非小细胞肺癌患者外周血CK19和LUNX mRNA的检测及意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法:选择初治的NSCLC患者62例,以肺部良性疾病10例和健康对照10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测患者外周血的CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达。结果:62例NSCLC患者中外周血CK19 mRNA表达阳性率33.9%(21/62),明显高于非肿瘤组的5%(1/20)(P=0.012);NSCLC组外周血LUNX mRNA表达阳性率29.0%(18/62),明显高于非肿瘤组的0%(0/20)(P=0.007);外周血CK19mRNA和LUNX mRNA表达阳性率与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度未见明显相关;外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA表达未见明显相关(P=0.376)。结论:CK19 mRNA和LUNX mRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。     

非小细胞肺癌外周血分子微转移研究

目的: 研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血癌胚抗原(CEA)、CK19、Lunx mRNA表达对于肿瘤微转移的价值。方法: 采用RT-PCR技术,对46例NSCLC患者(其中肺癌Ⅰ期组6例,Ⅱ期组9例,Ⅲ期组14例,Ⅳ期组17例))和同期18例良性肺部疾病(对照组)患者外周血CEA、CK19、Lunx mRNA进行检测。结果: NSCLC患者外周血Lunx、CEA、CK19 mRNA的阳性率为52.2%、43.5%、41.3%,其中Ⅰ期组Lunx、CEA和CK19 mRNA的阳性率为16.6%(1/6)、16.6%(1/6)和0%(0/6),与对照组差异均无统计学意义(P > 0.05);Ⅱ期、Ⅲ期和Ⅳ期组NSCLC患者Lunx mRNA的阳性率为44.4%(4/9)、50.0%(7/14)、70.6%(12/17),CEA mRNA的阳性率为33.3%(3/9)、50.0%(7/14)、52.9%(9/17),CK19 mRNA的阳性率为22.2%(2/9)、42.9%(6/14)、64.7%(11/17),肺癌Ⅱ期组Lunx、肺癌Ⅲ期组CEA和Lunx、肺癌Ⅳ期组CEA、CK19、LunxmRNA表达阳性与对照组差异均有统计学意义(P < 0.05~P < 0.01)。结论: 检测外周血CEA、CK19、Lunx mRNA表达可作为诊断早期NSCLC患者微转移重要的参考指标。     

NSCLC患者外周血中三种肿瘤标志物mRNA联合检查的意义

目的对NSCLC患者外周血LUNX、CEA和SCC的mRNA进行联合检测,并探讨其意义.方法标本为外周血分3组.肺癌组50例;良性疾病10例;健康志愿者15例.应用Nested PCR对外周血LUNX、CEA和SCC的mRNA进行检测.任意一种或一种以上标志物mRNA定为阳性.分析PCR检测结果与NSCLC各项临床指标之间的关系,行统计分析.结果肺癌组74.0%(37/50)例为阳性;良性疾病和健康对照组均为阴性.肺癌组中,Ⅰ期的患者仍有33.3%(3/9)呈现阳性,阳性率随肿瘤临床分期而升高(P＜0.05),而与患者性别、肿瘤分化程度、病理类型无统计学意义上的相关性.在肺癌组中各标志物的表达率为LUNX52.0%(26/50),高于CEA30.0%(15/50)和SCC16.0%(8/50),差异有显著性(P＜0.05).结论LUNX mRRNA是NSCLC外周血微转移检测的较好标志物.NSCLC微转移发生早,发生率较高.提示即使病理分期较早的患者手术后仍有可能发生远处转移.应用PCR法对NSCLC患者进行有LUNX mRNA组合的联合检测,有利于早期发现微转移,利于制定更优化的治疗策略.     

外周血表皮生长因子受体和LUNX mRNA表达对肺癌微转移诊断的价值

目的:分析非小细胞肺癌(NSCLC)患者和肺良性病变患者外周血表皮生长因子受体(EGFR)mRNA和LUNX mRNA表达情况,探讨其在肺癌微转移诊断中的价值.方法:采用荧光定量PCR方法检测42例肺癌患者和18例肺良性疾病患者外周血EGFR mRNA和LUNX mRNA表达.结果:42例NSCLC患者EGFR mRNA表达的阳性率为45.2%(19/42),LUNX mRNA表达的阳性率为40.5%(17/42),两者联合检测阳性率可提高到64.3%.良性肺部疾病患者均为阴性.结论:EGFR mRNA和LUNX mRNA可作为检测NSCLC患者外周血微转移的分子标志物,联合检测可提高外周血癌细胞的检出率.     

