枳实提取液对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响

目的 :探讨枳实提取液 (CAE)对豚鼠心室肌细胞膜L型钙通道电流 (ICa L)的影响。方法 :用酶解法分离单个心室肌细胞 ,采用全细胞膜片钳技术 ,观察枳实提取液对豚鼠心室肌细胞膜ICa L的影响。结果 :①CAE(4×10 3 ,2× 10 2 ,4× 10 2 ,1× 10 1)g/ml增大ICa L,增加率分别为 15 .89%,2 9.0 1%,5 2 .0 3%和 5 9.76 %(P <0 .0 5 )。②CAE 2× 10 1g/ml和 4× 10 1g/ml分别可使峰值ICa L减少 17.33%和 30 .0 9%(P <0 .0 5 )。CAE只改变电流幅度 ,不改变I V曲线形状。结论 :低浓度CAE ,可浓度依赖性的增大豚鼠心室肌细胞L型钙电流 ,有促进钙通道开放的作用。高浓度CAE ,可抑制心室肌细胞L型钙电流 ,有抑制钙通道开放的作用。     

白藜三醇对培养豚鼠心室肌细胞L-型钙电流密度的影响

目的:观察白藜三醇(RES)对培养的豚鼠心室肌细胞L-型钙电流(ICa-L)密度的影响.方法:分离成年豚鼠心室肌细胞,采用全细胞膜片钳技术,记录不同浓度RES孵育心室肌细胞不同时间的ICa-L密度.结果:①培养72 h时,RES 30 μmol/L和100μmol/L使ICa-L密度分别下降13%和27%,呈现浓度依赖性抑制趋势,且RES 100 μmol/L组与对照组比较有统计学差异(P<0.05);②RES 10 μmol/L,30 μmol/L和100μmol/L对ICa-L密度呈现时间依赖性抑制趋势.且RES 100 μmol/L在24 h和72 h之间有统计学差异(P<0.05);结论:白藜三醇对培养豚鼠心室肌细胞L-型钙电流呈现浓度和时间依赖性抑制趋势.     

一种筛选抗心律失常药物新模型的建立

目的　建立一种细胞水平的心律失常模型 ,以用于抗心律失常药物的筛选和评价。方法　酶解法分离单个大鼠心室肌细胞 ,在细胞水平给予传统诱发心律失常药物乌头碱 ,应用膜片钳技术观察记录应用乌头碱后心肌动作电位时程 (APD)、钠电流(INa)、L 型钙电流 (ICa L)、内向整流钾电流 (IK1 )及瞬时外向钾电流 (Ito)的变化。结果　应用乌头碱 1μmol·L- 1 使大鼠单个心室肌细胞 90 %复极化动作电位时程 (APD90 )从给药前的 (15 0 .2 3± 7.0 2 )ms延长至 (2 36 .0 3± 2 3.2 2 )ms(n =8,P <0 .0 1)。应用奎尼丁 10 μmol·L- 1 后动作电位…     

CPU86017对肥厚豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的:观察药物CPU86017对左-甲状腺素(L-thy)所致的肥厚豚鼠心室肌细胞L-型钙电流的影响.方法:ip L-thy,诱导豚鼠心肌肥厚,用全细胞膜片钳技术测定CPU86017对心室肌细胞L-型钙电流强度和密度的影响.结果:终浓度为30μmol/L的CPU86017对正常豚鼠心室肌细胞L-型钙电流强度的抑制率达74.21%;肥厚组,终浓度为30.0,10.0,3.3 μmol/LCPU86017均能明显抑制钙电流强度,抑制率分别为67.94%,43.25%,27.07%.结论:CPU86017可抑制正常和肥厚豚鼠心室肌细胞膜上的L-型钙电流,可减轻肥厚所致的钙超载,有利于预防病变心脏的心律失常.     

