趋化因子CCL5与糖尿病相关的弥漫大B细胞淋巴瘤关系的实验研究

目的:探讨趋化因子CCL5是否是糖尿病并发弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的重要因子。方法:体外培养人正常B细胞和DLBCL细胞,应用RT-PCR分别检测其CCL5 mRNA表达;通过5、30 mmol/L两种糖浓度体外培养人DLBCL细胞株和鼠源性DLBCL细胞株A20,使用RT-PCR分别检测其CCL5 mRNA表达。给BALB/c小鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病鼠模型,通过慢病毒转染技术建立稳定的低表达CCL5和高表达CCL5细胞株;将低表达CCL5和高表达CCL5二种细胞株皮下注入糖尿病BALB/c小鼠和正常血糖BALB/c小鼠体内。根据血糖水平将实验小鼠分为2组:糖尿病组(A组)和血糖正常组(B组);然后根据CCL5的表达水平A组和B组又分为高表达组(A1组和B1组)和低表达组(A2组和B2组),分别观察成瘤率、成瘤时间、肿块大小和质地;对瘤组织常规HE染色切片,免疫组织化学检测各组CCL5的表达。结果:体外培养人DLBCL细胞株CCL5mRNA表达高于正常B细胞(P0.05);高糖培养人DLBCL细胞株和鼠DLBCL细胞株中CCL5 mRNA表达高于低糖培养株(P0.05)。糖尿病小鼠体内注射高表达CCL5、低表达CCL5的小鼠A20细胞株的糖尿病小鼠中A1组成瘤率为93.3%、A2组为60%,成瘤时间A1组中为7.0±0.85 d、A2组为9.5±2.8 d。正常血糖鼠成瘤率在B1组中为20%、B2组中为20%,成瘤时间B1组为12±1.3 d、B2组为14±2.5 d;免疫组织化学检测糖尿病小鼠成瘤组织内CCL5表达高于正常血糖小鼠瘤组织。结论:高血糖可致患DLBCL的风险增加,并加快肿瘤的生长,趋化因子CCL5可能在糖尿病致DLBCL生长、转移中发挥作用。     

人免疫重建荷子宫内膜癌SCID小鼠动物模型的建立

目的构建人免疫重建皮下荷人子宫内膜癌移植瘤SCID小鼠模型。方法将SCID小鼠随机分成空白对照组、单纯免疫重建组、荷瘤组及模型组,分别经腹腔注射人淋巴细胞和(或)皮下接种HEC-1B细胞建立相应模型。观察荷瘤鼠成瘤、移植瘤生长及组织学特征;ELISA法检测小鼠血清中人IgG含量,流式细胞术、免疫组化法检测小鼠外周血及脾脏T细胞表型。结果小鼠成瘤率均为100%,但模型组小鼠成瘤潜伏期延长、移植瘤生长受限。单纯免疫重建组及模型组小鼠外周血、脾脏分别可检出人IgG及人T淋巴细胞表型。未发现移植物抗宿主情况,空白对照组、单纯免疫重建组、模型组小鼠体质量无显著差异。结论初步建立了人免疫重建荷人子宫内膜癌SCID小鼠复合模型。     

高成瘤性前列腺癌细胞亚克隆细胞株的制备及其生物学特性的研究

目的:建立人前列腺癌LNCap细胞高成瘤性亚克隆细胞株并探讨其生物学特性.方法:慢病毒载体PGK-luciferase-GFP转染LNCap细胞,稳转株与Matrigel混合注入SCID小鼠皮下,反复消化法原代培养皮下瘤获得亚克隆细胞株,CCK8及Transwell实验检测细胞增殖及迁移力;用亲代LNCap细胞及亚克隆细胞皮下注射SCID小鼠成瘤,观察两组瘤体生长及大小,并用生物活体发光、病理及免疫组织化学检测瘤体情况.结果:与亲代LNCap细胞相比,亚克隆细胞的生长速度增快,迁移力增强,皮下瘤成瘤率增高,荧光信号强度增加,皮下瘤组织切片HE染色镜下可见核分裂相,免疫组织化学AR染色阳性.结论:制备的人前列腺癌亚克隆细胞株其恶性生物行为增加.     

