息风止痉法干预AS易损性斑块IL-6、TNF-α的理论机制探讨

炎症反应是导致AS发生发展,尤其是AS斑块发生易损和破裂主要机制之一。IL-6、TNF-α在炎症反应、斑块易损性的发病过程中起着非常重要的作用。调节IL-6、TNF-α干预炎症反应,对于稳定易损性斑块具有重要意义。结合中医学及彝族医学的病机认识,提出"风邪内动,血脉痉挛"为斑块易损性的主要病机,"息风止痉"法为治疗原则。文章初步探讨IL-6、TNF-α影响AS炎症反应的机制,并阐明息风止痉法干预易损性斑块炎症反应的理论依据。     

“风邪内动,血脉痉挛”病机假说及彝药塔若散干预CAS易损性斑块的理论依据

通过回顾既往易损性斑块的中医病机认识,结合彝族医学的理论认识,发现风邪内动是颈动脉粥样硬化(CAS)易损性斑块与缺血性卒中病重要的病因病机联系,提出了"风邪内动——斑块易损性"的病机假说,认为CAS易损性斑块的病机是本为肝脾肾不足,标为痰瘀热毒互结,发则风邪内动。其中"内风"为斑块"易损性"的关键病理因素,"风邪内动,血脉痉挛"为斑块易损性的主要病机。确立了CAS易损性斑块的治疗原则:急则"息风止痉",稳定斑块;缓则化痰逐瘀解毒,补益肝脾肾,并初步阐明彝药塔若散干预易损性斑块的理论依据。这是一个具有创新意义的值得探索的科学问题。     

六郁同治法对动脉粥样硬化小鼠易损斑块胶原代谢的影响

目的观察六郁同治法对动脉粥样硬化小鼠易损斑块处Ⅰ型、Ⅲ型胶原的含量及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,探讨其稳定易损斑块的机制。方法采用高脂饮食喂养ApoE基因敲除小鼠的方法建立易损斑块模型。将小鼠分为正常组、模型组、中药高剂量组、中药低剂量组、辛伐他汀组,每组10只,给药组给予相应药物干预,模型组和正常组给予等量生理盐水,12周后,用苦味酸-天狼星红染色观察Ⅰ型、Ⅲ型胶原,免疫组化法检测MMP-9表达。结果与正常组比较,模型组形成易损斑块;与模型组比较,中药高、低剂量组Ⅰ型胶原增加、Ⅲ型胶原减少(P0.01),Ⅲ型胶原/Ⅰ型胶原比值降低(P0.01),MMP-9表达减少(P0.01)。结论六郁同治法可稳定易损斑块,调节Ⅰ型、Ⅲ胶原的含量和抑制MMP-9的表达可能是其作用机制之一。     

中药强心饮含药血清对心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的:研究强心饮对肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα,TNF-α)诱导新生大鼠心肌成纤维细胞(cardi-ac fibroblasts CFs)增殖和胶原合成的影响,探讨其抑制心肌纤维化的作用机制。方法:采用胰酶消化法分离培养乳鼠CFs,建立TNF-α诱导新生大鼠CFs纤维化病理模型,分别采用四氮唑蓝(MTT)比色法、羟脯氨酸法检测不同浓度强心饮含药血清对CFs增殖和胶原含量影响。结果:TNF-α能够刺激CFs增殖和胶原合成,与空白组相比差异显著(P<0.05);强心饮抑制TNF-α诱导CFs增殖和胶原合成(P均<0.05)。结论:强心饮通过抑制TNF-α诱导的CFs增殖和胶原合成,发挥有效的抗心肌纤维化作用。     

中药强心饮含药血清对心肌成纤维细胞增殖和胶原合成的影响

目的：研究强心饮对肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α,TNF—α）诱导新生大鼠心肌成纤维细胞（cardiac fibroblasts CFs）增殖和胶原合成的影响,探讨其抑制心肌纤维化的作用机制。方法：采用胰酶消化法分离培养乳鼠CFs,建立TNF—α诱导新生大鼠CFs纤维化病理模型,分别采用四氮唑蓝（MTT）比色法、羟脯氨酸法检测不同浓度强心饮含药血清对CFs增殖和胶原含量影响。结果：TNF—α能够刺激CFs增殖和胶原合成,与空白组相比差异显著（P〈0．05）;强心饮抑制TNF—α诱导CFs增殖和胶原合成（P均〈0．05）。结论：强心饮通过抑制TNF—α诱导的CFs增殖和胶原合成,发挥有效的抗心肌纤维化作用。     

