高效液相色谱法测定单面针中木兰花碱的含量

【目的】建立单面针药材中木兰花碱的含量测定方法,为该药材质量评价方法的建立提供基础。【方法】采用高效液相色谱法,色谱柱为Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1 mol/L磷酸二氢钠(体积比为11∶89);检测波长268 nm;柱温25℃。【结果】木兰花碱在20~300μg/mL范围内线性关系良好,r为0.999 9;理论塔板数不低于25 000;样品中木兰花碱检测无干扰,与邻峰分离度大于1.5,样品含量在0.74~6.61 mg/g之间,平均含量为2.99 mg/g,加样回收率为97%以上,sR为0.81%。【结论】所建方法简单可行,重复性好,可用于单面针药材的质量控制。     

高效液相色谱法测定显脉香茶菜中odonicin的含量

【目的】建立显脉香茶菜中odonicin含量的高效液相色谱仪测定方法。【方法】采用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇—水(体积比为60∶40);体积流量:1 mL/min;检测波长:227 nm;柱温25℃;分析时间为30 min。【结果】odonicin在10.3～412.0μg/mL之间线性关系良好,平均回收率为99.81%,sR=1.73%。【结论】该方法灵敏、简便、准确、分离度好,其他成分无干扰,可用于显脉香茶菜药材中odonicin的含量测定。     

桂木叶中儿茶素的提取分离与含量测定

【目的】提取分离桂木叶中活性成分儿茶素并建立其含量测定方法。【方法】采用硅胶柱层析及重结晶法分离桂木叶中儿茶素,通过光谱和波谱分析鉴定其化学结构。采用高效液相色谱(HPLC)法进行儿茶素的含量测定,色谱条件:Phenomenex prodigy C18色谱柱(250 mm×4.60 mm,5μm),流动相:乙腈—体积分数0.4%磷酸水梯度洗脱,流速:1.2 m L/min,检测波长:280 nm,柱温35℃,进样量10μL。【结果】经光谱和波谱分析鉴定,从桂木叶中分离得到的化合物为儿茶素,其纯度≥980 mg/g;儿茶素在20.04~120.24μg/m L范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 8);不同批次桂木叶样品中儿茶素含量为0.58~1.85 mg/g,平均回收率为98.07%(sR=1.84%)。【结论】首次确认了桂木叶含活性成分儿茶素,并建立其HPLC含量测定方法,所建方法简便、快速、定量准确,可为桂木叶的质量标准及资源开发提供参考依据。     

双波长高效液相色谱法测定银实润肠颗粒中绿原酸和柚皮苷的含量

【目的】建立同时测定银实润肠颗粒中绿原酸和柚皮苷含量的方法。【方法】采用高效液相色谱(HPLC)法,以Kromasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱为固定相,以甲醇—体积分数0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,柱温25℃,进样量10μL,检测波长为327 nm(绿原酸)、283 nm(柚皮苷)。【结果】绿原酸、柚皮苷的保留时间分别为9.53、30.12 min,两者浓度分别在9.7～77.6μg/mL、100.6～804.8μg/mL范围内线性关系良好,相关系数分别为0.999 8、0.999 9,平均加样回收率分别为99.01%、98.47%,sR分别为2.80%,2.42%。【结论】本研究方法操作简便,结果准确、可靠,重复性好,可用于银实润肠颗粒的质量控制。     

消疳化积散中胡芦巴碱含量测定

目的:采用液相色谱法对消疳化积散中胡芦巴碱含量进行了测定。方法:色谱柱:Diamonsil(钻石)NH2(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈-水(80∶20);流速:1.0m L/min;检测波长:265nm;柱温:40℃。结果:使君子中胡芦巴碱在11.98~766.8μg/m L(r=1.0000)范围内线性关系良好;回收率为98.35%,RSD=1.5%,(n=9)表明该方法回收率良好。结论:该法操作快速简便,稳定性和准确性良好,可用于控制消疳化积散中胡芦巴碱含量。     