多发性骨髓瘤基因修饰瘤苗诱导体内抗肿瘤反应的实验研究

本研究目的是评价NOD／SCID小鼠皮下移植瘤模型对多发性骨髓瘤基因修饰瘤苗引发体内抗肿瘤反应的效果。首先给NOD／SCID小鼠腹腔注射人外周血淋巴细胞以在其体内重建人的免疫系统，然后皮下接种γ-射线灭活的基因修饰骨髓瘤细胞sko-007（表达绿色荧光蛋白或者p53、GM—CSF和B7-1基因），以PBS作为对照，最后植入活sko-007细胞进行攻击。结果发现，与对照组相比接种感染腺病毒Ad—p53／GM—CSF／B7-1的sko-007细胞可以明显抑制移植瘤生长，病理分析显示移植瘤纤维组织增生伴弥漫性坏死增多，血管增生显著。免疫组织化学染色显示瘤灶内有人T淋巴细胞浸润。结论：p53、GM—CSF和B7-1基因修饰的骨髓瘤细胞能够诱导产生抗肿瘤免疫反应，有可能用于人类多发性骨髓瘤的免疫治疗。     

稳定表达GFP的骨髓增生异常综合征转白血病细胞株的建立

目的:建立稳定表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的骨髓增生异常综合征转白血病的细胞株,评价其生物学特性及其应用。方法:以人骨髓增生异常综合征转化为白血病细胞系SKM-1为母系细胞,通过携带GFP基因的慢病毒进行转染,以有限稀释法获得GFP阳性的单细胞克隆,并将扩大培养后的细胞通过皮下注射的方式进一步在小鼠体内筛选,致瘤后将瘤块分离,继续进行培养,获得SKM-1/GFP细胞株。通过荧光倒置显微镜观察细胞形态,应用流式细胞术检测细胞荧光表达水平,应用CCK-8法检测细胞生长特性,将扩大培养后的SKM-1/GFP细胞接种在免疫缺陷小鼠的皮下,致瘤后观察瘤块以及各个脏器组织的浸润情况。结果:SKM-1/GFP细胞形态和生长特性与SKM-1母系细胞无差异,流式细胞术检测GFP的表达率为100%,体外CCK-8法检测生长曲线显示,SKM-1/GFP细胞与母系SKM-1细胞无明显差异。将SKM-1/GFP细胞接种于NOD/SCID小鼠皮下,14d时可见瘤块形成。30 d时,在荧光显微镜下观察荷瘤小鼠,可见瘤块自发荧光。在荧光显微镜下观察肿块冰冻切片,可见较为均一的GFP阳性细胞。冰冻切片显示,小鼠心、肝、胃、肾均有肿瘤细胞浸润。结论:成功建立了稳定表达GFP的骨髓增生异常综合征转白细胞株SKM-1/GFP,该细胞株可以灵敏地追踪肿瘤细胞,应用于微小残留病的研究,为研究骨髓增生异常综合征转化的急性白血病提供一个新的实验平台。     

人骨肉瘤细胞株MG-63中肿瘤干细胞的生物学特性

背景：骨肉瘤干细胞在骨肉瘤的发生、复发及对化疗药物的耐药性中发挥关键作用,而目前关于骨肉瘤干细胞体外分离培养及生物学特性研究的报道甚少。目的：从人骨肉瘤细胞株MG-63中分离出具有干细胞特征的高致瘤性细胞亚群,检测肿瘤干细胞特异性标志物CD105的表达。方法：无血清悬浮培养法从人骨肉瘤细胞株MG-63中分离出骨肉瘤细胞球,应用流式细胞术检测细胞球中CD73、CD90、CD105的表达,免疫荧光法检测骨肉瘤细胞株及骨肉瘤细胞球中CD105的阳性率,免疫磁珠法分选出CD105＋和CD105-的细胞,传代后分别接种于NOD/SCID小鼠评估其致瘤性。结果与结论：CD105在球体细胞中高表达,此类肿瘤细胞具有高侵袭性和高致瘤性,在NOD-SCID小鼠中仅需移植1000个细胞即可形成肿瘤,这些细胞具有自主生长特性,能够在无血清条件下长期培养,CD105＋骨肉瘤细胞显示了干细胞的生物学特性,CD105可能成为骨肉瘤干细胞的表面标志之一。     

