人白细胞介素10离体供肺基因转染对大鼠移植肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨离体经肺静脉灌注途径转染目的 基因的可行性,观察移植肺局部转染人白细胞介素(hIL)-10基因对移植肺缺血再灌注损伤(IRI)的影响.方法 采用改良的三袖套法建立大鼠左肺原位移植模型,移植前供肺离体经肺静脉逆行灌注5×109 PFU/ml hIL-10基因重组的腺病毒载体(转基因组),保存3 h后移入受鼠;另设空载体对照组、空白对照组和假手术对照组.再灌注后4 h,测定动脉血PaO2;检测移植肺湿-干重比率(W/D)、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、髓过氧化物酶(MPO)活性;观察组织学改变;采用RT-PCR法和免疫组化染色法检测移植肺hIL-10基因的表达情况,酶联免疫吸附法(ELISA)测定移植肺肿瘤坏死因子(TNF)-α、干扰素(IFN)-γ的表达水平.结果 空载体对照组和空白对照组出现明显的移植肺IRI,转基因组移植肺IRI明显减轻,PaO2提高、W/D比率降低、MDA含量和MPO活性下降(P＜0.01)、SOD活性升高(P＜0.05);转基因组移植肺TNF-α、IFN-γ的表达下调(P＜0.01),肺泡间质水肿减轻,炎细胞浸润减少,并有外源性hIL-10基因的表达.结论 (1)离体供肺经肺静脉灌注途径转染外源性基因有效可行;(2)腺病毒介导hIL-10转基因能有效地减轻移植肺IRI,改善早期移植肺功能.     

血红素加氧酶-1在肺早期缺血再灌注损伤中的表达及意义

目的研究血红素加氧酶-1（HO-1）与供肺缺血再灌注损伤之间的关系。方法采用改进的套管吻合技术，建立同系大鼠左肺原位再灌注损伤的动物模型。采用HO-1的诱导剂钴原卟啉（CoPP）和抑制剂锌原卟啉（ZnPP）分别进行干预处理后，运用免疫组织化学技术和RT-PCR技术分别检测HO-1蛋白在供肺组织中的表达以及供肺中HO-1mRNA的表达；运用TUNEL技术检测供肺组织中细胞凋亡。结果肺组织发生缺血再灌注时可诱导HO-1蛋白的表达，且随着再灌注时间的延长，表达逐步增多，再灌注8 h后达到高峰；再灌注前使用CoPP进行预处理，可以诱导HO-1蛋白的表达上调。HO-1蛋白表达上调可以降低肺缺血再灌注后细胞凋亡的发生率。结论肺缺血再灌注损伤可诱导HO-1表达上调，CoPP诱导的HO-1过表达可以抑制肺缺血再灌注损伤诱导的肺细胞凋亡，从而减轻供肺的再灌注损伤。     

姜黄素对机械通气相关性肺损伤的保护作用及其机制研究

目的 研究姜黄素对机械通气相关性肺损伤的保护作用及其分子机制.方法 将30只健康的日本大耳白兔分为对照组、损伤组和姜黄素组.其中对照组采用正常潮气量8 mL/kg通气;损伤组采用20 mL/kg大潮气量机械通气诱导肺损伤;姜黄素组在损伤组基础上给予姜黄素鼻饲,并分别予以血红素氧合酶1(HO-1)激动剂钴原卟啉(CoPP)和抑制剂锌原卟啉(Zn-PP)干预.实验过程中检测氧合指数,48 h后处死动物获取肺组织标本检测肺组织湿干比(W/D)、丙二醛(MDA)水平及髓过氧化物酶(MPO)活性;用实时荧光定量-聚合酶链反应(RTQ-PCR)法检测HO-1 mRNA表达水平,比色法检测其活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素6(IL-6)水平.结果 与对照组比较,损伤组氧合指数明显降低,W/D、MDA水平及MPO活性、肺损伤总积分增加(P＜0.05).姜黄素干预后,姜黄素组氧合指数较损伤组明显增加,W/D、MDA水平、MPO活性及肺损伤总积分明显降低;BALF中TNF-α及IL-6水平明显降低,HO-1活性及mRNA表达水平明显增加(P＜0.05).姜黄素组经HO-1激动剂CoPP处理后TNF-α、IL-6、肺损伤积分明显降低;经HO-1抑制剂ZnPP处理后TNF-α、IL-6、肺损伤积分明显增加.结论 姜黄素可能通过上调HO-1表达,从而改善机械通气相关性肺损伤兔肺部气体交换功能,减轻炎性反应.     