三甲散对大鼠肝星状细胞株HSC-T6 Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响

目的:观察三甲散对大鼠肝星状细胞株HSC-T6Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响。方法:以三甲散药物血清干预HSC-T6细胞,空白对照组采用DMEM培养液、HSC-T6,Y-27632阳性对照组采用Y-27632、DMEM培养液、HSC-T6,三甲散组采用三甲散、DMEM培养液、HSC-T6。ELISA法检测细胞上清Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的含量,观察Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原合成情况。结果:与对照组比较,三甲散和Y-27632处理组I型胶原含量明显降低(P0.01),三甲散和Y-27632处理组Ⅲ型胶原含量降低(P0.05)。结论:三甲散可以抑制大鼠肝星状细胞株HSC-T6Ⅰ、Ⅲ型胶原合成。     

动脉粥样硬化易损斑块中医药干预机制研究概况

动脉粥样硬化易损斑块是指不稳定、易于破裂、易形成血栓而导致不良心血管事件的斑块,中医学多从"虚"、"瘀"、"痰"、"毒"、"风"等方面认识易损斑块的"易损性"。现代研究表明,中医药可以通过调节脂质代谢、抗炎、抑制血管新生、干预氧化应激、干预信号通路等多途径、多环节使易损斑块趋于稳定,在稳定斑块方面具有一定疗效和优势。     

冰香散对甲Ⅰ型流感病毒感染小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响

目的 观察冰香散挥发油对甲Ⅰ型流感病毒(H1N1)感染小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响,探讨其影响机体免疫应答的作用机制。方法 冰香散挥发油不同途径给药(滴鼻、雾化)对甲Ⅰ型流感病毒感染小鼠干预性给药,用CCK-8法检测冰香散对刀豆蛋白A(ConA)、革兰氏阴性菌细胞壁脂多糖(LPS)诱导T、B淋巴细胞增殖的影响;酶联免疫法(ELISA)检测冰香散对白介素-4(IL-4)、白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等相关细胞因子的影响。结果 与正常对照组比较,模型组H1N1对小鼠脾B淋巴细胞增殖有明显的抑制作用(P < 0.05),明显提升了TNF-α、IFN-γ和IL-2等相关致炎因子的水平(P < 0.05),而对IL-4等抗炎因子提升并不明显;利巴韦林对感染小鼠脾B淋巴细胞增殖有明显的增强作用(P < 0.01),明显提高IL-4和IFN-γ的水平,同时降低TNF-α水平(P < 0.05);冰香散滴鼻能促进感染小鼠脾B淋巴细胞的增殖(P < 0.05),抑制IL-2和TNF-α的分泌(P < 0.05);冰香散雾化能促进感染小鼠脾T淋巴细胞的增殖(P < 0.05),促进IL-4和IFN-γ产生的同时,抑制IL-2的分泌(P < 0.05)。结论 冰香散挥发油对甲Ⅰ型流感病毒感染小鼠脾细胞活性有一定的促进作用,对Th1/Th2免疫平衡有一定的调节作用,但不同给药途径(滴鼻、雾化)的抗病毒免疫机制有所不同。     

生肌化瘀方及其拆方对实验性创面新生肉芽组织中MMP-1的影响

创面的修复结果与胶原的合成和降解有密切关系，其中基质金属蛋白酶在胶原合成与代谢中具有重要的调节作用。本文旨在证实生肌化瘀方对创面的愈合作用，同时从基质金属蛋白酶MMP-1角度探讨生肌化瘀方的作用机制。     

四妙勇安汤对动脉粥样硬化易损斑块内细胞外基质的影响

目的:探讨四妙勇安汤干预动脉粥样硬化(AS)易损斑块内细胞外基质(ECM)的作用机制。方法:随机将40只日本大耳白兔分为正常组、模型组、辛伐组、四妙组,第24周取材。检测第8、16、24周时血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)含量;检测动脉壁胶原含量(CA)、细胞外脂质含量(ELA)、脂核与斑块面积比(LCA/PA)及纤维帽厚度(FCT);免疫组化方法检测斑块内MMP-9、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及核因子-κB(NF-κB)阳性面积百分比。结果:给药后各时间点四妙组血清MMP-9水平均低于模型组(P<0.01);斑块内ELA、LCA/PA、MMP-9和NF-κB阳性面积百分比均低于模型组,斑块FCT、CA及α-SMA阳性面积百分比均高于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:四妙勇安汤能够抑制细胞外基质降解,稳定AS易损斑块,其作用机制可能是通过抑制MMP-9表达实现的。     

