EHF肾组织肾小球超微结构和细胞表型的研究

目的 研究流行性出血热（ＥＨＦ）肾组织中肾小球超微结构和细胞表型的改变及其意义。方法 应用多重ＰＡＰ３０例ＥＨＦ肾组织中肾小球α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）,结蛋白（ｄｅｓｍｉｎ）和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）的表达及意义;应用电子显微镜观察肾小球的超微结构。结果 ＥＨＦ肾脏仅４例肾小球显示痕量的ａ－ＳＭＡ阳性表达,无ｄｅｓｍｉｎ和ＰＣＮＡ的表达。电镜下观察肾小球毛细血管内皮细胞不同程度肿胀。部分     

细胞因子对人肾小球系膜细胞表达细胞粘附分子的调控

研究白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）及肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα），对体外培养的人肾小球系膜细胞表达细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）和血管细胞粘附分子－１（ＶＣＡＭ－１）的调节作用。方法用ｒｈＩＬ－１β（２５ｎｇ／ｍｌ）或ｒｈＴＮＦα（１００ｎｇ／ｍｌ）与系膜细胞共同孵育４、８、１６及３２小时，然后用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测该细胞ＩＣＡＭ－１和ＶＣＡＭ－１的ｍＲＮＡ表达，并用细胞ＥＬＩＳＡ检测它们的蛋白质表达。结果未予任何刺激的对照组，系膜细胞仅低水平表达ＩＣＡＭ－１、ＶＣＡＭ－１ｍＲＮＡ和蛋白质。ｒｈＩＬ－１β或ｒｈＴＮＦα刺激后，系膜细胞上这两种细胞粘附分子ｍＲＮＡ的表达，均迅速上调（仅ＴＮＦα刺激ＩＣＡＭ－１ｍＲＮＡ表达高峰在８小时，其余均在４小时），蛋白质表达也显著增加（Ｐ＜０．００１））。结论细胞因子ＩＬ－１β及ＴＮＦα可能通过刺激肾小球系膜细胞表达ＩＣＡＭ－１和ＶＣＡＭ－１而参与肾小球肾炎发病。     

大鼠输尿管梗阻后肾间质病变及：α—平滑肌肌动蛋白的表达

目的：探讨肌纤维母细胞（ＭＦＢ）在肾间质纤维化形成中的作用。方法：制作大鼠单侧尿路梗阻模型，观察α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）阳性细胞在肾间质病变中形成和发展的过程。结果：在单侧输尿管梗阻后４８ｈ肾间质区域即出现α－ＳＭＡ表达，ｄ３后阳性细胞数明显增加，ｄ７达高峰。结论：α－ＳＭＡ在肾间质纤维化时表达明显增加，应用α－ＳＭＡ染色能较好的标记ＭＦＢ，通过在原位肾间质观察α－ＳＭＡ的表达情况，是临床     

IgA肾病的超微结构、免疫组化研究

目的探讨ＩｇＡ肾病（ＩｇＡＮ）超微结构变化和各项免疫组化反应的病理意义及在本病演化进展中的作用，以寻找导致本病恶化的影响因素和反映预后的早期指征。方法对１２２例ＩｇＡＮ患者肾活检组织，进行系统的超微结构观察，其中６０例运用ＳＰ法进行增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）、α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）、纤维连接蛋白（ＦＮ）的免疫组化染色，以半定量的方法对各项超微结构病变及免疫组化反应结果进行分级，并和组织病理上肾小球损伤程度、肾小管间质损伤程度、临床分型、免疫学类型相对照，进行统计学处理。结果（１）肾小球系膜旁区半球形沉着或大量沉着、系膜基质溶解、旁区病变、基膜异常、沉着物出现于基膜内皮下或上皮下，以及系膜细胞插入，都是病变进展过程中较早期的重要事件。它们和组织病理上肾小球损伤程度呈正比，相互影响，最终可导致肾小球节段性或球性硬化的不可逆损伤。（２）系膜区α－ＳＭＡ免疫组化反应可反映系膜细胞的机能状态和增殖情况。ＰＣＮＡ反应和肾小球的损伤程度呈正相关。系膜区ＦＮ反应增强，表明系膜基质增多，亦与肾小球损伤程度呈正相关。（３）肾小管损伤程度、间质细胞α－ＳＭＡ和ＰＣＮＡ表达增强均和肾小球损伤程度密切相关。结论（１）肾小球     

