当归补血汤不同制剂对骨髓抑制小鼠造血调控的实验研究

[目的]通过比较当归补血汤煎剂及颗粒剂对骨髓抑制小鼠造血机能调控的影响来比较它们之间的疗效差异.[方法]本实验采用造血祖细胞培养术、外周血像的计数法、酶联免疫吸附法(ELISA)等方法对造血祖细胞集落数、外周血像的变化及造血微环境中红细胞生成素(EPO)、血小板生成素(TPO)、粒细胞集落刺激因子(GM-CSF)的变化进行了检测.[结果]煎剂、颗粒剂能平衡骨髓微环境中EPO、TPO、GM-CSF.的表达;促进骨髓造血细胞从G0/G1期进入G2/M期和S期;促进造血祖细胞增殖,从而提高骨髓抑制小鼠外周血像和骨髓像.[结论]当归补血汤煎剂、颗粒剂均能改善骨髓抑制小鼠的造血机能,其中配方颗粒疗效较为突出.     

四物汤对γ射线照射致血虚证小鼠造血细胞作用的研究

探讨四物汤预防和治疗血虚证的作用机理。用⁶⁰Coγ射线全身照射小鼠造成血虚证模型;荧光标记并用流式细胞仪测定CD34⁺细胞在骨髓有核细胞中的比例;细胞固定后PI染色测定细胞周期;Annexin V-FITC试剂盒和DNA凝胶电泳检测骨髓细胞的凋亡。结果:四物汤对小鼠骨髓造血干祖细胞、外周血细胞的恢复有明显促进作用;有保护骨髓和促进骨髓细胞由G₁期进入S期的效应;四物汤可减轻射线引起的细胞凋亡;促进骨髓造血干祖细胞的增殖,抑制骨髓造血干祖细胞的凋亡是四物汤预防和治疗血虚证的机制之一     

当归补血汤促进小鼠骨髓移植后造血组织重建的研究

目的:探讨当归补血汤对小鼠同基因骨髓移植(BMT)后骨髓造血组织重建的影响。方法:建立典型同基因BMT小鼠模型,随机分成BMT模型对照组和BMT+当归补血汤组,另取正常小鼠外周血及骨髓作空白对照。分别给以生理盐水、当归补血汤10g·kg^-1·d^-1灌胃治疗。于BMT后第1,11,22天观察外周血细胞、骨髓单个核细胞(BMMNC),镜下观察小鼠骨髓切片。结果:BMT+当归补血汤组第11,22天外周血白细胞、红细胞、血小板、BMMNC水平均显著高于BMT模型对照组(P<0.05或P<0.01),骨髓造血组织学情况也明显好于对照组。结论:当归补血汤有促进造血组织重建的作用。     

生血丸对骨髓抑制小鼠造血功能的调控作用

目的观察生血丸对60Co合并环磷酰胺致骨髓抑制小鼠造血功能的影响,探讨该方促进全血细胞上调的作用机制。方法通过全自动血细胞分析仪检测外周血象;流式细胞术检测骨髓细胞细胞周期;ELISA(酶联免疫吸附法)检测骨髓基质中红细胞生成素(EPO)、血小板生成素(TPO)、粒细胞生长因子(G-CSF)的量。结果 生血丸能明显改善骨髓抑制小鼠外周血中白细胞(WBC)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HB)、血小板计数(PLT)、骨髓有核细胞(BMC)的量(P0.05),生血丸组升红细胞疗效更为突出(P0.05);生血丸组能解除G0/G1期细胞阻滞,促进G0/G1期细胞进入增殖周期;生血丸能有效平衡微环境中TPO的量;能改善EPO的表达;对骨髓抑制小鼠骨髓细胞上清中G-CSF有明显的正调控作用。结论生血丸能提高骨髓抑制小鼠外周血血细胞和骨髓有核细胞计数;可促进骨髓抑制小鼠骨髓细胞从G0/G1期进入增殖周期;并能有效调节骨髓微环境中TPO、EPO和G-CSF的表达,从而促进骨髓抑制小鼠的造血功能。     

当归补血汤促进造血功能的成分及其作用的研究

目的 :探讨当归补血汤不同的组分或成分对血虚模型小鼠造血功能的作用及其机理。方法 :采用整体实验法、MTT比色法、³H-TdR参入法、半固体造血细胞集落形成技术等 ,测定血虚小鼠外周血象、骨髓有核细胞数和造血干 /祖细胞集落水平。结果 :当归补血汤的多糖与非多糖组分均有补血作用 ,多糖组分作用较强 ,尤以当归多糖的作用更为显著。非多糖组分中以阿魏酸作用最强 ,黄芪异黄酮等也有一定的作用。以上各成分可在不同的作用环节上促进造血细胞的形成。结论 :当归补血汤通过多成分、多环节改善血虚动物的造血功能。     

