乙型肝炎病毒免疫耐受动物模型的建立与验证

用鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）感染１ｄ龄幼鸭建立了乙型肝炎免疫耐受动物模型，随访２２周，鸭乙型肝炎病毒表面及前表面抗原（ＤＨＢｓ／ｐｒｅｓＡｇ）及ＤＨＢＶ ＤＮＡ阳性不变。在持续性感染鸭血清中未能检出抗ＤＨＢｓ／ｐｒｅｓ或抗鸭乙型肝炎核心（ＤＨＢｄ）抗体。用纯化的ＤＨＢｓ／ｐｒｅｓ Ａｇ及ＤＨＢｃＡｇ与鸭外周血淋巴细胞作特异性淋巴细胞增殖试验，结果也未见阳性反应。以ＤＨＢｓ／ｐｒｅｓＡｇ及ＤＨＢｃ…     

丁型肝炎的分布状况与分析

我们用ＥＬＩＳＡ法检测了６５５例不同类型乙肝病人，２９５例无症状ＨＢｓＳＡｇ携带者和３１７例献血员血清丁型肝炎病毒抗原（ＨＤＡｇ）和丁型肝炎病毒抗体（抗ＨＤ）。结果表明，９１例丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）标志物阳性病人中，以慢活肝占比数最大，无症状ＨＢｓＡｇ携带者和献血员的感染率分别为５．４％和１．２６％，证实乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和ＨＤＶ同时或重叠感染与肝炎慢性化有密切关系。应注意对无症状ＨＢｓＡｇ携带者或献血员进行ＨＤＶ标志物的检测。     

树鼩感染丁型肝炎病毒的实验研究

作者以树为对象、建立丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）／乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）实验感染动物模型，为丁型肝炎发病机理和药物筛选提供研究基础。对人工饲养的２０只健康成年树　接种ＨＢＶＤＮＡ阳性血清后ＨＢｓＡｇ的转阳率为７５％（１５只）；分别以同时感染（１３只）和重叠感染（９只）两种方式接种ＨＢＶＤＮＡ和ＨＤＶＲＮＡ阳性血清后，各有８只和６只树　的血清乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、丁肝抗原（ＨＤＡｇ）和丁肝抗体（抗ＨＤ）相继转阳，部分血清或肝内检出ＨＤＶＲＮＡ，以ＨＤＶ／ＨＢＶ阳性树　血清在树　间进行传代感染，可见第二代４只中３只、第三代５只中４只树　的血清ＨＢｓＡｇ、ＨＤＡｇ和抗ＨＤＶ相继转阳，２只第三代感染树　血清中检出ＨＤＶＲＮＡ，肝内检出ＨＢｓＡｇ和ＨＤＡｇ阳性；连续观察１６～１９个月，经重叠感染成功的４只树　血清ＨＢｓＡｇ持续阳性，２只ＨＤＡｇ和抗ＨＤ交替出现，１只抗ＨＤ持续阳性，提示可发展成慢性ＨＤＶ感染；感染ＨＤＶ的树　血清ＡＴＬ升高，肝组织有类似肝炎样病理变化，与ＨＤＶ在黑猩猩体内感染结果类似，提示树　可作为ＨＤＶ感染的动物模型。     

晚期血吸虫病患者合并HCV感染及与HBV感染的关系

采用酶联免疫吸附法检测４６１例各期血吸虫病患者血清乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）标志物，并采用逆转录聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测１０２例晚期血吸虫病（晚血）患者血清丙型肝炎病毒核糖核酸（ＨＣＶ－ＲＮＡ）．结果表明，晚血患者血清抗ＨＣＶ检出率为７．５％，显著高于急性血吸虫病（急血）．慢性血吸虫病（慢血）患者２．Ｏ％及对照人群１．８％．３０６例晚血患者血清抗ＨＣＶ和／或ＨＣＶ－ＲＮＡ阳性３８例（１２．４％），其中ＨＣＶ与ＨＢＶ合并感染６３．２％（２４／３８），ＨＣＶ单一感染３６．８％（１４／３８），９２例合并与未合并ＨＣＶ感染的ＨＢｓＡｇ阳性晚血患者，ＨＢｅＡｇ阳性率差异无显著性（Ｐ＞０．０５）．揭示，晚血患者ＨＣＶ感染率高，并多以与ＨＢＶ合并感染形式存在，ＨＣＶ感染对ＨＢＶ复制无明显抑制作用．     

