慢性HBV感染前C区变异与病毒复制水平关系

探讨HBV前C基因变异与病毒复制水平的关系在慢性HBV感染者中的意义。应用错配聚合酶链反应（PCR）－限制性片段长度多态性（RFLP）分析与荧光定量聚合酶链反应检测HBVDNA相结合,对30例HBsAg（＋）、抗－HBe( )及抗－HBc( )慢性HBV感染者,其中无症状携带者（AsC)9例、慢性乙型肝炎（CHB）12例及慢性重症肝炎（CHF）9例进行前C区基因变异与HBVDNA水平关系进行分析。AsC组3例（33．33％）,CHB组9例（75％）及CHF组8例（88．89％）有A83(nt1896)变异。荧光定量PCR结果表明HBVDNA含量在CHF组中最高。HBV前C变异与HBV不同感染状态中都可见,其病毒复制水平与肝病活动相关。     

HBV前C区基因变异与血清肝纤维化标志物的相关性研究

探讨HBV前C区基因变异与肝纤维化的相关性。应用聚合酶链反应—单链构象多肽性分析(PCR—SSCP)银染技术检测HBV前C区基因变异和放射免疫法检测血清肝纤维化标志物(血清透明质酸,HA和血清Ⅲ型前胶原肋,PCⅢ)检测103例HBeAg阴性而HBV—DNA阳性的慢性乙肝患者的血清,进行前c区基因变异与血清肝纤维化标志物水平的相关性分析。结果发现,70．87％发生了HBV前C区变异,其中包括变异株与野生株混合感染的病例,而这些病例中的血清肝纤维化标志物(HA、PCⅢ)水平显著高于单纯野生株感染者(P＜0．01),HBV前C区基因变异检出率与血清肝纤维化标志物水平呈正相关,提示HBV前C区基因变异与肝纤维化密切相关。     

PCR检测HBV前C/C基因启动子区变异与肝细胞癌的关系

目的研究聚合酶链反应(PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)前C/C基因启动子区变异与肝细胞癌(HCC)的关系。方法纳入2016年3月至2018年9月本院35例HCC患者(观察组)与35例HBV感染者(对照组),所有患者均提取血清DNA,采用PCR扩增对HBV前C/C基因启动子区进行测序,对比两组患者基因变异位点和基因型分布。结果观察组HBV前C/C子区24例发生变异,其中G189617例,G18997例,对照组HBV前C/C子区7例变异,其中G18962例,G18995例,两组HBV前C/C子区变异率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HCC患者基因亚型Ba型7例,C1亚型16例,C2型12例,对照组分别为4例,17例及14例。两组基因分型比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论HBV前C/C基因启动子区变异与HCC发生密切相关,其中HBV前C/C子区G1896变异可增加癌变风险。     

慢性乙型肝炎治疗过程中病毒基因变异及临床意义的研究

目的研究干扰素和拉米夫定治疗慢性乙型肝炎HBV前C区A83点突变及YMDD变异的发生情况,并探讨联合治疗对慢性HBV基因变异的影响.方法90例慢性乙型肝炎病人进行随机化分组,30例肌肉注射干扰素,30例常规口服拉米夫定100 mg/d,30例给予拉米夫定和干扰素联合治疗.治疗前检测血清丙氨酸转移酶水平,HBV DNA滴度(定量)水平,前C区A83点突变和YMDD变异,治疗后第1、3、6、9个月分别进行肝功能、HBV DNA定量检测,应用错配聚合酶链反应及限制性片断长度多态性(mPCR-RFLP)检测HBV基因变异的发生情况,对干扰素治疗、拉米夫定治疗和联合治疗后的慢性HBV变异情况进行比较,进行统计学分析.结果干扰素和拉米夫定治疗慢性乙型肝炎都可引起前C区A83点突变和YMDD变异,干扰素引起的变异以前C区A83突变为主,拉米夫定引起的变异以YMDD变异为主,而联合治疗则较少引起HBV变异,差异有统计学意义(P＜0.05).结论HBV变异是药物治疗选择的结果,干扰素、拉米夫定治疗后使变异株成为优势毒株,药效下降,病毒DNA滴度反跳,拉米夫定联合干扰素治疗HBV,基因变异机会则相对较少.     