SCID鼠人源化及视网膜母细胞瘤模型的建立

目的进行SCID鼠的人源化并建立人化SCID鼠视网膜母细胞瘤模型。方法SCID鼠腹腔注射人脐带血单个核细胞(CBMNC)生理盐水悬液。两周后割尾采血,检测其IgG水平。将10只人化的SCID鼠混分为两组,分别于腹股沟皮下注入视网膜母细胞瘤细胞株(SoRb-70),浓度分别为2×106,2×107,然后对肿瘤的发生率及瘤体大小连续观察,并作统计学分析,最后做病理解剖及组织切片观察。结果该实验经腹腔注射移植入SCID小鼠体内的CBMNC可在小鼠体内存活并大量增殖。移植后2～4周,SCID小鼠血清中即可检测到人免疫球蛋白。视网膜母细胞瘤细胞以两个梯度接种人化SCID鼠10只,观察8周,10只SCID小鼠7只致瘤。结论该模型的建立方法科学合理,在一定程度上可模拟人眼视网膜母细胞瘤的生物学行为,为进一步研究其发生发展机制及免疫治疗提供了一种模型。     

K562/NOD-SCID小鼠白血病模型的建立

本研究探讨人CML急性变的白血病细胞在NOD—SCID小鼠体内建立白血病模型的方法并研究其生长特性。首先将K562细胞接种于全身受照射后的裸鼠，待皮下成瘤后取出局部瘤块，选取无坏死的瘤组织制成瘤细胞悬液，再腹腔接种于全身受照射后的NOD—SCID小鼠。结果表明：成功建立全身播散的白血病模型。4周时外周血涂片可见白血病细胞，晚期浸润肝、脾、骨髓等造血器官，白细胞上升到接种前的8—10倍，血涂片中白血病细胞达20％-30％。腹腔局部出现瘤块，多位于腹腔内或大网膜，较少累及其他器官。结论：腹腔接种K562瘤细胞于全身照射后的NOD—SCID小鼠能建成全身播散的白血病模型，该模型较好地反映白血病在体内的演变过程，是进行新药疗效试验、生物导向治疗及基因治疗的理想工具。     

SCID小鼠腹腔内人B细胞非霍奇金淋巴瘤模型的建立

目的 为探讨人B细胞非霍奇金淋巴瘤诊治策略提供动物模型.方法 采用4-5周龄的SCID小鼠,经腹腔接种7.5×106 个Namalwa细胞.观察小鼠的发病情况及生存时间.取瘤组织进行HE及免疫组化染色检测CD20,CD79a,Ki-67和CD3抗原的表达.结果 Namalwa细胞在SCID小鼠腹腔发病的主要表现是腹腔出现肿块,时间（18.67±1.94） d,伴竖毛、精神萎靡、行动迟缓,一般情况随时间的延长而不断恶化.荷瘤SCID小鼠中位存活时间（28.00±6.36） d.瘤细胞主要浸润肠壁、肠系膜,胃、胰、肝、脾、肾、肺的周缘、盆腔以及邻近肌组织和皮肤.CD20在瘤组织表达为散在阳性,CD79a和Ki-67为弥慢阳性,CD3为阴性.结论 成功建立SCID小鼠腹腔人Namalwa细胞株B细胞非霍奇金淋巴瘤模型,为探索淋巴瘤提供载体.     

类似人弥漫型大B细胞淋巴瘤小鼠模型的免疫学特征

本研究建立类似人弥漫型大B细胞淋巴瘤的BALB／c小鼠模型并探索其免疫学特征。将鼠源性B淋巴瘤细胞株（A20细胞）接种于同源BALB／c小鼠以建立B细胞淋巴瘤鼠模型。实验分为3组：成瘤小鼠组,未成瘤小鼠组和正常小鼠组（对照组）。用流式细胞术检测肿瘤细胞CD抗原表达及成瘤小鼠、未成瘤小鼠和对照正常小鼠的外周血和脾脏的T／B淋巴细胞亚群比例。结果表明：在成功构建病理学形态类似人弥漫大B细胞淋巴瘤的BALB／c鼠模型肿瘤组织中,检测到CD3、CD4、CD8、CD19、CD30阳性细胞的比例分别为（49．27±23．75）％,（6．07±3．65）％,（51．2±23．1）％,（67．06±16．39）％,（37．93±17．03）％,与接种前A20细胞相比,其CD3和CD8阳性细胞比例显著升高,CD19阳性表达比例显著下降（P〈0．05）。成瘤小鼠外周血淋巴细胞亚群阳性表达比例较正常小鼠有显著差异,其CD3和CD4阳性细胞比例显著降低（P〈0．05）。未成瘤小鼠脾脏淋巴细胞亚群的阳性表达比例与正常小鼠相比,CD3、CD4、CD8阳性细胞比例降低,而CD19阳性细胞比例升高（P〈0．05）。结论：本研究为在有免疫功能的小鼠体内进行B细胞淋巴瘤相关研究提供了免疫相关实验依据。     

