HCMV感染及AngⅡ对人脑血管平滑肌细胞SM22α表达的影响

目的探讨人巨细胞病毒（HCMV）感染和血管紧张素受体Ⅱ型（AngⅡ）对人脑动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）中SM22α表达的影响。方法采用RT-PCR等技术观察VSMCs在更昔洛韦（GCV）、AngⅡ以及AT1和AT2受体拮抗剂（valsartan与P123319）作用下其SM22α的表达。结果病毒感染5dVSMCs中SM22α基因表达量较感染3d和1d时明显上调。经AngⅡ诱导1h和6h后，VSMCs中SM22α相对表达量较未诱导组明显上调。AngⅡ＋valsartan组SM22α相对表达量高于AngⅡ诱导组，AngⅡ＋P123319组SM22α相对表达量低于AngⅡ诱导组；AngⅡ诱导12h和24h后，3组间SM22α相对表达量差异无统计学意义。结论HCMV感染可使VSMCs中SM22α基因表达上调，AngⅡ对VSMCs的早期作用可能通过AT2受体途径激活SM22α基因表达。     

外源性Ang Ⅱ诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化的研究

目的在体外成功分离培养并扩增神经干细胞（NSCs）的基础上,研究外源性血管紧张素Ⅱ（Ang Ⅱ）对NSCs向多巴胺（DA）能神经元分化的影响。方法（1）分离培养新生1d SD大鼠脑组织NSCs,免疫细胞学方法测定NSCs特异性标志物神经上皮干细胞蛋白（Nestin）表达及其分化为神经元、神经胶质细胞的能力;（2）按培养液中Ang Ⅱ的浓度不同,分5个浓度（100、200、400、600、800nmol/L）对第二代NSCs进行诱导分化。10d后采用免疫细胞学方法检测DA能神经元标志物酪氨酸羟化酶（TH）和神经胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达,半定量RT-PCR（SQ-PCR）测定分化细胞中TH mRNA的相对表达量。结果外源性Ang Ⅱ诱导提高NSCs向TH阳性细胞分化的比率,TH mRNA相对表达量亦增加,以Ang Ⅱ浓度为400nmol/L及600nmol/L的诱导效果最明显,TH阳性细胞率分别为10.77%和11.34%,TH mRNA相对表达量分别为（0.4023±0.0515）和（0.3971±0.0319）,两组间比较无统计学意义（P〉0.05）;其中400nmol/L Ang Ⅱ组分化细胞中GFAP阳性细胞率高于对照组,有统计学意义（P〈0.05）。结论外源性AngⅡ促进NSCs向DA能神经元分化,在400～600nmol/L浓度范围内AngⅡ的诱导效能更显著;AngⅡ促进NSCs向DA能神经元分化的机制可能与同时促进星型胶质细胞（AS）分化有关。     

局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑内肾素-血管紧张素系统的变化及厄贝沙坦干预的影响

目的 研究局灶性脑缺血再灌注大鼠脑内肾素-血管紧张素的变化,探讨厄贝沙坦干预的影响及其脑保护机??方法将健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注(IR)组、厄贝沙坦预处理组(厄贝沙坦组)[30 mg/(kg·d)连续灌胃3周].用线栓法制作右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,进行神经功能缺损程度评分,TCC染色法测定梗死体积,逆转录-聚合酶链反应方法测定脑组织和外周血白细胞血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)和2型受体(AT2R)mRNA表达,放免法测定脑组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平及肾素活性.结果 (1)与IR组比较, 厄贝沙坦组神经功能缺损程度评分显著改善,梗死体积减少.(2)再灌注后24 h和72 h, IR组大鼠的缺血侧和对侧皮质、下丘脑、脑干及外周血白细胞AT1R mRNA表达和AT2R mRNA表达均显著性高于假手术组(均P<0.01);而厄贝沙坦组IR后各时间点上述部位AT1R mRNA表达明显低于IR组(均P<0.01),AT2R mRNA表达高于IR组(均P<0.01).(3)在IR后 24 h和72 h,IR组大鼠脑组织和外周血AngⅡ水平、外周血肾素活性均显著性增高;厄贝沙坦组大鼠脑组织、外周血AngⅡ和肾素活性与IR组比较差异无统计学意义.结论 脑缺血大鼠脑内AngⅡ、AT1R、AT2R表达增高,厄贝沙坦干预对脑缺血的神经保护作用可能与拮抗AT1R、抑制AT1R mRNA表达、上调AT2R mRNA表达有关.     