新疆维吾尔族慢性乙型肝炎病毒感染者病毒基因型及亚型分布特点

目的 了解新疆维吾尔自治区(简称新疆)维吾尔族慢性HBV感染者基因型、基因亚型分布情况及其与预后的关系.方法 采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析方法,分析109例新疆维吾尔族慢性HBV感染者感染病毒的基因型及基因亚型.多标本均数比较采用单向方差分析.结果 109例新疆维吾尔族慢性HBV感染者,其中慢性乙型肝炎88例,乙型肝炎肝硬化17例,肝癌4例.13基因型HBV感染者9例,占8.3%,C基因型感染者50例,占45.9%,C/D基因型重组体32例,占29.4%,D基因型感染者18例,占16.5%,C基因型、C/D基因型重组体为主要基因型.经过聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析及测序检测,鉴定9份B基因型HBV,均为Ba亚型.50例C基因型HBV感染者病毒基因亚型分布情况:Cl亚型27例,占54%,C2亚型23例,Cl亚型比C2亚型感染者多.在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、肝癌患者中,HBV Ba基因亚型感染者分别为8例(9.1%)、1例(5.8%)和0例;C2基因亚型感染者分别为17例(19.3%)、8例(47.5%)和2例(50%);C/D基因型感染者分别为29例(33.0%)、2例(11.9%)和1例(25%),随着病情加重,Ba基因亚型和C/D基因型感染者所占比例呈下降趋势,C2基因亚型感染者所占比例增加.结论 新疆地区维吾尔族慢性HBV感染者以Cl基因亚型为主,新疆维吾尔族慢性HBV感染者存在C/D基因型重组体.C2基因亚型HBV感染预示病情严重,预后差.     

88例乙型肝炎病毒携带者前C区1 896位变异分析

目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)携带者前C区1 896位变异情况.方法 采用聚合酶链反应(PCR)和酶联定量检测法分析,检测88例HBV携带者(其中HBeAg阳性50例,HBeAg阴性38例,HBV DNA均阳性)前C区1 896位变异.结果 50例HBeAg阳性患者中前C区1 896位变异率为8%,38例HBeAg阴性患者中,其前C区1 896位变异率为31.5%,88例HBV携带者总变异检出率为18.2%.HBV携带者HBeAg阴性组变异率明显高于HBeAg阳性组(P＜0.05).结论 HBV携带者普遍存在前C区1 896变异.     

深圳地区乙型肝炎病毒DNA基因分型与临床的关系

目的检测血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA并进行基因分型。方法采用聚合酶链反应(PCR)扩增HBV DNA后，用不同的探针，利用微板杂交法将其分为6个亚型。结果150例HBV DNA阳性病人中，B型50例、C型36例．D型13例、F型3例和A型1例，没有发现E型。另有47例为混合型，其中以B、D型(18例)、C、D型(20例)为主，分别占混合型的38．30％与42．6％。受检病人中，B型感染者丙氨酸氨基转移酶水平明显增高；B型感染者比C型感染者抗HBe阳性率高，分别为64．0％和30．5％，而C型感染者比B型感染者乙型肝炎e抗原阳性率高，分别为47．2％和22．0％；年龄、性别与基因型关系不明显。结论深圳地区HBV基因亚型以B型为主，C型次之，其他较少。基因型与肝炎程度有一定关系。     

慢性乙型肝炎HBV前C区基因突变研究(摘要)

目的:观察HBV前C区变异与患者病情轻重及血清e系统的关系,探讨改进的聚合酶链反应一单链构象多态性分析(PCR—SSCP)银染技术用于筛选HBV前C区突变的可行性和效果。方法:用酚—氯仿抽提法提取血清HBV DNA,根据adr亚型HBV基因核苷酸序列,选择Pre-C起始密码上游及C区保守序列设计引物P_1、P_2进行聚合酶链反应(PCR),使全前C基因区段(876p)增幅,用甲酰胺     

慢性乙型肝炎病毒感染者病毒前C区和基本核心启动子区变异检测及意义

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）前C区和基本核心启动子（BCP）区变异与基因型及疾病进展间的关系。方法 收集HBV携带者（ASC）、慢性乙型肝炎（CHB）、肝炎肝硬化（LC）、肝细胞肝癌（HCC）患者血清148份，用半巢式聚合酶链反应扩增HBV前C／C基因部分片段，产物纯化后直接测序，检测前C区A1896及BCP区T1762／A1764变异。用S基因聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）方法确定HBV基因型。结果 有128份血清能够成功分型和测序，其中B基因型60份，C基因型68份。在B基因型感染者中前C区A1896变异检出率（48．33％）明显高于C基因型感染者（29．41％，X^2=4．83，P〈0．05）；而BCP区T1762／A1764变异检出率却明显低于C基因型感染者，差异亦有统计学意义（30．00％：73．54%，X^2=24．25。P〈0．05）。前C区A1896变异在CHB、LC、HCC中的阳性检出率分别为46．88％（15/32）、39．39％（13／33）、51．52％（17／33）。与ASC的13．33％（4／30）相比，P分别〈0．05，差异有统计学意义。BCP区T1762／A1764变异检出率在HCC、LC组分别为87．88％（29／33）和72．73％（24／33）．明显高于CHB组的37．50％（12／32）及ASC组10.00％（3／30）（P〈0．05）。结论 前C区A1896变异常见于B基因型感染者，而BCP区T1762/A1764变异C基因型感染者多见。除ASC外．前C区A1896变异与疾病进展关系不大．而BCP区T1762/A1764变异与乙型肝炎进展及顶后相关。     

