一种新家兔症状性蛛网膜下腔出血模型的建立

目的 建立新的家兔症状性蛛网膜下腔出血模型。方法 采用单侧颈动脉结扎后枕大池二次注血的方法制成兔蛛网膜下腔出血（SAH）模型。实验分为4组,即正常对照组（N组）、结扎右侧颈总动脉组（L组）、枕大池二次注血组（SAH组）、结扎后枕大池二次注血组（L-SAH组）。观察并比较各组动物神经功能改变、基底动脉经颅多普勒超声血流速度变化以及基底动脉和海马形态学变化。结果 SAH组和L-SAH组均出现了神经功能症状,SAH组较轻,L-SAH组较重且持续时间长。SAH组和L-SAH组枕大池二次注血后血流速度均明显加快,根据平均血流速度计算的基底动脉痉挛程度：SAH组在二次注血后1d、3d、7d分别为32.70±5.81、21.29±7.98、4.21±6.55;而L-SAH组为29.97±6.37、21.51±10.25、12.40±7.46。结论 兔单侧颈动脉结扎后枕大池二次注血可制成症状性蛛网膜下腔出血模型,可用于研究SAH后神经功能损害及药物干预。     

兔症状性脑血管痉挛模型的改进

目的完善单侧兔颈总动脉结扎后枕大池二次注血法致症状性脑血管痉挛（CVS）动物模型的血管形态学研究。方法实验兔随机分为单侧颈总动脉结扎后枕大池二次注血组（S-SAH组）与单纯枕大池二次注血组（SAH组）,每组各10只。比较两组神经功能改变,并分别于注血前、注血后（d1,d5）行基底动脉脑血管造影。结果各组均出现神经功能障碍,两组d5发生CVS数量与注血前比较均有显著性差异（P〈0.05）;各组同时间段CVS程度无显著差异（P〉0.05）。结论单侧兔颈总动脉结扎后枕大池二次注血法制作CVS动物模型方法可行,模型稳定,改良制作方法有助于提高成功率。     

实验性蛛网膜下腔出血后兔脑血管病理结构的动态变化

目的观察蛛网膜下腔出血后脑血管病理结构的动态变化,以建立可靠的脑血管痉挛模型。方法实验分正常组、对照组(枕大池注入等量生理盐水)、SAH3d组、SAH5d组、SAH7d组、SAH10d组和SAH14d组,枕大池二次注血法建立兔蛛网膜下腔出血模型,应用脑血管造影、光镜和透射电镜检查等方法观察SAH后基底动脉形态改变。结果脑血管造影发现SAH后第3d基底动脉狭窄,第7d达高峰。光镜和透射电镜检查显示出血后第3d开始出现血管管腔狭窄、管壁增厚、内皮细胞和平滑肌细胞变性,并随时间推移加重,第5d和第7d病理改变更明显,尤以第7d为著,10d后缓解。结论兔枕大池二次注血法是可靠的SAH后脑血管痉挛模型制作方法。     

兔脑血管痉挛模型的建立及DSA和TCD对其的评价比较

目的 建立简便可靠的兔蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后脑血管痉挛的模型,并运用数字减影血管造影(digital subtraction angiography,DSA)、经颅多普勒(transcranial doppler,TCD)对基底动脉痉挛进行评价比较.方法 新西兰纯种家兔36只,随机分为第一次注血后3 d,5 d,7 d,10 d,14 组(n=6),经颈枕部切开行枕大池二次注血来制作SAH模型,另6只为假注血组,并用DSA及TCD对基底动脉的管径及血流速率进行检测.结果 兔二次注血SAH模型很好地模拟了人类SAH后迟发性脑血管痉挛的病理过程,DSA和TCD的结果 郁显示基底动脉狭窄随时间逐渐加重,7 d左右到达高峰,而后义逐渐减轻,两者显示了很好的一致性.结论 经颈枕部切升枕大池二次注血兔脑血管痉挛模型的制作简便、易行、可靠,TCD对兔基底动脉痉挛程度的评价比DSA更简便易行.     

