食管癌及癌旁组织中p53、MDR基因改变的研究

目的 :探讨食管癌及癌旁组织中 p53、MDR基因的表达及其临床意义。 方法 :采用免疫组化ABC法及逆转录一聚合酶链反应的方法 ,对 50例食管癌和 37例癌旁组织中p53、MDR基因的表达情况进行检测。结果 :p53基因蛋白在食管癌中有显著表达 70 % (35/ 50 ) ,癌旁组织中有表达 62 % (2 3/37) ;其中在正常组织中占 36 % (5/ 1 4 ) ,在非典型增生中占 78% (1 8/ 2 3)。MDR基因在食管癌高、中、低分化中的表达水平有极显著意义 ,癌与正常组织中有极显著意义。在不同年龄、性别、肿瘤大小上 p53、MDR基因的表达无显著意义。结论 :p53、MDR基因在食管癌中均呈高水平表达 ,癌旁组织中MDR有表达 ,p53基因突变早于组织形态学改变     

FHIT和p53基因在非小细胞肺癌中的表达

目的研究脆性组氨酸三联体(FHIT)基因与p53基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及其作用.方法病理确诊的NSCLC标本113例,免疫组化法检测FHIT和p53基因的蛋白表达,以癌旁正常组织作为对照.结果113例NSCLC中,66例(58%)FHIT蛋白表达降低,35例(31%)p53蛋白表达增多,均以鳞癌和吸烟患者多见(P＜0.01).结论FHIT基因缺失与p53基因异常,可能在NSCLC的发生和发展中起重要作用.     

FHIT和p53基因在非小细胞肺癌中的表达

目的研究脆性组氨酸三联体（FHIT）基因与p53基因在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其作用。方法病理确诊的NSCLC标本113例,免疫组化法检测FHIT和p53基因的蛋白表达,以癌旁正常组织作为对照。结果113例NSCLC中,66例（58％）FHIT蛋白表达降低,35例（31％）p53蛋白表达增多,均以鳞癌和吸烟患者多见（P〈0．01）。结论FHIT基因缺失与p53基因异常,可能在NSCLC的发生和发展中起重要作用。     

人肺癌GSTMl基因多态性与p53突变的相关性

目的 探讨谷胱苷肽S转移酶μ1(GSTMl)基因的多态性与抑癌基因p53突变在人肺癌发生中的关系。方法 收集48例人肺癌标本，HE染色做病理诊断，抽提基因组DNA，PCR扩增GSTMl基因的第4外显子，聚丙烯酰胺凝胶电泳分析基因的多态性。对相应的肺癌标本用免疫组织化学的方法做突变型P53蛋白表达的检测，分析二者的相关性。结果 在人的肺癌组织中，GSTMl基因的缺失率较高，达54．2％；突变型P53蛋白总的表达率为56．3％，其中GSTMl基因缺失者与非缺失者的p53突变率分别为73．1％和36．4％，二者之间有显著性差异，P＜0．05。结论 在人肺癌组织中，GSTMl基因的多态性与p53基因突变明显相关，GSTMl基因的缺失可能会导致p53基因的突变。     

非小细胞肺癌p15基因缺失的研究

目的　研究 p1 5基因的纯合性缺失与非小细胞肺癌的发生、发展和预后的关系。　方法　应用聚合酶链反应 (PCR)对 97例非小细胞肺癌与 1 0例非肿瘤疾病的正常肺组织和 2例畸胎瘤进行 p1 5基因的检测。　结果　 97例非小细胞肺癌中 ,p1 5基因的缺失率为 44.3 % ,而正常肺组织和畸胎瘤均未发生缺失 ;不同病理类型间缺失率差异无统计学意义 ,不同TNM分期中 ,p1 5的缺失率是不同的 ,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期分别为 2 9.4%、40 .0 %和 5 3 .3 % (P <0 .0 5 ) ;有淋巴结转移组的缺失率为 5 2 .2 % ,高于无淋巴结转移组的 2 6.7% ;p1 5基因缺失组的术后 1、3年生存率分别为 88.4%和 3 2 .6% ,较无缺失组的 97.7%和5 1 .2 %为低 (P <0 .0 1 )。　结论　p1 5基因缺失与非小细胞肺癌的发生、发展相关 ,是预后的独立预测指标。     

非小细胞肺癌 BALF 中 RAR-β基因甲基化与p53突变检测及相关性研究?