重组干扰素a_1与a_2b治疗慢性乙型肝炎的疗效对比研究

采用国产干扰灵和进口干扰能治疗慢性乙型肝炎５５例，其中干扰灵３００万ｕ／ｄ，连续或间日共３月；干扰能３Ｏ０万ｕ／间日，共３月。治疗结束时ＨＢｅＡｇ及ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴率分别为４４．４％和３９．２８％（Ｐ＞０．０５）。随访３－２４月，ＨＢ＿ｓＡｇ转阴率分别为１１．１％及７．１％，ＨＢ＿ｓＡｇ及ＨＢＶ－ＤＮＡ转阴率达５１．８５％和４６．４３％（干扰灵组有１例夏发）说明国产干扰灵与进口干扰能疗效相似，两组干扰素清除病毒的疗效均以、４ＬＴ≥１００ｕ／Ｌ比较＜１００ｕ／Ｌ者疗效高（Ｐ＜Ｏ０１）。     

氧化苦参碱对乙型肝炎病毒转基因小鼠乙肝抗原表达的影响

目的：研究氧化苦参碱抗乙型肝炎病毒的作用,并初步探讨其作用机制。方法：以乙型肝炎病毒全基因组转基因小鼠ＩＣＲ－ＴｇＮ（ＨＢＶａｄｒ１．２）ＳＭＭＵ 为动物模型,运用ＥＬＩＳＡ和免疫组化的方法检测小鼠肝脏内乙肝抗原含量。结果：分别予氧化苦参碱１００, ２００, ３００ ｍ ｇ／ｋｇ 腹腔注射,１次／ｄ,３０ ｄ 后,乙型肝炎病毒转基因小鼠肝脏内ＨＢｓＡｇ 和ＨＢｃＡｇ 的含量较空白对照组（予等体积生理盐水腹腔注射）均有明显的下降,且对两者作用一致;进一步的研究表明氧化苦参碱２００ ｍ ｇ／ｋｇ 作用１０ ｄ,２０ ｄ 时小鼠肝脏内ＨＢｓＡｇ 和ＨＢｃＡｇ 的含量较治疗前有明显的下降。结论：氧化苦参碱能降低乙型肝炎病毒转基因小鼠肝脏内ＨＢｓＡｇ 和ＨＢｃＡｇ 的含量,有抗乙型肝炎病毒作用。     

地高辛标记DHBVDNA探针的制备及应用

采用随机引物法制备地高辛标记含鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）基因片段的质粒ＰＢＲ３２２作为探针，建立ＤＨＢＶＤＮＡ斑点杂交试验，结果：探针可检出１．０ｐｇ同源ＤＮＡ片段，不与人乙肝病毒（ＨＢＶ）及鸭肝细胞ＤＮＡ发生杂交，与￣３５Ｓ－ＤＨＢＶＤＮＡ探针的灵敏度相似。该探针检出重庆地区２－３月龄麻鸭血清ＤＨＢＶ自然感染率为２５．４８％；用ＤＨＢＶ血清经腹腔感染１－２日龄雏鸭，１周后阳性感染率为８２．９０％，并可持续感染至少２月。     