经供体气管转染腺病毒介导的人白介素10基因对大鼠同种异体肺移植物缺血再灌注损伤的影响

目的:观察局部转染腺病毒介导的人白细胞介素(hIL)-10基因对移植肺缺血再灌注损伤(IRI)和肺功能的影响?方法:36只雄性SD大鼠随机分为空白对照组空载体对照组?基因转染组?在移植前经供体气管分别灌入生理盐水0.5 ml?Ad-5腺病毒5×109 PFU 和Ad-5-hIL-10 5×109 PFU;24 h后正中开胸取肺,在4℃ 低钾右旋糖酐液(LPD液)中保存18 h?采用改良的三袖套法建立大鼠左肺原位移植模型,移植肺再灌注后4 h测定动脉血气?移植肺湿-干重比率(W/D)?丙二醛(MDA)含量?超氧化物歧化酶(SOD)含量和髓过氧化物酶(MPO)含量;观察移植肺组织病理改变及人hIL-10免疫组化染色;并使用酶联免疫吸附法(ELISA)测定移植组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)?干扰素γ( IFN-γ)的表达水平?结果:与空载体组和空白对照组相比,基因转染组肺泡间质水肿减轻,炎细胞浸润减少,hIL-10基因的表达明显增加,PaO2明显提高(P < 0.01),W/D比率降低(P < 0.05),MDA含量和MPO活性下降(P < 0.01),SOD活性升高(P < 0.01), TNF-α和IFN-γ的表达下调(P < 0.01)?结论:移植前经供肺气管灌注途径转染外源性人IFN-10基因能有效地减轻移植后肺脏组织IRI,改善早期移植肺功能?     

钴原卟啉诱导HO-1高表达抗大鼠心肌缺血/再灌注损伤的实验研究

目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护效应及作用机制.方法 采用HO-1诱导剂钴原卟啉(CoPP) 和抑制剂锌原卟啉(ZnPP) 分别进行干预处理后建立大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,观察大鼠再灌注后I/R左心室心肌超微结构变化;检测HO-1蛋白在大鼠心肌的表达情况;测定大鼠左心室心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量.结果 再灌注前使用CoPP 进行预处理可以诱导HO-1蛋白表达上调.HO-1蛋白表达上调可以减少缺血/再灌注后心肌细胞坏死,提高心肌组织中SOD含量,并降低MDA含量.结论 CoPP诱导的HO-1过表达可以抑制心肌缺血/再灌注损伤后细胞坏死,从而减轻心肌再灌注损伤,抗氧自由基是其机制之一.     

乌司他丁对大鼠单肺移植后缺血再灌注损伤的作用

目的研究乌司他丁(UTI)在大鼠原位异体左肺移植模型中对供肺缺血再灌注损伤的治疗作用。方法16只接受原位异体左肺移植的SD大鼠随机分为2组,每组8只。对照组受体在供肺通气和再灌注开始时静脉注射生理盐水,UTI治疗组大鼠也在供肺通气和再灌注开始时接受UTI10 000U/kg,静脉注射。2h再灌注后取供肺肺静脉血测血气,处死动物,取部分供肺行组织学观察,其余部分保存于液氮中,测量供肺干湿重比,提取肺匀浆,测量髓过氧化物酶浓度(MPO),细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的mRNA表达和IL-8浓度。结果在UTI组,供肺肺静脉血气示PaO2/FiO2显著高于对照组[(38.62±0.75)kPavs(31.57±1.85)kPa,P<0.05)],移植肺干湿重比[(4.74±0.28)vs(5.00±0.12),P<0.05]、ICAM-1mRNA表达和MPO[(0.63±0.23)vs(0.84±0.22),P<0.05]浓度均低于对照组,病理示治疗组组织损伤轻于对照组。但治疗组IL-8[(173.43±27.64)vs(76.22±12.42),P<0.001]浓度显著高于对照组。结论UTI对大鼠单肺移植模型中移植肺的缺血再灌注损伤有保护作用。     