圣愈汤不同剂型对骨髓抑制小鼠骨髓细胞周期和凋亡影响的研究

目的:观察圣愈汤配方颗粒与煎剂对骨髓抑制小鼠造血功能的影响,比较两者的功效。方法:采用60Coγ照射和注射环磷酰胺制备骨髓抑制小鼠模型,应用血液学、流式细胞术等方法探讨圣愈汤不同剂型对骨髓抑制小鼠外周血、骨髓有核细胞数、骨髓细胞周期和凋亡率的影响。结果:圣愈汤煎剂和配方颗粒剂均能促进骨髓造血细胞从G0/G1期进入G2/M期和S期,抑制造血细胞凋亡,提高骨髓抑制小鼠外周血中的白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板数和骨髓有核细胞数。结论:圣愈汤煎剂、配方颗粒剂均能改善骨髓抑制小鼠的造血机能,两种剂型在促进骨髓造血细胞进入细胞增殖周期和抑制骨髓造血细胞凋亡等方面无明显差异。     

当归补血汤肝损伤小鼠含药血清抑制肝组织LPO生成的作用

应用CCl₄肝损伤病理模型小鼠制备不同剂量的当归补血汤含药血清,进行了含药血清药理实验研究。结果表明,13.2g、26.4g、52.8g饮片/kg体重当归补血汤CCl₄肝损伤小鼠含药血清具有明显抑制小鼠肝组织LPO生成的作用。     

当归补血汤含药血清对血虚小鼠骨髓造血功能的影响

目的:观察当归补血汤含药血清对血虚模型小鼠骨髓造血功能的影响,阐述当归补血汤补气生血作用机理。方法:连续4天腹腔注射环磷酰胺30mg/kg复制化学性血虚小鼠模型;灌胃给予15g/kg、7.5g/kg、3.75g/kg当归补血汤水煎液,一日两次,第4天腹主动脉取血,分离含药血清;将各剂量当归补血汤含药血清加入到血虚模型小鼠骨髓细胞的培养体系中,观察各组含药血清对骨髓造血祖细胞CFU-GM、CFU-E、CFU-B及骨髓有核细胞DNA合成的影响。结果:当归补血汤15g/kg含药血清5%组、10%组,当归补血汤7.5g/kg含药血清10%组、15%组,以及当归补血汤3.75g/kg含药血清15%组对血虚小鼠骨髓CFU-GM的集落生成均具有促进作用;当归补血汤15g/kg含药血清10%组、20%组,当归补血汤7.5g/kg含药血清20%组、30%组可明显升高骨髓CFUE和BFU-E集落个数;当归补血汤15g/kg含药血清0.5%组,7.5g/kg含药血清1%组、2%组及3.75g/kg含药血清1%组、2%组对血虚小鼠骨髓有核细胞DNA的合成具有促进作用。结论:当归补血汤含药血清能够促进骨髓粒系、红系造血祖细胞的增殖与分化,促进骨髓有核细胞DNA的增殖,达到其补气生血的功效。     

当归补血汤对再障小鼠骨髓造血及线粒体自噬的实验研究

目的:探讨当归补血汤对再生障碍性贫血小鼠骨髓造血及骨髓单个核细胞线粒体自噬的影响。方法:化学方法制备再障小鼠模型,观察2.7g/kg、5.4g/kg、10.8g/kg当归补血汤对再障小鼠一般症状、外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(HCG)、血小板(PLT)和单侧股骨骨髓单个核细胞(BMMNC)数量的影响,光学显微镜下观察其对再障小鼠骨髓病理的影响,估算造血组织增生度,透射电镜下观察其对小鼠骨髓单个核细胞线粒体自噬的影响。结果:当归补血汤可有效改善再障小鼠的骨髓病理形态,提高造血组织增生度,抑制再障造成的线粒体过度自噬。结论:当归补血汤可以促进再障小鼠骨髓造血功能恢复,线粒体自噬的改变可能是机制之一。     

四物汤及其单味药补血作用的研究进展

四物汤是由熟地黄、当归、白芍、川芎组成的经典补血方剂。四物汤及其单味药对升高外周血象、促进骨髓造血祖细胞的增殖均有显著作用,可通过调节多种造血生长因子及骨髓造血微环境而促进造血。本文综述了四物汤及其单味药补血作用及机制的研究进展。参考文献 32篇。     

针灸对化疗后骨髓抑制及白细胞的影响(英文)

