连续性血液滤过滤器复用对血浆炎性细胞因子清除的影响

目的探讨在连续性静脉-静脉血液滤过(CVVH)中滤器复用对血浆TNF-α、IL-6清除的影响。方法将需要行CVVH的危重症患者随机分为2组:A组为首次使用透析器,B组为用过氧乙酸消毒后复用透析器(均为第1次复用),分别测定治疗开始后0,2,6 h血浆TNF-α、IL-6的浓度及0~2 h和4~6 h期间收集的滤出液中TNF-α、IL-6的浓度。结果透析开始后2 h和6 h血浆中TNF-α、IL-6的浓度2组比较无显著性差异(P>0.05);透析开始后0~2 h和4~6 h期间收集的滤出液中TNF-α、IL-6的浓度2组比较也无显著性差异(P>0.05)。结论CVVH时滤器复用仍能有效地清除血浆中炎性细胞因子,尤其是对IL-6有较强的清除能力。     

血液标本体外放置时间和温度对尿酸检测结果的影响

目的研究血液标本体外放置时间和温度对尿酸测定的影响。方法测定不同温度和时间条件下保存的血液标本的尿酸水平,观察与立即分离血清测定组比较有无显著性差异。结果血液标本室温(25℃)下放置2 h以上尿酸结果有显著性变化(P<0.05),4℃冰箱放置的标本随时间的延长无明显变化。结论血液标本室温下体外放置随时间的延长,尿酸水平有显著下降趋势,为确保尿酸检测的准确性,采血后应及时分离血清或放4℃冰箱保存。     

参麦注射液对心衰犬肿瘤坏死因子α、白介素1β、白介素6的影响

目的:考察不同剂量参麦注射液(SMI)对心衰犬血清肿瘤坏死因子α(TNF-α),白介素1β(IL-1β),白介素6(IL-6)的影响。方法:将造模成功4周后的心衰犬20只随机分为模型对照组和SMI低、中、高剂量组,每组5只。模型对照组予生理盐水20mL,低、中、高剂量组分别予参麦注射液0.517,1.034,1.551ml·kg-1(生理盐水稀释至20mL)ivqd×7。分别于给药前及给药后72h,144h时点取静脉血2mL冰冻保存,用放射免疫分析法测定血清TNF-α,IL-1β,IL-6浓度。结果:SMI低、中、高剂量组心衰犬血清TNF-α,IL-1β,IL-6水平较模型对照组下调。结论:SMI能使心衰犬血中TNF-α,IL-1β,IL-6水平下调,并呈现一定的量效、时效关系。     

溪黄草不同基原植物的抗菌和抗真菌活性研究

目的:探究溪黄草不同基原植物的抗菌和抗真菌活性,为建立中药溪黄草的质量标准提供参考。方法:分别以80%的乙醇水溶液和水为溶剂对6种溪黄草基原植物进行超声波提取,以金黄葡萄球菌、表皮葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、变形杆菌和绿脓杆菌为供试细菌,以白色念珠菌、酿酒酵母和产黄青霉为供试真菌,采用琼脂平板扩散法测定各溪黄草基原植物醇提物和水提物的抗菌和抗真菌活性,用液体二倍稀释法测定其最小抑制浓度(MIC)。结果:6种基原植物的醇提物对供试的革兰阳性菌均有较强的抑菌活性,而对阴性菌抑制较弱或无抑制;其中,溪黄草和显脉香茶菜对金黄色葡萄球菌的抑菌活性最强,MIC分别为0.063、0.125 g·m L~(-1)。6种基原植物的醇提物中,溪黄草的抗真菌活性最强,其对白色念珠菌和酿酒酵母的MIC均为0.125 g·m L~(-1)。6种基原植物的水提物对供试细菌和真菌几乎没有抑制活性。结论:6种溪黄草基原植物中,溪黄草醇提物的抗菌和抗真菌活性最强。     

血液标本的保存时间对血常规检测结果的影响

目的研究血液标本的保存方法和时间等因素对血常规检测结果的影响。方法随机选择10名健康的志愿者,抽静脉血10管,每管2ml。分别进行血液标本保存时间对红细胞、白细胞、血小板参数等检测结果影响的研究。结果三项参数指标在6h与10h、24h平均变化率,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血液在低温条件下保存,并在6h以内操作对检测结果影响较小。     