L6大鼠成肌细胞胰岛素信号传导通路中磷脂酰肌醇3激酶、蛋白激酶B和葡萄糖转运蛋白4的表达**★

背景：血管紧张素Ⅱ可损伤胰岛素信号中的下游信号分子引起胰岛素抵抗，但其机制不清。 目的：观察血管紧张素Ⅱ对L6大鼠成肌细胞胰岛素信号传导通路中磷脂酰肌醇3激酶、蛋白激酶B和葡萄糖转运蛋白4的影响。 方法：L6细胞培养及诱导分化肌管，根据干预措施不同实验分为对照组、胰岛素组、胰岛素+血管紧张素Ⅱ组及胰岛素+血管紧张素Ⅱ+H89组。采用RT-PCR检测4组磷脂酰肌醇3激酶、蛋白激酶B mRNA表达，免疫荧光检测胰岛素受体底物1、酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1、葡萄糖转运蛋白4表达。 结果与结论：胰岛素组、胰岛素+血管紧张素Ⅱ组及胰岛素+血管紧张素Ⅱ+H89组的磷脂酰肌醇3激酶mRNA表达均较对照组显著升高(P < 0.05)。各组间蛋白激酶B mRNA表达差异无显著性意义(P > 0.05)。相比对照组，其余3组间胰岛素受体底物1、酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1和葡萄糖转运蛋白4(膜蛋白)表达均升高(P < 0.05)；胰岛素+血管紧张素Ⅱ+H89组酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1和葡萄糖转运蛋白4表达低于胰岛素组但高于胰岛素+血管紧张素Ⅱ组(P < 0.05)。结果显示，血管紧张素Ⅱ在骨骼肌细胞中通过JAK2-PKA通路引起胰岛素下游信号传导受阻，葡萄糖转运蛋白4表达减少，葡萄糖转运障碍，进而导致胰岛素抵抗。     

ACE及AT1受体在肌营养不良中表达的临床病理意义

目的揭示肾素-血管紧张素系统（RAS）在肌营养不良（MD）中的作用。方法应用免疫组织化学法、双免疫荧光标记和Western blot分析检测Duchenne型肌营养不良（DMD）、Becker型肌营养不良（BMD）和先天性肌营养不良（CMD）患者肌肉活检标本中血管紧张素转移酶（ACE）及血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）1型（AT1）受体的表达及细胞定位。结果免疫组织化学和双免疫荧光标记显示正常肌肉的血管内皮细胞为ACE阳性，而AT1受体只在正常肌肉的血管平滑肌细胞中表达。免疫组织化学法和Western blot分析均显示在MD的萎缩肌肉中ACE和AT1受体的免疫反应明显增强，ACE和AT1受体均在再生纤维的膜、细胞浆和细胞核，成纤维细胞，巨噬细胞和巨噬细胞浸润的坏死纤维中强烈表达。双免疫荧光标记显示DMD和CMD肌肉的肌内膜和肌束膜中大多数激活的成纤维细胞表达ACE和AT1受体，特别是AT1更强烈。AT1受体的免疫反应基本与ACE的反应相平行。结论局部ACE和AT1受体表达增加，表明肌肉组织中RAS在MD时被激活，可能在MD的发病巾起作用。     