缺血后处理对供体犬肺组织细胞凋亡基因表达的影响

【目的】观察供体犬肺再灌注后早期供体肺组织脂质过氧化反应的变化,了解缺血后处理对供体犬肺植入后细胞凋亡基因表达的变化情况。【方法】随机选取12对比咯犬,组成供受体,进行异体左侧单肺移植术。随机分成两组,对照组:6对犬,进行供受体左侧异体单肺移植,不予缺血后处理的干预,按常规方式进行。缺血后处理组:6对犬,进行供受体左侧异体单肺移植,常规方式获取的供体犬肺植入后,再灌注早期实施3个周期的10 s再灌～10 s再阻断,总时程1 min的缺血后处理。于供体犬肺再灌注后1、2 h时间点采集供肺标本检测超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)的含量;采用RT-PCR技术检测供体肺脏再灌注后1、2 h时间点细胞凋亡基因Bcl-2、Bax的表达;光镜下观察供体犬肺植入后1、2 h时间点肺组织的病理变化,应用SPSS 13.0统计软件处理,以P<0.05为统计学上有显著差别。【结果】供体肺脏植入时间平均(35.9±1.7)min。缺血后处理组在1、2 h时间点的供体肺组织SOD活性水平较对照组升高、MDA含量较对照组减低,有统计学差异(P<0.05);对照组与实验组相比较,肺组织再灌注后1、2 h时间点,Bc12蛋白表达上调(P<0.05),而Bax蛋白表达下调(P<0.05);缺血后处理组肺组织光镜下观察在各时间点的炎症反应均较对照组的变化轻微。【结论】缺血后处理可以抑制再灌注时氧化自由基的堆积,从而减少供体肺的缺血再灌注损伤;缺血后处理能够通过抑制促凋亡Bax蛋白的表达,及促进抗凋亡Bc12蛋白表达,从而影响内源性细胞凋亡途径。     

血红素氧合酶-1对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用机制。方法:SD大鼠30只,建立二套袖法原位肝移植模型。随机分为3组:对照组,无任何处理;CoPP处理组,供肝收获前24h供体腹腔注射HO-1诱导剂CoPP5mg/kg。;ZnPP处理组,腹腔注射抑制剂ZnPP20mg/kg。移植后第三天检测肝脏移植物肝功能,免疫组织化学方法检测肝脏移植物HO-1的表达情况。TUNEL法检测凋亡变化。以Suzuki标准评分来反映肝脏移植物的缺血再灌注损伤程度。结果:①CoPP组ALT,AST较对照组和ZnPP组明显降低(P<0.01)。②HO-1表达:CoPP组明显高于其他组(P<0.05)。③移植物凋亡阳性细胞百分率:CoPP组明显低于对照组和ZnPP组(P<0.05)。④肝脏移植物病理变化:CoPP组和与对照组,ZnPP组比较,炎症细胞浸润少,肝细胞损伤轻。肝脏移植物Suzuki评分,CoPP组(0.76±0.59)明显低于对照组(1.32±0.74)与ZnPP组(1.80±0.70),有显著统计学差异(P<0.05)。结论:HO-1对肝脏移植物缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制可能与抗炎症与抗凋亡有关。     

葛根素对兔肺缺血再灌注损伤中血红素加氧酶-1的影响

目的:观察葛根素对兔肺缺血再灌注损伤(IRI)中血红素加氧酶-1(HO-1)的影响.方法:30只健康日本大耳白兔随机分成假手术对照组(C组)、肺缺血再灌注组(IR组)和葛根素组(Pur组).复制兔单侧肺缺血再灌注损伤模型,对比观察各组肺湿干重比(W/D)、肺泡损伤数(IAR)、HO-1活性、HO-1mRNA及其蛋白的表达.结果:IR组与Pur组W/D、IQA均比C组为高(P＜0.01),但Pur组显著低于IR组(P＜0.01);与C组相比,IR组HO-1活性、HO-1mRNA及其蛋白表达增加(P＜0.01),Pur组上升更加显著(P＜0.01).结论:葛根素能增加HO-1的活性,上调HO-1mRNA及其蛋白的表达,对肺缺血再灌注损伤有明显的保护作用.     

