先天性巨结肠与RET基因的相关研究进展

RET原癌基因编码酪氨酸激酶受体,在细胞的增殖分化和迁移过程中发挥重要作用。先天性巨结肠(hirschsprung disease, HSCR)是由于肠神经嵴细胞(enteric neural crest cells, ENCCs)在肠道内的移行、种植过程中发生异常,致使远端肠道缺乏神经节细胞,是最常见的先天性小儿消化道畸形。研究证实RET原癌基因为主要易感基因。本文就近年来RET基因与HSCR发生、发展关系的国内外研究进行综述。     

甲状腺乳头状癌并BRAFV600E突变及原癌基因重排蛋白表达与其侵袭性的关系

目的探讨BRAFV600E突变及原癌基因重排(RET)蛋白表达并存与甲状腺乳头状癌(PTC)侵袭性的关系。方法收集50例PTC患者术后病理,分别用RT-PCR检测BRAFV600E突变,免疫组织化学SP法检测RET表达情况。分析BRAFV600E突变合并RET表达组(n=24)和BRAFV600E单突变或RET单表达组(n=19)的临床及病理特征。结果 BRAFV600E突变率、RET表达率分别为76%(38/50)、56%(28/50),存在BRAFV600E突变合并RET表达者占48%(24/50)。与BRAFV600E突变合并RET表达组比较,BRAFV600E单突变或RET单表达组肿瘤组织分化程度差,且甲状腺癌评分系统评分较高(P=0.011,P=0.022)。结论 BRAFV600E突变并存RET表达时提示PTC肿瘤组织分化差、更易出现实体亚型等侵袭性较高的病理亚型,有可能增加肿瘤相关死亡风险。     

RET基因多态性与甲状腺乳头状癌的关联性分析

目的：探讨RET基因第11外显子上rs1799939位点基因多态性与甲状腺乳头状癌(PTC)的关系,为PTC的遗传学机制研究提供理论依据。方法：采用病例-对照研究方法,选取100例PTC患者作为病例组,选取与病例组患者年龄、性别匹配的100例健康人作为对照组,采用PCR-RELP方法检测病例组和对照组的基因型,应用SPSS 13.0统计软件分析该单核苷酸多态性(SNPs)位点与甲状腺癌的关联性。结果：病例组和对照组在rs1799939位点上的基因型频数分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P>0.05);病例组和对照组rs1799939位点的基因型和等位基因频数分布差异无统计学意义（P>0.05）;不同性别的甲状腺乳头状癌患者在该位点的基因型和等位基因频数分布差异亦无统计学意义（P>0.05）。结论：RET基因rs1799939位点的基因多态性可能与PTC的发生无关联。     

RET原癌基因的研究进展

RET基因是一个在转化中发生重排的原癌基因,它编码细胞膜受体酪氨酸激酶。近些年随着对酪氨酸激酶家族的深入研究,发现RET基因在多种恶性肿瘤中存在高表达和/或基因重排现象,且RET的表达与这些恶性肿瘤的发生、发展关系密切。RET的表达与肿瘤恶性程度呈正相关,与患者的预后呈负相关,在恶性肿瘤治疗方面RET可以作为新的治疗靶点。本文就近几年来对RET原癌基因的研究进展进行综述。     

RET原癌基因在甲状腺结节细针穿刺标本中的表达

目的探讨RET原癌基因在甲状腺结节细针穿刺标本中的表达及其对良恶性诊断的意义。方法选择我院普外科拟行手术切除甲状腺结节的住院患者65例,术前行甲状腺结节细针穿刺(FNA),细针穿刺涂片做RET免疫组化染色。以手术切除的甲状腺结节组织标本的病理诊断做为黄金标准,评价RET原癌基因在甲状腺结节良恶性诊断中的意义。结果依据术后病理诊断,良性甲状腺结节30例,恶性甲状腺结节35例(甲状腺乳头状癌28例,甲状腺滤泡状腺癌7例)。RET在甲状腺恶性结节FNA样本中的阳性率高于甲状腺良性结节中的阳性率(82.35%VS 10%,χ2=34.31,P<0.05),与普通甲状腺FNA相比,结合RET特殊染色可提高结节良恶性诊断的敏感度和特异度(82.86%VS 65.71%;90%VS 86.67%)。结论 RET在甲状腺恶性结节的阳性率高于甲状腺良性结节,FNA结合RET特殊染色可提高术前甲状腺结节良恶性诊断的敏感度和特异度。     

