苇茎汤调控人肺腺癌A549细胞中EGFR、STAT3抗凋亡的机制研究

目的:研究苇茎汤对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法:将苇茎汤培养液浓度稀释为0.25、2.5、25g/L,与A549细胞共同培养,AO∕EB荧光染色观察细胞凋亡形态学改变;流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡率;Real-time PCR检测EGFR、STAT3基因的表达。结果:0.25~25g/L苇茎汤能诱导A549细胞发生凋亡形态学改变,且细胞凋亡率随苇茎汤浓度增加而升高;苇茎汤可将A549细胞周期阻滞于G0/G1期;Real-time PCR结果表明,苇茎汤可以下调A549细胞中EGFR、STAT3基因的表达。结论:苇茎汤可能通过调控EGFR、STAT3信号通路诱导人肺腺癌A549细胞发生早期凋亡。     

麦门冬汤诱导人肺腺癌A549细胞凋亡作用及其机制

目的:研究麦门冬汤对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)法检测麦门冬汤(0.25、2.5、25g/L)作用24、48、72h后人肺腺癌A549细胞(2×104个/m L)活性;吖啶橙(AO)/EB双荧光染色观察麦门冬汤各剂量作用48h后A549细胞凋亡形态学改变;流式细胞术分析麦门冬汤作用48h后A549细胞凋亡率;Western Blot检测麦门冬汤对凋亡相关蛋白表皮生长因子受体(EGFR)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)表达的影响。结果:各剂量麦门冬汤能够抑制A549细胞活性,诱导其发生凋亡形态学改变,且A549细胞凋亡率与麦门冬汤剂量呈正相关(P<0.01);Western Blot检测表明低、中剂量麦门冬汤可使EGFR、STAT3表达下降。结论:麦门冬汤可诱导A549细胞凋亡,其作用机制可能与下调EGFR、STAT3蛋白表达相关。     

益肺逐积方诱导人肺腺癌A549细胞凋亡机制

目的:通过体外实验观察益肺逐积方对人肺腺癌A549细胞活性、细胞凋亡以及表皮生长因子受体(EGFR),G蛋白偶联受体30(GPR30)蛋白表达的影响,探讨中药复方益肺逐积方抑制肺癌细胞活性,诱导肺癌细胞凋亡的作用机制。方法:将人肺腺癌A549细胞培养至对数生长期,益肺逐积方高、低质量浓度组分别加入2,1.5 g·L~(-1)益肺逐积方培养液,5-氟尿密啶(5-FU)组加入2.5 g·L~(-1)5-FU培养液,溶剂组加入含10%胎牛血清的RPMI 1640培养液,分别作用24,48 h后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测益肺逐积方对人肺腺癌A549细胞活性的影响;吖啶橙/溴乙啶(AO/EB)荧光染色观察益肺逐积方作用不同时间后人肺腺癌A549细胞的凋亡形态学变化;流式细胞术(FCM)测定益肺逐积方作用下人肺腺癌A549细胞的凋亡率;利用倒置显微镜观察益肺逐积方作用24,48 h后A549细胞的形态学改变,蛋白质免疫印迹法(Western blot)测定人肺腺癌A549凋亡细胞EGFR,GPR30蛋白的表达。结果:与溶剂组比较,1.5,2 g·L~(-1)益肺逐积方均能抑制人肺腺癌A549细胞活性(P0.05),诱导A549细胞发生不同程度的凋亡形态学改变;流式细胞术检测显示,益肺逐积方作用24,48 h后,可使人肺腺癌A549细胞其发生晚期凋亡(P0.05);Western blot结果显示,益肺逐积方可以不同程度地下调人肺腺癌A549细胞GPR30,EGFR蛋白的表达(P0.05)。结论:益肺逐积方可抑制人肺腺癌A549细胞活性、诱导其发生晚期凋亡,并使其发生凋亡形态学改变,这可能与下调EGFR,GPR30蛋白表达有关。     