双黄连注射液细菌内毒素检查方法的研究

目的：探讨双黄连注射液能否应用鲎试验法进行细菌内毒素检查。方法：通过抑制增强实验确定双黄连注射液对鲎试验凝集反应干扰情况，并按中国药黄2000版细菌内毒素检查法进行干扰评价实验。结果：双黄连注射液对鲎试剂的凝集反应有干扰，但经过1：8稀释后，能够消除这种干扰。结论：可以应用细菌内毒素法取代家兔法，对双黄边注射液进行热原检查。     

芍药苷对大鼠颈椎间盘纤维环细胞炎症模型IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响

目的:观察芍药苷对体外培养的大鼠颈椎间盘纤维环细胞炎症模型IL-1β、IL-6和TNF-α表达的影响。方法:分离3周龄SD大鼠颈椎间盘纤维环细胞,培养至取第三代进行甲苯胺蓝染色及II型胶原免疫组织化学染色鉴定。鉴定成功后,随机分为空白组、模型组和芍药苷组,其中模型组与芍药苷组均采用脂多糖(LPS)诱导,建立体外纤维环细胞的炎症模型,并确定干预的最佳浓度和时间;于造模成功后,芍药苷组分别用不同浓度芍药苷进行干预,其余各组不进行干预,24h后,收集各组细胞上清液,通过ELISA法检测IL-1β、IL-6和TNF-α的表达量。结果:与空白组比较,24h时,LPS10ng/mL、100ng/mL、1000ng/mL、2000ng/mL组细胞上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α含量均显著高于空白组(P0.01)。其中,LPS浓度为10ng/mL时,IL-1β、IL-6和TNF-α表达高于其余各组,差异具有统计学意义(P0.01);10ng/mL LPS分别干预纤维环细胞4h、8h、12h、24h、48h,细胞上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均高于空白组,且24h时细胞上清中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均高于其余各组。芍药苷组采用浓度为20μg/mL、200μg/mL、2 000μg/mL芍药苷溶液干预纤维环细胞的炎症细胞24h,细胞上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α的表达均低于空白组,差异具有统计学意义(P0.01),且芍药苷浓度为200μg/mL时IL-1β、IL-6和TNF-α均低于20μg/mL、2 000μg/mL时,差异具有统计学意义(P0.01)。结论:LPS浓度为10ng/mL时,干预24h时,可成功建立体外纤维环细胞炎症模型;芍药苷浓度为200μg/mL时可有效抑制纤维环细胞炎症模型IL-1β、IL-6和TNF-α的表达。     

人支气管上皮细胞体外炎症模型建立初探

目的:在体外建立人支气管上皮细胞(16HBE)的炎症模型,为研究中药组方抗炎机制提供实验模型。方法:采用完全培养液在体外培养人支气管上皮细胞,加入1mg/L的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)作用细胞不同时间(3、6、12、24h)后,测定细胞增殖活性,ELISA法检测上清液中IL-8和TNF-α含量。结果:脂多糖刺激12h后人支气管上皮细胞的增殖活性好、速度快,且炎性细胞因子TNF-α、IL-8分泌量与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论:1mg/L脂多糖刺激12h可以成功建立体外人支气管上皮细胞炎症模型。     

狗脊蒸后切与切后蒸工艺的比较

目的:比较狗脊的不同炮制工艺并优选其蒸制工艺。方法:采用HPLC测定原儿茶酸、原儿茶醛含量,流动相甲醇-1%冰乙酸(5∶95),检测波长280 nm。以原儿茶酸、原儿茶醛含量的综合评分为指标,比较鲜药材蒸后切片、切片烘干润蒸、蒸制、放置氧化后蒸制等工艺,确定合理的炮制方法;通过正交试验考察浸润时间、蒸制时间、闷润时间对狗脊鲜片烘干润蒸工艺的影响。结果:选择鲜狗脊切片烘干后润蒸的炮制方法,其最佳炮制工艺为生狗脊片室温浸润1 h,武火蒸制4 h,停火闷润4 h;原儿茶酸、原儿茶醛质量分数分别为1.561,0.107 mg·g-1。结论:优选的蒸制工艺节时、节能,合理可行,为狗脊的产地加工提供参考。     

