闪式提取猴头菌-地龙生物转化物中抗凝血活性成分的工艺研究

目的 优选闪式提取猴头菌-地龙生物转化物（Hericium erinaceus-Pheretima biotransformation,HD）中抗凝血活性成分工艺参数。方法 以活化部分凝血酶时间为评价指标,以水作提取溶剂,提取2次,通过响应面设计试验法,对闪式提取HD中抗凝血活性成分的主要工艺参数进行优化。结果 闪式提取HD中抗凝血活性成分的最优工艺条件为：提取2次,第1次提取加水12倍,5 500 r·min^-1提取7 min;第2次提取加水10倍,5 500 r·min^-1提取7 min。在此工艺条件下所制备提取液的活化部分凝血酶时间均值最高,为（53.42±3.02）s。结论 通过优化与验证,首次创立了闪式提取HD中抗凝血活性成分的工艺路线。该工艺提取速度快,提取溶剂无毒,提取设备操作简单、所占空间小,节约资源。     

猴头菌-地龙生物转化物干浸膏粉吸湿性考察

摘 要 目的：通过对干浸膏粉进行吸湿性研究,确定猴头菌 地龙（HD）生物转化物制剂成型工艺的相对湿度条件及对应相对湿度条件下制剂操作的最长时间。方法: 配制不同湿度环境的溶液,测定HD生物转化物干浸膏粉样品在不同湿度环境溶液中的吸湿速度及计算HD干浸膏粉临界相对湿度（CRH）。建立吸湿速度的数学模型并绘制吸湿百分率随相对湿度变化的曲线,求吸湿速度参数和吸湿百分率达到5%时对应的相对湿度及时间,用解析几何及直线回归法计算CRH,从而确定生产、贮存过程中空气湿度的控制范围及操作条件。结果: 在25℃, RH为66.0%、80.8%、88.2%、99.0%的条件下,HD干浸膏粉暴露空气中7.088,3.953,2.892,0.661 h吸湿百分率则达到5%;计算得吸湿百分率达到5%时对应的相对湿度是50.84%,最短时间是9.937 h。HD生物转化物干浸膏粉CRH为68.12%。结论:HD生物转化物干浸膏粉制剂环境的相对湿度控制在50.84%以下,操作时间不超过9.937 h;或相对湿度控制在68.12%以下,操作时间不超过6.810 h。该条件下才能保证HD干浸膏粉吸湿率控制在5%以下,不影响制剂的制备。     

2种地龙饮片不同提取法体外抗凝活性对比研究

目的 研究酒制对地龙体外抗凝活性的影响，为地龙临床应用提供科学依据。方法 分别采用传统水提法和仿生酶解提取法对生品地龙、酒制地龙进行提取，以活化部分凝血活酶时间（activated partial thromboplastin time，APTT）、凝血酶原时间（prothrombin time，PT）、凝血酶时间（thrombin time，TT）和抗凝血酶活力为指标进行抗凝活性测定，并采用BCA蛋白测定法测定可溶性蛋白、多肽含量。结果 采用水提取法时，PT和抗凝血酶滴定法均显示酒地龙与生地龙抗凝血活性相当，TT测定结果显示酒地龙抗凝血活性强于生地龙，APTT测定结果则显示地龙具有促凝血活性，且在一定范围内，浓度越高，促凝效果越强，蛋白、多肽含量为酒地龙大于生地龙；采用仿生酶解提取法时，APTT和PT测定结果显示酒地龙的抗凝血活性强于生地龙，并且蛋白、多肽含量测定结果显示酒地龙要多于生地龙，但TT和抗凝血酶滴定法并未比较出生品与酒制品之间的差异。结论 与传统水提法相比，仿生酶解提取法能更多地提取出蛋白多肽类成分，仿生酶解提取液具有更强的抗凝血活性，2种提取法均显示地龙酒制有利于可溶性蛋白、多肽的溶出，能增强体外抗凝血活性。     