刺五加对实验性蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛及内皮素和降钙素基因相关肽的影响

目的探讨中药刺五加(AS)防治蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)的作用机制.方法采用犬枕大池二次注血制作实验性犬SAH后CVS动物模型.放免法测定SAH后30 min、2 d、4 d和7 d时血及脑脊液(CSF)中内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CGRP)含量.并于第二次注血后30 min静脉滴注AS注射液,以后每日1次(40 mL/d)至第7天,测定时间点同上.结果 AS组在第二次注血后2 d、4 d、7 d血浆及CSF中ET含量较对照组高,较单纯注血组低.而CGRP较对照组略低,较注血组高.结论刺五加可以通过抑制ET升高和CGRP降低而达到防治SAH后CVS的目的.     

丹参对实验性蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的影响

目的 探讨中药丹参防治蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)的作用机制。方法 采用兔枕大池2次注血法制作实验性兔SAH模型,放免法测定SAH后2d、4d、7d时的血及脑脊液中的内皮素(ET)和降钙素基因相关肽(CCRP)的含量,并于第2次注血后30min从耳缘静滴复方丹参注射液,以后1次/d(2ml/kg),至第7d,测定时间点同上。结果 丹参组在第2次注血后血浆及脑脊液中ET含量较对照组高,较单纯注血组低,而CGRP较对照组低,较单纯注血组高。结论 丹参可以通过抑制ET升高和CCRP降低达到防止SAH后CVS的目的。     

兔蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛与脑细胞外液相关性实验研究

目的探讨蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛的脑代谢变化规律及其与脑血管痉挛程度的相关性。方法 16只成年新西兰白兔随机分为:枕大池2次注生理盐水组(NS组)8只,枕大池2次注血组(SAH组)8只。两组均采用微透析仪于注血(或生理盐水)前、后第1,3,5,7天检测脑细胞外液的葡萄糖、乳酸、丙酮酸、谷氨酸及天冬氨酸的浓度,并计算乳酸与丙酮酸(L/P)比值。经颅多普(TCD)测定两组兔基底动脉血流速度;DSA测定两组兔基底动脉直径。结果与注血前相比,SAH组注血后各指标均有不同程度变化。基底动脉直径显著缩小及血流速度明显增快均于第3天开始(P0.05),并于第5天达高峰;且轻度和中度脑血管痉挛血流速度与管径呈负相关(γ轻=0.673,P0.01;γ中=0.613,P0.01)。乳酸和L/P比值均于第1天明显升高(P0.05),第5天达高峰;且与基底动脉直径变化呈负相关(γ乳酸=0.624,P0.01;γL/P=0.713,P0.01)。谷氨酸第1天显著升高(P0.05),后急剧下降。结论 TCD可通过检测血流速度变化判断兔脑血管痉挛情况,但痉挛程度的判断存在局限性。脑细胞外液乳酸和L/P比值变化可预测兔脑血管痉挛的发生并判断其痉挛程度。     

川芎嗪对实验性SAH后CVS防治作用的研究

目的研究兔症状性蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛(CVS)与内皮素(ET)和一氧化氮(NO)的关系及川芎嗪的保护作用.方法采用双侧颈动脉结扎和枕大池二次注血制成兔SAH模型,观察SAH前后动物进食量和神经功能改变,用放射免疫方法和硝酸还原酶法分别测定血液和脑脊液中ET和NOx-含量,以氢清除法测定局部脑血流量(rCBF).结果SAH后大部分动物进食量有不同程度的下降,所有动物均有不同程度的神经功能障碍和rCBF下降.SAH后血液和脑脊液中ET含量增加,NOx-含量下降(P＜0.01).上述变化随出血时间延长和出血量的增大而增加.川芎嗪治疗组上述变化均有不同程度的改善.结论双侧颈动脉结扎后枕大池二次注血可制成可靠的兔症状性SAH后CVS的动物模型.兔SAH后ET和NO含量的改变与CVS的发生密切相关,并进而导致临床症状的恶化.川芎嗪可通过抑制SAH后ET和NO的变化而对CVS的发生和发展起到防治作用.     