脑忆源胶囊中黄酮类物质含量测定

【目的】建立脑忆源胶囊中总黄酮和淫羊藿苷含量的测定方法。【方法】采用《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中规定的方法,以芦丁为对照品,采用紫外—可见分光光度法测定总黄酮含量,高效液相色谱(HPLC)法测定胶囊中淫羊藿苷含量,色谱柱:luna Cl8(2)100R(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈—水(体积比为30∶70),流速:1.0 mL/min,检测波长:270 nm。【结果】芦丁在0～24.75μg/mL范围内呈良好的线性关系,r=0.999 0,平均加样回收率为102.29%,sR为1.34%(N=5);淫羊藿苷含量在6.9×10-2～4.83×10-1μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系,r=0.999 9,平均回收率为95.39%,sR为2.5%(N=5)。【结论】本研究所建立的方法能够准确测定脑忆源胶囊中黄酮类成分的含量。     

黄精煎剂中5-羟甲基糠醛的含量测定

【目的】通过对11批黄精煎剂中5-羟甲基糠醛含量的考察,为黄精的物质基础与质量控制研究奠定基础。【方法】采用煎煮法获得供试品溶液,高效液相色谱(HPLC)法测定其含量。色谱条件:HypersilODS2色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),甲醇—体积分数0.05%磷酸溶液(体积比为10:90)为流动相,流速为1.0mL/min,检测波长为280nm。【结果】11批黄精煎剂中5-羟甲基糠醛含量的差别达30倍,在0.0200～2.0000μg(r=0.9997)范围内线性关系良好,平均回收率为100.3%(sR=1.9%,N=6)。【结论】该方法简便、结果准确,为黄精物质基础研究与质量控制提供了一定参考。     

RP-HPLC法测定王氏保赤丸中盐酸小檗碱的含量

目的建立RP-HPLC法测定王氏保赤丸中盐酸小檗碱的含量。方法采用反相高效液相色谱法测定,以Diamonsil-C18柱(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾(28∶72)磷酸调pH3.0为流动相。柱温:室温,流速:1.0mL/min,检测波长:349nm。结果盐酸小檗碱在0.20~1.20μg范围内的线性关系良好,其线性方程为A=3673.7m+5.5251,r=0.9999,平均回收率为100.49%,RSD=1.46%(n=9)。结论RP-HPLC法测定王氏保赤丸中盐酸小檗碱的含量线性关系良好、精密度较好、准确度较高、稳定性良好,可用于王氏保赤丸的质量控制。     

复方银杏叶颗粒中总黄酮醇苷的含量测定

目的:建立HPLC法测定复方银杏叶颗粒中总黄酮醇苷含量。方法:色谱柱为Hypersil BDS C18(250mm×4.6 mm,5μm);流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液(50∶50);流速为1.0 m L/min;检测波长为360 nm。结果:槲皮素在7.5656~189.14μg/m L范围内线性关系良好(r=0.9999);山柰素在7.0832~177.08μg/m L范围内线性关系良好(r=0.9999);异鼠李素在4.6728~177.08μg/m L范围内线性关系良好(r=0.9999);总黄酮醇苷的平均回收率为100.9%,RSD为1.2%。结论:本方法操作简便、灵敏、可靠,具有良好的重复性和稳定性,可用于复方银杏叶颗粒中总黄酮醇苷的检测。     

高效液相色谱法测定狭叶红景天药材中红景天苷的含量

【目的】建立测定红景天药材根茎中红景天苷含量的HPLC方法,为进一步研究红景天的药材质量提供依据。【方法】采用Thermo C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-水-四氢呋喃(5.5:93:0.4)为流动相;流速为1.0 ml/min;紫外检测波长为270 nm;柱温30℃。【结果】红景天苷在2.5~40μg/ml范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程为Y=1×107X-2428,r=0.9996。平均回收率为96.45%,RSD为0.63%(n=9)。【结论】本法灵敏,准确,稳定性与重现性均良好,可用于红景天药材中红景天苷的含量测定。     

甲型H1N1流感病毒在季流病毒、禽流感病毒共感染时变异可能性的验证

目的 甲型H1N1流感病毒A/California/7/2009分别与A/Brisbane/10/07和A/ShenZhen/406H/06共感染小型香猪,预测甲流病毒在与季流H3N2病毒/甲流病毒与禽流感病毒共感染时是否会发生变异.方法 分别将A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)对5～6月龄小型猪共感染,小型猪经复方氯胺酮0.1 mL/kg麻醉后进行滴鼻感染,感染后第5天安乐死动物,取动物肺组织作病毒测序分析.结果 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2)共感染后,A/California/7/2009病毒PB1基因993位G→A突变,PA基因1659位G→A突变,没有氨基酸的变异.A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后A/California/7/2009病毒PB2基因1711位T→C突变.碱基的突变未引起氨基酸的变异.结论 A/California/7/2009(CA7)与A/Brisbane/10/07(H3N2),A/California/7/2009与A/Shenzhen/406H/06(H5N1)共感染后在猪的体内没有发生病毒重组、变异.     

