫素对SGC-7901细胞增殖的影响,流式细胞仪分析萝卜硫素对SGC-7901细胞凋亡的影响,荧光素酶报告基因实验检测萝卜硫素对Wnt/β-catenin通路中淋巴增强因子/淋巴腺黏连因子（TCF4/LEF）转录活性的影响,Western Blot方法检测萝卜硫素对SGC-7901细胞中β-catenin、糖原合成激酶3β（GSK-3β）、c-Myc及半光天冬酶3（Caspase3）蛋白表达水平的影响。[结果]与对照组相比,萝卜硫素组SGC-7901细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）,呈现出时间、剂量依赖性;萝卜硫素组SGC-7901细胞凋亡率相比对照组显著增高（P<0.05）,并且萝卜硫素还能明显抑制TCF4/LEF报告质粒的荧光素酶活性（P<0.05）;萝卜硫素组SGC-7901细胞内β-catenin及c-Myc蛋白表达呈浓度依赖性降低,而GSK-3β及Caspase3蛋白表达呈浓度依赖性增高（P<0.05）。[结论]萝卜硫素能明显抑制SGC-7901细胞增殖,并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路活化有关。     

萝卜硫素联合索拉菲尼对肝癌HepG2细胞生长抑制和凋亡的影响

[目的] 探讨萝卜硫素与索拉菲尼联合对肝癌HepG2细胞生长抑制及凋亡的作用,并观察其可能的机制。[方法] 细胞计数试剂盒8（CCK8）法分析了萝卜硫素、索拉菲尼及两者联合给药对HepG2细胞增殖抑制率的影响,计算每种药物的半数抑制浓度（IC₅₀）及联合时的联合指数（CI）;流式细胞仪检测了HepG2细胞凋亡情况;免疫蛋白印记（Western Blot）检测了细胞周期蛋白D1（ClinD1）、C-myc、B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、磷酸化核因子-κB（p-NF-κB）及磷酸化核因子κB抑制蛋白α（p-IκBα）蛋白表达水平。[结果] 萝卜硫素与索拉菲尼联合对HepG2细胞增殖抑制作用和凋亡诱导作用显著高于各单独给药（P<0.05）,还表现出浓度依赖性,呈现出明显的协同作用（CI值<1）。Western Blot结果显示,相比于对照组及单独给药组,联合给药能显著抑制原癌基因[细胞周期蛋白D1（ClinD1）和C-myc]、抗凋亡蛋白Bcl-2、p-NF-κB及磷酸化IκBα蛋白的表达,诱导促凋亡蛋白Bax的表达（P<0.05）。[结论] 萝卜硫素与索拉菲尼联合对HepG2细胞具有协同抗肿瘤作用,机制可能与诱导细胞凋亡及抑制NF-κB信号通路活化有关。     

泽兰提取物调控NDRG2对低糖低氧所致的神经细胞损伤的影响

[目的] 研究泽兰提取物对低糖低氧所致神经细胞损伤的影响及潜在分子机制。[方法] 用PC12细胞建立脑缺血模型,然后用0.1、1、10 mg/mL的泽兰提取物对模型细胞进行处理,噻唑蓝（MTT）法测定PC12细胞的光密度（OD）值,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测N-Myc下游调控基因2（NDRG2）、细胞周期蛋白1（Cyclin D1）、p21、Bax和Bcl-2蛋白表达,流式细胞术测定细胞凋亡率。[结果] 与对照组相比,1 mg/mL和10 mg/mL泽兰提取物均可使模型组PC12细胞OD值升高,CyclinD1和Bcl-2表达升高,NDRG2、p21和Bax表达降低,促细胞增殖并抑制细胞凋亡;抑制NDRG2表达可促进模型组PC12细胞增殖并抑制细胞凋亡;过表达NDRG2可逆转泽兰提取物对模型组PC12细胞增殖和凋亡的作用。[结论] 泽兰提取物通过抑制NDRG2表达促进神经细胞脑缺血损伤模型细胞PC12增殖,抑制细胞凋亡。泽兰提取物可能对神经细胞脑缺血损伤具有潜在的治疗作用。     