鱼腥草破壁饮片抗细菌内毒素作用研究

目的考察鱼腥草破壁饮片抗内毒素(LPS)作用,并与传统饮片作用进行比较。方法采用BALB/c小鼠鼻滴LPS建立肺部炎症模型,检测血液中炎症细胞数和病理学观察肺组织炎症程度;采用尾iv内毒素致大鼠炎症模型,检测血液中白细胞数和血浆中LPS含量,酶联免疫法(ELISA)检测血清中炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量;采用鲎试剂试验法,观察鱼腥草破壁饮片提取物体外抗细菌内毒素作用。结果鱼腥草破壁饮片和传统饮片均可不同程度降低BALB/c小鼠全血中白细胞含量,减轻肺组织病理炎症细胞浸润,且破壁饮片呈明显的剂量依赖关系;鱼腥草破壁饮片与传统饮片均可不同程度显著降低大鼠全血中白细胞、血浆中内毒素和血清中IL-6、IL-1β和TNF-α含量;与传统饮片比较,鱼腥草破壁饮片可明显降低血清中IL-1β、TNF-α含量;相同剂量或相同稀释比例下,鱼腥草破壁饮片体外抗细菌内毒素作用均显著强于鱼腥草传统饮片。结论鱼腥草破壁饮片具有良好的抗内毒素作用,且在一定程度上优于鱼腥草传统饮片。     

鲎试剂用于细菌内毒素检测碳酸氢钠注射液的研究

 目的：通过试验以确定碳酸氢钠注射液可用细菌内毒素代替传统的热原检查法。方法：用鲎试剂和家兔做对照试验确定灵敏度。结果：用灵敏度为0.125 EU·ml^-1的鲎试剂进行内毒素检查比家兔灵敏度高12倍。结论：细菌内毒素检查法可以代替热原检查法。     

鲎试剂用于细菌内毒素检测碳酸氢钠注射液的研究

目的：通过试验以确定碳酸氢钠注射液可用细菌内毒素代替传统的热原检查法。方法：用鲎试剂和家兔做对照试验确定灵敏度。结果：用灵敏度为０１２５ＥＵ·ｍｌ－１的鲎试剂进行内毒素检查比家兔灵敏度高１２倍。结论：细菌内毒素检查法可以代替热原检查法。     

Production of Th1- and Th2-dependent cytokines induced by the Chinese medicine herb, Rhodiola algida, on human peripheral blood monocytes

Ethnopharmacological relevance

Rhodiola algida, an herb ingredient used in Chinese medicine, has been clinically proven to be effective in enhancing human immune responses.

Aim of study

This study attempted to identify the potential immunomodulatory effect of Rhodiola algida extract in human immune system in vitro, and to examine its underlying molecular effects.

Materials and methods

Firstly, the bioactive marker compound salidroside was used for standardization of Rhodiola algida extract by reversed-phase HPLC. Secondly, the regulation of human immune responses was investigated in human peripheral blood monocytes. A series of cytokines known to play important roles in the human immune responses were examined.

Results

The current study provided quantitative assay for the marker compound, salidroside, in the Rhodiola algida extract for ensuring the quality consistency of Rhodiola algida used in the following experiments. Biological assay indicated that Rhodiola algida stimulates human peripheral blood lymphocytes and its underlying immunomodulatory effects probably through its regulation of IL-2 in Th1 cells and IL-4, IL-6, IL-10 in Th2 cells.

Conclusion

The findings may enable us to further explain the pharmacological properties in Chinese medicine and make Rhodiola algida a very promising immunomodulating agent.     

防风醇提物对肥大细胞PAR-2及相关细胞因子的影响

目的:观察防风醇提物对肥大细胞过氧化物酶体增殖因子活化受体-2(PAR-2)及相关细胞因子的影响,探索防风抗过敏的新机制。方法:用胰蛋白酶刺激P815细胞的方法建立肥大细胞脱颗粒模型,设空白组,模型组,防风高、低剂量组(0.02,0.01 g·m L~(-1)),药物作用6 h后,采用ELISA检测细胞上清液中组胺,白细胞介素-4(IL-4),IL~(-1)3水平,Western blot,RTPCR检测PAR-2蛋白及其mRNA的表达。结果:与空白组比较,模型组组胺,IL-4,IL~(-1)3含量及PAR-2蛋白及mRNA的表达明显升高(P0.05,P0.01);与模型组比较,防风醇提物在体外抑制肥大细胞组胺,IL-4,IL~(-1)3含量及PAR-2蛋白及mRNA的表达(P0.05,P0.01)。结论:防风醇提物可能通过抑制PAR-2表达,阻断肥大细胞脱颗粒,且选择性减少相关细胞因子分泌,继而抑制肥大细胞"瀑布效应",达到抗过敏作用。     