小檗碱对颈动脉粥样硬化家兔血管紧张素的影响

目的探讨小檗碱预防颈动脉粥样硬化形成的作用机制。方法将32只雄性新西兰大白兔随机分成4组：正常组、颈动脉粥样硬化组（模型组）、生理盐水组（对照组）、小檗碱预防组（小檗碱组）；除了正常组给予正常饮食外，其余各组行高脂饲料喂养加颈动脉内膜空气干燥术建立颈动脉粥样硬化模型，在此基础上对照组和小檗碱组分别肌注生理盐水和小檗碱，术后4周麻醉处死；取动脉血及颈动脉组织分别测定循环型和组织型血管紧张素Ⅰ转换酶（ACE）活性和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）含量，挑选部分颈动脉行HE染色作为模型阳性筛选。结果模型组血管病变以泡沫细胞为主，形成动脉粥样斑块；对照组血管病变是以泡沫细胞为主的动脉粥样硬化灶；小檗碱组血管主要显示内膜明显增厚；模型组组织型ACE活性和AngⅡ含量明显高于小檗碱组和正常组（P〈0．05）。结论小檗碱可抑制ACE活性，特别是颈动脉ACE活性，降低组织中AngⅡ含量，预防颈动脉粥样硬化形成。     

肾素-血管紧张素系统阻断药物在抗高血压治疗中的应用

过去20余年，肾素-血管紧张素一醛固酮（renin-angiotensin-aldosteron，RAA）系统被认为在高血压、心血管疾病和心。肾疾病的发病中占有重要地位。而。肾素一血管紧张素一醛固酮轴已变为药理学干预的重要靶点，其中积累最多的药物治疗经验当首推血管紧张素转换酶抑制药（ACEI）。1981年问世的血管紧张素转换酶抑制药卡托普利（captopril）以其抑制转换酶使血管紧张素Ⅰ（AngⅠ）不能转变为血管紧张素Ⅱ（AngⅡ），从而达到降低血压的目的而受人瞩目。如今被认可的血管紧张素转换酶抑制药已有10种（表1）。其后，1995年首次公布的血管紧张素Ⅱ受体阻断药（angiotensin Ⅱ receptorblocker，ARB）氯沙坦（losartan）以其对肾素-血管紧张素-醛固酮轴新的干预靶点而受到医学界的关注，近年来对血管紧张素Ⅱ受体阻断药的开发更为迅速。此外，这类药物还被确认具有降低血压以外的靶器官保护作用，尤其是具有延缓进行性心、肾血管性疾病的病程，从而使其临床应用适应证从高血压扩展到充血性心力衰竭、心肌梗死后和糖尿病性。肾病等领域。笔仅对目前最常用的肾素-血管紧张素系统（renin—angioten-sinsystem，RAS）阻断药在高血压治疗中的应用进行阐述，而对于醛固酮及阻断其受体的药物则归于利尿药中叙述。     

氯沙坦对兔动脉粥样硬化血管AT1 mRNA表达的影响

目的探讨氯沙坦抗动脉粥样硬化(AS)作用的分子机制。方法48只日本雄性长耳大白兔随机分为4组,A组为胆固醇组(12只),喂以含1%高胆固醇的兔饲料;B、C组(各12只)在喂以高胆固醇饲料的同时喂以10mg.kg-1.d-1、25mg.kg-1.d-1氯沙坦;D组(10只)喂以标准普通饲料。12周实验结束时处死动物,分离胸主动脉制作组织切片及电镜切片,用原位RT-PCR的方法对兔胸组动脉Ⅰ型血管紧张素Ⅱ受体(AT1)mRNA的表达进行半定量和定位研究,用透射电镜方法观察血管内皮细胞(VEC)和血管平滑肌(VSMC)的超微结构。结果(1)与D组相比,A组的AT1mRNA阳性表达率明显增高,两组相比有显著性差异(P<0.01),主要分布在增生的内膜和临近内弹力板处的VSMC,呈核、浆表达;药物干预后,B、C组的AT1mRNA阳性表达率显著低于A组(P<0.05),与D组比较无显著性差异(P>0.05);(3)A组VEC肿胀、脱落、脂质沉积;VSMC内粗面内质网增多,肌丝减少,VSMC向合成型转化;B、C组内皮变化较A组为轻,内弹力板基本完整,紧邻内弹力板的VSMC虽有向合成型过度的趋势,细胞器较D组增多,但肌丝含量比A组明显增多。结论高胆固醇血症可促使兔血管组织AT1mRNA的表达增加,加速VSMC的表型转化,从而促进AS的发生与发展,氯沙坦可下调兔血管组织AT1mRNA的表达,从而减轻和延缓AS的进展,这可能是氯沙坦抗AS作用的又一分子机制。     