肾炎大鼠肾小球α—SMA表达与基质增生的关系

为了进一步了解肾小球α平滑肌肌动蛋白（αｓｍｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ，αＳＭＡ）的表达与肾炎发病时肾小球基质增生的关系，我们观察了大鼠肾毒血清肾炎（ｎｅｐｈｒｏｔｏｘｉｃｎｅｐｈｒｉｔｉｓ，ＮＴＮ）发病１～１４ｄ肾脏组织形态、肾功能、肾小球αＳＭＡ和血小板衍生的生长因子（ｐｌａｔｅｌｅｔｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＰＤＧＦ）以及基质成分纤维连接蛋白（Ｆｉｂｒｏｎｅｃｔｉｎ，ＦＮ）、胶原Ⅲ和Ⅳ型的表达，并对αＳＭＡ、ＰＤＧＦ及基质成分间进行相关性分析。研究显示，ＮＴＮ第３天大鼠肾小球表达αＳＭＡ和ＰＤＧＦ，先于ＦＮ的表达和胶原Ⅳ型的增多。在ＮＴＮ第７和１４天，αＳＭＡ和ＰＤＧＦ表达增加，并且两者间及与ＦＮ和胶原Ⅳ型之间呈显著正相关。在ＮＴＮ各时间点均未能在肾小球中检测出胶原Ⅲ型的存在。研究表明，注射抗血清引起的肾小球免疫损伤刺激肾小球系膜细胞表达αＳＭＡ是系膜细胞被激活后大量分泌基质的标志。系膜区ＰＤＧＦ的分泌进一步加强了系膜细胞αＳＭＡ的表达及基质增生。     

整合素α2和α3在小鼠肾脏发育过程中的表达

目的 了解整合素α2和α3在小鼠肾脏发生发育过程中的表达规律及其与肾脏发生、发育及成熟的关系.方法 应用免疫组化链霉菌素亲和生物素-过氧化物酶连接法（SP）测定不同胚龄及生后日龄小鼠肾组织中整合素α2和α3的表达.结果 免疫组化结果显示整合素α2在生肾区及间充质表达;在未成熟肾小球有一过性的表达,在成熟肾小球没有表达;在发育各个时期的肾小管都有表达.整合素α3在肾小球、肾小管有表达,而在肾间质无表达.结论 整合素α2主要在发育各个时期的肾小管表达,提示整合素α2对胚胎肾发育的诱导主要在肾小管.整合素α3在胚胎时期和成熟肾组织的主要作用是与肾小球的发育和成熟有关,而与小管发育成熟的关系相对来说较弱.     

免疫组织化学研究流行性出血热肾组织中细胞骨架蛋白和Ⅳ型胶原的改变

目的：研究流行性出血热（ＥＨＦ）尸检肾脏中细胞骨架蛋白和Ⅳ型胶原的变化以客观反映肾脏的损伤．方法：应用免疫组化方法，以抗平滑肌特异性肌动蛋白α链（α－ＳＭａｃｔｉｎ），结蛋白（Ｄｅｓｍｉｎ），波形蛋白（Ｖｉｍｅｎｔｉｎ），Ⅳ型胶原单克隆抗体评价肾小球的损伤；以抗Ⅳ型胶原、Ｖｉｍｅｎｔｉｎ单克隆抗体显示肾小管基底膜、血管和间质的改变；以抗细胞角蛋白（ＣＫ），角蛋白（Ｋｅｒａｔｉｎ），上皮细胞膜抗原（ＥＭＡ）单克隆抗体判断肾小管的损伤；ＰＣＮＡ和Ｖｉｍｅｎｔｉｎ显示肾小管的增生和分化．结果：ＥＨＦ肾脏肾小球固有细胞和基底膜中无显著的Ｄｅｓｍｉｎ，Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和Ⅳ型胶原的变化；α－ＳＭａｃｔｉｎ和ＰＣＮＡ可作为增殖性或硬化性肾小球疾病中有用的诊断和判断预后的指标，在ＥＨＦ肾小球中几乎为阴性．在肾髓质严重出血部位，肾小管和血管基底膜的连续性破坏，结构消失，Ⅳ型胶原和Ｖｉｍｅｎｔｉｎ均为阴性，该部位大多数集合管被破坏，ＣＫ，Ｋｅｒａｔｉｎ和ＥＭＡ阳性染色消失．而梗死样坏死部位的肾小管基底膜Ⅳ型胶原染色均匀一致．间质中Ｖｉｍｅｎｔｉｎ，Ⅳ型胶原染色无明显异常．Ｖｉｍｅｎｔｉｎ在上皮细胞中表达是作为细胞增殖分化的标志     