低剂量华法林对心房颤动患者脑卒中和凝血指标的影响

目的 探讨心房颤动患者低剂量长期使用华法林对患者脑卒中和凝血指标的影响。方法 选择2016年1月—2018年12月喀什地区第一人民医院收治的心房颤动患者213例作为研究对象,按照随机数字表法将患者分为3组,每组各71例。对照组患者使用阿司匹林肠溶片,200 mg/d。华法林高剂量组患者在使用华法林钠片前测定抗凝强度国际化标准比率（INR）作为基础值,初始剂量为2.5 mg/d,每隔3~5 d复查IRN,根据IRN调整使用剂量,每次增加0.625 mg,直至复查INR达标,达标时IRN值为2.1~3.0。华法林低剂量组患者使用华法林初始量为1.25 mg/d,每隔3~5 d复查IRN,达标时IRN值为1.5~2.0。根据IRN调整使用剂量,如果INR<1.5,每次增加0.625 mg,直至复查INR达标;如果INR>2.1,将华法林剂量减少0.625 mg。INR不稳定时,连续达标2次后以该剂量作为维持剂量,每月复查1次,直至INR达标。3组均治疗随访18个月。观察并比较两组患者的脑卒中发生情况、凝血指标、华法林用量、达INR标准时间和不良反应发生情况。结果 随访后,华法林高剂量组脑卒中发生率为2.82%,华法林低剂量组为4.23%,均明显低于对照组的14.08%,组间差异具有统计学意义（P<0.05）。治疗后,3组活化部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶原时间（PT）均明显延长（P<0.05）,华法林高剂量和低剂量APTT、PT显著优于对照组,组间差异具有统计学意义（P<0.05）。华法林低剂量组华法林使用量和INR达标准值时间均明显低于华法林高剂量组（P<0.05）。治疗期间,华法林高剂量组出血、腹部不适等不良反应发生率为9.86%,华法林低剂量组为5.63%,均明显低于对照组的29.58%（P<0.05）。结论 心房颤动患者长期使用低剂量华法林能够有效的达到预防脑卒中的效果,其疗效与标准抗凝强度相当,且明显优于阿司匹林,具有较高的临床应用价值,可推广使用。     

丹红注射液对大鼠体内华法林抗凝作用的影响

摘 要 目的： 研究丹红注射液对大鼠体内华法林抗凝作用的药效学和药动学影响及其作用机制,为临床合理用药提供参考。方法: Wistar大鼠随机分为空白对照组（Ⅰ）、丹红注射液给药组（Ⅱ）、华法林对照组（Ⅲ）和丹红注射液与华法林联合给药组（Ⅳ）,每组8只。四组大鼠连续14d腹腔注射给予生理盐水或丹红注射液。在第8天,Ⅰ、Ⅱ组给予生理盐水灌胃1次,Ⅲ、Ⅳ组给予等量华法林溶液。分别于给药后的既定时间点采血,测定凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）值,计算国际标准化比值（INR）,采用UPLC-MS/MS法测定S-华法林和R-华法林的血药浓度并计算相关药动学参数。结果: 丹红注射液能升高大鼠的PT和INR值（P<0.01）,与华法林合用能使大鼠PT和INR值显著增加（P<0.01）,APTT值升高（P<0.05）。联合给药组与华法林对照组比较,S-华法林的C_max、AUC_0-t、AUC_0-∞分别增加了90.72%、52.17%、43.13%（P<0.01）,t_1/2增加了14.76%（P<0.05）;R-华法林的C_max、AUC_0-t、AUC_0-∞分别增加了56.89%、79.10%、77.96%（P<0.01）,t_1/2增加了17.17%（P<0.05）。结论:丹红注射液与华法林联合应用时会增加华法林的抗凝作用,出血风险增加,应避免联合使用,或注意密切监测。     

柏药灌肠液辅助少腹逐瘀胶囊治疗寒湿凝滞型慢性盆腔炎的临床研究

目的 确证柏药灌肠液辅助少腹逐瘀胶囊综合治疗寒湿凝滞型慢性盆腔炎的临床疗效,为其临床应用提供科学依据。方法 寒湿凝滞型慢性盆腔炎患者124例,随机分为对照组和试验组。对照组口服少腹逐瘀胶囊,试验组口服少腹逐瘀胶囊同时辅助柏药灌肠液治疗,2个疗程后比较2组治疗效果。结果 试验组治疗总愈显率75.0%,总有效率为95.3%;对照组治疗愈显率48.3%,总有效率为83.3%;2组比较差异有统计学意义（P<0.05）。试验组在改善中医证候和局部体征方面优于对照组,差异有显著性（P<0.05）。试验组在降低高切全血粘度、血浆黏度和红细胞积压方面优于对照组,差异有显著性（P<0.05）。结论 柏药灌肠液辅助少腹逐瘀胶囊综合治疗寒湿凝滞型慢性盆腔炎,可以明显提高治疗效果,且能改善患者血液流变性,值得临床推广。     