核苷（酸）类似物治疗慢性ＨＢＶ感染者至ＨＢＶ ＤＮＡ阴转后ＡＬＴ异常的因素分析

【目的】 探明慢性乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者接受核苷（酸）类似物（ＮＡ）治疗至ＨＢＶ ＤＮＡ降至不可检测水平后,丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）仍然异常的高危因素。【方法】２００６年１月至２０１４年２月期间,回顾加前瞻性随访核苷（酸）类似物初始治疗至ＨＢＶ ＤＮＡ阴转（＜２０ ＩＵ／ｍＬ）后的慢性ＨＢＶ感染者（ｎ ＝ ３８８）,对比ＡＬＴ复常者（ｎ＝ ２９８）及异常者［ｎ ＝ ９０;定义为在每１ ～ ３个月的随访间隔中,连续２次以上ＡＬＴ ＞ ４０ Ｕ／Ｌ（男）或 ＞ ３５ Ｕ／Ｌ（女）］的临床特征,使用ｌｏｇｉｓｔｉｃ多因素回归分析ＡＬＴ异常的高危因素。【结果】总随访中位数为４２．０月。两组在人口学和病史数据（性别、年龄、乙肝／肝硬化／肝癌家族史、既往嗜酒史等）,基线特征（ＨＢｅＡｇ阳性率、ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＨＢＶ ＤＮＡ水平等）,核苷（酸）类似物治疗方案构成比,治疗后的病毒学突破和优化治疗率、治疗中的肝癌发生率等,均无显著差异。但ＡＬＴ异常组体质指数［（２４．１ ± ３．５） ｖｓ． （２２．５ ± ３．２）ｋｇ／ｍ２, ｔ ＝ ４．１６５, Ｐ ＜ ０．００１］、基线肝硬化比例（４５．６％ ｖｓ． ２７．２％,Ｐ ＝０．００１）和ＨＢｅＡｇ转换率［５８．１％（２５／４３） ｖｓ． ３９．２％（４９／１２５）,Ｐ ＝ ０．０１６］高于ＡＬＴ复常组。Ｌｏｇｔｉｓｔｉｃ多因素回归分析发现：抗病毒基线时即诊断肝硬化（ＯＲ＝ ２．４７２,９５％ ＣＩ ＝ １．４２４－４．２９２,Ｐ ＝０．００１）、高体质量指数（ＯＲ ＝ １．１７０,９５％ ＣＩ ＝ １．０７７－１．２７１,Ｐ＜ ０．００１）和治疗１年时ＨＢＶ ＤＮＡ水平（ＯＲ ＝ １．７２７,９５％ ＣＩ ＝ １．０１７－２．９３３,Ｐ ＝ ０．０４３）是ＮＡ治疗至ＨＢＶ ＤＮＡ不可测后ＡＬＴ仍然异常的独立危险因素。【结论】治疗前有肝硬化,更高的体质指数和治疗１年时ＨＢＶ ＤＮＡ的对数水平是慢性ＨＢＶ感染者核苷（酸）类似物治疗至ＨＢＶ ＤＮＡ ＜ ２０ Ｕ／ｍＬ后,ＡＬＴ持续异常的独立危险因素。     

硫代反义寡脱氧核苷酸在树体内对HDV复制与表达的抑制作用

目的：在树（Ｔｕｐａｉａ）体内观察硫代反义寡脱氧核苷酸（Ｓ－ＡＳＯＤＮ）对ＨＤＶ复制、表达的抑制作用。方法：树同时接种ＨＢＶ阳性血清０．１ｍｌ、ＨＤＶ阳性血清０．３ｍｌ后，将１６只ＨＤＶ／ＨＢＶ感染成功的树随机分为两组，给药组８只树按每只每次经尾静脉注射Ｓ－ＡＳＯＤＮ３ｍｇ，隔日１次，共７次。对照组中２只注射等量生理盐水，另６只不作处理。注射后５、１０、１５、２５ｄ取血及肝组织采用免疫组化、斑点杂交及原位杂交法检测ＨＤＶＡｇ及ＨＤＶＲＮＡ。结果：于注射结束时（１５ｄ）给药组有７只树肝内ＨＤＶＡｇ及ＨＤＶＲ－ＮＡ转为阴性，对照组８只树中仅１只转为阴性。停止使用Ｓ－ＡＳＯＤＮ１０ｄ后，给药组２只阴转树肝内又可检出ＨＤＶＡｇ和ＨＤＶＲＮＡ，对照组仍有７只可检出。结论：Ｓ－ＡＳＯＤＮ在树体内能有效抑制ＨＤＶ复制及表达，但作用并不完全，可能与用药剂量不足，时间不够长及仅用硫代修饰尚不能直接导向靶基因有关     