八角莽草酸诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡及其机制研究

目的：研究八角莽草酸诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡的作用和机制。方法：取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,用0.125,0.5,1 g·L^-1不同浓度八角莽草酸作用人肝癌HepG-2细胞,采用MTT法测定莽草酸对HepG-2细胞增殖的影响;通过流式细胞仪检测在以上浓度的莽草酸对肝癌HepG-2细胞周期的影响;通过免疫细胞化学检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤白血病2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax蛋白）表达的改变。结果：MTT实验结果表明,各质量浓度0.125,0.5,1 g·L^-1的莽草酸对人肝癌HepG-2的生长具有显著的抑制作用（P<0.05）,呈现时间依赖性和剂量依赖性;流式结果表明莽草酸将人肝癌HepG-2细胞阻滞在G₁期,使细胞不能顺利地进入细胞DNA合成期S期,从而抑制了该细胞的增殖。免疫细胞化学检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达明显减少、Bax表达明显增加;Bcl-2/Bax比例明显降低。结论：八角莽草酸在体外诱导人肝癌HepG-2细胞大量阻滞在G₁期,进入S期细胞减少,抑制细胞增殖,其作用可能通过降低Bcl-2/Bax比例来诱导细胞凋亡而实现的。     

黄芩汤体外诱导人结肠癌SW620细胞凋亡及其对凋亡相关因子表达的影响

目的：研究黄芩汤对人结肠癌SW620细胞凋亡的作用及其机制。方法：CCK-8和MTT法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot方法检测Bcl-2、Bax蛋白表达;酶标免疫测定Caspase-3和Caspase-8的相对活性。结果：与对照组相比,不同浓度黄芩汤处理的细胞增殖抑制率显著增加（P<0.05或P<0.01）,细胞凋亡率升高（P<0.05或P<0.01）,抑制细胞凋亡蛋白Bcl-2表达降低而促细胞凋亡蛋白Bax表达明显增高（P<0.05或P<0.01）,Caspase-3和Caspase-8活性增强（P<0.05或P<0.01）,并呈量效依赖关系。结论：黄芩汤能够有效的促进结肠癌SW620细胞凋亡,其机制可能与抑制Bcl-2表达而促进Bax表达并增强Caspase的活性有关。     

西达本胺对耐伊马替尼慢性髓系白血病细胞株K–562/Ima 细胞增殖、凋亡的影响

〔摘 要〕 目的：研究西达本胺对耐伊马替尼慢性髓系白血病（CML）细胞株 K–562（K–562/Ima）细胞增殖、凋亡 的影响。方法：根据预实验结果,选定西达本胺（作用时间 48 h）不同浓度（终浓度 0、5、10、20、30 μmol·L-1）对 K–562/Ima 细胞进行干预,CCK–8 法检测细胞活力即增殖能力。根据 CCK–8 实验结果,选定西达本胺（终浓度为 0、1、3、 5、7 μmol·L-1）,对 K–562/Ima 细胞进行干预,流式细胞术检测细胞的凋亡。结果：西达本胺作用 K–562/Ima 细胞 48 h 后, 不同浓度均可显著抑制 K–562/Ima 细胞的增殖,且诱导 K–562/Ima 细胞凋亡,随着浓度增加,细胞增殖抑制率、凋亡率明 显升高。结论：西达本胺对 K–562/Ima 细胞有显著的抑制增殖、促进凋亡作用,且均有浓度依赖性。     