The rGel/BLyS fusion toxin specifically targets malignant B cells expressing the BLyS receptors BAFF-R, TACI, and BCMA

B lymphocyte stimulator (BLyS) is crucial for B-cell survival, and the biological effects of BLyS are mediated by three cell surface receptors designated B cell-activating factor receptor (BAFF-R), transmembrane activator and calcium modulator and cyclophilin ligand interactor (TACI), and B-cell maturation antibody (BCMA). Increased expression of BLyS and its receptors has been identified in numerous B-cell malignancies. We generated a fusion toxin designated rGel/BLyS for receptor-mediated delivery of the recombinant gelonin (rGel) toxin to neoplastic B cells, and we characterized its activity against various B-cell tumor lines. Three mantle cell lymphoma (MCL) cell lines (JeKo-1, Mino, and SP53) and two diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell lines (SUDHL-6 and OCI-Ly3) expressing all three distinct BLyS receptors were found to be the most sensitive to the fusion toxin (IC(50) = 2-5 pmol/L and 0.001-5 nmol/L for MCL and DLBCL, respectively). The rGel/BLyS fusion toxin showed specific binding to cells expressing BLyS receptors and rapid internalization of the rGel component into target cells. The cytotoxic effects of rGel/BLyS were inhibited by pretreatment with free BLyS or with soluble BAFF-R, TACI, and BCMA decoy receptors. This suggests that the cytotoxic effects of the fusion toxin are mediated through BLyS receptors. The rGel/BLyS fusion toxin inhibited MCL cell growth through induction of apoptosis associated with caspase-3 activation and poly (ADP-ribose) polymerase cleavage. Our results suggest that BLyS has the potential to serve as an excellent targeting ligand for the specific delivery of cytotoxic molecules to neoplastic B cells expressing the BLyS receptors, and that the rGel/BLyS fusion toxin may be an excellent candidate for the treatment of B-cell malignancies especially MCL and DLBCL.     

重症联合免疫缺陷鼠腹膜后荷人卵巢癌动物模型的建立

目的探讨在重症联合免疫缺陷(SC ID)鼠体内建立腹膜后荷人卵巢癌动物模型的可行性。方法将处于对数生长期的人卵巢癌细胞株HO8910 1×106个细胞注射于SC ID鼠腹膜后髂血管处,观察荷瘤鼠的生存状态。4周后处死荷瘤鼠,取出病灶,观察其病理组织学特征。结果种植的移植瘤保持了人卵巢癌组织学特征。结论成功建立SC ID鼠腹膜后荷人卵巢癌的动物模型。     

三株人白血病细胞系/SCID小鼠模型的建立及其生长特性

本文报道了3株人白血病细胞系(HL-60,CEM和J6-1/SCID)小鼠模型的建立及其生长特点。发现人粒细胞白血病细胞系(HL-60)和T淋巴细胞系(CEM)给SCID小鼠静脉或腹腔移植后均发生全身性白血病,外周血可见白血病细胞。J6-1细胞(可能来自恶性淋巴瘤)眼眶后静脉移植后具有恶性淋巴瘤生长特点,在局部形成瘤块(与瘤细胞漏出血管有关),并侵及颌下淋巴结,无全身性播散。由此可见,人白血病细胞/SCID小鼠模型更类似于人类白血病,是进行人类白血病研究新的良好的模型。     