参松养心胶囊致INR值降低2例及文献回顾

目的 探讨参松养心胶囊对华法林抗凝作用的影响、作用机制和处理方法。方法 采用病例回顾方式,1例62岁非瓣膜病房颤女性服用华法林抗凝治疗后INR>2,加用参松养心胶囊4 d后INR降至1.68,停用参松养心胶囊4 d后INR值升至2以上;另1例57岁非瓣膜病房颤男性服用稳定剂量（4.0 mg·d^-1）的华法林抗凝治疗,服用参松养心胶囊后INR值降至1.56,后增加华法林剂量至4.5 mg·d^-1,INR值升至2以上。结果 患者在稳定的华法林治疗剂量基础上加用参松养心胶囊（含有人参）后,减弱了华法林的抗凝效果。可能的机制是人参轻度诱导了CYP2C9,但是尚不能排除人参的血小板抑制作用等其他可能的机制。结论 服用华法林期间应尽可能避免服用人参等草药,如果坚持加用人参及含人参药物后,建议持续监测INR值,并根据INR值调整剂量。     

2011～2013 年武汉地区34家医院抗血小板药和抗凝血药应用分析

摘 要 目的:了解武汉地区34家医院抗血小板药和抗凝血药临床应用情况,为临床合理用药提供参考。方法：采用回顾性分析方法,对 2011～2013年武汉地区34家医院抗血小板药和抗凝血药的销售金额、各药品品种的销售金额、用药频度(DDDs) 、药品限定日费用(DDC) 和排序比(B/A) 进行统计分析。结果：抗血小板药和抗凝血药的销售金额逐年呈上升趋势,氯吡格雷、红花、低分子量肝素销售金额每年均排在前3位;氯吡格雷、华法林、肝素、低分子量肝素、红花DDDs位居前5位,华法林、肝素的DDC小于10元/d;肝素、西洛他唑、舒洛地特、蚓激酶、华法林、吲哚布芬B/A 值超过1。结论：武汉地区34家医院抗血小板药和抗凝血药临床应用中,氯吡格雷、华法林、肝素和低分子肝素占主导地位,吲哚布芬、达比加群酯前景可观。     

华法林钠片在健康受试者生物等效性试验中的安全性分析

目的 探讨健康受试者参加华法林钠片生物等效性试验的安全性。方法 收集2017—2020在首都医科大学宣武医院开展的4项随机、开放、四周期、交叉对照设计的华法林钠片生物等效性（BE）试验中188例受试者,比较空腹与餐后给药所发生不良事件（TEAEs）的差异及TEAEs与性别和年龄的相关性。结果 4个试验中共报告了116例次TEAEs,与试验药物相关的TEAEs 29例次,均属于轻度,主要为凝血功能指标异常（14例次）和肝功能指标异常（10例次）。餐后给药试验中肝功能指标异常的发生例次多于空腹给药试验（8：2）,与试验药物具有相关性的TEAEs发生率出现随年龄增加而增高的趋势。结论 健康受试者参加BE试验单次口服华法林钠片的安全性良好,与试验药物相关的不良事件多与华法林的药理机制有关,年龄是不良事件发生类型和发生率的潜在影响因素。     

逐瘀通脉胶囊对缺血性心肌病患者血清脑钠肽的影响

目的观察逐瘀通脉胶囊对缺血性心肌病患者血清脑钠肽(BNP)的影响。方法选择缺血性心肌病患者60例,随机分为对照组与治疗组,每组30例,治疗4周,对照组采用利尿剂、洋地黄、血管紧张素转化酶抑制剂、β受体阻滞剂;治疗组在对照组基础上加用逐瘀通脉胶囊。两组均在治疗前后测定血清脑钠肽。结果两组在治疗4周后血清脑钠肽均有改善,治疗组与对照组相比有统计学意义(P<0.05)。结论逐瘀通脉胶囊能改善缺血性心肌病患者的心功能。     