血瘀证与血栓形成病证结合动物模型的研究

目的:以细菌内毒素(LPS)与角叉菜胶(Ca)两种因素联合造模,制备一种方法简便、稳定的血瘀证和血栓形成病证结合动物模型。方法:将大鼠随机分成正常对照组,LPS/Ca造模组。造模组动物先每只给予Ca 5 mgip,16 h后给予LPS 50μg.kg^-1iv,以注射LPS时作为试验的0 h。于造模后24 h观察血栓形成,于造模后不同的时间点分批观察微循环变化、血液流变学指标、凝血指标和炎症反应指标。结果:LPS/Ca联合造模可建立稳定、重复性良好的血栓形成模型,不需剖杀动物在尾部即可肉眼观察和定量测量血栓。该模型还表现出微循环障碍以及全血黏度增高、血小板聚集率异常等血液流变学指标的改变,同时还由于血栓形成消耗了大量凝血因子和血小板,而表现出凝血指标延长。结果表明该模型具有明显的血瘀证客观指标的改变。模型早期动物血液中的炎性因子TNFα和IL-6明显增高,故该模型符合炎症诱导的热毒血瘀证特点。结论:LPS/Ca联合造模可建立一种操作简便、稳定的热毒血瘀证与血栓形成病证结合动物模型。     

Suppressive effect of Petasites japonicus extract on ovalbumin-induced airway inflammation in an asthmatic mouse model

Aim of the study

Asthma is a disease marked by airway inflammation. Petasites japonicus (Pj) is known as an herb for treating asthma, oxidant stress and gastric ulcer in traditional Oriental medicine. In this study, the inhibitory effects of Pj extract on asthmatic responses were examined both in vitro and in vivo.

Materials and methods

The Pj extract was acquired from whole plants of Petasites japonicus using 80% ethanol. Cytotoxicity of the Pj extract on Jurkat cells and THP-1 cells was determined using MTT assay. ELISA was performed to determine the expression levels of cytokines, chemokines, and IgE. BALB/c mice were used for an OVA-induced asthmatic mouse model. Reactive oxygen species (ROS) production was stained with 2′,7′-dichlorofluorescein diacetate and measured by fluorescence-activated cell sorting analysis. The effects of the Pj extract on leukocyte infiltration and mucus production were determined using periodic acid-Schiff staining as well as hematoxylin and eosin staining.

Results

The Pj extract inhibits the increased release of interleukin (IL)-2, IL-4, IL-5, IL-13, and TNF-α due to house dust mite in Jurkat cells and blocks IL-6 expression in THP-1 cells without cytotoxicity. In the asthmatic mouse model, the Pj extract inhibits eosinophil infiltration, mucus hypersecretion, and IL-5 level in bronchoalveolar lavage (BAL) fluid, and it has a scavenging effect on ROS production of cells in BAL fluid.

Conclusion

The Pj extract has suppressive properties for the pathogenesis of airway inflammation and may be used as a potent agent for the treatment of asthma.     

山药多糖纳米粒的体外抗氧化活性

目的：湿磨法制备山药多糖纳米粒,星点设计优化最优处方。研究山药多糖纳米粒的体外抗氧化活性。方法：通过星点设计优化湿磨法制备的山药多糖纳米粒最优处方,SALD-2201激光粒度分布仪检测其平均粒径及粒度分布。通过化学实验法和试剂盒法研究过氧化氢、羟自由基、超氧阴离子自由基、DPPH的抗氧化能力,并测定其还原力与金属螯合力。结果：星点设计得最优工艺料液比1：24、球磨转速360 r·mim^-1、球磨时间36 h。SALD-2201激光粒度分布仪测定1.0%粒径在186 nm,80.0%粒径575 nm。经体外抗氧化实验证实,过氧化氢、DPPH、还原潜力与金属螯合力的自由基清除率随多糖浓度的增加而成增长趋势。其中山药多糖与其纳米粒对DPPH清除能力在0.5,4,6,8 g·L^-1质量浓度下均有极显著差异。超氧阴离子自由基与羟自由基的抗氧化能力亦与多糖浓度成正相关。结论：山药多糖及其纳米粒体外抗氧化活性良好,且山药多糖纳米粒的体外抗氧化活性优于山药多糖。     

Camel urine components display anti-cancer properties in vitro

Ethnopharmacological relevance

While camel urine (CU) is widely used in the Arabian Peninsula to treat various diseases, including cancer, its exact mechanism of action is still not defined. The objective of the present study is to investigate whether camel urine has anti-cancer effect on human cells in vitro.