白细胞介素—10对大鼠肾小球系膜细胞炎症效应的拮抗作用

探讨白细胞介素（ＩＬ）－１０对肾小球系膜细胞炎症效应的调节作用。方法采用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法与细胞计数，观察系膜细胞的增殖反应，以Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交观察ＩＬ－１与肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）的基因表达；生物活性检测法评估ＩＬ－１与ＴＮＦα的产生；细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）的表达，用细胞ＥＬＩＳＡ法。结果ＩＬ－１０（２５ｎｇ／ｍｌ）抑制５％胎牛血清与ＩＬ－１诱导的系膜细胞增殖，抑制率分别为３９％和５２％。ＩＬ－１０也抑制脂多糖（ＬＰＳ）刺激的系膜细胞ＩＬ－１与ＴＮＦα生物活性的产生（抑制率分别为４８％与６８％）和基因表达，同时它还抑制ＩＬ－１诱导的系膜细胞表达ＩＣＡＭ－１。结论ＩＬ－１０是一种对肾小球系膜细胞炎症效应具有抑制作用的细胞因子。     

多发性硬化患者外周血单个核细胞IL—2,IFN—γ和TNF—αmRN…

应用逆转录／聚合酶链反应（ＲＴ／ＰＣＲ）和狭缝印迹分子交发技术，研究１７例多发性硬化（ＭＳ）患者外周血单个核细胞ＩＬ－２，ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α的ｍＲＮＡ表达。结果发现存３种细胞因子的ｍＲＮＡ表达的高于健康对照组，治疗后病程处于稳定期的ＭＳ患者ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α的ｍＲＮＡ表达恢复正常水平，但ＩＬ－２ｍＲＮＡ仍保持高水平，此结果表明炎性细胞因子（ＩＦＮ－γ和ＴＮＦ－α）参与ＭＳ发病过程，并可作为     

四氯化碳诱导大鼠肝纤维化过程中肝内细胞骨架蛋白表达的变化

探讨肝纤维化发生过程中，细胞骨架蛋白—结蛋白（Ｄｍ）和α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）阳性细胞动态变化的规律以及这些阳性细胞之间的关系。方法用四氯化碳辅以低胆碱饲料诱导大鼠肝纤维化，应用免疫组化、电镜技术和图像分析方法对肝纤维化过程中出现的Ｄｍ和α－ＳＭＡ阳性细胞进行定位和定量研究。结果α－ＳＭＡ阳性细胞的变化几乎与Ｄｍ阳性细胞同步，两者于实验早期均有增生，但前者少于后者，至纤维间隔大量形成时（１２周），两者增生均达到最高峰，但前者多于后者，以后两者均逐步下降；从形态分析，Ｄｍ和α－ＳＭＡ阳性细胞主要为贮脂细胞（ＦＳＣ），部分卵圆细胞和新生胆管上皮细胞也表达此两种骨架蛋白。结论除了ＦＳＣ以外，α－ＳＭＡ和Ｄｍ阳性卵圆细胞也可能在肝纤维化发生发展中起重要作用。     

胎儿肾小球毛细血管的发生及发育的扫描电镜观察

应用微血管筹型扫描电镜（ＳＥＭ）观察了１５例２０－３８周胎儿肾小球毛细血管发生及发育的形态学变化。结果显示了２０－３８周胎儿的肾脏内皮质肾小球，生长发育较好，肾小球大小无明显变化，但其毛细管形态显示了一定的差异，外皮质肾小球发育较差，在胎儿早期（５个月）较多初级肾小球的入球小动脉发出的毛细血管呈向前开放５～１０支数量不等的不突起或弯曲成指状排列，部分肾动脉分支形成的终末血管（入球小动脉）呈光滑而又     