Influence of YiQi HuoXueFang on Expressions of Serological Indexes Associated to Vulnerable Plaque of Unstable Angina Pectoris

目的:观察益气活血方对不稳定性心绞痛(UAP)易损斑块相关血清学指标MMP-9、sCD40L、sVCAM-1水平表达的影响.方法:选择51例冠心病不稳定性心绞痛(气虚血瘀证)患者,随机分为治疗组26例与对照组25例.2组均予常规西药治疗,治疗组加服益气活血方汤剂.治疗4周后,观察并比较2组患者治疗前后及治疗后反映冠状动脉粥样硬化斑块易损性的血清学检测指标MMP-9、sCD40L、sVCAM-1的变化.结果:治疗组患者血清中MMP-9、sCD40L、sVCAM-1的水平显著降低,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:益气活血方对反映冠状动脉粥样硬化斑块易损性的相关血清学检测指标有一定程度的影响,可显著降低患者MMP-9、sCD40L、sVCAM-1的表达,其机制可能通过抗血小板聚集、抗氧化、抑制炎症反应、保护内皮细胞功能等途径有效干预冠状动脉粥样硬化易损斑块,提高斑块的稳定性,从而预防心血管疾病的发生.     

三甲散含药血清对大鼠HSC-T6细胞Rho/ROCK信号通路的影响

目的:观察三甲散含药血清对HSC-T6细胞增殖及对Rho/ROCK信号通路的影响。方法:以三甲散含药血清作用HSC-T6细胞,以MTT法检测其对HSC-T6细胞增殖的影响,ELISA检测其对Ⅰ、Ⅲ型胶原合成的影响,荧光定量PCR检测其对α-SMA、TIMP-1、ROCK-ⅠmRNA表达的影响,Western blot检测其对α-SMA、TIMP-1、ROCK-Ⅰ蛋白表达的影响。结果:三甲散含药血清对HSC-T6细胞增殖抑制率从12 h开始升高,24 h达到峰值;三甲散组细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原含量较空白对照组显著降低(P0.05或P0.01);三甲散和Y-27632均能下调HSC-T6细胞α-SMA、ROCK-Ⅰ、TIMP-1 mRNA及蛋白的表达(P0.05或P0.01)。结论:三甲散可抑制HSC-T6细胞的增殖,其机制可能与Rho/ROCK信号通路有关。     

益气活血方对UAP易损斑块相关血清学指标MMP-9、sCD40L、sVCAM-1水平表达的影响

目的:观察益气活血方对不稳定性心绞痛(UAP)易损斑块相关血清学指标MMP-9、sCD40L、sVCAM-1水平表达的影响。方法:选择51例冠心病不稳定性心绞痛(气虚血瘀证)患者,随机分为治疗组26例与对照组25例。2组均予常规西药治疗,治疗组加服益气活血方汤剂。治疗4周后,观察并比较2组患者治疗前后及治疗后反映冠状动脉粥样硬化斑块易损性的血清学检测指标MMP-9、sCD40L、sVCAM-1的变化。结果:治疗组患者血清中MMP-9、sCD40L、sVCAM-1的水平显著降低,与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:益气活血方对反映冠状动脉粥样硬化斑块易损性的相关血清学检测指标有一定程度的影响,可显著降低患者MMP-9、sCD40L、sVCAM-1的表达,其机制可能通过抗血小板聚集、抗氧化、抑制炎症反应、保护内皮细胞功能等途径有效干预冠状动脉粥样硬化易损斑块,提高斑块的稳定性,从而预防心血管疾病的发生。     

姜黄素对血小板衍生生长因子诱导活化的肝星状细胞细胞外基质的影响

目的 研究姜黄素对血小板衍生生长因子(PDGF)诱导活化的肝星状细胞细胞外基质沉积的干预机制.方法 以Western blotting和RT-PCR方法分别检测姜黄素对PDGF诱导活化的肝星状细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、细胞外基质主要成分Ⅰ型前胶原(α1I胶原)和纤黏蛋白的表达,以及对调控细胞外基质降解平衡的基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9与其组织抑制剂(TIMP-1)蛋白与mRNA表达的影响.结果 姜黄素可显著下调α-SMA、α1I胶原和纤黏蛋白的蛋白与mRNA表达,减少细胞外基质的沉积:还可调节细胞外基质的降解平衡,表现为TIMP-1表达下调和MMP-2的表达上调.结论 姜黄素能够抑制PDGF诱导的肝星状细胞合成与分泌细胞外基质增加,促进细胞外基质降解,减少细胞外基质在肝脏中的沉积,进而发挥治疗肝纤维化的作用.     