缺血后处理对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护效应的实验研究

目的:研究缺血后处理(IPO)对在体大鼠肺缺血/再灌注损伤(IRI)的作用及机制.方法:健康SD大鼠48只,随机分成6组(n=8):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血后处理组(IPO组).采用开胸夹闭和开放左肺门建立大鼠IRI模型,S组持续灌注150min;I/R组缺血40min.再灌注105min;IPO组缺血40min后,短暂再灌注30s和缺血30s,反复3次,然后再恢复灌注102min.测定各组动脉血氧分压(PaO2)、肺组织湿/干重比(W/D)、血清丙二醛(MDA)含量、HO-1蛋白表达,并观察肺组织病理变化.结果:与S组比较,I/R组、IPO组动脉血PaO2下降,而肺组织W/D、血清MDA含量增加(P<0.05或0.01);与I/R组比较,IPO组动脉血PaO2显著增高,肺组织W/D、血清MDA含量明显降低(P<0.05);肺组织病理损伤:IPO组明显轻予I/R组.绪论:缺血后处理明显减轻在体大鼠肺缺血/再灌注损伤,其机制与其减轻脂质过氧化有关.     

Heme oxygenase-1 expression in rats with acute lung rejection and implication

This study investigated the expression of hemeoxygenase-1 （HO-1） in rats with acute lung rejection and its implication. A valid rat orthotopic left lung transplantation model （SD rat→Wistar rat） was established by using an improved three-cuff anastomosis technique. The rats were divided into control group, CoPP （HO-1 inducer）-treated group and ZnPP （HO-1 inhibitor）-treated group. The severity of acute rejection was graded on the basis of the morphologic changes of the lung samples stained with HE. The expression of HO-1 protein in lung tissue was detected by using immunohistochemistry and Western blot, and HO-1 mRNA activity was assayed by RT-PCR. The results showed that the expression of HO-1 protein was significantly increased with the acute rejection grading in rats （P〈0.01）. As compared with control and ZnPP-treated groups, the severity of acute rejection was not alleviated and the grade not reduced significantly in CoPP-treated group （P〉0.05）. It was concluded that HO-1 protein might be involved in the pathological process of post-graft acute rejection. The expression of HO-1 protein was increased gradually with aggravation of acute rejection, and HO-1 protein might be used as an index to monitor acute rejection after lung transplantation.     

血红素加氧酶-1重组乳酸乳球菌灌胃对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的作用

目的:利用基因工程原理合成携带血红素加氧酶-1(HO-1)基因的乳酸乳球菌,给正常大鼠灌胃后,观察其对内毒素诱导大鼠急性肺损伤的保护效应。方法:随机将30只健康清洁级SD大鼠分为对照组(LPS组,n=10)、携带HO-1的乳酸乳球菌灌胃组(HO组,n=10,LPS模型建立前24 h灌胃)、拮抗剂组[锌原卟啉(ZnPP)组,n=10,HO灌胃24 h后,LPS模型建立前1 h腹腔注射ZnPP 10μmol/kg];LPS模型建立后4 h取材,比较各组动物支气管灌洗液(BALF)中髓过氧化物酶(MPO)活性、中性粒细胞(PMN)计数、肺组织湿干重比(W/D)、肺组织MPO活性,并在光镜下观察肺组织病理学改变。结果:与LPS组比较,HO组BALF中MPO、PMN计数和肺组织W/D均降低(P<0.05),肺组织病理学损伤减轻;与HO组比较,ZnPP组BALF中MPO、PMN计数和肺组织W/D均升高(P<0.05),肺组织病理学损伤加重;ZnPP组与LPS组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:预先给大鼠用携带HO-1基因的乳酸乳球菌灌胃,可对内毒素诱导急性肺损伤大鼠产生一定的保护作用。     