沈阳地区乙型肝炎病毒DNA前C区变异研究

用限制性酶切片段长度多态性分析对沈阳地区７０例血清经巢式聚合酶链反应扩增ＨＢＶ ＤＮＡ阳性的乙型肝炎患者的Ｃ基因前Ｃ区１８９６位点进行分析。结果：（１）急性乙型肝有Ｃ区变异检出率为４％（１／２０），慢性迁延肝炎为２５％（５／２０），慢性活动性肝炎为３８％（５／１３），肝硬化为３３％（４／１２）；（２）ＡＬＴ升高组中，ＨＢｅＡｇ及抗ＨＢｅ均阴性患者和ＨＢｅＡｇ阴性，抗ＨＢｅ阳性患者ＨＢＶ ＤＮＡ前Ｃ     

儿童特发性血小板减少性紫癜病因学的初步研究

应用 Ｐ Ｃ Ｒ 和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 技术对３２ 例急性特发性血小板减少性紫癜（ Ｉ Ｔ Ｐ） 患儿的外周血进行了人细小病毒 Ｂ１９（ Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９） 、 Ｅ Ｂ 病毒（ Ｅ Ｂ Ｖ） 、巨细胞病毒（ Ｃ Ｍ Ｖ） 及乙型肝炎病毒（ Ｈ Ｂ Ｖ） 系列检测。结果：病例组 Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９ Ｄ Ｎ Ａ 阳性８ 例（２５ ．０ ％ ） ,与正常对照组比较有显著性差异（ Ｐ＜ ０ ．０５） 。 Ｅ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 阳性２ 例, Ｃ Ｍ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 阳性３ 例, Ｈ Ｂｓ Ａｇ 和 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 同时阳性２ 例,４种病毒的总阳性率为４６ ．９ ％ （１５／３２ 例） 。提示：近半数儿童 Ｉ Ｔ Ｐ 病例的发生可能与上述病毒感染有关,而 Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９ 较其他病毒与 Ｉ Ｔ Ｐ 的关系更为密切。     

阿昔洛韦联合胸腺肽抗乙肝病毒疗效观察

本文报道了阿昔洛韦联合胸腺肽对慢性乙型肝炎抗病毒疗效，阿昔洛韦１０ｇ，胸腺肽１６ｍｇ静滴，每日一次，连续治疗２月，共治疗３３例，治疗结束后，治疗组ＨＢｅＡｇ阴转１６例，阴转率５５１７％，ＨＢＶ ＤＮＡ阴转１８例，阴转率５４５４％。对照组ＨＢｅＡｇ阴转率９５２％（２／２５），ＨＢＶ ＤＶＡ阴转率９０９％（１／２５），两组比较有显著性差异（ｐ＜００１），表明阿昔洛韦联合胸腺肽是一种有效、价廉、使用方便的抗乙型肝炎病毒药物。     