肾小球疾病时肾脏组织中细胞间粘附分子－1的表达

为探讨细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）与肾小球炎症的关系，根据肾小球内细胞增生的程度将６４例不同类型肾小球疾病患考分为Ａ组（肾小球炎症不明显或很轻微）、Ｂ组（肾小球有肯定的细胞增生）、Ｃ组（以硬化为主的肾小球晚期病变），观察肾组织中ＩＣＡＭ－１的表达。结果（１）肾小球内ＩＣＡＭ－１表达水平日组显著高于Ａ组（Ｐ＜０．００１）；Ｃ组明显低于Ｂ组（Ｐ＜０．０５）。（２）Ｂ组患者肾小管表达ＩＣＡＭ－１的阳性率明显高于Ａ组（Ｐ＜０．０５）；Ｃ与Ｂ组间差异无显著意义（Ｐ＞０．０５）。（３）伴有ＩＣＡＭ－１阳性间质浸润细胞组肾小管表达ＩＣＡＭ－１的阳性率高于不伴有ＩＣＡＭ－１阳性间质浸润细胞组（Ｐ＜０．００５）；（４）原位杂交结果证实ＩＣＡＭ－１蛋白质表达部位与其ｍＲＮＡ表达部位一致。提示ＩＣＡＭ－１在人类肾小球疾病中具有重要作用。     

强直性脊柱炎患者血、尿α1微球蛋白测定

目的 探查强直性脊柱炎（ＡＳ）患者的肾功能受损情况。方法 用Ａｒｒａｙ ３．６全自动特定蛋白分析仪测定７５例ＡＳ患者（１８例为尿检异常组，５７例为尿检正常组）和３０例正常对照组的血、尿α１微球蛋白（α１－ＭＧ）水平。结果 ＡＳ患者血α１－ＭＧ水平比正常对照组升高，其中尿检异常组高于尿检正常水检异常组病情活动明显。各组间尿α１－ＭＧ水平差别无显著性意义。结论 ＡＳ患者早期即有肾小球滤过功能受损，而且伴尿检异常者受损更明显。     

纤维连接蛋白及其整合素受体在人胚胎和成熟肾中的表达

为探讨纤维连接蛋白（ＦＮ）及其β１整合素受体在人胎儿和成熟肾中的表达及意义，采用免疫组化的方法观察纤维连接蛋白及其整合素受体（α５β１）的α５亚单位在胎儿和正常成熟肾组织中的分布。结果发现：在胚胎肾组织中，ＦＮ及α５在输尿管芽细胞周围有弱阳性表达，在肾小球发育早期，ＦＮ及α５在肾单位中表达较弱，其在间质网状分布，当血管插入肾单位后，ＦＮ表达明显增加，主要分布于系膜区和毛细血管壁。成熟肾组织中ＦＮ及α５在肾小球基底膜（ＧＢＭ）强阳性表达且以血管极节段明显，间质及小血管壁亦为阳性。结果提示，ＦＮ和整合素的表达和相互作用在肾小球系膜区，肾间质及ＧＢＭ的形成、发育过程中发挥重要作用     

细胞因子对人胃癌细胞胃癌相关抗原MG7Ag表达的调节

探讨细胞因子对人胃癌细胞胃癌相关抗原ＭＧ７Ａｇ表达的调节作用。用基因重组干扰素α（ＩＦＮ－α），干扰素γ（ＩＦＮ－γ），白细胞介素２（ＩＬ－２）和肿瘤坏死因子γ（ＴＮＦ－γ）体外诱导三株人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１，ＭＧＣ８０３和ＭＫＮ４５胃癌相关抗原ＭＧ７Ａｇ表达。ＩＦＮ－α和ＩＦＮ－γ对胃癌细胞ＭＧ７Ａｇ有促表达作用。ＩＬ－２对三株细胞ＭＧ７Ａｇ无调节作用；ＴＦＮ－α对细胞ＭＧ７Ａｇ表达调节是随     