胰腺细胞缩胆囊素和胆碱能受体对细胞内Ca~2 的调节

本文使用Fura-2做为细胞内钙离子荧光指示剂,在大白鼠胰腺分离细胞观察缩胆囊素和乙酰胆碱对细胞内钙离子的影响及其相互作用.结果表明1nmol/L缩胆囊素和lmmol/L乙酰胆碱分别使细胞内钙离子浓度从基础水平的122±8nmol/L增高至360±32nmol/L和380±20nmol/L,半最大有效浓度分别为0.45nmol/L及54μmol/L。不同剂量的缩胆囊素和乙酰胆碱彼此不同程度抑制对方的作用,后加入的试剂提高细胞内钙离子浓度的幅度与先加入的试剂所引起的增加幅度成反比,加入各自相应的受体拮抗剂可使细胞恢复对另一激素(蛙皮素)刺激的反应。说明了缩胆囊素受体和胆碱能受体的相互调节影响细胞内钙离子的活动.加入受体拮抗剂后,细胞恢复反应过程中的时间动力学改变可能与受体阻滞后钙离子通道关闭的程度和时间有关.     

甲型H1N1流感病毒感染小鼠的发病机制

目的 甲型H1N1 流感病毒A/California/7/2009感染BALB/c小鼠,研究甲型H1N1流感病毒病毒性肺炎发病机制.方法 4～6 周龄雌性BALB/c 小鼠60只,随机分为2组,实验组和对照组,每组30只.CA7 流感病毒滴鼻制备甲流病毒感染小鼠模型.攻毒后第5天解剖实验和对照组小鼠,取肺组织,测定肺组织中IL-2,IL-6,TNF-α含量.结果 结果实验组肺组织中IL-6,TNF-α,水平明显高于对照组,IL-2水平明显低于对照组,差异均有显著性(P<0.05).结论 IL-6、TNF-α、IL-2这3种细胞因子在感染甲流病毒后的显著性变化与病毒感染后的肺组织病理损伤有密切的关系.     

A/California/7/2009与A/California/4/2009病毒感染力比较

目的甲型H1N1流感病毒A/California/7/2009与A/California/4/2009病毒序列比较同源性在99%以上,本实验旨在比较两株病毒感染BALB/c小鼠研究感染力强弱。方法分别将A/California/7/2009(CA7)与A/California/4/2009(CA4)两株病毒分别连续10倍稀释后,对4~6周龄雌性BALB/c小鼠经乙醚麻醉后进行滴鼻攻毒,每个稀释度接种10只实验小鼠,测定CA7 MLD50为101.24/0.05 mL,检测小鼠感染、致病的多项指标,观察期为14 d。结果相同TCID50的CA7和CA4病毒感染小鼠,CA4感染小鼠后14 d内死亡率为20%,而CA7感染小鼠后8 d内死亡率为100%。CA7 106TCID50感染的小鼠病理表现为重度弥漫性间质性肺炎,CA4 106TCID50感染的小鼠病理表现为中度-重度间质性肺炎。结论在相同条件下,CA7感染力明显强于CA4。     

可手术胃癌血清HER-2/neu ECD水平与临床特征及疗效的研究

目的：探讨可手术胃癌患者血清HER-2/neu胞外域部分(ECD)水平与临床特征及疗效的关系。方法：收集江苏省连云港市第二人民医院2010年01月至2010年12月,可手术胃癌患者46例进入研究,术前、术后收集血清,同时获取15例正常人、22例胃良性病变患者血清为对照组。另外收集7例血清HER-2/neu ECD阳性患...     