洛士辛对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的作用

采用膜片钳技术 ,研究Lot对单个豚鼠心室细胞L型钙通道电流 (ICa -L)的影响。Lot1～ 2 0 0 μmol/L浓度依赖性地增加ICa -L幅值 ,EC50 为 38μmol/L ,Lot30 μmol/L使最大峰值电流增加 6 0 %。其促钙作用无明显使用依赖性 ,略促进钙通道电流激活 ,显著地减少钙电流的稳态失活。表明Lot增加L型钙电流作用主要与减少钙电流的稳态失活有关。     

人参皂苷单体Rb1对缺血心室肌细胞动作电位及L-型钙离子通道的影响

目的: 观察人参皂苷单体Rb₁对豚鼠缺血心室肌细胞动作电位（AP）和L-型钙离子通道的影响。方法: Langendorff离体心脏逆向灌流法分离豚鼠心室肌细胞，随机选取心室肌细胞分为正常对照组、缺血组及Rb₁100、200和400 μmol•L^-13个剂量组。应用全细胞电流钳模式记录心室肌细胞动作电位，应用电压钳模式记录L-型钙离子通道电流（I_ca-L。结果: Rb₁ 100、200和400 μmol•L^-1组缺血心室肌细胞动作电位复极50%（APD₅₀）和动作电位复极90%（APD₉₀）明显低于给药前（P<0.05或P<0.001），缺血后的心室肌细胞L-型钙离子通道峰值电流明显低于给药前（P<0.05或P<0.01）。Rb₁抑制缺血心室肌细胞钙离子通道的开放，随浓度增加钙电流显著降低，具有浓度依赖性。结论：Rb₁缩短缺血心肌细胞AP时程和抑制钙通道的作用，可能是其抗心肌缺血的机制之一。     

高浓度氨甲酰胆碱与去甲肾上腺素对心室肌细胞L型钙电流的联合作用

目的　观察高浓度氨甲酰胆碱与去甲肾上腺素共存时对心室肌细胞L型钙电流的影响。方法　采用全细胞膜片钳方法记录单个大鼠心室肌细胞的L型钙电流。结果　去甲肾上腺素剂量依赖性地激动心室肌细胞L型钙电流 ,5 μmol/L去甲肾上腺素使L型钙电流由对照组的 (30 5± 132 ) pA增加到 (4 5 0± 10 8)pA(P <0 .0 5 )。氨甲酰胆碱不影响L型钙电流 ,但对去甲肾上腺素激动的L型钙电流有抑制作用。结论　高浓度的氨甲酰胆碱对L型钙电流无直接作用 ,但可以抑制去甲肾上腺素激动的L型钙电流     

间羟胺对大鼠心室肌细胞动作电位及L-型钙电流的影响

目的观察α肾上腺素能受体激动剂间羟胺对大鼠心室肌动作电位及L-型钙电流的影响。方法采用全细胞膜片钳方法,记录离体大鼠心室肌细胞动作电位和L-型钙电流。结果 200μmol/L间羟胺可使心室肌细胞L-型钙电流增大（P〈0.05）,动作电位时程（APD）明显延长（P〈0.01）,动作电位复极50%和90%时间（APD50and APD90）明显延长（P〈0.01）。100μmol/L酚妥拉明可使增大的的L-型钙电流和APD、APD50、APD明显恢复。结论间羟胺可明显延长大鼠心室肌动作电位时程,而酚妥拉明可不同程度地拮抗此效应。     

甲基黄酮醇胺对大鼠心室肌细胞钙电流的影响

采用胶原酶Ｂ急性分离大鼠心室肌细胞。利用膜片钳技术,观察甲基黄酮醇胺对心肌细胞膜钙离子通道的影响。结果表明：甲基黄酮醇胺１ 、１０ 和５０ μｍｏｌ／Ｌ可剂量依赖性地抑制大鼠心室肌细胞膜钙离子电流,表明甲基黄酮醇胺有钙拮抗作用。     

溶血磷脂酸对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

目的 :研究溶血磷脂酸 ( LPA)对心肌细胞膜离子通道的作用及机制。方法 :采用全细胞膜片钳技术。结果 :0 .1、1 .0和 1 0 .0 μmol·L-1的 LPA对豚鼠心室肌细胞 Ca2 +通道电流均具有明显的增强作用 ,而且这种作用可以被 G蛋白受体阻断剂白喉毒素阻断。结论 :LPA通过与 G蛋白偶联的膜受体介导促进豚鼠心室肌细胞 Ca2 + 通道开放     

雷诺嗪对兔心室肌细胞快钠电流的影响

目的 研究雷诺嗪对兔心室肌细胞快钠电流的影响.方法 运用全细胞膜片钳记录方法了解雷诺嗪对兔心室肌细胞快钠电流的作用,并了解其是否存在使用依赖性阻滞作用.结果 30μmol/L雷诺嗪对兔心室肌细胞快钠电流有明显的抑制作用,其IC50为(39.3±2.0)μmol/L,并且随着刺激频率的增加其作用加强,存在使用依赖性.结论 雷诺嗪对兔心室肌细胞快钠电流有一定的抑制作用,其存在使用依赖性阻滞作用.     