无心跳供体大鼠同种异体左肺原位移植模型的热缺血时限

 目的 建立无心跳供体（NHBD）大鼠同种异体左肺原位移植模型，比较不同热缺血时间（WIT）对大鼠移植肺功能和结构的影响。方法 将32只SD大鼠按供受体随机配对成16对，分成4组，分别为有心跳供体组（对照组，HBD）、NHBD热缺血1 h组、（实验组，NHBD1h）、热缺血2 h组（实验组，NHBD2h）和热缺血3 h组（实验组，NHBD3h），每组4对。供肺摘取后置于4℃低钾右旋糖苷（LPD）液中4 h。采用三“袖套”套管法行左肺原位移植术。测定和观察移植前、移植后10 min、1 h和2 h的右颈动脉血气，移植后2 h的左肺静脉血气、移植肺湿/干重比和组织形态学改变。结果 NHBD1h组移植肺再灌注10 min、1 h和2 h所采集的右颈动脉血PaO2数值（177.8 ± 15.5、162.0 ± 19.3和195.5 ± 26.4）和对照组HBD组（187.3 ± 34.4、191.8 ± 36.6和198.8 ± 36.6）的差别没有统计学意义；再灌注10 min和2 h，NHBD2h组右颈动脉血PaO2数值（154.8 ± 25.2和116.5 ± 32.1）以及NHBD3h组（121.0 ± 28.2和88.3 ± 23.6）和对照组的差别有统计学意义（P<0.05）。移植肺再灌注2 h后，NHBD1h组左肺静脉血PaO2数值与对照组的差别没有统计学意义（132.3 ± 33.8 vs. 143.8 ± 17.1），NHBD2h和NHBD3h组与对照组的差别均有统计学意义（78.8 ± 16.1 vs. 143.8 ± 17.1，70.8 ± 15.5 vs. 143.8 ± 17.1，P<0.05）。NHBD3h组的湿/干重比数值和肺损伤程度病理评分与对照组的差别有统计学意义（P<0.05）。结论 本实验成功建立了NHBD大鼠同种异体左肺原位移植模型，在本实验动物模型中，大鼠可以耐受的WIT为1 h。     

二氯甲烷对肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨二氯甲烷对减轻肝脏缺血再灌注损伤的机制.方法 将80只雄性SD大鼠随机分为4组(20只/组):对照组,无任何处理;CoPP(钴-原卟啉)组,供肝收获前24 h供体腹腔注射CoPP 5 mg/kg;ZnPP(锌-原卟啉)组,供肝收获前24 h供体腹腔注射ZnPP 20mg/kg;MC(二氯甲烷)组,供肝收获前7 d,供体口服MC 500 ms/(kg·d).受体不作处理,采用双袖套法施行大鼠同基因原位肝移植(每组供体和受体各10只),移植后3 d每组各处死5只受体鼠,取出供肝并检测:移植后受体肝功能;Western印迹法和免疫组化法检测供肝血红素氧合酶-1(HO-1)的表达;TUNEL法检测供肝细胞的凋亡;Suzuki标准评分评估供肝的缺血再灌注损伤程度.每组留下5只受体鼠观察移植后的生存时间.结果 MC组、CoPP组血清的丙氨酸转氨酶(ALT)[(75±16)、(65±28)U/L]、天冬氨酸转氨酶(AST)[(185±42)、(187±43)U/L]明显较对照组[ALT(346±45)U/L、AST(474±90)U/L]和ZnPP组[ALT(578±75)U/L、AST(1084±128)U/L]低(P<0.01).CoPP组肝脏移植物的HO-1表达量中位数为3.05,明显较对照组高(P<0.05),MC组与对照组间差异无统计学意义(P>0.05).MC组和CoPP组的移植物细胞凋亡指数分别为4.1%±0.6%、3.2%±0.8%,明显较对照组(12.5%±2.4%)和ZnPP组(25.8%±3.1%)低(P<0.05).MC组、CoPP组比对照组、ZnPP组的肝细胞损伤轻、炎症细胞浸润少,MC组、CoPP组的Suzuki评分分别为0.76±0.52、0.76±0.59,明显较对照组(1.32±0.74)和ZnPP组(1.80±0.70)低(P<0.05).MC组、CoPP组的中位生存时间分别为100、93 d,较对照组(85 d)、ZnPP组(12 d)延长(P<0.05).结论 HO-1上调和二氯甲烷对肝脏移植物缺血再灌注损伤均有保护作用.     

血红素氧合酶1干预对呼吸机所致肺损伤的影响

目的探讨血红素氧合酶1（HO-1）的干预对家兔呼吸机所致肺损伤（VILI）的影响。方法 24只家兔随机分为常规潮气量＋PEEP组（C组）、呼吸机所致肺损伤组（VILI组）、呼吸机所致肺损伤＋HO-1诱导剂干预组（Hm组）;实验终点行动脉血气分析,Western blot和免疫组化方法检测肺组织HO-1的表达水平和细胞定位,观察肺组织形态变化并进行肺损伤评分,测定肺组织湿干重比值。结果 VILI组较C组HO-1蛋白表达水平升高,HO-1蛋白主要定位于肺泡上皮细胞和血管内皮细胞,在肺泡巨噬细胞和中性粒细胞也有表达。Hm组与VILI组比较,HO-1蛋白表达水平升高,PaO2/FiO2升高,肺湿干重比值和肺损伤评分降低,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 HO-1蛋白表达升高能减轻VILI,对VILI有一定的保护作用。     