目的：探讨非小细胞肺癌患者支气管肺泡灌洗液(BALF)中 RAR-β基因甲基化与 p53基因突变检测的临床意义及二者的相关性。方法收集非小细胞肺癌患者(肺癌组)85例及良性疾病患者(良性疾病组)70例的 BALF 标本,采用甲基化特异性 PCR(MSP)方法检测 BALF 中的 RAR-β基因甲基化,PCR 结合 DNA 测序法检测 p53基因突变。结果肺癌组 BALF 中RAR-β基因甲基化率及 p53基因突变率分别为49.4%、36.5%,均显著高于良性疾病组(P <0.01);(Ⅰ+Ⅱ)期 RAR-β基因甲基化率(32.5%)高于同期 p53基因突变率(12.5%)(P <0.05);(Ⅲ+Ⅳ)期 RAR-β基因甲基化率及 p53基因突变率均显著高于(Ⅰ+Ⅱ)期(P <0.01);发生 RAR-β基因甲基化的肺癌患者 p53基因突变率更高(P <0.01);发生 p53基因突变的肺癌患者RAR-β基因甲基化率更高(P <0.01)。结论检测非小细胞肺癌患者 BALF 中 RAR-β基因甲基化与 p53基因突变有助于肺癌的诊断。     

非小细胞肺癌与淋巴结转移癌组织中FHIT基因异常表达的相关性

目的 :检测脆性组氨酸三联体 (FHIT)基因在正常肺组织、非小细胞肺癌 (non smallcelllungcancer)与淋巴结转移癌组织中表达 ,探讨FHIT基因与肺癌发生及转移的关系。方法 :用免疫组化SP(streptavidinperoxidaseconju gatedmethod ,SP)法检测 2 0例无淋巴结转移的肺癌组织 ,2 0例肺癌及其相应的淋巴结转移癌组织和 15例正常肺组织中FHIT基因的表达水平 ,用图像分析系统测量FHIT蛋白表达的阳性率和平均光密度。结果 :FHIT蛋白在正常肺组织、无淋巴结转移的肺癌、肺癌及其相应的淋巴结转移癌组织中的阳性率分别为 89.1%、6 0 .5 %、5 4 .1%、30 .4 % ,平均光密度分别为 (0 .2 74± 0 .0 2 3)、(0 .16 5± 0 .0 16 )、(0 .0 87± 0 .0 0 4 )、(0 .0 4 9± 0 .0 0 7)。肺癌组织FHIT蛋白表达阳性率和强度明显低于正常肺组织 (P <0 .0 1) ,淋巴结转移癌组织FHIT蛋白表达明显低于其它 3组 (P <0 .0 1)。结论 :在肺癌发生、浸润、转移病变阶段中 ,FHIT基因表达下调 ,这揭示肺癌的演进过程与FHIT有密切关系。     

眼睑恶性肿瘤P53基因的表达

1目的　探讨 P5 3基因突变与眼睑恶性肿瘤发生的关系及临床病理学意义。 2方法　采用微波处理免疫组化 L SAB法 ,检测了 10 2例眼睑恶性肿瘤组织中 P5 3基因的表达。 3结果　原位癌及浸润癌 P5 3基因的表达强于正常上皮、轻度不典型增生及中度不典型增生组织 (H c=2 4.45 ,P<0 .0 5 )。鳞状细胞癌 (SCC)中低分化型癌的 P5 3基因表达强于高、中分化型 (H c=7.12 ,P<0 .0 5 )。眼睑 SCC,基底细胞癌及睑板腺癌的表达率分别为5 0 .0 % ,5 6 .6 % ,5 8.8% ,明显高于正常上皮组织及不典型增生组织 (χ2 =16 .73～ 2 5 .5 9,P均 <0 .0 1)。4结论　 P5 3基因突变与眼睑恶性肿瘤发生相关     