四妙勇安汤对实验性兔动脉粥样硬化易损斑块的影响

目的探讨四妙勇安汤对AS易损斑块的影响及机制。方法随机将40只日本大耳白兔分为正常组10只,实验组30只。正常组予普通饲料,实验组利用复合因素制备兔AS易损斑块模型,8周时实验组随机分为模型组、辛伐组、四妙组,24周取材。检测动脉壁内膜厚度（IT）、内中膜厚度比（IT／MT）、斑块纤维帽厚度（FCT）、纤维帽与内中膜厚度比（FCT／IMT）、胶原含量（CA）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及核因子-κB（NF-κB）阳性面积百分比。结果模型组各指标与正常组比较,差异均有统计学意义（P〈0．05,P〈0．01）。四妙组IT、IT／MT均低于模型组（P〈0．05）,FCT和FCT／IMT均高于模型组（P〈0．01）;斑块内CA阳性面积百分比均高于模型组（P〈0．01）,α-SMA阳性面积百分比低于正常组MMP-9和NF-κB阳性面积百分比均低于模型组（P〈0．01,P〈0．05）。结论四妙勇安汤能够稳定AS易损斑块,其作用机制可能是通过抑制MMP-9、TNF-α及NF-κB表达实现的。     

加味芎蝎散含药血清对哮喘小鼠巨噬细胞表型及气道重塑蛋白表达的影响

目的 观察加味芎蝎散含药血清对哮喘小鼠巨噬细胞活力、M1/M2表型、炎症介质[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-8(IL-8)] m RNA水平及基质金属蛋白酶（MMP9）和Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）蛋白的影响，探讨加味芎蝎散调控巨噬细胞极化，进而探讨其对Th1/Th2免疫平衡、组织重塑的相关机制。方法 建立哮喘小鼠模型并分离提取肺巨噬细胞，同时制备加味芎蝎散含药血清。设立空白组、模型组及加味芎蝎散含药血清高剂量组、低剂量组，根据分组给予相应处理措施。干预24 h后，细胞增殖和毒性法检测细胞活力，免疫荧光法（IF）检测细胞M1标志物iNOS、M2标志物CD206的表达，荧光定量PCR法检测炎症因子TNF-α、IL-2、IL-4、IL-8的mRNA水平，免疫印迹法检测基质金属蛋白酶（MMP9）和Ⅰ型胶原（CollagenⅠ）的蛋白变化。结果 与正常组比较，模型组巨噬细胞活力增加，iNOS/CD206比例下调，TNF-α、IL-8水平增高，IL-4减低，MMP9和CollagenⅠ蛋白表达增多，差异有统计学意义（P <0.05）；与模型组比较...     

益气化瘀补肾方及拆方影响椎间盘细胞外基质胶原和代谢酶mRNA表达的研究

目的探讨益气化瘀补肾方及拆方影响退变模型大鼠颈椎间盘细胞外基质中Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原和相关代谢酶MMPs／TIMPmRNA的表达。方法采用RT—PCR法检测胶原和MMPs／TIMPmRNA表达,凝胶成像系统扫描仪对各条带进行扫描,计算机自动计算出光密度。结果与假手术组比较,模型组Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原和MMP-13 mRNA表达明显升高（P〈0．01）;TIMP-1 mRNA表达无明显统计学差异（P〉0．05）。益气化瘀补肾方及其拆方可明显降低Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原和MMP-13 mRNA的过度表达（P〈0．01或P〈0．05）。结论退变椎间盘的Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅹ型胶原mRNA表达增高,MMP-13 mRNA的高表达和TIMP-1 mRNA的低表达,MMPs／TIMP的比例失调,反映了退变椎间盘ECM合成和降解的失调。益气化瘀补肾方及拆方可能通过影响颈椎间盘组织胶原及相关代谢酶mRNA表达而延缓椎间盘的退变。     