RT-QPCR法检测早期NSCLC患者外周血中CK-19 mRNA的意义

目的:RT-QPCR法探测早期非小细胞肺癌(NSCLC)外周血中CK-19 mRNA的意义?方法:以RT-PCR法从113例NSCLC患者(肺癌组)?50例肺良性病变和50例健康者(对照组)标本中筛选出有CK-19 mRNA表达的标本;再以RT-QPCR法检测表达CK-19 mRNA的标本,通过测定受试者标准曲线下面积(AUC)分析本实验的准确性?结果:①肺癌组和对照组中CK-19 mRNA阳性表达率分别为38.94%(44/113)?1.00%(1/100),差异有统计学意义(P < 0.01),且肺癌组中CK-19 mRNA的阳性表达与肿瘤分期和分化程度有关;②本实验效果的临界值为0.236,灵敏度为95.45%,准确度为77.27%;AUC为0.896?结论:RT-QPCR法检测外周血中的CK-19 mRNA可作为早期NSCLC患者发生微转移时的一个参考指标,但尚需大样本长期追踪观察证实?     

NSCLC术后病人外周血MUC1 mRNA和CK19 mRNA表达及其意义

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC) 术后外周血微转移的基因诊断方法,并分析黏蛋白1 (MUC1) mRNA、角蛋白19 (CK19) mRNA 作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性.方法 应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),对60例NSCLC病人(肺癌组)的外周血MUC1 mRNA、CK19 mRNA 表达情况进行检测;以10 例肺良性病变病人及15例健康人的外周血标本作对照.结果 肺癌组外周血MUC1 mRNA阳性表达21例(35%),CK19 mRNA阳性表达18例(30%);对照组MUC1 mRNA和CK19 mRNA 表达均为阴性,两组比较差异均有显著性(χ2=7.292、5.921,P＜0.01、0.05).结论 MUC1、CK19 基因均可作为RT-PCR 法检测NSCLC 病人淋巴结微转移的分子标志物,两者联合检测可能有助于肺癌转移早期诊断.     

骨桥连接素(OPN)在肺癌中的表达及其临床病理学意义

目的　探讨骨桥连接素 (OPN)在肺癌中的表达及其临床病理学意义。方法　应用免疫组织化学方法对 78例肺癌组织标本进行OPN检测。结果　 6 5例非小细胞肺癌 (NSCLC)阳性率为 5 8.4 6 % ,13例小细胞肺癌(SCLC)的OPN表达均为阴性。OPN表达率与患者TNM分期及淋巴结转移有密切关系 (P <0 .0 1) ,与细胞分化程度无明显关系 (P >0 .0 5 )。结论　OPN的表达同肺癌病理类型、发生、发展、淋巴结转移有密切关系 ,可作为临床评估NSCLC进展及预测肿瘤转移潜能的指标。     

非小细胞肺癌外周血中CK19mRNA与LUNXmRNA检测的临床意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血细胞角蛋白19(CK19)及肺特异性蛋白X(LUNX)的表达,探讨其对检测NSCLC微转移的可行性。方法:应用RT-PCR技术检测30例NSCLC患者及15例健康人外周血CK19mRNA及LUNXmRNA的表达。结果:NSCLC患者外周血中CK19mRNA及LUNXmRNA的阳性表达率分别为30%及13.3%,而对照组外周血中均无表达,外周血CK19mRNA及LUNXmRNA的表达与临床分期密切相关,与病理类型无关。结论:CK19及LUNX均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为敏感的分子标志物,联合检测有助于提高检测结果的阳性率。     

非小细胞肺癌患者外周血中肺表面活性蛋白CmRNA的表达及临床意义

目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中肺表面活性蛋白C mRNA(SP-C mRNA)在病理确诊后的表达及其意义。方法:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术来检测44例非小细胞肺癌患者外周血中SP-C mRNA的表达,并以20例肺良性病变患者和10名健康人作为对照。结果:44例肺癌患者外周血SP-C mRNA表达阳性率为59.1%;20例肺良性病变患者和10名健康人的外周血中无SP-C mRNA表达。结论:通过检测非小细胞肺癌患者外周血,SP-C mRNA可能是良好的微转移分子标志物。     

肺癌患者外周血CK19 mRNA和CEA mRNA表达的检测及临床意义

目的探讨CK19 mRNA、CEA mRNA能否作为判断肺癌血源性微转移的参考指标.方法取67例肺癌患者及37例健康体检者外周血,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测上述两个指标的表达.结果肺癌组外周血中CK19 mRNA阳性率(57.6%)及CEA mRNA阳性率(52.2%)均显著高于健康对照组的2.7%和5.4%(均P＜0.01),两个指标联合检测能将对肺癌微转移诊断的灵敏度提高至76.1%;CK19 mRNA的表达与临床分期相关(P＜0.01),CEA mRNA的表达与组织类型相关(P＜0.05).结论 CK19 mRNA和CEAmRNA可作为判断肺癌血源性微转移的参考指标,两者联检可提高诊断价值.     