肝组织中HDAg和HBcAg的检测及其意义

采用免疫酶染色法检查了２２例丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）感染者肝组织连续切片上的ＨＤＡｇ和ＨＢｃＡｇ，同时对照检查了４２例乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）单纯感染者肝组织中的ＨＢｃＡｇ。结果发现ＨＤＡｇ主要存在于细胞核内，阳性细胞散在分布于肝组织中，细胞形态基本正常，少数细胞肿胀。ＨＢＶ合并ＨＤＶ感染者肝组织中的ＨＢｃＡｇ细胞核多呈阳性，细胞浆中较少有ＨＢｃＡｇ的阳性颗粒。在单纯ＨＢＶ感染中，可在其胸核及胞浆中同时查到ＨＢｃＡｇ的阳性颗粒，ＨＢＶ合并ＨＤＶ感染者肝组织中的ＨＢｃＡｇ阳性细胞数为６．６４±３．６０，单纯ＨＢＶ感染者为８．８５±３．７３，两者差异有显著性。对ＨＤＡｇ的表达与血清ＧＰＴ的相关性研究发现，ＨＤＡｇ的阳性细胞数与血清ＧＰＴ水平有相关性（ｒ＝０．４３２）。表明ＨＤＶ合并感染后对ＨＢＶ的复制有抑制作用，ＨＤＶ的细胞毒作用与肝细胞损伤有一定相关性     

54例HBsAg阴性慢性肝炎乙肝病毒感染的分析

用聚合酶链反应方法检测５４例乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阴性的慢性肝炎患者血清中的乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ，结果３１例阳性（５７．４％）。其中单项抗─ＨＢｃ（＋）１０例，检出９例，ＨＢＶ标志物三抗体阳性５例中，检出１例；ＨＢＶ标志物全阴性１４例中检出９例。提示慢性肝炎即使ＨＢｓＡｇ阴性，仍有可能是ＨＢＶ感染，尤其是抗─ＨＢｃ（＋）者。     

急性黄疸型肝炎284例血清学分析

应用ＥＬＩＳＡ法对２８４例急性黄疸型肝炎（急黄肝）患者的血清标本回顾性地检测了甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）、丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）及戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）感染标志。结果，各种肝炎病毒单一感染占７９．６％，重叠感染占１８．７％（其中二重感染１７％，三重感染０．７％，四重感染１．０％）；各种肝炎病毒的检出率依次为：ＨＡＶ５８．８％＞ＨＢＶ３６．６％＞ＨＥＶ１１．３％＞ＨＣＶ１０．９％＞ＨＤＶ２．１％。提示，在我国ＨＡＶ和ＨＢＶ感染可能是急黄肝的最主要病因，单纯甲肝、单纯乙肝及甲乙混合感染可能是急黄肝的主要类型。     

乙型肝炎病毒在成人膜性肾病中的致病作用

为了进一步了解乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）在成人膜性肾病（ＭＮ）发病中的作用。作者应用免疫组化方法对６７例ＭＮ，患者肾组织中的ＨＢＶ抗原进行了检测。年龄小于３０岁者２６例，３０～５０岁者３２例，大于５０岁者９例。肾组织中ＨＢＶ抗原检出率分别是７３．１％（１９／２６），７５％（２４／３２）和３３．３％（３／９）。５０岁以上ＭＮ患者肾组织中ＨＢＶ抗原检出率显著低于５０岁以下年龄组（Ｐ＜０．０５）。ＭＮ患者肾组织中以ＨＢｓＡｇ检出串最高，６７．２％（４５／６７），ＨＢｃＡｇ检出率２２．４％（１５／６７），ＨＢｅＡｇ仅１例阳性；ＨＢＶ抗原总阳性率６８．７％（４６／６７）。以３０例系膜增殖性肾炎（ＭｓＰＧＮ）为对照，ＨＢｓＡｇ检出率１０％（３／３０），ＨＢｃＡｇ、ＨＢｅＡｇ均为阴性。ＨＢＶ抗原总阳性率１０％（３／３０）。ＭＮ组肾组织内ＨＢＶ抗原检出率显著高于ＭｓＰＧＮ组（Ｐ＜０．０１）。本研究结果显示，ＨＢＶ抗原及其相应抗体形成的免疫复合物在膜性肾病，特别是中青年患者的发病机理中起着极其重要的作用，其中ＨＢｓＡｇ可能是最主要的致病抗原。     