镉对大鼠胚胎损害作用的实验研究

目的 :探讨镉对大鼠胚胎的毒性效应及可能机制。方法 :雌雄性 SD大鼠按 2∶ 1同笼交配获取 38只孕鼠 ,随机分为 4组 (对照组 ,低镉组 ,中镉组 ,高镉组 )。分别在妊第7、1 0、1 3天经腹腔注射生理盐水和不同剂量的氯化镉 ( Cd Cl2 ) ,妊 2 1 d,剖宫取胎鼠 ,活杀取出胎鼠的肝、脑组织称重后测定 Cd、Zn、Ach、AKP、DNA含量。结果 :1高镉组未见存活胎鼠 ;2染镉组胎鼠肝中镉增加 ( P<0 .0 5 ) ,脑中锌有下降趋势 ;3染镉组胎鼠肝组织中的AKP活性 ,脑组织中的 Ach、DNA含量较对照组减低。结论 :1高剂量的镉可使孕鼠胚胎发育异常 ;2母鼠染镉可致胎鼠肝中 AKP酶活性降低及脑组织中 Ach、DNA含量减少 ,抗脂质过氧化能力减弱。     

服镁后血镁钙及24小时尿钙和钙/肌酐比值变化

研究服镁后，血镁钙及24h尿钙和钙／肌酐比值变化及与妊高征发生的关系。方法：采用前瞻性随机双盲的方法，对治疗组52例（治疗1组24例和治疗2组28例）孕妇自孕28周起，连续服用葡萄糖酸镁，每日3g。结果：治疗组血钙明显高于对照组；治疗2组的尿钙和钙／肌酐明显高于对照2组，且妊高征发生率3．57％，明显低于对照2组（30．77％）；治疗组和对照组尿钙与钙／肌酐比值分别呈正相关关系。结论：服镁后，调节体内钙平衡，使妊高征发生率降低。     

动脉粥样硬化相关性疾病血清胆红素与血脂检测结果分析

目的:探讨血清胆红素浓度与四种动脉粥样硬化( AS)性疾病的关系。方法:观察组分为四组,单纯性高血压组、冠心病组、糖尿病组、脑梗死组,对照组为同年龄段健康查体者,检测空腹血清总胆红素、直接胆红素、总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇,低密度脂蛋白胆固醇,计算间接胆红素,并对检测结果进行统计学分析。结果:与对照组比较,观察组中直接胆红素均有所下降,但差异无显著统计学意义( P>0 .0 5 ) ,总胆红素与间接胆红素除脑梗死组外,其他各组均明显降低( P<0 .0 5 ) ;除脑梗死组HDL - C与对照组无显著差异外,其他观察组血脂各指标与对照组比较均有显著统计学差异( P<0 .0 5 ) ,且糖尿病组三酰甘油及冠心病组低密度脂蛋白胆固醇与对照组比较有极显著统计学差异( P<0 .0 1 )。结论:高血压、冠心病、脑梗死、糖尿病等动脉粥样硬化相关性疾病血清胆红素浓度有不同程度降低,其中,间接胆红素降低更明显,提示可将胆红素水平作为AS患者体内氧化活性增加的一个临床监测指标     

赐百龄胶囊质量标准的实验研究

赐百龄胶囊系选用螺旋藻为原料直接精制而成。本研究采用吸收光谱法鉴别蓝藻蛋白，可见６２０ｎｍ的特征吸收峰。采用三氯化锑试管反应鉴别β－胡萝卜素，显蓝绿色。采用ＴＬＣ鉴别氨基酸，可显７个斑点。采用ＴＬＣ鉴别多糖水解液，可显３个斑点，其中２个斑点与葡萄糖、半乳糖对应．采用氨基酸分析仪测定游离、水解氨基酸，含丰富的人体必需的氨基酸，总量高达５５％以上。采用凯氏定氮法测定总氮量，提示蛋白质总量高达６０％以上。采用柱层析－ＵＶ法测定β－胡萝卜素，含量为４４ｍｇ％。     

黄体不健的生殖内分泌变化

黄体不健是不孕症的重要原因之一。本文对52例黄体不健者采用放射免疫法测定其早卵泡期血请FSH、LH、PRL、E_2和黄体中期血清PRL、E_2,P_0水平,并与正常对照组进行比较。结果表明:黄体不健组早卵泡期FSH、LH、E_2及黄体中期P_0水平较正常对照组低,而PRL水平则高于正常对照组,其差别均有显著或非常显著性意义(P<0.05或P<0.01)。由此说明,黄体不健与卵泡发育障碍有关。因而认为对黄体不健的治疗,如果采用补充黄体酮的方法仅是“治标”,而促进卵泡发育成熟才是“治本”。并认为中医药的周期疗法可能为此打开一条有效途径。