检测非小细胞肺癌患者外周血CK19 mRNA微转移的临床意义

目的检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血CK19 mRNA的表达情况,探讨其作为分子标志物检测NSCLC微转移的可行性。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术检测48例NSCLC患者,15例肺良性疾病（BLD）患者和10例健康人外周血CK19 mRNA的表达。结果NSCLC患者CK19 mRNA的阳性表达率明显高于BLD患者和健康对照者,差异有统计学意义（Х^2=24．735,P=0．000）。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期NSCLC患者外周血中CK19 mRNA阳性表达率分别为44．4％（8／18）,75．0％（9／12）,92．3％（12／13）,4／5,不同临床分期NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异有统计学意义（Х^2=8．820,P=0．032）;有无淋巴结转移NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异亦有统计学意义（Х^2=6．813,P=0．009）;而不同病理类型、不同分化程度NSCLC患者外周血CK19 mRNA阳性表达率比较差异无统计学意义（Х^2=4．655,P=0．459;Х^2=1．204,P=0．548）。结论检测外周血CK19 mRNA表达可作为诊断NSCLC患者微转移的一个有价值的参考指标。     

Skp2 mRNA在肺癌中的表达及意义

目的：探讨S期激酶相关蛋白2（S—phase kinase—associated protein2,Skp2）在肺癌患者外周血中微转移中的诊断价值。方法：选取40例在本院就诊经病理组织学检查确诊为非小细胞肺癌（NSCI。C）的患者作为肺癌组,选择同期诊断为肺部良性疾病的20例患者为肺部良性疾病组。未进行任何治疗前收集各研究对象的外周血,实时荧光定量PCR方法检测血Skp2 mRNA并进行评价分析。结果：（1）肺癌组外周血中Skp2 mRNA相对表达量明显高于肺部良性疾病组,差异具有统计学意义（P=0．006）;（2）肺癌组外周血中Skp2 mRNA的阳性表达率分别为77．5％,肺部良性疾病组阳性表达率为8％,明显低于肺癌组,差异具有统计学意义（P〈0．01）;（3）肺癌组外周血中Skp2 mRNA的表达与患者肿瘤的TNM分期显著相关（P=0．004）,与年龄、性别、吸烟、肿瘤的组织学类型及分化程度无明显相关性。结论：外周血Skp2 mRNA表达可作为肺癌细胞的分子标记物用于NSCLC临床诊断。     

肺癌外周血中EGFR mRNA、SP-D mRNA、LUNX mRNA表达的临床意义

目的:应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测肺癌患者肿瘤组织和外周血中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达,探讨其作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法:应用RT-PCR技术检测40例非小细胞肺癌组织和15例肺良性病变组织中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达;检测40例肺癌患者外周血中靶基因的表达,并以15例良性肺疾病患者和10名健康人外周血作为对照。结果:40例肺癌患者病理组织中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA的表达率为77.5%(31/40)、100%(40/40)、100%(40/40),外周血中EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA表达阳性率分别为55.0%(22/40)、52.5%(21/40)和57.5%(23/40);对照组中15例肺良性病变患者病理组织中EGFRmRNA表达率为13.3%(2/15),无SP-DmRNA和LUNXmRNA表达,15例肺良性病变患者和10名健康人的外周血中无EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA表达。结论:EGFRmRNA、SP-DmRNA、LUNXmRNA作为检测肺癌组织及肺癌外周血微转移的分子标志物具有良好的敏感度和特异性;三者表达与肺癌TNM分期、组织学类型和癌细胞分化程度关系密切。     