慢性乙型肝炎病毒前C区基因突变与中医证型的关系

目的 :探讨乙型肝炎病毒 ( HBV)前 C区基因突变与慢性乙型肝炎中医证型的关系。方法 :将 162例慢性乙型肝炎患者按中医辨证分为 5种证型 ,应用聚合酶链反应 -单链构象多态分析 ( PCR- SSCP)银染技术检测 HBV前 C区基因变异。结果 :慢性乙型肝炎湿热中阻型患者 HBV前 C区突变率为 61.1% ( 3 3 / 5 4 ) ;瘀血阻络型为5 7.6% ( 19/ 3 3 ) ;肝郁脾虚型为 2 9.8% ( 14 / 4 7) ;肝肾阴虚型为 3 8.1% ( 8/ 2 1) ;脾肾阳虚型为 14 .3 % ( 1/ 7)。结论 :HBV前 C区突变与慢性乙型肝炎中医证型密切相关。湿热中阻型和瘀血阻络型突变率明显高于肝郁脾虚型和脾肾阳虚型。     

HBV C基因启动子变异及基因型与肝硬化的相关性研究

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)C基因启动子(CP)和前C区基因变异及HBV基因型与肝硬化的关系。方法通过DNA扩增、基因序列分析检测44例慢性乙型肝炎(CH)、29例肝硬化(LC)患者的血清HBVS基因序列确定其基因型,测定HBVCP和前C区序列确定其变异状况。结果LC患者CP双变异(nt1762A→T和1764G→A)发生率(72.4%)显著高于CH(45.5%),P<0.05;LC患者C型检出率(69.0%)显著高于CH(43.2%),P<0.05;C型HBV感染者的CP双变异发生率(69.2%)显著高于B型感染者(44.1%),P<0.05。结论CP双变异与C基因型密切相关,并且导致病情向肝硬化发展。     

感染两种HBV C基因亚型患者病毒变异特点比较

目的调查乙型肝炎病毒C1和C2亚型感染者的临床、病理和前C基因区的变异特点。方法运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法，并结合HBV前C／C区序列测定，对广东地区63例慢性乙型肝炎患者C基因亚型和前C区变异特点进行分析，并对两种基因亚型感染者的多项临床和病理检测指标进行比较。结果所选C1和C2亚型感染者的年龄和性别构成无差异，其肝功能指标、HBV DNA水平以及肝组织炎症活动度和纤维化分期评分也无显著性差异。在前C基因区变异方面，C1亚型毒株发生C基因核心启动子变异机率高于C2亚型，C2亚型毒株发生前C终止密码变异的机率显著高于C1亚型，但两种变异的总发生率在两种亚型间并无显著性差别。结论两种C基因亚型的临床致病性并无明显差异，但在形成HBeAg阴性HBV感染方面两种毒株会采取不同的变异模式。     

乙型肝炎病毒基因型对乙型肝炎病毒变异的影响

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)基因型对病毒前核心区(前C区,nt1896)及基本核心启动子(BCP,nt1762/1764)变异的影响.方法416例血清HBsAg阳性、HBV DNA定量大于1.0×104拷贝/ml的患者,采用微流基因芯片检测HBV基因型、前C区及BCP变异.结果416例HBV感染者中406例有基因分型结果:B型20.9%、C型65.9%、BC混合型10.8%,10例患者未分出基因型.302例为HBeAg(-)且HBV DNA( )患者,其中248例(82.12%)有前C区或BCP变异,41.06%为前C区变异,31.12?P变异,2种同时变异为9.94%.B型患者前C区变异率为22.9%(20/87),与C型患者前C区变异率39.4%(108/274)及B、C混合型变异率40.0%相比均有显著差异(P＜0.01).在BCP变异及双变异,C型患者变异率均大于B型患者,但差异无统计学意义(P＞0.05).B、C混合型患者前C区及BCP变异率与C型相似.结论HBV基因型可影响病毒前C区及BCP变异,以C型为著.     