多脏器衰竭患儿血清磷脂酶A2及肿瘤坏死因子水平的研究

采用ＥＬＩＳＡ法检测了脏器衰竭患儿３６例，健康儿２０例血清磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）及肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）含量，并监测病儿脏器功能及动脑海因气，探讨血清ＰＬＡ２及ＴＮＦ－α在多脏器衰竭（ＭＯＦ）发生、发展中的作用及意义。结果：血清ＰＬＡ２及ＴＮＦ－α含量在ＭＯＦ组明显高于单衰组，死亡组显著高于治愈组；ＰＬＡ２与ＴＦＮ－α、动脉血氧分压呈要关关系。提示：ＰＬＡ２及ＴＮＦ－α参与了ＭＯＦ病理过程，动     

植物血凝素及脂多糖对人肾小球系膜细胞分泌IL-1 8的影响

目的 了解植物血凝素（ＰＨＡ）、脂多糖（ＬＰＳ）对人肾小球系膜细胞分泌ＩＬ－１８的影响。方法 体外培养的人系膜细胞经不同浓度的ＰＨＡ,ＬＰＳ诱导,ＥＬＩＳＡ测定培养上清。结果 ＬＰＳ和ＰＨＡ均可诱导人肾小球ＭＣ释放ＩＬ－１８,ＬＰＳ和ＰＨＡ呈浓度促进ＭＣ释放ＩＬ－１８,ＬＰＳ诱导作用较ＰＨＡ强,均显著高于对照组水平（Ｐ〈０．０５）。结论 肾小球系膜细胞在ＬＰＳ和ＰＨＡ诱导下可增加ＩＬ－１８分泌。．     

细胞间粘附分子—1在肾小球肾炎肾组织中的表达

为了探讨细胞间粘附分子－１（ｉｎｔｅｒｃｅｌｌｕｌａｒ ａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ－１，ＩＣＡＭ－１）与肾小球肾炎的关系，根据肾小球内细胞增生及炎细胞浸润的程序将４０例不同类型的肾小球肾炎患者分为Ａ组（肾小球炎症不明显或很轻微）；Ｂ组（肾小球内有肯定的细胞增生）；Ｃ组（以硬化为主的肾小球晚期病变）。用免疫组织化学方法观察肾小球肾炎肾组织中ＩＣＡＭ－１的表达。结果：①肾小球ＩＣＡＭ－１的表达     

TGF—β1对瘢痕对纤维细胞α—SMA表达的诱导作用

目的 研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对瘢痕成肌纤维细胞中α－平滑肌肌动蛋白（α－ＳＭＡ）表达的诱导作用。方法 以５例增生性瘢痕为标本,３例正常瘢痕为对照,２成纤维细胞二维培养和三维培养体系及ＬＳＡＢ免疫组织化学染色技术,观察了在不同ＴＧＦ－β１浓度条件作用下,来源的于增生性瘢痕和正常瘢痕在成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的情况。结果 （１）不同浓度的ＴＧＦ－β１诱导瘢痕成纤维细胞表达α－ＳＭＡ的作用不     

核因子-κB/IκB系统在慢性肾炎肾小球中的表达及意义

目的：研究慢性肾炎（CN）肾组织中核因子－κB(NF-κB）P65／IκBα系统及单核细胞趋化蛋白－1（MPC－1）的表达并探讨它们与CN肾脏病理改变和肾功能损害的关系。方法：以NF－κB亚基P65及其抑制性亚基IκBα单抗为抗体，采用ABC免疫组织化学染色检测CN肾组织NF－κB P65／IκBα表达，并进一步分析它们与肾小球内MCP－1蛋白表达，肾脏病理改变和功能损害的关系。结果：CN肾小球中NF－κB P65与MCP－1表达较正常肾组织显著增高，而IκBα表达则明显低于正常肾组织，以增殖性肾炎（MsPGN)为最显著（P＜0．01），CN肾小球NF－κB，MCP－1阳性细胞数与肾小球IκBα阳性细胞数呈负相关，而与肾脏病理改变及肾功能损害呈正相关。结论：NF－κB可能参与了CN的发病机制。