CEA mRNA及CK19mRNA在非小细胞肺癌外周血中的表达及其与临床病理参数的关系

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血中癌胚抗原mRNA(CEA mRNA)及细胞角蛋白19 mRNA(CK19mRNA)的表达及与临床病理参数(病理类型、分期、细胞分化程度、淋巴结转移)之间的相关性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测48例NSCLC患者、15例肺良性疾病(BLD)患者和10例健康人外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA的表达。结果 NSCLC患者外周血中CEAmRNA及CK19 mRNA的阳性表达率分别为58.33%(28/48)、68.75%(33/48),在BLD患者中的阳性表达率分别为6.67%(1/15)、13.33%(2/15),而健康对照组均无表达,差异有统计学意义(P<0.05)。其中Ⅰ、Ⅱ期NSCLC患者外周血中CEA mRNA及CK19 mRNA阳性表达率分别为27.78%(5/18)、83.33%(10/12)及44.44%(8/18)、75%(9/12)。外周血CEA mRNA及CK19 mRNA的阳性表达与临床分期及淋巴结转移密切相关,而与病理类型及分化程度无关。结论 NSCLC患者早期(Ⅰ、Ⅱ期)外周血中也有微转移的存在,说明微转移可能是NSCLC预后不良的原因之一。CEAmRNA与CK19 mRNA均可作为检测NSCLC患者外周血微转移较为合适的分子标志物,联合检测有助于提高检测的准确度。     

RT-PCR测定非小细胞肺癌骨髓微转移

目的 探讨RT－PCR法检测非小细胞肺癌骨髓微转移的临床可行性。方法 以CK19mRNA作为标记物，运用RT－PCR方法检测41例非小细胞肺癌手术患者骨髓中CK19mRNA的表达，并以肺癌组织作为对照。结果 肺癌组织中CK19mRNA表达的阳性率100％，41例非小细胞肺癌患者骨髓中CK19mRNA阳性15例，阳性率36．64％，非肿瘤对照组均阴性。结论 以CK19mRNA作为肿瘤标记物，用RT－PCR法作为检测骨髓中肺癌微转移的手段是敏感和可行的。     

Detection of micrometastases in bone marrow and sentinel lymph nodes of breast cancer patients

To study the sensitivity and clinical significance of HE-staining,IHC and RT-PCR in detecting breast cancer micrometastases in bone marrow and sentinel lymph nodes （SLNs）. Methods ：After general anesthesia, all patients underwent bone marrow puncture and sentinel lymph node biopsy （SLNB） by 1% isosulfan blue, and then HE-staining,IHC and RT-PCR were used to detect micrometastases. Results：Of 62 patients with breast cancer whose axillary lymph nodes showed negative HE-staining results, 15 cases presented with positive RT-PCR and 9 cases showed positive IHC results positive in bone marrow micrometastases detection. PT-PCR and IHC showed good uniformity（kappa=0.6945）and there was significant difference in detective rate between these two methods （X2=4.1667,P = 0.0412）. In SLN samples, 13 showed positive RT-PCR results, while 7 showed positive IHC results. PT-PCR and IHC showed good uniformity （kappa=0.64.83）and significant difference was also found in detective rate between these two methods （X^2=4.1667 ,P = 0.0412）. Both bone marrow and SLN samples were RT-PCR positive in 3 cases, which indicated that bone marrow did not always accompany SLN micrometastases（X^2=0.067,P = 0.796）. Conclusion： Even if no axillary lymph node involvement or distant metastases are present in routine preoperative examination, micrometastases can still be detected in bone marrow or SLNs. Because the bone marrow micrometastases and axillary node micrometastses are not present simultaneously, combination test of multiple indicators will detect micrometastases more accurately.     

非小细胞肺癌患者外周血LUNX mRNA表达及临床意义

目的：通过检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者化疗前后外周血中肺特异性X蛋白（LUNX）mRNA的表达,探讨其对NSCLC微转移的诊断价值。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法,对54例NSCLC患者化疗前后、非肺癌恶性肿瘤患者36例、肺良性疾病患者16例及健康志愿者15例的外周血进行LUNX mRNA检测。结果：54例NSCLC患者化疗前后外周血LUNX mRNA的阳性表达率分别是48.1%（26/54）和25.9%（14/54）,差异比较有统计学意义（P〈0.05）;非肺癌恶性肿瘤患者、肺良性疾病患者及健康志愿者外周血LUNX mRNA的阳性表达率均为0,与NSCLC组比较均有统计学意义（P〈0.01）;LUNX mRNA的阳性表达率在化疗前后均随TNM分期增加而升高（P〈0.05）,与患者年龄、性别、病理类型及分化程度无明显相关性（P〉0.05）;NSCLC外周血LUNX mRNA表达与化疗近期疗效无关（P〉0.05）。结论：LUNX mRNA是一种检测NSCLC外周血微转移较好的特异性标志物;化疗后NSCLC外周血LUNX mRNA的表达比化疗前显著降低,表明有效化疗可消灭NSCLC患者的微转移癌细胞。