丹参对实验性蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的影响

目的探讨中药丹参防治蛛网膜下腔出血(SAH)后脑血管痉挛((CVS)的作用机制。方法采用兔枕大池2次注血法制作实验性兔SAH模型，放免法测定SAH后2d、4d、7d时的血及脑脊液中的内皮素(ET)和降钙素基因相关肽((CGRP)的含量，并于第2次注血后30min从耳缘静滴复方丹参注射液，以后1次／d(2ml/kg)，至第7d，测定时间点同上。结果丹参组在第2次注血后血浆及脑脊液中ET含量较对照组高，较单纯注血组低，而CGRP较对照组低，较单纯注血组高。结论丹参可以通过抑制CT升高和CGRP降低达到防止SAH后CVS的目的。     

巴曲酶鞘内注射防治犬蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛的实验研究

目的　探讨巴曲酶鞘内注射防治蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛 (SAH DCVS)及其所致脑水肿的作用。方法　“枕大池二次注血法”建立犬SAH DCVS动物模型 ,采用DSA等方法动态观察了巴曲酶鞘内注射对犬SAH DCVS的脑血管口径大小的影响 ,干湿法测定脑组织含水量变化。结果　巴曲酶组在枕大池注血后 7d脑血管口径显著大于单纯注血组 (P <0 .0 1 ) ,而脑组织含水量则显著低于单纯注血组 (P <0 .0 1 )。结论　巴曲酶可以防治SAH DCVS及其所致的脑水肿     

蛛网膜下腔出血诱导小鼠长期认知功能损害

目的了解蛛网膜下腔出血（SAH）小鼠模型是否存在认知功能损害及探讨造成认知功能损害的可能机制。方法经枕大池注射自身动脉血建立SAH小鼠模型；14d时测量大脑主要动脉直径；通过8一臂迷宫实验评估SAH30d后动物空间学习和记忆功能；加高效液相色谱分析海码组织谷氨酸和天门冬氨酸水平。结果SAH后2周，大脑主要动脉无明显痉挛；SAH30d后，小鼠工作记忆能力和参考记忆能力明显低于对照组和假手术组（P〈0．05）；SAH后24h、48h和72h，海马区谷氨酸和天门冬氨酸含量明显增高（P〈0．01），30d后，这两种氨基酸的浓度明显下降（P〈0．05）。结论SAH不引起迟发性脑血管痉挛，但可引起小鼠长时间认知功能损害。SAH引起急性脑血流量降低，海马区兴奋性氨基酸大量释放，可能引起海马区神经细胞损害，迟发性海马区兴奋性氨基酸（EAA）降低和认知功能损害是海马损害后的结果。     

猪蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型

目的建立猪SAH模型并研究其脑皿流灌注的变化。方法实验猪随机分为SAH组（n=5）和假手术组（n=4）。SAH组在右额颞开颅向鞍上池内注入自体动脉血制成SAH模型,假手术组注入等量生理盐水。4d后行SPECT—CT同机融合扫描并以大脑小脑比（corticocerebellar ratio,CCR）、相对离散度（relative dispersion,RD）半定量描述大脑半球血流量和血流分布离散度。7d后对海马行苏木精-伊红染色,观察神经元形态变化。结果CT证实血液积聚于鞍上池,造模成功。SAH组左右侧CCR（1．768±0．298,1,382±0．192）均较假手术组对应侧（2．131±0．246,1．988±0．346）显著下降（P〈0．05）;SAH组两侧CCR差异亦有统计学意义（P〈0．05）。SAH组右侧RD（0．417±0．015）较假手术组右侧（0．389±0．015）显著增加（P〈0．05）,SAH组左侧RD（0．406±0．023）与假手术组左侧（0．378±0．030）差异无统计学意义（P〉0．05）,SAH组两侧RD差异无统计学意义（P〉0．05）。苏木精-伊红染色证实SAH组海马神经元形态异常。结论猪SAH模型符合SAH血管痉挛引起的异常脑血流灌注特征,为此类疾病研究提供了理想的大型动物模型。     