HBV感染者免疫学标志与DNA含量BCP基因变异的关系

近年来 ,乙型肝炎病毒 (HBV)前 C区 C基因启动子(BCP)基因变异的研究报道较多 ,已证实其与暴发性肝炎及重症肝炎有关。为探讨 HBV感染者免疫学标志 HBV- DNA含量及其与 BCP基因变异的关系 ,我们采用 PCR微板核酸分子杂交 EL ISA检测技术 ,对 15 1例 HBV感染者的血清进行了 HBV- DNA含量及 BCP基因变异的检测。现将结果报告如下。资料与方法 :本组患者均为我院肝炎门诊、肝病中心及内科消化组的住院患者 ,男 112例、女 39例 ,年龄 16～ 6 7岁。乙肝免疫学标志检测采用酶免法 ,HBV- DNA和 BCP基因变异检测采用 PCR微板核…     

家系感染乙型肝炎病毒基因变异与HLA-Ⅱ类等位基因的关系

目的研究家系内慢性乙型肝炎病毒基因变异特征及与HLA-II类分子基因多态性的关系。方法采用PCR扩增和产物测序检测HBV前C区1896位及BCP区1762/1764位变异,分析家系内慢性HBV感染者121例（实验组）病毒变异特征及与非家系慢性乙肝患者83例（对照组）病毒变异频率差异;用PCR/SSP对家系内慢性HBV感染者的HLA-DQA1和DQB1等位基因多态性进行测定;分析HLA-II类分子基因多态性与家系内慢性乙型肝炎病毒基因变异的关系。结果实验组前C区1896位变异、BCP区1762/1764位双变异及联合变异率均高于对照组;HLA-DQA1＊0501和DQB1＊0301等位基因频率和家系慢性HBV感染者前C区1896位、BCP区1762/1764位及联合变异有关;母亲为第一代的感染家系中,子女的前C区1896位及BCP区1762/1764位变异与母亲是否有该位点变异差异无显著性。结论家系感染HBV患者中,HBV前C区1896位、BCP区1762/1764位双突变及联合变异频率明显高于无家系感染的慢性乙型肝炎患者;家系内感染HBV前C区1896位、BCP区1762和1764位变异并非都是由上一代遗传或传播而来,而主要是与个体的免疫状况有关。     

乙型肝炎病毒X区基因变异与原发性肝癌的关系研究

目的初步研究乙型肝炎病毒(HBV)X区基因变异与原发性肝癌的关系。方法收集39例HBV感染患者的肝(癌)石蜡组织标本,其中慢性乙型肝炎(CHB)14例、肝细胞癌(HCC)25例。采用聚合酶链式反应(PCR)方法扩增组织中HBV X区基因,并对PCR产物进行DNA测序,分析常见变异位点的变异情况。结果 1.HCC组与CHB组相比,在X区发生插入/缺失变异,联合变异的位点及例数增多,并且A1762T与G1764A常发生双突变。2.HBV X区变异频率较高位点依次是C1655T/G、A1605C/G、A1762T、G1764A、A1772B、A1645C、C1687A、G1776T。结论 HBV X区存在点突变、插入/缺失变异及联合变异,可能在HCC的发生和发展过程中起重要作用。     

中国贵州地区乙型肝炎病毒前S基因变异的研究

目的研究HBV前S基因变异与基因型及疾病类型的关系。方法建立聚合酶链反应-限制性片段长度多态性检测HBV前S2起始码变异的方法;用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析HBV前S区缺失变异;用直接测序验证方法的准确性。用S基因聚合酶链反应-限制性片段长度多态性确定HBV基因型。检测160份HBV感染者血清,并结合基因型、疾病类型分析。结果160份标本中B基因型81份,C基因型79份。C基因型前S2起始码变异的检出率为43.04%,高于B型的1.23%(P<0.05)。前S区缺失变异在C基因型中的检出率也高于B型(36.71%与19.75%,P<0.05)。前S2起始码变异在HCC、LC组的检出率分别为50.00%、39.47%,明显高于慢性肝炎组的8.00%、慢性无症状乙型肝炎表面抗原携带者组的0(P值均<0.05)。前S区缺失变异检出率在HCC、LC组分别为53.13%和42.11%,也高于慢性肝炎组的18.00%及慢性无症状乙型肝炎表面抗原携带者组的7.50%(P值均<0.05)。经多因素Logistic回归分析,C基因型和严重肝病是影响前S基因变异的重要因素(OR分别为6.26、11.99,P值均<0.01)。测序结果与酶切,聚丙烯酰胺凝胶电泳结果一致。结论与B基因型相比,C型HBV感染者更易发生前S2起始码、前S区缺失变异;前S基因变异与肝病进展及预后相关。     