京尼平苷体内外微透析回收率的研究

目的 探究京尼平苷在自制线性微透析探针上的体内外回收率与灌流速度、药物浓度、透析膜长之间的关系。方法 采用HPLC测定微透析样品浓度,考察不同灌流速度、不同药物浓度和不同透析膜长对体外正向和体外反向回收率、体内反向回收率的影响。结果 自制探针性质稳定;探针回收率与京尼平苷的药物浓度无关,与灌流速度成反比,随透析膜长增加而增加;体外的正向与反向探针回收率有显著性差异（P<0.01）,而体内反向回收率低于体外反向回收率,与体外正向回收率无显著性差异;新探针体内回收率大于使用过1次的探针体内回收率（P<0.05）。结论 在京尼平苷的皮肤药动学研究中,宜采用体内反向回收率或体外正向回收率作为药物的探针回收率来校正。     

Antrodia camphorata inhibits proliferation of human breast cancer cells in vitro and in vivo

Antrodia camphorata (A. camphorata) has been shown to induce apoptosis in cultured human breast cancer cells (MDA-MB-231). In this study, we report the effectiveness of the fermented culture broth of A. camphorata in terms of tumor regression as determined using both in vitro cell culture and in vivo athymic nude mice models of breast cancer. We found that the A. camphorata treatment decreased the proliferation of MDA-MB-231 cells by arresting progression through the G1 phase of the cell cycle. This cell cycle blockade was associated with reductions in cyclin D1, cyclin E, CDK4, cyclin A, and proliferating cell nuclear antigen (PCNA), and increased CDK inhibitor p27/KIP and p21/WAF1 in a dose and time-dependent manner. Furthermore, the A. camphorata treatment was effective in delaying tumor incidence in the nude mice inoculated with MDA-MB-231 cells as well as reducing the tumor burden when compared to controls. A. camphorata treatment also inhibited proliferation (cyclin D1 and PCNA) and induced apoptosis (Bcl-2 and TUNEL) when the tumor tissue sections were examined histologically and immunohistochemically. These results suggest that the A. camphorata treatment induced cell cycle arrest and apoptosis of human breast cancer cells both in vitro and in vivo.     

头孢他啶/阿维巴坦耐药肺炎克雷伯菌的体外抗菌药物治疗方案研究

目的 探索对头孢他啶/阿维巴坦耐药的肺炎克雷伯菌体外抗菌药物治疗方案，为临床治疗方案选择提供理论依据。方法 采用PCR对2株肺炎克雷伯菌株可能耐药基因进行鉴定，并对扩增产物进行测序。采用体外时间杀菌试验评估不同抗菌药物单药或联合用药对耐药菌株生长的影响。结果 膜孔蛋白严重缺失和产金属酶分别介导了两菌株对头孢他啶/阿维巴坦耐药；多黏菌素B、亚胺培南、美罗培南和磷霉素单药或两药合并不能显示足够抗菌效果，而多黏菌素B-美罗培南-磷霉素或多黏菌素B-头孢他啶-阿维巴坦三药联合方案可分别对这2株耐药株产生强大持续的杀菌作用。结论 多黏菌素B为基础三药联合可能是对抗具有不同机制介导的头孢他啶/阿维巴坦耐药肺炎克雷伯菌的有效方案。     

吲哚美辛亚微乳胶药动学及体内外相关性研究

目的 研究吲哚美辛（indomethacin,IMC）亚微乳胶在兔体内的药动学,评价其生物利用度和经皮渗透性行为的体内外相关性。方法 采用改良Franz扩散池法,以SD大鼠腹部皮肤进行体外经皮渗透性实验。以家兔为实验动物,两侧腹部去毛涂抹亚微乳胶或市售普通乳膏10 g（相当于IMC 100 mg）,不同时间点心脏取血,用高效液相色谱法测定IMC的血药浓度。采用反卷积分法对体外经皮渗透数据和体内药动学数据进行体内外相关性研究。结果 IMC亚微乳胶体外24 h累积经皮渗透量是市售IMC普通乳膏的2倍;经皮给药后,与市售IMC普通乳膏相比,IMC亚微乳胶的T_max、C_max、T_1/2均无显著性差异;AUC_0-24和AUC_0-∞均为市售IMC普通乳膏的2倍。IMC亚微乳胶体内外相关性系数r=0.930。结论 与市售IMC普通乳膏相比,IMC亚微乳胶能够增加IMC渗透入血量,提高IMC的相对生物利用度,且其体内外经皮渗透行为具有良好的体内外相关性。     