RET／PTC3在甲状腺乳头状癌中的表达

目的：探讨RET／PTC3在甲状腺乳头状癌中的表达。方法选择甲状腺乳头状癌、甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿、正常甲状腺组织各20例,用免疫组织化学染色方法,观察RET／PTC3在甲状腺良恶性结节中表达的情况。结果20例甲状腺乳头状癌组织中RET／PTC3阳性表达15例（75．0％）,阴性5例（25．0％）;20例甲状腺腺瘤组织中阳性表达4例（20．0％）,阴性16例（80．0％）;20例结节性甲状腺肿组织中阳性表达2例（10．0％）,阴性18例（90．0％）;20例正常甲状腺组织中阳性表达1例（5．0％）,阴性19例（95．0％）。甲状腺乳头状癌组织中RET／PTC3阳性表达率明显高于甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿和正常甲状腺组织,差异有统计学意义（ P＜0．05）。 RET／PTC3阳性表达的平均光密度与积分光密度在各组织间均不相同,甲状腺乳头状癌RET／PTC3阳性表达的平均光密度及积分光密度显著增加,差异有统计学意义（ P＜0．05）。结论 RET／PTC3在甲状腺乳头状癌中表达明显高于甲状腺腺瘤、结节性甲状腺肿和正常甲状腺组织,RET／PTC3有可能是鉴别甲状腺良恶性结节一个较好的分子标志物,尤其对甲状腺乳头状癌的诊断具有重要的临床意义。     

多发性内分泌腺瘤病2A家系的RET原癌基因突变研究

目的 检测一个多发性内分泌腺瘤病2A(MEN 2A)型家系的RET原癌基因突变情况。方法 提取16名家系成员外周血基因组DNA，对RET原癌基因第ll外显子进行聚合酶链反应(PCR)，PCR产物进行直接基因测序。结果 家系中l例病理确诊嗜铬细胞瘤的患者存在RET原癌基因第ll外显子634密码子错义突变；另外筛查出2名家系成员为该突变基因携带者，其中l例经B超发现甲状腺结节性病灶伴血清降钙素升高。结论 MEN2A的诊断达到了基因水平，对家系基因筛查可以早期诊断该疾病。     

多发性内分泌腺瘤病2A家系的RET原癌基因突变研究

目的检测一个多发性内分泌腺瘤病2A(MEN 2A)型家系的RET原癌基因突变情况.方法提取16名家系成员外周血基因组DNA,对RET原癌基因第11外显子进行聚合酶链反应(PCR),PCR产物进行直接基因测序.结果家系中1例病理确诊嗜铬细胞瘤的患者存在RET原癌基因第11外显子634密码子错义突变;另外筛查出2名家系成员为该突变基因携带者,其中1例经B超发现甲状腺结节性病灶伴血清降钙素升高.结论 MEN 2A的诊断达到了基因水平,对家系基因筛查可以早期诊断该疾病.     

ret原癌基因与甲状腺癌关系的研究进展

目前认为在人类肿瘤中至少有10％的肿瘤的发病机制与基因的改变有关，包括染色体易位、基因重组、基因突变或基因的过表达等，这些改变都将某些特定的基因片段发生激活或失活。在甲状腺癌中，由于ret原癌基因突变会引起甲状腺乳头状癌(PTC)，多发性内分泌腺瘤2型(MEN2)及散发性甲状腺髓样癌(MTC)的发生，ret原癌基因在甲状腺乳头状癌中通过基因重排被激活，而在多发性内分泌腺瘤2型及散发性甲状腺髓样癌中的激活机制为点突变，其中在MEN2型中发生的点突变均为种系水平，故可遗传给后代，因此国际上现已开展对甲状腺髓样癌高危人群的ret原癌基因突变的筛查工作，并通过区别点突变发生在种系水平抑或体细胞水平分析是否会遗传给后代，本文现就ret原癌基因在甲状腺癌中的研究进展作一介绍。     

RET Proto-oncogene Expression in Fine Needle Aspiration of Thyroid Nodules

目的 探讨RET原癌基因在甲状腺结节细针穿刺标本中的表达及其对良恶性诊断的意义.方法 选择我院普外科拟行手术切除甲状腺结节的住院患者65例,术前行甲状腺结节细针穿刺(FNA),细针穿刺涂片做RET免疫组化染色.以手术切除的甲状腺结节组织标本的病理诊断做为黄金标准,评价RET原癌基因在甲状腺结节良恶性诊断中的意义.结果 依据术后病理诊断,良性甲状腺结节30例,恶性甲状腺结节35例(甲状腺乳头状癌28例,甲状腺滤泡状腺癌7例).RET在甲状腺恶性结节FNA样本中的阳性率高于甲状腺良性结节中的阳性率(82.35% VS 10%,χ2=34.31,P＜0.05),与普通甲状腺FNA相比,结合RET特殊染色可提高结节良恶性诊断的敏感度和特异度(82.86% VS 65.71%; 90% VS 86.67%).结论 RET在甲状腺恶性结节的阳性率高于甲状腺良性结节,FNA结合RET特殊染色可提高术前甲状腺结节良恶性诊断的敏感度和特异度.     