血浆游离FHIT基因杂合性缺失在非小细胞肺癌中的临床意义

目的 探讨脆性组氨酸三联体(fragile histidine triad,FHIT)基因在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血浆及组织中杂合性缺失(loss of heterozygosity,LOH)的特点,检测血浆游离FHIT基因的LOH在NSCLC研究中的临床意义.方法 通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)-银染法检测69例NSCLC患者(手术前、后)血浆和新鲜癌组织标本中FHIT基因的3个微卫星位点D3S1300、D3S1234、D3S4103的LOH,并进行比较;15例肺良性病变患者静脉血、组织标本及5例健康志愿者的静脉血标本作对照.对应的组织病理切片进行FHIT蛋白的免疫组化染色.结果 NSCLC患者术前血浆和组织FHIT基因的3个微卫星位点上LOH阳性率分别为53.6%(37/69例)、72.5%(50/69例),其共同检出率达74.0%(37/50例).肺良性病变及健康人血浆中未检出该基因突变,两组相比差异有显著性意义(P<0.05).不同病理类型的肺癌患者手术前后血浆FHIT基因LOH之间差异无统计学意义(P＞0.05);有淋巴结转移的肺癌患者与无淋巴结转移者相比,血浆更易检测到FHIT基因的LOH,差异有统计学意义(P<0.05);不同临床分期患者术前血浆FHIT基因LOH之间差异无统计学意义(P＞0.05),而术后同一患者血浆FHIT基因的LOH的检出率差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化染色发现在78.3%(54/69)NSCLC患者肿瘤组织中检测出FHIT蛋白表达缺失,而在FHIT蛋白表达缺失的54例肿瘤组织中,有39例患者血浆FHIT基因存在1个或2个上述微卫星位点的LOH.结论 NSCLC患者血浆与肿瘤组织中FHIT基因LOH有较高的一致性变化;LOH可能是NSCLC肿瘤组织FHIT蛋白表达下调的重要机制之一,血浆FHIT基因的LOH检测对于评估肺癌的预后、转移具有潜在的价值和广阔的应用前景.     

人类乳头瘤病毒与脆性组氨酸三联体基因蛋白在皮肤鳞状细胞癌中的作用

目的探讨人类乳头瘤病毒(HPV)和脆性组氨酸三联体基因(FHIT)蛋白在皮肤鳞状细胞癌(SCC)中的作用及其之间的关系。方法用免疫组化SP法检测SCC和癌旁组织皮损中HPV及FHIT蛋白的表达。结果HPV和FHIT蛋白在癌旁正常皮肤鳞状上皮组织、非典型增生组织、原位癌及浸润癌组织中的表达具有明显差异性(P<0.05);且FHIT蛋白在分化不同的肿瘤组织表达具有差异性(P<0.01);HPV和FHIT蛋白在肿瘤组织中的表达呈负相关。结论HPV和FHIT共同参与了SCC的发生,FHIT表达状况与SCC的分化程度有关。     

hMLH1和Bax基因在食管不同病变组织中的表达及意义

目的探讨Bax基因及错配修复基因hMLH1在食管不同病变组织中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法,检测正常食管黏膜上皮及食管不同病变组织中hMLH1和Bax的表达情况,并与临床病理参数作相关性分析。结果hMLH1在食管鳞状细胞癌中的阳性表达率显著低于正常食管黏膜组织、非典型增生组织和原位癌组织(P<0.05)。Bax在食管原位癌和食管鳞癌组之中的阳性表达率显著高于正常食管黏膜(P<0.05)。hMLH1和Bax在食管癌中的表达有明显相关性(P<0.05)。结论hMLH1基因突变与食管鳞状上皮癌变有关;Bax基因突变可能与食管鳞癌浸润有关。     