血管内皮细胞内皮素分泌功能与茶多酚及血管紧张素Ⅱ的相关性

背景：内皮素是一种强效血管收缩物质，血管紧张素Ⅱ可以刺激血管内皮细胞分泌内皮素，通过检测血液或细胞培养液中的内皮素含量，可以间接反映血管内皮细胞的功能及损伤情况，因此，增强血管内皮细胞对损伤因素的抵抗作用意义重大。茶多酚是茶叶药效的主要活性成分，具有抗动脉粥样硬化、对抗血管内皮细胞损伤、预防心血管疾病等作用。 目的：通过建立血管紧张素Ⅱ诱导血管内皮细胞损伤模型，观察了血管紧张素Ⅱ作用不同时间后血管内皮细胞分泌内皮素含量的变化以及不同浓度的茶多酚对这种变化的影响，以探讨茶多酚对血管内皮细胞的保护作用。 设计：观察性实验。 单位：解放军海军总医院航空潜水医学中心。 材料：实验于2005-03/09在解放军海军总医院航空潜水医学中心实验室完成。主要材料：血管紧张素Ⅱ（Sigma公司）；茶多酚（浙江大学茶学系）；血管内皮细胞（美国CBI公司的人大动脉血管内皮细胞体系）。 方法：将培养的血管内皮细胞分为4个组：①对照组：不加特殊试剂，加入等体积的细胞培养液，分别在加液前和加液后0.5，6，24 h提取上清液100μL。②血管紧张素Ⅱ组：在细胞培养液中加入血管紧张素Ⅱ，使培养液中血管紧张素Ⅱ的终浓度为10-7 mol/L，余同对照组。③高浓度茶多酚+血管紧张素Ⅱ组：将茶多酚加入细胞培养液中，使培养液中茶多酚终浓度为50 mg/L，余同血管紧张素Ⅱ组。④低浓度茶多酚+血管紧张素Ⅱ组：加入茶多酚，使培养液中茶多酚终浓度为25 mg/L，余同血管紧张素Ⅱ组。采用放射免疫法测定血管紧张素Ⅱ及茶多酚作用前及作用后0.5，6，24 h各组细胞培养上清中的内皮素含量。 主要观察指标：内皮素含量。 结果：①血管紧张素Ⅱ组培养上清的内皮素含量显著高于对照组（P < 0.01）。②高浓度茶多酚在作用6 h和24 h 后，内皮素含量较血管紧张素Ⅱ组显著下降（P < 0.01）；而低浓度茶多酚在各作用时间点均较高浓度茶多酚组及血管紧张素Ⅱ组显著下降（P < 0.01）。 结论：茶多酚对血管紧张素Ⅱ所致血管内皮细胞分泌内皮素的功能具有抑制作用，提示茶多酚对血管内皮细胞具有保护作用；且低浓度茶多酚的保护作用要强于高浓度茶多酚。     

高血压合并左室肥厚患者晚期糖基化产物与血管紧张素Ⅱ的相关性研究

目的探讨血清晚期糖基化产物（AGEs）与血浆血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）在原发性高血压（EH）合并左心室肥厚（LVH）患者中的水平及二者的相关性。方法分别用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）及放射免疫法（RIA）测定50例健康者（对照组）,85例高血压患者的血清AGEs及血浆AngⅡ含量。根据LVMI把高血压患者分为52例EH患者（EHN-LVH组）和33例EH合并LVH患者（EHLVH组）。结果与对照组比较,EH组AngⅡ、AGEs含量均增高,EHNLVH组P〈0.05,EH-LVH组P〈0.01;相关性分析显示EH患者AGEs与AngⅡ呈正相关;LVMI值与AGEs、AngⅡ呈正相关。结论AGEs和AngⅡ与EH及EH-LVH的发生发展有关,且二者存在相互作用。     