DelD631:多发性内分泌腺瘤病2A型RET原癌基因的一个新突变

目的 检测一个多发性内分泌腺瘤病2A型（MEN2A）家系中RET原癌基因突变情况,以探寻该家系发病的分子机制。方法一个MEN2A家系,包括先证者两代人共22位成员的大家系。提取该家系22位成员外周血基因组DNA,扩增先证者RET原癌基因的外显子10、11,进而对纯化后的PCR产物直接测序,并进一步进行克隆测序,判定变异的位点及编码氨基酸序列的变化,测得突变所在的外显子后,将其余几例患者及其亲属相应外显子的扩增产物进行测序。结果 4例MEN2A患者均存在13631密码子（GAC）的杂合缺失,碱基序列由TGC^∧GACGAGCTG变为TGCGAGCTG,导致代表天冬氨酸的13631的缺失,即delD631;4例患者中Ⅱ6的一级亲属（Ⅲ10）为该基因突变携带者。克隆测序发现的突变点与Cariff医学遗传学院人类基因突变数据库收录的MEN2A相关的RET原癌基因突变比较,确定为新突变点。结论 本研究MEN2A家系存在外显子11的13631杂合缺失突变,是国内外报道的首个RET原癌基因13631缺失突变。临床表现特点：相对于半胱氨酸位点突变,其发病年龄迟,肾上腺嗜铬细胞瘤可早于甲状腺髓样癌发生。     

两个多发性内分泌腺瘤病2A型家系RET基因突变研究

目的总结2个多发性内分泌腺瘤病2A（MEN2A）型家系的临床特点,及MEN2A家系RET基因突变类型。方法对2个MEN2A家系进行临床调查,分析其临床特点。提取2个家系成员外周血基因组DNA,扩增先证者RET原癌基因的外显子10、11,13—16,并行Sanger测序,测得突变所在的外显子后,将其亲属相应外显子的扩增产物进行测序。结果家系1的先证者及其哥哥的10q11．2外显子11（密码子634）RET原癌基因发生点突变：Cys643Trp。家系2的先证者其兄长存在10q11。2外显子11（密码子634）RET原癌基因发生点突变：Cys643Arg,筛查出1个家系成员为基因突变携带者。结论RET原癌基因第11外显子Cys643Trp杂合突变及Cys634Arg杂合突变,均为MEN2A的致病基因．此2个家系患者虽然突变类型不同,但两家系患者在起病方式、发病年龄及临床表现均相似。基因检测是诊断MEN2A的有效方法。     

RET基因C634Y突变致多发性内分泌腺瘤病2A型一例报道并文献复习

多发性内分泌腺瘤病2A型（MEN2A）是多发性内分泌腺瘤病2型（MEN2）的一种,临床通常表现为甲状腺髓样癌（MTC）、嗜铬细胞瘤（PHEO）及甲状旁腺功能亢进。研究表明MEN2A由10号染色体RET基因突变导致。本文报道了一例由RET基因C634Y突变导致的MEN2A患者,并对其家族成员进行了基因检测,绘制系谱图。基因检测结果显示患者同胞及同胞的子女存在C634Y突变。通过本病例诊疗结合文献复习,提示临床当患者出现内分泌腺体肿瘤时,需引起警惕,应对患者其他内分泌腺体进行进一步检查,并进行RET基因检测,以防出现误诊、漏诊,实现早期治疗,提高治疗效果,改善患者预后。MEN2A患者亲属也应进行RET基因检测。     