桂枝茯苓丸抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖机制

目的:通过观察桂枝茯苓丸对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,并检测细胞周期的变化和蛋白表达的改变,从而探讨桂枝茯苓丸对乳腺癌细胞产生抑制的作用机制。方法:体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,以5-氟尿嘧啶(5-Fu,25 mg·L~(-1))作为阳性药,噻唑蓝(MTT)比色法检测不同剂量桂枝茯苓丸培养液和在不同作用时间对细胞的抑制作用;选用1.8,2.7 g·L~(-1)的桂枝茯苓丸培养液作用48 h,流式细胞技术检测5-Fu组和桂枝茯苓丸培养液组的周期,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测表皮生长因子(EGFR),周期素A2(Cyclin A2)及周期素依赖性激酶2(Cdk2)mRNA表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测其EGFR,Cyclin A2,Cdk2蛋白表达。结果:桂枝茯苓丸对人乳腺癌细胞MCF-7细胞有抑制作用(P0.05),且具有时间-剂量依赖性。与空白组比较,1.8,2.7 g·L~(-1)桂枝茯苓丸作用MCF-7细胞48 h后S期细胞明显增加(P0.05),EGFR,Cdk2,Cyclin A2mRNA表达明显降低(P0.01);桂枝茯苓丸各质量浓度组中EGFR,Cdk2蛋白表达均下降(P0.05),但Cyclin A2蛋白表达仅2.7 g·L~(-1)组有明显降低(P0.05)。结论:桂枝茯苓丸在S期阻滞MCF-7细胞增殖,这可能与下调Cyclin A2,Cdk2,EGFR mRNA和其蛋白的表达有关。     

黄芪建中汤干预脾虚裂慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜表皮生长因子含量、诱导裂一氧化氮合成酶和表皮牛长因子受体基因的表达

目的：观察黄芪建中汤对造模脾虚型慢性萎缩性胃炎大鼠的治疗作用及机制，并且为临床应用提供试验依据。 方法：实验于2003—12／2005—09在河南中医学院实验动物中心和郑州大学细胞分子生物学研究中心完成。雄性Wistar大鼠30只，体质量（170&;#177;10）g，饲养1周后按体质量编号完会随机法分为4组，即正常对照组6只：不做任何处理；慢性萎缩性胃炎组8只：以2％的水杨酸钠灌胃8周造成胃黏膜损伤，后4周结合饥饱失常、劳倦过度使大鼠致虚；维酶素组8只：造模后，给予7．9％维酶素2mL灌胃，1次／d，连续21d；黄芪建中汤组8只：造模后，给予2．5kg／L黄芪建中汤水箭剂2mL灌胃，1次／d，连续21d。末次给药后所有大鼠再逐只处死，平行胃小弯取小块胃窦部胃壁组织，手工制成胃黏膜组织芯片，用原位杂交的方法检测诱导型一氧化氮合成酶-mRNA和表皮生长因子受体-mRNA的表达量。从剩余胃黏膜组织中精确称取2g．置于玻璃匀浆器中研磨制成组织匀浆，按放免试剂盒说明测定其表皮生长因子含量。 结果：纳入大鼠30只，造模过程中死亡1只，造模结束后抽样处死5只，24只进入结果分析。①原位杂交结果：诱导型一氧化氮合成酶mRNA和表皮生长因子受体-mRNA基因表达的阳性部位呈现紫蓝色颗粒．前者以慢性萎缩性胃炎组显色最强，后者主要以胃小凹底部和胃腺中上部显色突出。②与正常对照组大鼠相比，慢性萎缩性胃炎组大鼠胃黏膜组织的上述指标均显著增高[（333．00&;#177;56．71），（453．67&;#177;68．25）；（0.73&;#177;0．21）（3．14&;#177;0．77）μg／L；（124．36&;#177;26．13），（318．42&;#177;45．38），（P〈0．01，P〈0.05）]，经黄芪建中汤治疗21d后，恢复至接近正常水平，其中对诱导型一氧化氮合成酶-mRNA和表皮生长因子受体-mRNA表达量的恢复作用显著优于维酶素。 结论：黄芪建中汤对慢性萎缩性胃炎有良好的治疗作用，其机制与下调慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜表皮生长因子含量、诱导型一氧化氯合成酶-mRNA及表皮生长因子受体-mRNA的表达有关，其疗效优于维酶素。     