胶质瘤中促血管生成素2和血管内皮生长因子基因表达的意义

目的 探讨胶质瘤促血管生成素（Ang2）和血管内皮细胞生长因子（VEGF）基因表达的意义。方法 采用逆转录-酶促链反应（RT-PCR）检测52例人脑胶质瘤中Ang2、VEGF基因的表达，同时采用SABC免疫组化方法检测Ang2蛋白的表达。结果 50例脑胶质瘤表达Ang2 mRNA片段．52例脑胶质瘤表达VEGF mRNA片段。Ang2 mRNA与VEGF mRNA表达呈显著性正相关（r=0，816，P〈0．01）；高度恶性胶质瘤Ang2mRNA、VEGF mRNA表达均显著性高于低度恶性者（P〈0．01）。免疫组化染色显示Ang2蛋白主要分布在高度恶性胶质瘤组织的瘤细胞和内皮细胞．而在低度恶性胶质瘤中呈低水平表达。结论 Ang2与VEGF可能在胶质瘤血管生成中起协同性促进作用。     

人工合成E-选择素对兔颈总动脉动脉瘤壁平滑肌细胞增殖活性的影响

目的 探讨人工合成E-选择素对兔颈总动脉动脉瘤壁平滑肌细胞增殖活性的影响.方法 新西兰白兔54只,雌雄各半,随机分成9组(每组6只),对照组;实验1、2、3、4周组;治疗l、2、3、4周组.用弹性蛋白酶(EA)滴注法建立兔右颈总动脉瘤模型,并用CTA和HE染色观察模型动脉瘤的形态学改变和病理变化,免疫组化分析基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、细胞增殖核抗原(PCNA)和平滑肌α肌动蛋白(α-SMA)表达,Real-time PCR检测骨桥蛋白(OPN)和MMP-2 mRNA表达.结果 大体测量和CTA结果显示:治疗组与实验组相比,其动脉瘤高度和宽度均有不同程度减小;免疫组化结果显示:治疗组动脉瘤壁MMP-2蛋白表达与同期实验组相比均有减少,治疗1、2周组动脉瘤壁PCNA蛋白表达低于同期实验组,而治疗3、4周组动脉瘤壁PCNA蛋白表达与同期实验组比较表达升高;治疗组动脉瘤壁α-SMA蛋白表达低于同期实验组.Real-time PCR结果显示:治疗组动脉瘤壁OPN mRNA表达与同期实验组相比均有增加,而治疗组动脉瘤壁MMP-2 mRNA表达分别低于同期实验组.结论 人工合成E-选择素可以抑制兔颈总动脉瘤壁平滑肌细胞数目和层数的减少,有效促进兔颈总动脉瘤壁平滑肌细胞的增殖,使血管平滑肌细胞由收缩型向合成型转化,进而对动脉瘤壁起到一定的修复作用.     