目的:观察针刺及艾灸疗法对化疗骨髓抑制及白细胞计数的影响, 并探讨其作用机制。方法:采用动物实验和临床研究相结合的方法, 观察针灸对化疗中骨髓及白细胞的影响, 用生物培养法检测造血干/祖细胞数量、血清集落刺激因子的活性。结果:与模型组比较, 针刺及艾灸组外周血白细胞提前1 d开始回升。针灸促进中性粒细胞分裂增殖最明显。结论:针灸抗化疗骨髓抑制, 提升白细胞计数的效应可能与促进骨髓细胞向外周血中释放、延长白细胞寿命, 提高血清集落刺激因子的活性, 促使造血干/祖细胞尽快增殖, 减轻化疗药物对造血干/祖细胞的损伤等有关。     

四物汤对环磷酰胺致血虚证小鼠骨髓蛋白质组的影响

目的：研究四物汤对环磷酰胺（CTX）损伤致血虚证小鼠骨髓蛋白质组的影响,旨在分子水平上探讨四物汤促进骨髓造血的作用机制。方法：采用CTX 250 mg·kg^-1腹腔注射制成化学损伤型血虚证小鼠模型,利用蛋白质组学技术研究四物汤治疗后的差异蛋白质组。结果：研究发现CTX使小鼠骨髓中12个蛋白表达上调、3个蛋白表达下调,四物汤可使CTX造模后这些表达改变的蛋白有不同程度恢复。结论：四物汤可能通过影响与细胞凋亡、造血干祖细胞增殖分化有关的蛋白质而促进骨髓造血。     

Experimental study of the bone marrow protective effect of a traditional Chinese compound preparation

This study investigated the effect of Wei Gan Li on bone marrow haemopoiesis in myelosuppressed anaemic mice induced by ⁶⁰Coγ, cyclophosphamide and chloramphenicol. After treatment with Wei Gan Li, colony forming units of granulocyte macrophages, erythroid cells, burst forming unit‐erythroid cells, megakaryocytes and the proliferation of bone marrow stromal cells were measured by in vitro cell culture techniques. Bone marrow haemopoietic stem cells were measured by flow cytometry. The peripheral blood cell count was found to have significantly recovered after Wei Gan Li administration and the proliferation of bone marrow haemopoietic stem/progenitor cells and BMSC were also significantly increased. Wei Gan Li was therefore found to promote the recovery of bone marrow haemopoietic function in myelosuppressed anaemic mice. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

Radioprotective effects of dammarane sapogenins against 60Co‐induced myelosuppression in mice

Radiotherapy frequently induces failure of hematopoietic system and leads to myelosuppression. The objective of this study was to investigate the protective effect of dammarane sapogenins (DS), the hydrolysed product of the constituent ginsenosides of Panax ginseng, which are produced by gut metabolism, on radiation‐induced hematopoietic injury. Mice were exposed to 3.5 Gy ⁶⁰Co γ‐rays of total body radiation at a dose rate of 1.60 Gy per minute and treated with DS or granulocyte colony‐stimulating factor immediately after radiation. The general condition of the mice, the peripheral blood cell counts, multiple colony forming unit (CFU) assays of hematopoietic progenitor cells, hematopoietic stem cell counts, bone marrow histology, and spleen colony forming unit counts were then investigated. Our results indicated that administration with DS could ameliorate ⁶⁰Co‐irradiation induced damage and significantly increase the number of peripheral blood cells (white blood cells and platelets), 5 types of hematopoietic progenitor cells CFU (CFU‐GM, CFU‐E, BFU‐E, CFU‐Meg, and CFU‐GEMM), hematopoietic stem cell (Lin^?c‐kit⁺Scal‐1⁺) numbers, and CFUs in the spleen, as well as improved bone marrow histopathology. All together, these results confirmed the enhancement of DS on hematopoiesis.     

Protective Effects of Tannins in Sanguisorbae Radix on Myelosuppression Mice

Objective To explore the protective effects of tannins in Sanguisorba Radix(TSR) on myelosuppression mice induced by cyclophosphamide(CTX). Methods TSR was iggiven at the dose of 20 mg/kg for 10 d after ip administration of CTX(200 mg/kg). Results TSR could significantly increase the numbers of white blood cells, red blood cells, and platelets of myelosuppression in mice. And it could accelerate bone marrow haemopoietic stem/progenitor cells(HSPCs) in myelosuppression mice and enhance cell proliferation by promoting cell cycles from G0/G1 phase to access into S and G2/M phases, then the reduced number of HSPCs induced by CTX was reversed. Moreover, TSR could increase the mRNA and protein expression levels of O(6)-methylguanine-DNA methyltransferase(MGMT) in HSPCs of myelosuppression mice. Conclsion TSRhas a protective function against CTX-induced myelosuppression. The mechanism might be related to protecting hematopoietic stem cells of bone marrow, stimulating hematopoiesis recovery, as well as preventing the apoptosis of hematopoietic stem cells induced by CTX.     