Materials and methods

The annexinV/PI assay was used to assess apoptosis, and immunoblotting analysis determined the effect of CU on different apoptotic and oncogenic proteins. Furthermore, flow cytometry and Elispot were utilized to investigate cytotoxicity and the effect on the cell cycle as well as the production of cytokines, respectively.

Results

Camel urine showed cytotoxicity against various, but not all, human cancer cell lines, with only marginal effect on non-tumorigenic epithelial and normal fibroblast cells epithelial and fibroblast cells. Interestingly, 216 mg/ml of lyophilized CU inhibited cell proliferation and triggered more than 80% of apoptosis in different cancer cells, including breast carcinomas and medulloblastomas. Apoptosis was induced in these cells through the intrinsic pathway via Bcl-2 decrease. Furthermore, CU down-regulated the cancer-promoting proteins survivin, β-catenin and cyclin D1 and increased the level of the cyclin-dependent kinase inhibitor p21. In addition, we have shown that CU has no cytotoxic effect against peripheral blood mononuclear cells and has strong immuno-inducer activity through inducing IFN-γ and inhibiting the Th2 cytokines IL-4, IL-6 and IL-10.

Conclusions

CU has specific and efficient anti-cancer and potent immune-modulator properties in vitro.     

龙胆泻肝汤对PCOS模型大鼠的影响

目的:研究龙胆泻肝汤对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠药效观察及机制,为龙胆泻肝汤临床PCOS的应用提供初步实验依据。方法:将SD大鼠50只,随机分为2组,即正常组10只、模型制备组40只,采用胰岛素(INS)联合人绒毛膜促性腺激素(HCG)法复制大鼠PCOS模型,造模成功的大鼠分为模型组、达英-35(0.21 g·kg-1)及龙胆泻肝汤高、低剂量组(29.6,7.4 g·kg-1),除正常组外,其余各组连续灌胃给药15 d;动物处理后测量卵巢质量及体积大小,检测各组大鼠血清中促黄体生成素(LH)/卵泡刺激素(FSH),睾酮(T),空腹血糖,空腹胰岛素(INS)激素水平及炎症因子白细胞介素-2(IL-2),IL-4,IL-6,IL-10水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)分析各组卵巢组织中JAK2,STAT3,p-STAT3和IL-6蛋白的表达量。结果:与正常组比较,模型组卵巢质量及体积明显升高,血清LH/FSH,T,空腹血糖及INS均明显升高,IL-2,IL-6,IL-10水平明显升高,JAK2,STAT3和IL-6蛋白的表达量明显升高(P0.05);与模型组比较,龙胆泻肝汤高、低剂量组明显降低卵巢质量及体积,血清LH/FSH,T,空腹血糖及INS,IL-2,IL-6,IL-10水平,升高JAK2,STAT3蛋白的表达量,降低p-STAT3和IL-6蛋白的表达量(P0.05)。结论:龙胆泻肝汤对PCOS大鼠具有明显疗效,主要通过降低激素水平和抑制炎症反应;且其机制可能与JAK2/STAT3通路相关。     

野生与家养五灵脂药效学比较研究

目的: 对野生和家养复齿鼯鼠所产五灵脂的活血化瘀及抗炎作用进行比较。 方法: 抗炎实验动物随机分为8组:模型对照组,阳性药组(阿司匹林0.2 g·kg^-1),家养(陕西)五灵脂高、中、低剂量组(生药9,4.5,2.25 g·kg^-1),野生五灵脂高、中、低剂量组(生药 9,4.5,2.25 g·kg^-1),连续口服7 d;活血化瘀实验动物分为9组:空白对照组、模型组,阳性药组(阿司匹林0.05 g·kg^-1)及6个给药组(剂量及疗程同前)。给药后以角叉菜胶致大鼠足肿胀模型,观测30 min,1,2,4,6,24 h足跖肿胀度;利用大鼠血瘀证模型,检测不同切变率下的全血黏度、红细胞压积、血浆黏度、血小板聚集率和血浆纤维蛋白原含量。 结果: 各给药组在给药后1 h作用最强,家养五灵脂作用时间持久,高剂量在6 h仍可以明显降低足跖肿胀度[由(0.141±0.073)mL降至(0.075±0.025)mL]。家养五灵脂对血液流变学指标没有明显影响,野生五灵脂可以降低全血黏度。 结论: 家养五灵脂抗炎作用优于野生五灵脂,但没有显示出活血化瘀作用。