急性脑梗死患者血浆肾素、血管紧张素Ⅱ的变化及其临床意义

目的　观察急性脑梗死 (ACI)患者血浆肾素活性 (PRA)及血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )浓度的变化及其临床意义。方法　采用放射免疫法检测 55例ACI患者急性期、恢复期的PRA、AngⅡ浓度 ,并与病灶大小及神经功能缺损程度进行相关分析。结果　 (1 )ACI患者发病 3日内PRA和AngⅡ浓度明显高于对照组 (分别P<0 0 1和P <0 0 5)和恢复期 (均P <0 0 5) ,恢复期AngⅡ浓度仍高于对照组 (P <0 0 5) ;(2 )ACI的PAR及AngⅡ浓度与患者是否伴高血压病无关 ,而与神经功能缺损程度呈正相关 (分别为r=0 .72 ,r =0 .63) ;(3)PRA和AngⅡ浓度在大梗死灶组 (>3 .0cm2 )与中梗死灶组 (1 .5cm2 ～ 3 .0cm2 )之间无差异 ,但两组均高于腔隙性脑梗死组 (<1 .5cm2 ) (分别P <0 0 1和P <0 0 5)。结论　ACI早期PRA和AngⅡ水平应激性升高 ,提示肾素 血管紧张素系统参与了ACI形成的病理过程 ,可作为ACI患者病情监测指标之一     

氯沙坦对大鼠脑缺血再灌注后血管紧张素Ⅱ和加压素的影响及脑保护作用

目的 探讨氯沙坦对大鼠脑缺血再灌注后血浆、脑组织中血管紧张素Ⅱ（angiotensin Ⅱ，ANGⅡ）、脑组织中血管加压素（vasopressin，AVP）的影响和脑保护作用及两者的相互关系。方法 制作大鼠大脑中动脉栓塞模型（middle cerebral artery occlusion，MCA0），用Longa法评分，测定神经功能；干湿法测定脑水肿；TUNEL法凋亡染色。观察脑梗死灶半暗带区凋亡细胞的变化；用放免法测定血浆、脑匀浆ANGⅡ及脑匀浆AVP，并作统计分析。结果 结果显示实验组的神经功能缺损、脑水肿、半暗带区细胞凋亡程度均明显轻于缺血未治疗组（P〈0．05，P〈0．01，P〈0．01），血浆中的ANG Ⅱ水平则显著高于缺血未治疗组（P〈0．01），但脑局部ANGⅡ实验组与缺血未治疗组间无显著差异（P〉0．05）。实验组脑组织中的AVP明显低于缺血未治疗组（P〈0．01）。结论 氯沙坦可通过影响大鼠缺血再灌注脑局部ANGⅡ和AVP发挥一定的脑保护作用。     

干扰长单一序列区83基因对人巨细胞病毒感染后人脑血管平滑肌促血管生成素及血管内皮生长因子表达的影响

目的 长单一序列区（unique l ong r egion 8 3,UL83）基因是人巨细胞病毒（human c ytomegalovirus, HCMV）感染再激活标志。本研究拟探索UL83对HCMV感染后人脑血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells,VSMC）中不稳定斑块破裂相关因子,如促血管生成素（angiopoietin,Ang）以及血管内皮生 长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的影响。 方法 ①采用流式细胞仪确定amidite荧光素（fluorescein amidite,FAM）标记的小干扰核糖核酸（small interfering ribonucleic acid,siRNA）通过脂质体转入人脑VSMC的转染效率;②将3条化学合成siRNA通 过脂质体转染入已感染HCMV AD169株（MOI＝10）的人脑VSMC当中,结合空白组、接毒组及接毒无效 干扰组筛选抑制UL83基因最强siRNA;③分别检测HCMV AD169株（MOI＝10）感染人脑VSMC后0 h、6 h、 12 h、24 h、48 h以及72 h Ang-1、Ang-2及VEGF-A信使核糖核酸（messenger ribonucleic acid,mRNA）及蛋 白表达变化;④分别检测空白组、接毒高效干扰组、接毒无效干扰组及接毒组在感染48 h后Ang-1、 Ang-2及VEGF-A的mRNA及感染72 h后上述蛋白表达情况。 结果 转染6 h后,95.59%人脑VSMC转染了FAM标记siRNA。感染HCMV AD169株（MOI＝10）的人脑 VSMC在转染siRNA 48 h后,siRNA转染组与接毒组相比,UL83 mRNA相对表达量最多下降78.7%;转染 si RNA72 h后,UL83编码的pp65蛋白相对表达量最多下降81.3%。人脑VSMC感染HCMV AD169株（MOI＝ 10）0 h、6 h、12 h、24 h、48 h以及72 h时后,Ang-1 mRNA及蛋白相对表达量逐渐下降（P <0.01）,Ang-2 及VEGF-A mRNA及蛋白相对表达量则逐渐增加（P <0.01）。而通过转染高效siRNA抑制HCMV AD169株 UL83基因,使得Ang-1表达下降,Ang-2和VEGF-A表达增加均被抑制。 结论 H CMV AD169株具有同时促进人脑VSMC中Ang-1表达降低,Ang-2及VEGF-A表达增加功能。而通 过siRNA抑制HCMV AD169株UL83基因表达能够阻止上述变化。提示HCMV可能通过UL83基因造成靶细 胞产生促血管新生微环境。     