补髓生血颗粒治疗慢性再生障碍性贫血患者67例

目的:观察补髓生血颗粒治疗慢性再生障碍性贫血(CAA)患者的临床疗效及骨髓单个核细胞(BMNC)中Ras同源基因家族成员(Rho)-鸟苷酸三磷酸酶(GTP)相关酶类如细胞分裂周期蛋白(CDC42),Ras相关的C3肉毒杆菌毒素底物(Rac)以及Rho家族成员A(Rho A)的蛋白表达。方法:将134例CAA患者按随机数字表法分为试验组67例和对照组67例,另设20名健康志愿者作为正常对照组。试验组采用补髓生血颗粒治疗,对照组采用再造生血片治疗,两组疗程均为6个月。观察治疗前后临床疗效、中医症状积分、中医证候疗效、外周血、骨髓增生程度变化,采用Western-blot方法检测CAA患者治疗前后BMNC中Rho-GTP相关酶类(CDC42,Rho A,Rac)的蛋白表达。结果:试验组临床疗效及中医证候疗效均优于对照组(均P0.05);经治疗后,两组中医症状平均积分及外周血均明显改善(P0.05),试验组中医症状平均积分及外周血白细胞计数(WBC)及血红蛋白含量(HGB)的改善优于对照组(均P0.05),两组血小板计数(PLT)改善程度无显著性差异;两组骨髓象改善比较无显著性差异;两组治疗前CDC42,Rho A,Rac的相对蛋白含量表达均低于正常对照组(均P0.05),治疗后两组CDC42,Rho A和试验组中Rac的相对蛋白含量表达明显升高(均P0.05),而对照组中Rac的表达较治疗前无明显变化,两组治疗后CDC42,Rho A,Rac仍低于正常对照组(均P0.05),且试验组CDC42及Rac的表达改善优于对照组。结论:补髓生血颗粒治疗CAA疗效显著,且一定程度上能改善CAA患者的骨髓造血功能。CAA患者BMNC中Rho A,CDC42及Rac的蛋白均表达异常,提示Rho GTP酶异常表达可能与CAA发病相关,补髓生血颗粒可能通过调节Rho-GTP相关酶类CDC42,Rho A,Rac的表达来改善造血干细胞与造血微环境调节进而改善其骨髓造血功能。     

复方活血汤对免疫诱导再生障碍性贫血小鼠骨髓微环境的作用研究

目的 :探讨临床上治疗再生障碍性贫血 (再障 )加用活血化瘀药物提高疗效的机制。方法 :建立免疫介导的再障小鼠模型 ,胃饲 1 0 0 %复方活血汤注射液每次 0 2ml,每天 2次 ,第 1 0天观察骨髓组织学、体外成纤维细胞集落形成单位 (CFU -F)、培养基质细胞层的粘附能力 ,骨髓氧分压 (PO2 )。结果 :复方活血汤组小鼠白细胞计数 ,骨髓有核细胞计数 ,骨髓造血组织容量、CFU -F计数 ,均较再障组有明显升高 (P <0 0 1 ) ;且基质细胞粘附功能、骨髓PO2 已恢复至正常。结论 :复方活血汤可促进再障小鼠骨髓微环境的修复及供氧 ,从而促进骨髓造血。     

补髓生血颗粒对慢性再障患者粘附分子VLA-4mRNA表达的影响

造血干/祖细胞及骨髓造血微环境中粘附分子表达异常,可能参与了再障骨髓造血功能衰竭的病理过程。研究采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测慢性再障患者治疗前后骨髓单个核细胞VLA-4的mRNA表达水平。结果表明,慢性再障患者VLA-4的mRNA蛋白均呈低表达状态,补髓生血颗粒能提高其表达。结论提示,慢性再障患者存在粘附功能异常,补髓生血颗粒可能通过调节骨髓基质细胞粘附分子的表达来改善慢性再障造血细胞与造血微环境的粘附功能状态。     

四物汤中糖类物质对辐射小鼠造血功能的影响

目的初步探讨四物汤中糖类物质与四物汤补血作用的关系。方法四物汤部位分离采用醇沉法、萃取法和大孔吸附树脂法。用辐射小鼠血虚证模型考察活性。结果将前期发现的具有提高辐射血虚模型小鼠外周血白细胞数和促进骨髓造血祖细胞增殖作用的四物汤部位C 2(正丁醇部位),用吸附树脂法分离为C 2-1(糖部分)和C 2-2(非糖部分)两个部位。活性研究表明部位C 2-1具有提高模型小鼠外周血白细胞数和促进骨髓造血祖细胞增殖的作用,部位C 2-2仅显示促进骨髓造血祖细胞增殖的作用。按照部位C 2中糖类的组成和质量分数,将D-果糖、D-葡萄糖和蔗糖混合,活性研究表明混合糖具有促进模型小鼠骨髓造血祖细胞增殖的作用,但对外周血白细胞的作用不显著。结论单、双糖类物质对四物汤促进辐射小鼠造血功能的作用有一定贡献。