川芎嗪对单个心室肌细胞电生理的影响

采用全细胞膜片钳（Ｗｈｏｌｅｃｅｌｌｐａｔｃｈ ｃｌａｍｐ） 技术研究川芎嗪（ 四甲基吡嗪,ｔｒｔｒａｍｅｔｈｙｌｐｙｒａｚｉｎｅ,ＴＭＰ） 对豚鼠心室肌细胞Ｌ型钙通道电流（Ｌ ＩＣａ）的浓度依赖性影响。当维持电位为－ ４０ ｍ Ｖ,刺激频率为０－５ Ｈｚ,钳制时间为４００ ｍｓ,步进电压为１０ ｍ Ｖ,去极到６０ ｍＶ,发现３ μｍｏｌ／ＬＴＭＰ对Ｌ ＩＣａ无影响（Ｐ＞ ０－０５） ;１０ ,３０ 和１００ μｍｏｌ／ＬＴＭＰ对Ｌ ＩＣａ的抑制为３６－３４ ％ ,５８－９４ ％ 和７４－２４％ （Ｐ均＜ ０－０１） ,且浓度愈大,其抑制作用愈强,但都不使Ｉ Ｖ曲线的峰值发生偏移。提示ＴＭＰ具有阻断Ｌ ＩＣａ的作用,且呈浓度依赖性阻滞效应。     

淫羊藿苷对兔心室肌细胞L-型钙电流的影响

目的:利用膜片钳技术研究淫羊藿苷(ICA)对兔单个心室肌细胞L-型钙电流(ICa,L)的影响。方法:采用酶解法分离兔单个心室肌细胞,应用全细胞膜片钳技术观察10,20,40μmol/L的ICA对心室肌细胞ICa,L的作用。结果:①10,20,40μmol/L的ICA使兔心室肌细胞ICa,L最大峰电流密度从(15.81±1.23)pA/pF分别降至(11.27±0.89)pA/pF,(9.48±0.85)pA/pF和(6.87±0.81)pA/pF(n=6,P<0.05),抑制率分别为28.7%,40.0%和56.5%;ICA使ICa,L的电流-电压曲线上移,但不改变其基本形状;②20μmol/L ICA可以使钙通道稳态失活曲线左移并可减慢L-型钙通道失活后的恢复过程。结论:ICA对ICa,L具有浓度依赖性阻滞作用,这可能是其抗心律失常的重要机制之一。     

多用途成年大鼠心室肌细胞分离方法

目的 建立稳定的可同时用于细胞培养和膜片钳实验的成年大鼠心室肌细胞的分离方法 .方法 应用Langendorff灌流.生物酶消化法分离耐钙心肌细胞.分别用左右心室肌做细胞培养和全细胞膜片钳研究.结果 左室心肌细胞数(3.7±0.6)× 10~6,杆状细胞得率(84.85±2.7)%.右室心肌细胞横纹清晰,折光率好,膜片钳实验时容易封接破膜,记录到典型的I_(Ca).L、I_(K1)、I_(to)、I_(Na)电流.结论 该方法 简单、节约、重复性好,改善了杆状细胞得率、细胞质量,左右心室肌细胞分别能很好地用于细胞培养和膜片钳实验.     

心肌微环境诱导骨髓间充质干细胞心肌化时电生理特性研究

目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌细胞分化过程中离子通道电流的表达情况,为临床BM-SCs移植的安全性提供参考。方法分离培养BMSCs及乳鼠心肌细胞(NRVM s),并以1∶10的比例共培养,应用全细胞膜片钳技术记录共培养的BMSCs上离子通道电流的表达情况。结果成功分离培养BMSCs和NRVM s并建立了共培养模型,共培养1周后,BMSCs形态发生了明显变化;在心肌微环境诱导下,向心肌分化的BMSCs平均膜电位为-(40.37±3.68)mV,平均膜电容为(35.18±4.96)pF;共培养的BMSCs上可记录到IK1、Ito、IKsus,未记录到INa和ICa,也未记录到KCa。结论BMSCs和NRVM s共培养1周后,BMSCs上记录到IK1、Ito及IKsus,但未记录到INa和ICa。     

Effect of etomidate on voltage-dependent potassium currents in rat isolated hippocampal pyramidal neurons