血管紧张素Ⅱ干预内皮细胞外泌体通过Drp1依赖的线粒体分裂介导神经元凋亡

目的 探究正常及高血压条件下内皮细胞外泌体(Exo)对神经元的作用及其可能机制。方法 收集正常条件和用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)模拟高血压环境培养内皮细胞后的培养液，经超速离心和Exo提取试剂盒提纯Exo。将神经元分为无Exo组、对照Exo组(正常内皮细胞Exo)、AngⅡ干预Exo组(AngⅡ干预内皮细胞)。用TUNEL法检测神经元凋亡，Western blot检测MFN2、FIS1和Drp1蛋白表达，免疫荧光检测神经元、神经元线粒体形态和Drp1蛋白表达，Image J计算线粒体长短轴比例及圆度，计算线粒体和Drp1共定位表征参数。结果 与无Exo组和对照Exo组比较，AngⅡ干预Exo组的神经元凋亡显著增加(P<0.05)。AngⅡ干预Exo组神经元线粒体分裂明显增加(P<0.01)。3组神经元MFN2、FIS1和Drp1蛋白表达水平差异无显著性，但Drp1与神经元线粒体共定位荧光和共定位表征参数显示，AngⅡ干预Exo组的Drp1与神经元线粒体共定位明显增加。结论 AngⅡ干预的内皮细胞释放的Exo能显著诱导原代神经元凋亡，高血压介导的神经退行性损伤的潜在机制可能与A...     

血管紧张素Ⅱ受体在增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成中的作用

背景:最新研究发现，血管紧张素Ⅱ与皮肤纤维化病变的发生和发展有关，然而有关血管紧张素Ⅱ受体在人增生性瘢痕成纤维细胞中的表达及作用鲜见报道。 目的:观察血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体在人增生性瘢痕成纤维细胞中的表达，并探讨它们在成纤维细胞胶原合成中的作用。 设计、时间及地点:对比观察，于2006-08/ 2007-11在解放军广州军区广州总医院医学实验中心完成。 对象:取住院患者增生性瘢痕18例，男10例，女8例，年龄19~47岁，将增生性瘢痕标本分为两组，每组各9例。正常皮肤7例，取自增生性瘢痕切除患者的正常皮肤。所有取材部位未经任何治疗，标本经无菌取材后分成2份，其中一份用40 g/L多聚甲醛固定后用于免疫组织化学检测，另一份用于成纤维细胞培养。 方法:采用免疫组织化学的方法和放射性配体受体结合测定法观察人增生性瘢痕组织中成纤维细胞血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体的表达，并用体外细胞培养技术观察2种受体在人增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成中的作用。 主要观察指标:2种受体在增生性瘢痕组织成纤维细胞中的表达及在人增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成中的作用。 结果:①在增生性瘢痕的成纤维细胞可见1型受体和2型受体表达，阳性染色信号较强。放射性配体受体结合测定法显示在培养的增生性瘢痕的成纤维细胞有1型受体和2型受体，受体密度分别为(10.69±2.15)，(4.9±1.05) fmol/106个细胞。②在培养的人增生性瘢痕成纤维细胞，血管紧张素Ⅱ明显促进成纤维细胞胶原的合成，1型受体阻断剂Valsartan明显抑制血管紧张素Ⅱ的这种促进作用，2型受体拮抗剂PD123319明显增强血管紧张素Ⅱ的这种作用。 结论:在增生性瘢痕的成纤维细胞表达血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体，血管紧张素Ⅱ通过激活2种受体对成纤维细胞胶原的合成产生相反的作用，血管紧张素Ⅱ产生和受体表达比例的变化可能影响瘢痕的形成和成熟。     