当归芍药散对动脉粥样硬化小鼠的干预作用及DNA甲基转移酶1和PPAR-γ表达的影响

目的研究当归芍药散对载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠主动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)斑块的干预作用及DNA甲基转移酶1(DNMT1)和PPAR-γ表达的影响。方法将30只8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠西方类型膳食喂养9周,随机分为模型组、立普妥组(阳性对照组)和当归芍药散组(n=10),药物干预9周后,检测血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、血清DNA甲基化水平及DNMTs水平。行苏木素-伊红染色(hematoxylin and eosin staining,HE),采用IPP图像分析软件测量小鼠主动脉As斑块面积。免疫组化法检测各组小鼠主动脉As斑块内DNA甲基化转移酶1(DNMT1)和过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)的表达。结果与模型组相比,当归芍药散组和立普妥组小鼠血清TC、TG水平明显降低(P0.05),当归芍药散组小鼠血清HDL-C水平明显升高(P0.05)。与模型组相比,当归芍药散组小鼠主动脉As斑块面积显著降低(P0.01),当归芍药散组小鼠主动脉斑块内DNMT1表达显著降低(P0.05),PPARγ表达显著升高(P0.05)。结论当归芍药散可改善As小鼠的血脂水平,减少As斑块面积,具有明确的抗As作用,其机制可能与抑制As小鼠血清甲基化水平和DNMTs水平,促进As小鼠主动脉斑块内PPARγ表达和抑制斑块内DNMT1表达有关。     

红景天对兔股动脉粥样斑块模型稳定性的影响

目的观察红景天对兔股动脉粥样硬化模型斑块稳定性的影响,并初步探索其机制。方法将新西兰兔以高脂饮食和股动脉球囊扩张法建立动脉粥样硬化模型,随机分为空白对照组、辛伐他汀组、红景天组。测定用药前后血脂、血清MMP-3水平;观察药物干预后组织病理,进行免疫组化检测。结果红景天组与辛伐他汀组的血清胆固醇和血清LDL-C均明显低于空白对照组,血清MMP-3水平也明显下降(P<0.05或P<0.01);红景天组与辛伐他汀组均能明显减少斑块内CD34、VEGF、MMP-3和胶原的阳性染色面积,与空白对照组相比有明显差异(P<0.05或P<0.01);红景天组的斑块内胶原面积显著大于辛伐他汀组(P<0.01),而斑块内CD34阳性面积则显著低于辛伐他汀组(P<0.01)。此外,红景天组能明显减少α平滑肌肌动蛋白抗体阳性染色区域(P<0.01),但辛伐他汀组对α平滑肌肌动蛋白抗体阳性染色区域影响不大。结论红景天能有效抑制斑块内新生血管生长,降低血清LDL-C和总胆固醇,并且能减少斑块内细胞外基质的降解,有利于稳定动脉粥样硬化斑块。     

芪参益气滴丸对心梗后大鼠心功能及心肌纤维化相关蛋白表达的影响

目的:观察芪参益气滴丸对心肌梗死后大鼠心功能,Ⅰ型胶原(ColⅠ),Ⅲ型胶原(ColⅢ),基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及增殖细胞核抗原(PCNA),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),波形蛋白(Vimentin)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠50只随机分为5组:假手术组,模型组,芪参益气滴丸低、高(135,270 mg·kg-1·d-1)剂量组(QSYQ-N,QSYQ-H),卡托普利组,每组10只。假手术组开胸穿线不结扎,其余各组结扎左冠状动脉前降支制作心肌梗死模型,灌胃4周。4周后生理记录仪记录血流动力学状态,免疫组织化学法检测大鼠心肌ColⅠ,ColⅢ及PCNA,α-SMA,Vimentin表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清中MMP-9浓度。结果:与假手术组相比,模型组左心室内压最大上升速率(+dp/dtmax),左心室内压最大下降速率(-dp/dtmax),左心室收缩压(LVSP)均明显降低,左心室舒张末期压(LVEDP)明显升高(P0.01);心肌ColⅠ,ColⅢ及PCNA,α-SMA,Vimentin表达上调,血清MMP-9浓度升高(P0.01);与模型组相比,QSYQ-N,QSYQ-H组,卡托普利组+dp/dtmax,-dp/dtmax,LVSP提高(P0.05,P0.01);QSYQ-H组、卡托普利组LVEDP降低(P0.05,P0.01);QSYQ-N,QSYQ-H及卡托普利组大鼠心肌ColⅠ,ColⅢ及PCNA,α-SMA,Vimentin表达下调,MMP-9浓度降低(P0.05,P0.01)。结论:芪参益气滴丸能够改善心肌梗死后大鼠心脏收缩与舒张功能,其机制与抑制胶原沉积、基质蛋白的降解及心脏成纤维细胞、肌成纤维细胞增殖、分化有关。