乳头状甲状腺癌患者血清和甲状腺组织中白细胞介素6 水平的检测及其意义

目的：探讨白细胞介素6（IL-6）与乳头状甲状腺癌（PTC）发病的关系,阐明IL-6在PTC发生发展中的作用及其可能机制。方法：收集5例PTC患者（病例1组）、5例桥本甲状腺炎（HT）并发PTC患者（病例2组）和5名查体正常人（正常组）的血清,采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组研究对象血清中IL-6水平。收集20例PTC （PTC组）、15例HT并发PTC患者（HT+PTC组）病变甲状腺组织和18名正常人（对照组）甲状腺组织,采用免疫组织化学（IHC）法检测各组研究对象甲状腺组织中IL-6、IL-6受体（IL-6R）、核因子κB （NF-κB）和RET/PTC蛋白表达阳性率;分析IL-6、IL-6R与RET/PTC、NF-κB表达的关联性。结果：PTC患者甲状腺组织内上皮细胞复杂乳头状增生伴细胞核毛玻璃样,并见核沟及核内包涵体;HT并发PTC患者甲状腺组织中除了PTC典型病变外,还可以看见弥漫淋巴组织浸润伴淋巴滤泡形成,增生与萎缩甲状泡上皮共存伴甲状腺上皮嗜酸性变,间质纤维化;正常甲状腺组织小叶结构存在,滤泡细胞大小一致。ELISA法检测,PTC组和HT并发PTC组患者血清IL-6水平高于正常组（P<0.05）;IHC法检测,PTC组患者甲状腺组织中IL-6、IL-6R、NF-κB和RET/PTC表达阳性率高于对照组（P<0.05）。IL-6、IL-6R与NF-κB、RET/PTC蛋白表达有关联（P<0.05）。结论：IL-6可能通过RET/PTC-NF-κB信号通路参与PTC的发生发展。     

CK19、RET、Survivin在甲状腺乳头状癌及淋巴细胞性甲状腺炎中表达的意义

目的:探讨淋巴细胞性甲状腺炎(LT)与甲状腺乳头状癌(PTC)之间的关系。方法:选取手术切除并经病理证实的26例LT、26例PTC及28例LT合并PTC组织,应用免疫组织化学法检测细胞角蛋白19、RET、Sur-vivin蛋白的表达。结果:CK19、RET、Survivin在LT合并PTC中的癌组织与癌周淋巴细胞性甲状腺炎组织中的表达均无统计学差异(P>0.05)。在单纯PTC及LT合并PTC两组淋巴结转移状况的比较中,Survivin的阳性率在周围淋巴结转移组均高于无淋巴结转移组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)LT与PTC的关系密切,LT可被认为是一种癌前病变。(2)Survivin蛋白的表达与PTC及LT合并PTC的淋巴结转移呈正相关,可以作为判断其转移倾向的参考指标。     

天津地区肠无神经节细胞症RET基因13号外显子基因多态性研究

目的：探讨RET基因13号外显子的基因多态性改变与肠无神经节细胞症（HSCR）的发生关系.方法：提取74例HSCR患者和53例与胃肠道疾病无关的对照组病人的全血DNA,聚合酶链反应（PCR）扩增RET基因13号外显子,纯化,应用直接测序方法分析13号外显子的基因表达情况.结果：在HSCR组与对照组中,RET基因13号外显子存在T769G基因多态性改变,其基因型频率在HSCR组中为GG78.27％,GT18.93％,TT2.8％;在对照组中为GG58.5％,GT15.1％,TT26.4％.等位基因频率在HSCR组中为G：87.84％,T：12.16％;在对照组中为G：66.0％,T：34.0％.两组的基因型和等位基因频率差异均有统计学意义（x2=18.383,P＜0.001;x2=19.834,P＜0.001）.结论：RET基因13号外显子的T769G基因多态性改变与先天性巨结肠的发生可能相关.     

Ret-proto-oncogene analysis in medullary thyroid carcinoma

Introduction: Medullary carcinoma of the thyroid (MTC) is a rare tumour which occurs in both sporadic and hereditary forms. Mutations of the RET proto-oncogene have been identified in hereditary forms. The aim of our study was to confirm or exclude familial disease by examining for germline mutations in the RET proto-oncogene in patients with medullary thyroid carcinoma. Methods: Nine patients with medullary thyroid carcinoma and 4 of their children were studied. Peripheral blood was used to examine for mutations in the RET proto-oncogene. When this was not available, archival thyroid tissue was used. Results: Seven patients had clinically sporadic tumours, confirmed by mutational analysis of RET. Four children were at risk of being carriers of a mutated gene, as their fathers had histologically proven MTC and had tested positive for the mutation at codon 618 on exon 10 of the RET proto-oncogene. Three of these children carried the 618 mutation. To date, 2 have had a prophylactic thyroidectomy, the pathology of which revealed C-cell hyperplasia. One child had familial disease excluded by mutational analysis. One patient had a clinical diagnosis of MEN2B confirmed by detection of the 918 mutation on exon 16 of the RET proto-oncogene. Conclusions: RET proto-oncogene analysis is a reliable method of differentiating familial from sporadic MTC. Mutational information determines which family members of affected kindreds are at risk of developing the disease and can be used to affect clinical management.