原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的分析

背景：近年来，有观点认为原发性肝癌的发生机制可能为肝干细胞分化不全或分化异常所致。目前，肝干细胞研究正处于起步阶段，对人原发性肝癌的“干细胞起源”学说尚需进一步验证。目的：观察原发性肝癌不同病理组织类型中肝干细胞的活化、分布、来源和免疫表达特征。设计：观察对比实验。单位：解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心。对象：实验于2003-09／2004-07在解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心完成，选用94例肝细胞癌和12例肝内胆管细胞癌和10例混合型肝癌石蜡包埋组织，同时选用5例肝硬化和4例正常肝组织作为实验对照，均取自病理科存档资料。肝癌组织均为患者首次肝癌切除手术时采取，包括肿瘤组织和癌旁组织，患者均无化疗和放射治疗史，并对受检项目知情同意。实验主要抗体均购自SantaCruz公司。方法：采用苏木精一伊红染色、免疫组织化学SP方法（检测的免疫标志有鼠抗人细胞角蛋白19单克隆抗体、鼠抗人细胞角蛋白7单克隆抗体、鼠抗人细胞角蛋白8＆18单克隆抗体、鼠抗人c—kit单克隆抗体、鼠抗人Thy—1单克隆抗体、鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体）观察各病变类型肝干细胞免疫标志表达情况。、主要观察指标：各病变类型肝干细胞免疫标志表达情况。结果：在原发性肝癌不同病理组织类型中干细胞免疫标志均有不同程度的表达，均可观察到肝干细胞向肝癌细胞的转化，以混合型肝细胞癌中肝干细胞免疫表型表达率最高（P〈0．05）。正常组和肝硬化组干细胞免疫表型特征为阴性。结论：不同病理组织类型的肝癌组织中均存在不同分化状态和不同来源的肝干细胞。     

CA2-02: Identification of Prognostic Tumor Markers in HIV+ Diffuse Large B-cell Lymphoma

Background/Aims About half of HIV+ diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) patients die within 2 years of diagnosis. Identification of prognostic tumor markers may assist clinical risk stratification and inform therapeutic developments. We examined if certain tumor markers in HIV+ DLBCL are associated with mortality. Methods H&E slides from HIV+ DLBCL cases diagnosed between 1996-2007 in the Kaiser Permanente California Health Plan were reviewed to identify representative tumor blocks for tissue microarray (TMA) construction. Immunohistochemistry staining of TMA cores was used to analyze the expression of selected markers in the following categories: viral factor: EBV cell cycle regulators: Cyclin E, SKP2 and cMYC; B-cell activators: FOXP1, PKC-?2, p27, and Ki-67; and apoptosis regulators: GAL3, p53, BCL2, surviving, and BLIMP1. Percent of DLBCL cells with visible marker staining was scored on a scale from 0-4 (0-9%, 10-24%, 25-49%, 50-74% and =75%). Epstein Barr Virus (EBV) infection was determined by in situ hybridization of EBV RNA. Positivity for each marker was determined based on previously established cut-off values. Information on patient demographics and clinical history, DLBCL characteristics and death was collected from Kaiser Permanente's credited cancer and HIV registries as well as electronic medical records. Each marker's prognostic significance on 2-yr mortality was first evaluated in a univariate Cox model. Markers showing a mortality association at p<0.10 level were examined in a multivariable Cox model, adjusting for stage, presence of B symptom, Germinal Center phenotype, prior AIDS and CD4 cell count. Results Of 194 HIV+ DLBCL cases identified; 80 had sufficient tissue for study inclusion. In the crude analyses, cMYC [hazard ratio (HR)=2.08, 95% confidence interval:0.93-4.63, p=0.07], EBV [HR=2.86 (1.45-5.63), p<0.01] and BLIMP1 [HR=2.57 (0.99-6.67), p=0.05] positivity were associated with 2-yr mortality. In the adjusted analysis, cMYC positivity remained significantly associated with a 3-fold increase in 2-yr mortality [hazard ratio=3.18 (1.15-8.80), p=0.03]. Other markers were not significantly associated with mortality. Discussion cMYC expression may be associated with increased mortality in HIV+ DLBCL patients. Our initial findings should be confirmed in larger studies.     