胃康舒宁方治疗慢性萎缩性胃炎

<正>慢性萎缩性胃炎(简称CAG),是一种消化系统常见病,世界卫生组织将其列为胃癌前状态,尤其是伴有肠上皮化生或不典型增生者,癌变可能性更大。目前临床上配合中医药辨证治疗多取得了明显的疗效,能有效缓解症状,延缓或逆转癌前病变的形成。笔者结合多年临床经验,自拟"胃康舒宁方"用于治疗慢性萎缩性胃炎多种证型,均取得了一定的临床疗效。     

益中蠲毒浓缩丸体内抗肿瘤作用的实验研究

根据中医“养正积自除”的理论 ,经多年临床实践 ,认为对于晚期胃癌以扶正、恢复脾胃功能为主进行治疗 ,对于稳定病灶 ,提高生存质量 ,延长生存期具有较好疗效。在此基础上 ,研制出以人参、白术、茯苓、薏仁、半枝莲、半夏、蜈蚣、水蛭等药为主组成的益中蠲毒浓缩丸。经实验研究证明 ,该药具有较理想的提高机体免疫力、改善脾虚状态、改善胃液分泌功能 ,同时也具有一定的体内、体外抗肿瘤的作用。现就该药体内抗肿瘤作用的实验研究作一些探讨。1　材料与方法1.1　动物裸小鼠 ,均为雄性 ,6～ 8周龄 ,体重 18～ 2 2 ｇ ,购自河南医科大学实验…     

浅析中药药剂学和方剂学的关系

目的:探讨中药药剂学与方剂学的学科关系。方法:从方剂学和中药制剂学的概念范畴、中药药剂学是方剂学发展的条件和方剂学是中药药剂学得以发展的基础几个方面来探讨两个学科之间的关系。结果:方剂学和中药药剂学定义既有联系又有区别,中药药剂学是方剂学得以发展的条件,方剂学是中药制剂学发展的基础。结论:药剂学与方剂学是相辅相成,共同发展的两个学科。     

3种中医治法对胃癌前病变大鼠胃黏膜细胞增殖的影响

目的:比较3种中医治法对胃癌前病变大鼠胃黏膜细胞增殖的影响,并探讨其机制。方法:采用以化学损伤为主的综合法复制大鼠胃癌前病变模型,将大鼠随机分为正常对照组和造模组,造模成功后再将造模组分为模型对照组、健脾益气组、活血化瘀组、养阴荣络组,中药治疗6周,采用免疫组织化学的方法检测大鼠胃黏膜组织内细胞增殖核抗原(PCNA)及细胞周期素D1(Cyclin D1)的表达情况。结果:与正常对照组相比,各参加造模大鼠胃黏膜细胞的增殖指数PI(%)、PCNA和Cyclin D1的表达量显著升高(P<0.05)。与模型对照组相比,3个用药组增殖指数PI、PCNA和Cyclin D1表达量均明显减低(P<0.05)。3个用药组之间进行两两比较,也具有显著性差异(P<0.05),且以养阴荣络组最低。结论:3种治法均可抑制大鼠胃黏膜细胞的增殖,其作用以养阴荣络方最佳,其机制与降低PCNA及Cyclin D1在大鼠胃黏膜细胞内的表达有关。     

消食散对消化及免疫功能的影响

消食散对消化及免疫功能的影响河南４５０００３河南中医学院蒋时红苗明三韦新主题词％消食散／药效学胃酸测定巨噬细胞／免疫学消食散主要有鸡内金、太子参、槟榔、鳖甲等药组成，具有益气健脾和胃开中之功。临床用于儿童消化不良、厌食及发育迟缓等具有良效。本文报道其...