斑蝥酸钠维生素B6诱导人肝癌HepG2细胞凋亡及周期阻滞

目的: 研究斑蝥酸钠维生素B6（艾易舒）注射液对人肝癌HepG2细胞增殖、细胞周期与凋亡的影响,探讨其分子机制。 方法: 将不同浓度的斑蝥酸钠维生素B6注射液（0,1,5,10 mg·L^-1）作用于人肝癌HepG2细胞12,24,48 h,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞学技术检测细胞凋亡率及细胞周期的变化,Western blot检测蛋白激酶B（Akt）,磷酸化蛋白激酶B（pAkt）,B细胞淋巴瘤-2基因相关X蛋白（Bax）,B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）及细胞周期依赖性激酶抑制因子p21蛋白表达变化,RT-PCR检测Bax,Bcl-2及p21 mRNA表达变化。 结果: 斑蝥酸钠维生素B6可显著抑制HepG2细胞的增殖,诱导细胞凋亡,具有显著的时间和浓度效应（P<0.05）;同时G₀/G₁期细胞比例显著升高,S期细胞比例显著降低（P<0.05）。Western blot结果显示斑蝥酸钠维生素B6可下调HepG2细胞中pAkt和Bcl-2蛋白的表达,上调Bax和p21蛋白的表达（P<0.05）。RT-PCR结果显示Bax,p21 mRNA的表达水平明显升高,而Bcl-2 mRNA的表达水平下降（P<0.05）。 结论: 斑蝥酸钠维生素B6可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,诱导其凋亡并引发G₀/G₁期阻滞,其机制可能与斑蝥酸钠维生素B6参与调控磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）通路有关。     

芹菜素抗肺癌SPC-A1细胞增殖和诱导凋亡作用

目的：探讨芹菜素对人非小细胞肺癌SPC-A1细胞增殖和凋亡的影响。方法：体外常规培养人肺癌细胞株SPC-A1细胞,用5~80 μmol·L^-1不同浓度芹菜素作用SPC-A1细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率;Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态学变化;流式细胞术FITC-Annexin V/碘化丙啶（PI）双标记染色法检测细胞凋亡率。结果：芹菜素对SPC-A1细胞增殖的抑制作用呈时间和浓度依赖性,芹菜素干预24,48,72 h的IC₅₀值分别为319.02,37.23,18.59 μmol·L^-1;Hoechst 33258染色后倒置荧光显微镜下观察可见芹菜素给药后出现细胞数逐渐减少,凋亡细胞核固缩,染色质凝集,着色深而呈亮蓝色;流式细胞术检测结果显示芹菜素可诱导SPC-A1细胞出现不同程度的凋亡。结论：芹菜素能抑制人非小细胞肺癌SPC-A1细胞的增殖和诱导其凋亡。     

淫羊藿素对人卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的 观察淫羊藿素对人上皮性卵巢癌A2780细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响，并探讨淫羊藿素通过调控A2780细胞上皮间质转化（EMT）相关分子表达抑制细胞侵袭迁移。方法 设置空白组，淫羊藿素低、中、高剂量组（5，10，20 μmol·L^-1）分别作用于人卵巢癌A2780细胞48 h。采用细胞增殖与活性检测CCK-8）法，流式细胞术检测各组细胞增殖抑制率及凋亡率；划痕实验及transwell迁移实验观察细胞迁移情况并计算划痕愈合率与迁移率；transwell侵袭实验观察细胞侵袭情况并计算侵袭率；蛋白免疫印迹法（Western blot）与实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测EMT相关分子E-钙黏蛋白（E-cadherin），N-钙黏蛋白（N-cadherin），波形蛋白（Vimentin）和肿瘤侵袭迁移相关分子基质金属蛋白酶-9（MMP-9）蛋白及mRNA表达情况。结果 CCK-8与流式细胞术结果显示，与空白组比较，淫羊藿素各组细胞抑制率显著上升（P<0.01），细胞总凋亡率上升（P<0.05）；划痕实验及transwell侵袭迁移实验结果显示，与空白组比较，淫羊藿素组的侵袭迁移能力减弱，细胞侵袭迁移数量和侵袭迁移率明显减少（P<0.05）；Western blot与PCR结果显示，与空白组比较，淫羊藿素各组中N-cadherin，MMP-9，Vimentin蛋白和mRNA表达总体呈下降趋势，E-cadherin的表达呈上升趋势。结论 淫羊藿素对人卵巢癌A2780细胞具有抑制增殖、促进凋亡的作用，可能通过调控EMT相关分子表达抑制A2780细胞的侵袭迁移。     