Background Previous studies demonstrated general anesthetics affect potassium ion channels, which may be one of the mechanisms of general anesthesia. Because the effect of etomidate on potassium channels in rat hippocampus which is involved in memory function has not been studied, we investigated the effects of etomidate on both delayed rectifier potassium current （IK（DR）） and transient outward potassium current （I_K（A）） in acutely dissociated rat hippocampal pyramidal neurons.Methods Single rat hippocampal pyramidal neurons from male Wistar rats of 7-10 days were acutely dissociated by enzymatic digestion and mechanical dispersion according to the methods of Kay and Wong with slight modification. Voltage-clamp recordings were performed in the whole-cell patch clamp configuration. Currents were recorded with a List EPC-10 amplifier and data were stored in a computer using Pulse 8.5. Student＇s paired two-tail t test was used for data analysis. Results At the concentration of 100 μmol/L, etomidate significantly inhibited IK（DR） by 49.2% at ＋40 mV when depolarized from -110 mV （P 〈0.01, n=8）, while did not affect IK（A） （/1=8, P 〉0.05）. The IC50value of etomidate for blocking IK（DR）was calculated as 5.4 μmol/L, with a Hill slope of 2.45. At the presence of 10 μmol/L etomidate, the V1/2 of activation curve was shifted from （17.3±1.5） mV to （10.7±9.9） mV （n=8, P 〈0.05）, the V1/2 of inactivation curve was shifted from （-18.3±2.2） mV to （-45.3±9.4） mV （n=8, P 〈0.05）. Etomidate 10 μmol/L shifted both the activation curve and inactivation curve of IK（DR））to negative potential, but mainly affected the inactivation kinetics.Conclusions Etomidate potently inhibited IK（DR） but not IK（A） in rat hippocampal pyramidal neurons. IK（DR） was inhibited by etomidate in a concentration-dependent manner, while IK（A） remained unaffected.     

异甘草素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

目的:研究异甘草素对豚鼠单个心室肌细胞膜ICa-L通道的影响,旨在探讨其抗心律失常的机制。方法:采用全细胞膜片钳技术,观察不同浓度的异甘草素对ICa-L的作用。结果:①异甘草素能使I-V曲线明显上移。②异甘草素0.1-100μmol/L对ICa-L呈浓度依赖性的抑制作用。③3μmol/L异甘草素具有频率依赖性的抑制作用,它能使ICa-L稳态激活曲线右移、失活曲线左移,还能增加失活后恢复的τ值。结论:提示异甘草素对ICa-L通道的激活态和失活态有较高亲和力,这些可能成为其抗心律失常作用的机制。     

心律平对心肌细胞钠钙通道的抑制效应

目的 研究抗心律失常药物心律平对通道电流的作用。 方法 运用细胞内微电极、电压箝和膜片箝技术从细胞动作电位、跨膜离子流和单通道三个水平研究心律平的作用。 结果 心律平对钠流、钙流有明确的抑制作用，减少晚钠通道电流爆发型模式的出现，并能抑制早期后除极的平台期振荡。 结论 心律平对心肌细胞钠通道和钙通道有明确抑制效应，为心律平应用于室上性和室性心律失常的治疗提供理论依据。     

1-磷酸鞘氨醇对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

目的：研究1-磷酸鞘氨醇（S1P）对心室肌细胞膜钙离子通道的作用及机制。方法：Langendorff离体心脏逆向灌流法分离豚鼠心室肌细胞,随机选取心室肌细胞分为正常对照组和S1P 0.1、1.0和10.0 μmol•L^-1剂量组以及百日咳毒素（PTX）0.1 mg•L^-1+S1P1.0 μmol•L^-1组。采用全细胞膜片钳技术分别记录各组心室肌细胞Ca²⁺电流。 结果：1.0 μmol•L^-1的S1P使豚鼠心室肌细胞Ca²⁺电流从给药前的(0.256±0.030)mV增加到（0.367±0.090）mV（P<0.05）,10.0 μmol•L^-1的S1P使Ca²⁺电流从给药前的(0.242±0.030)mV增加到(0.364±0.060)mV(P<0.01),而加入G-蛋白耦联受体阻断剂PTX后,S1P对Ca²⁺通道电流的作用与给药前比较差异无显著性。结论：S1P通过与G-蛋白耦联的细胞膜受体介导促进豚鼠心室肌细胞Ca²⁺通道的开放,并具有一定的剂量依赖性。