人-NOD/SCID小鼠异种急性移植物抗宿主病模型的建立

目的 建立一种人-NOD/SCID小鼠嵌合的异种急性移植物抗宿主病(aGVHD)模型.方法 NOD/SCID小鼠给予亚致死剂量的60Coγ射线全身照射后经尾静脉输注动员后人外周血单个核细胞(PBMNC),移植后每周检测血常规,采用流式细胞术检测人CD45+细胞的比例,分析人淋巴细胞亚群,取各脏器组织检测人、鼠保守基因序列片段,并进行免疫病理分析.结果 移植后1周起NOD/SCID小鼠的血细胞中有明确的人CD45抗原表达,随人CD45+细胞比例增高逐渐出现以体重减轻和血细胞减少为主要表现的异种急性移植物抗宿主病(X-GVHD),人-NOD/SCID嵌合体的基因组DNA中可扩增出入β-globin及小鼠保守基因HYPSIN序列片段,移植后6周生存率约为14%;人-NOD/SCID嵌合体中以人T淋巴细胞的植人为主,CD4+/CD8+细胞比例倒置;X-GVHD以人的淋巴细胞浸润为主,肝脏与肺脏是主要靶器官.结论 NOD/SCID小鼠预先给予亚致死剂量照射,再经尾静脉输注入PBMNC,能够建立X-GVHD模型.临床表现主要为植入率相关的体重减轻和血细胞减少,病理表现靶器官主要为肝脏和肺脏.该模型建立方法简便,X-GVHD发生时间(2～3周)较早,发生率(94%)高,便于在此基础上进行aGVHD防治的动物实验研究.     

In vivo recovery of human platelets in severe combined immunodeficient mice as a measure of platelet damage

BACKGROUND: Clinical performance of human platelet (PLT) products processed or stored under novel conditions is difficult to predict based on in vitro studies alone. Recovery and survival of radiolabeled PLTs in human subjects are used as surrogate markers for PLT efficacy in development of new products. Such experiments pose some risk to the participants, can be a financial burden on the sponsor, and may stifle innovation and development of new PLT products. Animal models for in vivo recovery and survival of human PLTs are limited by rapid, immune-mediated clearance of human cells. The severe combined immunodeficient (SCID) mice allowed prolonged circulation of human PLTs and were used to detect differences in recovery and survival between chemically damaged, aged PLTs, or normal PLTs. STUDY DESIGN AND METHODS: Human PLTs were transfused into SCID and wild-type (WT) mice, and the recoveries and survival times were detected in mouse whole blood by flow cytometry with an anti-human CD41-fluorescein isothiocyanate monoclonal antibody. Recoveries of damaged PLTs were compared to normal PLTs. RESULTS: Recoveries were significantly shorter in WT than in SCID mice at 4 hours after transfusion (WT, 20.8 +/- 5.4%, n = 12; SCID, 63.8 +/- 8.4%, n = 10) and with a t((1/2)) estimate of 2 hours for WT and 7 hours for SCID mice. Human PLTs damaged either by chemical treatment or by improper storage exhibited decreased recoveries in SCID mice. CONCLUSION: The SCID mouse model can detect differences between damaged and control human PLTs and could be useful in evaluating novel PLT collection, processing, and storage technologies that may impact PLT quality.     

多药耐药基因转染的脐血细胞对白血病小鼠化疗的骨髓保护作用

目的探讨转染多药耐药(mdr1)基因的脐血单个核细胞(MNC)对急性髓系白血病小鼠的骨髓保护作用及疗效。方法通过逆转录病毒介导的方法将含有人全长cDNAmdr1基因导入脐血MNC,即逆转录病毒上清液与脐血MNC体外共培养;将接种人髓系白血病细胞系(HL60细胞)的SCID小鼠分成3组A组(观察组)经鼠尾静脉注射转染mdr1的脐血MNC2×106/只,共2次;B、C两对照组小鼠以同样剂量、方法分别注射未转染mdr1的脐血MNC和等容积的生理盐水。3组白血病SCID小鼠在每周递增高三尖杉酯碱剂量化疗下,通过检测小鼠外周血白细胞数、瘤细胞阳性率、组织病理和HL60细胞表面抗原(CD33)等观察转基因小鼠和对照小鼠对抗癌药物的耐受性及抗肿瘤疗效。同时分别采用PCR技术、免疫组化方法和柔红霉素排出试验检测mdr1基因在小鼠体内的表达和功能。结果①体外成功地将mdr1基因导入脐血MNC,转染率达30%左右;②用HL60细胞2×106接种于经亚致死量照射的SCID小鼠可成功制成白血病动物模型;③采用程序性移植转基因细胞方法成功建立了mdr1转基因脐血细胞移植小鼠模型,并可作为白血病临床前期体内评价mdr1基因保护骨髓作用;④转基因脐血细胞移植小鼠对高三尖杉酯碱耐受性高于正常剂量的5~6倍,外周血白细胞维持在3.0×109/L左右,外周血涂片瘤细胞降至5%以