胃癌和胃癌前病变bcl-2基因表达及其对细胞凋亡的调控作用

目的探讨胃癌前病变及胃癌中bcl-2基因表达状况及其与细胞凋亡的关系.方法应用原位杂交和免疫组织化学技术检测10例正常胃粘膜、72例慢性萎缩性胃炎和53例胃癌中bcl-2基因的表达,并采用凋亡细胞原位检测方法对组织切片中的凋亡细胞进行观察和比较.结果bcl-2基因在正常胃粘膜及不同胃粘膜病变中均有不同程度的表达.bcl-2 mRNA在胃癌组织中的表达率为77.36%,显著高于正常胃粘膜、萎缩性胃炎及肠化生(20.00%,25.00%,44.44%,P＜0.01);异型增生组织bcl-2 nRNA表达率为75.00%,显著高于正常胃粘膜及萎缩性胃炎(P＜0.05).胃癌组织bcl-2蛋白表达率为81.13%,显著高于正常胃粘膜、萎缩性胃炎及肠化生(20.00%,31.25%,52.78%,P＜0.01),异型增生组织bcl-2蛋白表达率为75.00%,显著高于正常胃粘膜及萎缩性胃炎(P＜0.01).x2检验表明两种方法检测阳性率差异无显著性.凋亡细胞原位检测结果显示,bcl-2蛋白表达阳性肠化生和胃癌组织中的凋亡细胞指数显著低于bcl-2蛋白阴性组(P＜0.05及P＜0.01),bcl-2蛋白表达状态与细胞凋亡指数呈负相关.结论bcl-2基因对胃癌前组织及胃癌细胞凋亡具有抑制性调控作用,细胞凋亡调控异常在胃癌发病中可能起重要作用.     

Expression of telomerase genes in cancer development in atypical hyperplasia of the mammary duct

目的　观察端粒酶基因在乳腺癌前病变 乳腺导管非典型增生及乳腺癌中的表达 ,探讨其与恶性转化的关系。方法　应用原位杂交方法评价端粒酶基因hTR和hTRT在 5 0例乳腺增生组织 (其中乳腺单纯性增生 6例 ,轻度非典型增生 9例 ,中度非典型增生 12例 ,重度非典型增生 2 3例 )及 2 6例乳腺癌中的表达。结果　在乳腺导管单纯性增生组织中端粒酶基因 (hTR、hTRTmRNA)呈弱表达 (16 6 % )或表达阴性。在乳腺导管轻、中度非典型增生组织中端粒酶基因 (hTR、hTRTmRNA)呈弱表达 (2 2 2 % ,11 1% ;33 3% ,2 5 0 % ) ,在乳腺导管重度非典型增生组织中端粒酶基因 (hTR、hTRTmRNA)表达增强 (6 0 9% ,5 2 1% ) ,在乳腺癌组织中端粒酶基因(hTR、hTRTmRNA)呈较强阳性表达 (88 5 % ,80 8% )。乳腺导管重度非典型增生组织中的端粒酶基因表达与在轻中度非典型增生、乳腺浸润性导管癌组织中的表达比较差异显著 (P <0 0 5 ) ,但与导管内癌表达无显著差异(P >0 0 5 )。结论　端粒酶基因hTR、hTRT的表达与乳腺导管非典型增生细胞的恶性转化有关 ,端粒酶的重新激活可能在乳腺癌的组织发生中起作用     