阿德福韦治疗过程中乙型肝炎病毒核酸序列的变化

目的研究新药阿德福韦抗病毒过程中乙型肝炎病毒(HBV)核酸序列的变化情况,以有效的指导临床用药。方法选取4例服用阿德福韦患者的系列血清,包括用药前血清及用药后半年(28周)、1年(52周)、2年(92周) 血清,将4例系列血清用一片段聚合酶链反应法进行全基因组克隆、测序;并对测序结果进行基因型及血清型分析、全基因序列同源性及差异性比较、HBV各编码区氨基酸变异等生物信息学分析。结果 4例系列血清的基因型及血清型分析为:1例为C基因型／adrq 血清型,1例为B、C混合基因型／adw2、adrq 昆合血清型,2例为B基因型／adw2血清型。全基因序列同源性比较情况为:同例血清组内序列同源性为97．5％-99．8％;B、C混合型感染者其组内同源性为 90．9％-99．3％。不同例血清组间序列同源性为90．6％-100％。各编码区氨基酸变异情况为:治疗52周时碱基突变数明显高于28周和92周。存在热点突变位点。在P基因的逆转录酶区,有几处非常有意义的有义突变,很可能会影响逆转录酶的活性,而使HBV对阿德福韦产生耐药逃逸。结论 HBV全基因组序列分析发现了几处有意义的氨基酸变异,这可能与HBV对阿德福韦的耐药逃逸有关。     

HBV前C区基因变异与肝功能、TNF—α、sIL—2R的关系

目的：探讨HBV前C区基因变异与患者肝功能、TNF－α、sIL-2R的关系。方法：应用珠益肝胶囊或赛若金治疗36例慢性乙型肝炎患者。在治疗前后检测患者HBV前C区基因变异、肝功能、TNF－α、sIL-2R。结果：HBV前C区基因变异在治疗过程中存在3种情况;16例患者治疗前后均未发生基因变异。8例患者在治疗后发生了基因变异,12例患者在治疗前已经发生基因变异,在治疗后无1例变异阳性转为阴性。治疗后,患者的肝功能、TNF－α、sIL-2R均有改善。结论：HBV前C区基因发生变异与否对患者的肝功能、TNF－α、sIL-2R无明显影响,在治疗过程中药物可能引起HBV前C区基因变异,难以防治基因变异的发生,药物对HBV基因变异患者的肝功能、TNF－α、sIL-2R均有改善作用。     

慢性HBV感染者HBV前C区/基本核心启动子区基因突变与临床应用

目的:探讨2010年10月至2013年6月来我院门诊及住院慢性HBV感染者中HBV前C(Pre C)区/基本核心启动子(BCP)区基因突变与其病程进展的相关性。方法:165例慢性HBV感染者血清生化指标检测,血清HBV DNA含量和HBe Ag定性检测,HBV Pre C区/BCP区突变率比较,分析Pre C区l896、BCP区1762/1764变异在HBV携带者(As C)、慢性乙型肝炎(CHB)和慢性乙型肝炎肝硬化(CHB-LC)患者中的分布。结果:血清生化指标在慢性HBV感染者病程发展中呈现相关性。与As C组比较:CHB组、CHB-LC组患者血清ALT、AST、AFP、TBA水平升高,差异有显著性意义(p0.01),呈显著正相关,而TP、Alb、A/G水平降低,差异有显著性意义(p0.05),呈负相关。HBe Ag(+)、HBe Ag(-)的标本中,BCP的突变率高于前C区突变率,差异有非常显著性意义。BCP区1762/1764双突变的突变率高于Pre C1896突变率。As C、CHB、CHB-LC 3组患者Pre C A1896、BCP区1762/1764变异率依次升高,与As C组比较,CHB组差异有显著性意义(P0.05);CHB-LC组差异有非常显著性意义(P0.01)。结论:对165例慢性HBV感染者观察,HBe Ag(+)/HBe Ag(-)患者及其病程不同发展阶段,Pre C/BCP出现相关联的突变率。特别需要注意的是HBe Ag(-)的慢性HBV感染者BCP区的突变率高于Pre C区的突变率,需要慎防HBV复制的危害性。HBV Pre C区/BCP区突变率可以预测到慢性HBV感染者病情的发展程度,对临床此类患者的研究具有重要意义。