广州地区3个鸭种1日龄雏鸭垂直感染鸭乙肝病毒调查

鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）与人乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）同属嗜肝ＤＮＡ病毒科，ＤＨＢＶ感染的鸭，可造成为较好的ＨＢＶ动物模型和作为嗜肝病毒科分子病毒学研究的材料。为查明不同鸭种的垂直感染情况，本文采用斑点杂交方法对广州地区３个主要鸭种１日龄雏鸭携带鸭乙型肝炎病毒（ＤＨＢＶ）进行了调查，广州麻鸭１日龄ＤＨＢＶＤＮＡ阳性率为１４／５０（２８％），樱桃谷鸭１日龄为２／１０（２０％），野水鸭１日龄为８／１０（８０％）。提示野水鸭垂直感染率最高，对追踪ＤＨＢＶ基因同源性和基因变异提供了良好的材料。     

丁型肝炎病毒标志物检测的临床意义

报道在１６０例乙肝中检出３１例ＨＤＶ感染者，慢活肝、肝硬化中阳性率分别为２７．３％（２１／７７）、２５．０％（６／２４），高于慢迁肝中阳性率３．２％（１／３１）（Ｐ＜０．０５）。８例抗ＨＤＩｇＭ阳性者中ＨＤＡｇ阳性者滴度低，ＨＤＡｇ阴性者滴度高；３例抗ＨＤＩｇＧ、ＩｇＭ同时阳性者病情活动且重，单纯抗ＨＤＩｇＧ阳性者病情轻。ＨＢｅＡｇ、ＨＢＶＤＮＡ阳性中ＨＤＶ感染率分别为１９．４％（６／３１）、１０．２％（５／４９），抗ＨＢｅ阳性、ＨＢＶＤＮＡ阴性中ＨＤＶ感染率分别为３０．６％（１９／６２）、２９．３％（２２／７５），提示ＨＤＶ感染对ＨＢＶ复制有抑制作用，对肝脏慢性化起一定促进作用，抗ＨＤＩｇＭ阳性者说明肝内有ＨＤＶ复制，病情活动。     

聚合酶链反应检测血清HBVDNA及与HBV五项标记的关系

对１７４例各型乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）感染者应用聚合酶链反应检测血清ＨＢＶＤＮＡ，及酶联免疫吸附试验检测血清ＨＢＶ五项标记，结果表明ＨＢｅＡｇ阳性者，ＨＢＶＤＮＡ的阳性率为１００．００％；抗－ＨＢｅ阳性者，ＨＢＶＤＮＡ的阳性率为２２．９５％，其中以慢性活动性肝炎及肝硬化患者阳性率较高，分别为５８．３３％和３３．３３％。同时发现血清ＡＬＴ异常者ＨＢＶＤＮＡ的阳性率明显高于血清ＡＬＴ正常者。     

聚合酶链反应检测重型肝炎患者血清HBVDNA

采用ＰＣＲ法检测４８例重型肝炎患者血清中ＢＨＶＤＮＡ存在情况，并与斑点杂交检测进行比较，结果表明：ＰＣＲ检测３９例阳性，检出率为８１．３％（３９／４８）．ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（＋）组ＰＣＲ检测均阳性（８／８），ＨＢｓＡｇ（＋）、ＨＢｅＡｇ（－）组阳性率为８８．０％（２２／２５），抗体阳性组检出率为７２．７％（８／１１），检测灵敏度为１．０ｆｇ；斑点杂交检测１５例阳性，阳性率３０．２％（１５／４８），各组斑点杂交阳性率均低于ＰＣＲ法．提示：（１）大多数重型肝炎患者血清中存在低滴度的病毒颗粒，对重肝发病有一定作用；（２）大部分ＨＢｅＡｇ阴性，抗体阳性的重型肝炎患者血清仍有传染性，应考虑抗病毒治疗．