大鼠血红素加氧酶-1基因在乳酸乳球菌中的表达

目的:在乳酸乳球菌中表达大鼠血红素加氧酶-1(HO-1)基因。方法:采用RT-PCR技术从大鼠脾总RNA中分离扩增血红素加氧酶HO-1基因,将该基因克隆进pGEM-Teasy质粒中,转化大肠杆菌DH5α提取质粒,鉴定HO-1基因。酶切后与pSEC质粒连接,经电击转化,将重组质粒转入乳酸乳球菌NZ9000中,转化子在含有氯霉素的脑心浸液培养基上培养。用nisin诱导HO-1表达,SDS-PAGE、Westernblot鉴定表达产物,并采用分光光度法测定HO-1活性。结果:表达产物相对分子量约为32kU,表达量约为7.0mg/L,HO-1活性为2.386U/(mg·h)。结论:乳酸乳球菌能够表达具有生物活性的大鼠HO-1。     

体内外诱导血红素加氧酶-1延长异种移植胰岛功能和生存

Background  The induced expression of heme oxygenase-1 (HO-1) in donor islets improves allograft survival. Cobalt protoporphyrin (CoPP) could significantly enhance the expression of HO-1 mRNA and protein in rat islet safely. Our work was to study how to protect pancreatic islet xenograft by CoPP-induction.

Methods  Islet xenografts treated with CoPP-induction and CoPP+ Zinc protoporphyrin (ZnPP) in vitro and in vivo were randomly transplanted into murine subrenal capsule; then the graft survival time was compared by blood glucose level and pathological examination and meanwhile the interferon γ (IFN-γ), tumor necrosis factor α (TNF-α), interleukin 10 (IL-10) and IL-1β level in serum and their mRNA and HO-1 mRNA and protein expression were examined.

Results  Islets with CoPP-induction under low- and high-glucose stimulation exhibited much higher insulin secretion compared with other three groups. CoPP-induction could increase higher expression of HO-1 (mRNA: 3.33- and 76.09- fold in vitro and in vivo; protein: 2.85- and 58.72-fold). The normoglycemia time in induction groups ((14.63±1.19) and (16.88±1.64) days) was significantly longer. The pathological examination showed less lymphocyte infiltration in induction groups. The IL-10 level and its mRNA in induction groups were significantly higher.

Conclusions  The HO-1 induced by CoPP would significantly improve function, prolong normoglycemia time and reduce lymphocyte infiltration. Meanwhile CoPP-induction in vivo had more beneficial effects than in vitro. Its mechanism could be related to immune-modulation of IL-10.

     

血红素氧合酶－1对肝硬化大鼠肺脏结构和功能的影响

目的：探讨血红素氧合酶－1/一氧化碳系统在实验大鼠肝肺综合征中的作用。 方法：35只SD大鼠随机分为肝硬化组、锌原卟啉组、钴原卟啉组和假手术组。胆总管结扎制备大鼠肝硬化模型。锌原卟啉组、钴原卟啉组模型制备同肝硬化组,仅在标本采集前24小时分别腹腔给予锌原卟啉组、钴原卟啉组30mg/Kg。测量平均动脉压、门静脉压,血气分析;病理观察肝硬化和肺血管扩张形成;应用免疫组化方法观察HO-1蛋白在肺内的表达,RT-PCR法检测肺组织中HO-1 mRNA的表达。 结果：病理显示手术组4周肝硬化形成;肺内血管扩张,肺泡间隔增加伴有肺不张。与假手术组相比,肝硬化组平均动脉压显著下降,门静脉压显著升高（P）;肺泡动脉血氧梯度增加（P）;动脉碳氧血红蛋白、肺组织HO-1蛋白及HO-1 mRNA显著增加（P< 0.05）。与肝硬化组相比,锌原卟啉组肺泡动脉血氧梯度下降、动脉碳氧血红蛋白、肺组织HO-1蛋白及HO-1 mRNA显著减少（P< 0.05）,肺内血管扩张缩小;钴原卟啉组肺泡动脉血氧梯度增高、动脉碳氧血红蛋白、肺组织HO-1蛋白及HO-1 mRNA显著增加（P< 0.05）,肺内血管扩张加重。 结论：肺内血红素氧合酶－1表达增加在肝肺综合征的发病中起着重要的作用。