胃癌组织中Dnmt1基因mRNA和蛋白的表达

目的:探讨正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌组织中Dnmt1基因mRNA及蛋白的表达以及两者之间的关系.方法:应用原位杂交技术及免疫组化SP法检测20例正常胃黏膜、40例不典型增生胃黏膜及60例胃癌组织中Dnmt1基因mRNA及蛋白的表达状况.结果:Dnmt1 mRNA在正常胃黏膜腺上皮中基本呈阴性表达(除部分增生的小凹上皮),其阳性率在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌三组间呈递增趋势,组间有统计学差异(P<0.01).Dnmt1蛋白在正常胃黏膜腺上皮中基本呈阴性表达(除部分增生的小凹上皮和淋巴细胞),其阳性率在正常胃黏膜、不典型增生胃黏膜及胃癌三组间呈递增趋势,组间有统计学差异(P<0.01).Dnmt1 mRNA和蛋白的阳性表达与年龄、性别、肿物的大小、浸润深度、有无脉管转移等临床病理特征无关,而与有无淋巴结转移有关(P<0.05).Spearman等级相关分析显示Dnmt1蛋白与mRNA表达呈正相关(rs=1.000,P<0.01).结论:Dnmt1在胃癌组织中的高表达与胃癌的发生、发展及淋巴结转移密切相关.     

MDM2与P53在宫颈鳞癌中的表达及相关性研究

目的探讨MDM2与P53蛋白在宫颈鳞癌中的表达及相关性，进一步探讨宫颈鳞癌的发生和发展机制。方法选取2003年3月至2006年3月郑州大学第三附属医院50例宫颈鳞癌手术切除标本，50例正常宫颈黏膜组织，30例癌旁非典型增生组织。采用免疫组化SP法检测MDM2与P53蛋白的表达情况。结果宫颈鳞癌组织、癌旁非典型增生组织与正常宫颈黏膜组织中MDM2蚤白阳性表达率依次降低，且癌组织、癌旁非典型增生组织及正常宫颈黏膜组织中MDM2蛋白表达间相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。宫颈鳞癌组织、癌旁非典型增生组织与正常宫颈黏膜组织中P53蛋白阳性表达率依次降低，癌组织、癌旁非典型增生组织及正常宫颈黏膜组织中P53蛋白表达间相比，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MDM2和P53在宫颈黏膜从良性病变到癌前病变到癌的进展过程中发挥重要作用。     

乳腺病变组织中BcL-2,p53蛋白的表达

目的　观察 Bcl- 2 ,p5 3蛋白在浸润前系列乳腺病变(包括正常乳腺组织、导管增生、不典型导管增生、小叶增生、导管原位癌 )组织中的表达 .方法　采用免疫组化方法检测15例正常乳腺组织、18例导管增生、10例不典型导管增生(atypical ductal hyperplasia,ADH)、10例小叶增生 ,45例导管原位癌 (ductal carcinoma in situ,DCIS)的 Bcl- 2和 p5 3蛋白的表达 .结果　 Bcl- 2蛋白在正常乳腺组织、导管增生、ADH、小叶增生组织中均阳性 ,而 p5 3蛋白染色阴性 .DCIS病例中 ,Bcl- 2蛋白表达阳性 34例 (76 % ) ,而 p5 3蛋白阳性 11例(2 4% ) .Bcl- 2蛋白表达与 DCIS组织学分级密切相关 (P<0 .0 1) ,6 7% DICS病例表现为 Bcl- 2 + / p5 3-表达表型 ,还有33%不同于正常的表型 (包括所有 Bcl- 2 - / p5 3+表型 )多代表差分化病例 .结论　 Bcl- 2蛋白在正常乳腺组织、导管增生、ADH、小叶增生组织中均有表达且高于乳腺 DCIS.大部分DCIS病例表现为 Bcl- 2 + / p5 3-表型 ,与正常乳腺上皮、良性增生病变一致     