垂盆草总黄酮影响肝星状细胞凋亡的作用机制研究

目的:研究垂盆草总黄酮(SSTF)对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)凋亡的影响及其作用机制。方法:将不同质量浓度的SSTF与HSC-T6细胞共培养不同时间后,MTT法检测SSTF对HSC-T6细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪Annexin-V/PI双染方法检测SSTF对HSC-T6细胞凋亡的影响;应用Western blotting和Real-time PCR方法观察药物对凋亡相关细胞因子Bcl-2,Bax和Caspase-3蛋白及mRNA表达的影响。结果:SSTF能显著抑制HSC-T6细胞增殖、诱导细胞凋亡,且呈剂量和时间依赖;Western blotting结果显示,SSTF通过抑制Bcl-2,促进Bax和Caspase-3蛋白表达促进细胞凋亡;进一步采用Real-time PCR研究发现,Bcl-2能够从mRNA水平抑制Bcl-2、促进Bax和Caspase-3表达。结论:SSTF具有促进HSC-T6凋亡的作用,这种作用的发挥主要是通过抑制Bcl-2、促进Bax和Caspase-3蛋白和mRNA的表达实现的。     

柑橘不同用药部位中橙皮苷、柠檬苦素及诺米林含量与其体外抗氧化和抗乳腺癌活性相关性研究

  目的：考察柑橘不同用药部位——橘核、橘络和陈皮中橙皮苷、柠檬苦素及诺米林的含量与其抗氧化和抗乳腺癌活性的相关性  方法：通过HPLC法检测来自不同产地的橘核、橘络和陈皮药材中橙皮苷、柠檬苦素及诺米林的含量,结合体外DPPH和FRAP抗氧化实验方法以及MTT法研究3种成分的含量差异对药材抗氧化活性和抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖作用的影响  结果：橙皮苷含量:陈皮>橘络>橘核;柠檬苦素类物质含量:橘核>橘络>陈皮;体外抗氧化活性:陈皮>橘络>橘核;抑制乳腺癌细胞增殖作用:橘核>橘络>陈皮  结论：橘核、橘络和陈皮的抗氧化活性强弱主要与橙皮苷含量相关,而三者的抗乳腺癌活性强弱主要与其柠檬苦素和诺米林含量相关。     

蒲公英-丝瓜络提取物对小鼠乳腺癌4T1细胞增殖与凋亡作用的影响的体外试验研究※

目的 研究蒲公英-丝瓜络（PS）提取物对小鼠乳腺癌4T1细胞增殖和凋亡作用的影响。方法 将不同浓度的PS提取物作用于乳腺癌4T1细胞,通过CCK8法和集落形成实验检测PS提取物对细胞增殖的影响;通过Hoechst 33258细胞核染色法和Annexin V-FITC/PI染色法观察细胞凋亡情况;通过Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3、CDK2、Cyclin A2蛋白表达,评估PS提取物对乳腺癌4T1细胞周期与凋亡相关蛋白表达的影响。结果 CCK8结果显示PS提取物各剂量组作用24、48、72 h后细胞存活率下降;不同浓度PS提取物处理4T1细胞后,细胞集落形成能力减弱;细胞周期检测结果表明PS提取物能阻滞细胞周期于S期;Hoechst 33258染色实验观察到细胞核固缩和出现明显的凋亡小体,Annexin V-FITC/PI染色流式细胞仪检测发现细胞凋亡率增加;Western blot结果显示PS提取物可使Bcl-2、周期蛋白Cyclin A2及CDK2表达降低,Bax、Cleaved caspase-3表达增加。结论 PS提取物具有抑制乳腺癌4T1细胞增殖的作用,该作用可能与诱导细胞凋亡和细胞周期阻滞有关。