大鼠脑缺血再灌注后MMP-9的表达及人工合成E-选择素的干预作用

目的：研究肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）参与大鼠脑缺血再灌注损伤的机制及人工合成E-选择素保护作用的机制。方法：健康SD大鼠,随机分为手术组、假手术组和治疗组。手术组建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型;治疗组术前从股静脉注射人工合成E-选择素;假手术组仅将线栓插到颈外动脉、颈内动脉分叉处,其余步骤同手术组。免疫组化检测脑组织中TNF-α和MMP-9的表达,RT-PCR检测MMP-9mRNA的表达。结果：手术组TNF-α、MMP-9和MMP-9mRNA表达与假手术组比较均有明显升高（P〈0．05）;治疗组TNF-α、MMP-9和MMP-9mRNA表达水平比手术组明显下降（P〈0．05）。相关分析表明,MMP-9mRNA分别与TNF-α和MMP-9的表达呈正相关。结论：大鼠脑缺血再灌注后TNF-α能够在转录水平诱导MMP-9的表达。人工合成E-选择素降低大鼠脑缺血再灌注后缺血脑组织MMP-9表达的机制可能是抑制TNF-α对MMP-9mRNA合成的诱导,从而降低了MMP-9的表达。     

心钠素、血管紧张素Ⅱ与急性脑梗死的关系

目的:通过观察急性脑梗死患者血浆心钠素和血管紧张素Ⅱ的变化,探讨二者与急性脑梗死之间的关系,期望这两者能够有助于临床医生判断患者病情、预后及指导临床治疗。方法:选择首次发病并在24h以内到我院就诊、经头部MR检查证实的急性脑梗死患者60例,并选择同期在我院健康体检且排除了急性脑梗死的58例患者作为对照组。采用双抗体夹心法检测所有患者发病48h以内的血清心钠素和血管紧张素Ⅱ。结果:(1)脑梗死组的心钠素和血管紧张索Ⅱ水平高于对照组,且差异具有统计学意义(P＜0.0l);(2)在脑梗死组中,脑梗死合并高血压患者心钠素和血管紧张素Ⅱ的水平均高于单纯脑梗死患者,但差异无统计学意义(P＞0.05)。结论:心钠素和血管紧张素Ⅱ与脑组织损伤有关。在急性脑梗死患者中,血清中的心钠素和血管紧张素Ⅱ均显著升高。     

脑梗塞患者血浆内皮素和血管紧张素Ⅱ变化的临床观察

目的探讨内皮素（ＥＴ）和血管紧张素Ⅱ（ＡⅡ）在脑梗塞中的作用及相互关系。方法应用放射免疫分析法同步测定３０例脑梗塞患者和３０例正常对照者血浆ＥＴ和ＡⅡ含量。结果脑梗塞急性期血浆ＥＴ和ＡⅡ含量均较正常对照组显著升高（Ｐ均＜０．０１），且中－重度脑梗塞组两者均显著高于轻度组（Ｐ均＜０．０１）。急性期血浆ＥＴ与ＡⅡ呈显著正相关（ｒ＝０．７０３３，Ｐ＜０．０１），恢复期（ｒ＝０．２４６５，Ｐ＞０．０５）和正常对照组（ｒ＝０．１８３７，Ｐ＞０．０５）无显著相关。结论脑梗塞时血浆ＥＴ和ＡⅡ增高并与病情严重程度相一致。内源性ＥＴ与ＡⅡ具有正反馈调节关系，两者相互作用可能在脑梗塞发病和进展过程中起重要作用