尼莫地平对大鼠蛛网膜下腔出血后认知障碍及海马Tau蛋白的影响

目的探讨尼莫地平（ND）对大鼠蛛网膜下腔出血（SAH）后认知功能障碍及海马Tau蛋白的影响。方法将40只SD大鼠随机分成正常组、假手术组、SAH组、ND组,每组10只;采用枕大池单次注血法建立SAH模型;造模后30 d进行Morris水迷宫试验评估大鼠认知功能,TUNEL法检测海马细胞凋亡,免疫组化染色法检测海马Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白表达。结果 1认知功能：SAH组和ND组潜伏期较正常组和假手术组明显延长（P〈0.05）,而ND组较SAH组明显缩短（P〈0.05）;SAH组和ND组平台象限游泳时间百分比较正常组和假手术组明显缩小（P〈0.05）,而ND组较SAH组明显增大（P〈0.05）。2海马病理改变：SAH组和ND组细胞凋亡较正常组和假手术组明显升高（P〈0.05）,而ND组较较SAH组明显减少（P〈0.05）;SAH组和ND组海马Tau蛋白及磷酸化Tau蛋白表达水平均明显高于正常组和假手术组（P〈0.05）,而ND组明显低于SAH组（P〈0.05）。结论 ND可改善大鼠SAH后认知功能障碍,可能与抑制细胞凋亡及降低海马Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白的表达有关。     

家犬实验陛脑出血后血肿周围脑代谢的微透析监测

目的研究脑出血（intracerebral hemorrhage,ICH）后继发脑损伤的机制。方法雄性成年家犬12只,随机分为ICH组（n=6）和生理盐水对照组（n=6）,ICH组于额叶注入非抗凝自体动脉血,对照组动物在相同部位注入等量生理盐水。在模型制备后2h、6h、24h、3d、7d、14d进行血肿周围脑组织间液微透析,监测葡萄糖、乳酸、丙酮酸、甘油和谷氨酸浓度。结果ICH组葡萄糖浓度无显著变化;乳酸浓度在注血后24h和3d升高;丙酮酸浓度在注血后6h、24h和3d升高;甘油浓度在注血后24h升高：谷氨酸浓度在注血后升高,3d达到高峰,至14d明显高于对照组和基础值。结论ICH后血肿周围脑组织代谢变化提示存在“生化半暗带”区域,兴奋性氨基酸的聚集可能是加重和维持继发性脑损伤的重要因素。     

氯高铁血红素诱导血红素氧合酶-1抗脑血管痉挛实验研究

目的探讨氯高铁血红素诱导血红素氧合酶-1(HO-1)的表达变化和迟发性脑血管痉挛(DCV)之间的关系。方法采用大鼠枕大池二次注血法建立蛛网膜下腔出血(SAH)后DCV模型,对照组注入等体积(0.3 ml)的生理盐水,氯高铁血红素诱导组每日通过腹腔注射氯高铁血红素(30 mg/kg)。监测各组基底动脉血管内径周长和血管壁厚,用逆转录多聚酶链式反应(RT-PCR)检测基底动脉HO-1 mRNA表达变化。结果对照组不同时相基底动脉中无HO-1 mRNA的表达,SAH后大鼠基底动脉有HO-1 mRNA的低表达,氯高铁血红素诱导组HO-1的表达增高,并能减轻DCV的发生。结论 HO-1表达增高能够拮抗SAH后DCV的发生。     