胃癌前组织和胃癌中Fas基因表达及其与细胞凋亡的关系

目的 探讨胃癌组织及胃癌中Fas基因表达状况及其与细胞凋亡的关系。方法 应用原位杂交和免疫组织化学技术检测10例正常胃粘膜、72例慢性胃炎和53例胃癌中Fas基因的表达,并采用凋亡细胞原位检测方法对组织切片中的凋亡细胞进行观察和比较。结果 正常胃粘膜无Fas基因表达。Fas mRNA在肠化生组织中的表达率为75．00％,显著高于萎缩性胃炎（37．50％,P＜0．01）和胃癌（52．83％,P＜0．05）。Fas蛋白在肠化生组织中的表达率为80．56％,显著高于萎缩性胃炎（37．50％,P＜0．01）、异型增生（55．00％,P＜0．05）和胃癌（45．28％,P＜0．01）。X^2检验表明两种方法检测阳性率差异无显著性。凋亡细胞原位检测结果显示,Fas蛋白表达阳性萎缩性胃炎、肠化生和胃癌组织中的凋亡细胞指数显著高于Fas蛋白阴性组（P＜0．05及P＜0．01）,Fas蛋白表达状态与细胞凋亡指数呈正相关（r=0．393,P＜0．01）。结论 Fas基因对胃癌前组织及胃癌细胞凋亡具有促进性调控作用,细胞凋亡调控异常在胃癌发病中可能起重要作用。     

小肝癌CT表现与端粒酶蛋白基因关系分析

目的探讨端粒酶蛋白hTRT基因表达与小肝癌CT表现的相关性。方法选择具有完整手术资料的20例小肝癌、5例进展期肝癌、3例不典型腺瘤样增生结节、5例正常肝组织,用原位杂交技术检测端粒酶蛋白hTRT基因表达,然后与CT病理表现对照。结果 20例小肝癌中的16例hTRT阳性,阳性率与CT病理表现无显著关系（P〉0.05）。包膜不完整或无包膜的癌灶和癌灶hTRT强阳性表达明显高于包膜完整和无明显强化的癌灶（P〈0.05）。5例进展期肝癌hTRT均呈强阳性。3例有癌细胞侵犯的病灶hTRT呈强阳性。3例不典型腺瘤样增生结节2例呈强阳性,5例正常肝组织hTRT阴性。结论 hTRT阳性表达与CT表现无显著关系,因而,有助于CT表现不典型小肝癌的诊断。hTRT强阳性与肿瘤的侵入性相关,结合CT可客观评价肿瘤生物学行为、恶性程度和预后。     

SELlL基因在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨sel-1样基因(SEL1L)在胃癌组织中的表达及与临床病理因素之间的关系。方法 应用免疫组织化学染色方法及原位杂交方法检测SEL1L在100例胃癌组织、20例非典型增生胃组织和30例正常胃黏膜组织中的表达。结果 SEL1L蛋白在上述组织中的阳性表达率分别为83.0%、85.0%和16.7%,胃癌组织及非典型增生组织中的表达率显著高于正常组(P<0.01);相对应的3组中SEL1L的信使核糖核酸(mRNA)的阳性表达率分别为90.0%、95.0%和10.0%,前2组的表达率显著高于正常组(P<0.01)。结论 SEL1L的过表达可能是胃癌发生的早期表现,检测胃癌中的SEL1L的表达对于评估胃癌的发生和发展具有重要意义。     

HPV16/18与喉鳞状细胞癌发生发展的关系

目的：研究喉鳞状细胞癌的发生与HPV16／18的相关性。方法：采用原位杂交法检测54例喉癌中HPV16／18的表达。结果：54例喉癌组织中30例HPV16／18阳性，喉癌组HPV16／18的阳性表达为55．6％，癌旁不典型增生组为38．1％，二者比较有显著性差异（P〈0．05）；HPV16／18在癌周正常组织、癌旁单纯增生及轻度不典型增生组织中无表达。随着不典型增生程度的增大，HPV16／18阳性表达率增高，轻、中、重度增生分别为0％、7．1％和12．5％；HPV16／18的表达与喉癌的分化程度及有无淋巴结转移无关（P〉0．05）。结论：HPV16／18与喉癌的发生有关，与喉癌的分化程度及有无淋巴结转移无关。