大鼠蛛网膜下腔出血后脑血管储备的实验研究

目的探讨大鼠蛛网膜下腔出血(SAH)模型不同时期脑血管储备功能的变化。方法将120只SD大鼠分为空白对照组、盐水对照组、盐水+乙酰唑胺(ACZ)组、SAH模型组和SAH+ACZ组,其中盐水对照组、盐水+ACZ组、SAH模型组和SAH+ACZ组又分为1 d、3 d、5 d、7 d 4个亚组,对各亚组大鼠进行神经行为学评分,测定不同时间大鼠皮层脑血流。结果 SAH模型组脑血流较空白对照组及盐水对照组有不同程度的下降,差异具有统计学意义(P0.05);盐水对照组与盐水+ACZ组之间的脑血流变化及神经行为学评分比较无统计学差异(P0.05);SAH+ACZ组与SAH模型组比较脑血流及神经行为学评分均下降,以5 d组为著。结论 SAH后不同时期脑血管储备功能及神经行为学评分均降低,且二者具有相关性。     

7-Nitroindazole, a selective inhibitor of nNOS, increases hippocampal extracellular glutamate concentration in status epilepticus induced by kainic acid in rats

The glutamate extracellular concentration is controlled by metabolic and neuronal pathways via release and uptake mechanisms. Stimulation of glutamate receptors induces neuronal nitric oxide (NO) release, which in turn modulates glutamate transmission. In this study, the influence of neuronally derived NO on hippocampal glutamate extracellular concentration was investigated in conditions of intense metabolic activation, i.e., during status epilepticus induced by systemic kainic acid (KA). Glutamate, arginine and citrulline concentrations were measured by microdialysis coupled to HPLC. Experiments were performed in conscious rats implanted with a microdialysis probe within the hippocampal CA3 area. Three groups were used: (1) rats treated with KA i.p. (12 mg/kg) and vehicle locally, via the microdialysis probe (n = 9); (2) rats given KA i.p. and a selective inhibitor of neuronal NO synthase, 7-nitroindazole (7-NI, 1.25 mM) locally (n = 13); (3) rats treated with saline i.p. and 7-NI locally (n = 7). Infusion of 7-NI or vehicle was performed throughout the second hour of status epilepticus. In groups 1 and 3, no significant modifications of extracellular glutamate, arginine and citrulline concentrations were measured. In group 2, the local application of 7-NI in the hippocampus during status epilepticus significantly increased extracellular glutamate and arginine concentrations, whereas citrulline concentration remained constant. The concomitant increases of extracellular glutamate and arginine concentrations under local 7-NI perfusion in seizure conditions, suggest that glutamate and arginine are linked in a common metabolic pathway and/or that glutamate is involved in the cross-talk between glia and neurons. A cerebrovascular effect of 7-NI which triggers glutamate release may also occur.     

尼莫地平对蛛网膜下腔出血大鼠额叶转化生长因子-β1表达的影响

目的：探讨尼莫地平对蛛网膜下腔出血（SAH）大鼠额叶转化生长因子-β1（TGF—β1）表达和血管痉挛的影响。方法：枕大池二次注血法制作SAH模型。54只成年健康雄性SD大鼠随机分为对照组（n=6）、SAH组（n=24）和尼莫地平处理组（n=24），其中SAH组和尼莫地平处理组随机均分为1、3、5和7d等4组（n=6）。尼莫地平处理组于二次注血后30min时经股静脉注入尼莫地平2mg／kg，此后每天经腹腔注射尼莫地平2mg／kg。HE染色光镜下观察基底动脉病理学变化，测定内径；免疫组化法检测各组大鼠额叶TGF—β1表达。结果：SAH组和尼莫地平处理组基底动脉内径显著小于对照组（P〈0．01），而SAH组与尼莫地平处理组无显著差异。SAH1d时，TGF—β1表达增加，3d时达高峰，5d和7d时显著低于1d和3d时（P〈0．01），但仍照著高于对照组（P〈0．01）。与SAH组相比，尼莫地平处理组1d和3d时TGF-β1表达无显著差异，5d和7d时显著增加。结论：SAH后额叶TGF—β1表达发生改变，与脑血管痉挛有关，提示TGF-β1参与了脑血管痉挛的病理学过程。尼莫地平可能通过增加SAH后啮组织中TGF-β1表达对缺血脑组织起着保护作用。