密蒙花与其替代品结香总提物体外抗氧化活性作用的比较研究

目的通过体外抗氧化活性检测,比较密蒙花与其替代品结香总提物体外抗氧化能力的差异。方法采用福林酚法测定密蒙花、结香总提物中总酚,并采用DPPH自由基清除能力法、ABTS清除能力法、Fe~(3+)还原能力法和Fe~(2+)螯合能力法分别测定两者体外抗氧化能力,选取维生素C和EDTA-Na_2作为阳性对照。结果密蒙花中总酚为结香的3~5倍;除亚铁离子螯合试验外,密蒙花的抗氧化作用均明显优于结香,这与总酚的量呈正相关性。结论两者总提取物中总酚和抗氧化能力差异显著,密蒙花明显优于结香。     

头孢拉定微透析体外回收率及影响因素的研究

目的 测定头孢拉定微透析体外回收率及影响因素。方法 采用微透析浓度差法（减量法、增量法）和液质联用技术（LC-MS/MS）测定头孢拉定的体外回收率,并考察流速、浓度对回收率的影响,以探讨微透析技术用于头孢拉定体内药动学研究的可行性。结果 所建立的方法在要求范围内线性关系良好,方法灵敏可靠。增、减量法测得的回收率无显著性差异。相同条件下,探针体外回收率随流速增大而减小,不受探针周围药物浓度的影响。结论 微透析技术可用于头孢拉定药动学研究,减量法可用于头孢拉定微透析体内回收率和药动学参数的测定。     

LC-MS/MS鉴定木兰花碱在大鼠体内外主要代谢产物

目的 研究木兰花碱在大鼠体内外的主要代谢产物及代谢途径。方法 SD大鼠ig木兰花碱（50 mg/kg）,收集0~24 h尿液和粪便,0~6 h胆汁以及1、2、4、6、8 h血浆;体外代谢采用肝微粒体温孵系统和肠菌培养液。利用LC-MS/MS对生物样品中的原型药及代谢产物进行鉴定。采用Agilent TC-C₁₈色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温30℃。质谱采用电喷雾电离源（ESI）,正离子采集模式;扫描范围m/z100~1 000。根据药物体内代谢规则,结合木兰花碱的色谱保留时间和多级质谱碎片离子特征,推测其代谢产物的结构。结果 给药后生物样品中共鉴定出12个代谢产物,其中Ⅰ相代谢产物8个,Ⅱ相代谢产物4个。主要的代谢途径为羟基化、去甲基化、脱氢作用、酮基化、葡萄糖化、葡萄糖醛酸化及硫酸酯化。结论 木兰花碱在体内可发生Ⅰ相和Ⅱ相代谢,肠道菌群和肝药酶可催化木兰花碱发生Ⅰ相代谢转化,Ⅱ相代谢存在于肠道以外部位,最有可能的部位是肝脏。     

新型眼用阳离子微乳-原位凝胶的制备及其体外角膜滞留特性的研究

设计了新型眼用阳离子微乳-原位凝胶(cationic microemulsion-in situ gel，CM-ISG)系统，以维生素A棕榈酸酯(vitamin A palmitate，VAP)为模型药物研究了该释药系统的角膜滞留特性，并评价了角膜刺激性。采用外界供能法制备了VAP/CM，考察了维生素A棕榈酸酯阳离子微乳-原位凝胶(vitamin A cationic microemulsion-in situ gel，VAP/CM-ISG)胶凝前后的流变学性质，以及VAP/CM-ISG和市售品诺沛凝胶(Oculotect Gel)中VAP的体外释放和凝胶溶蚀情况；采用束缚泡法研究了VAP/CM-ISG和Oculotect Gel在离体角膜表面的滞留情况，Draize评分法评价了VAP/CM-ISG对兔角膜刺激性。透射电镜表明VAP/CM粒径分布均匀，加入poloxamer 407凝胶材料前后粒径无明显变化；加入VAP/CM后poloxamer 407溶液的胶凝温度下降了1.5 ℃，胶凝后系统的弹性模量增加了15.7倍；VAP/CM-ISG和Oculotect Gel中药物释放和凝胶溶蚀均呈现良好的零级释放特征。解吸附动力学研究发现，VAP/CM-ISG与Oculotect Gel相比，体外角膜滞留时间延长，且角膜接触角减小，具有良好的角膜铺展和滞留效果；兔角膜刺激性评价试验表明，制得的VAP/CM-ISG眼部生理相容性良好。VAP/CM-ISG能综合阳离子微乳和原位凝胶两种剂型的优点，改善药物在角膜表面的铺展性，提高角膜滞留，是一种具有良好应用前景的新型眼用释药系统。     

Design and in vivo evaluation of an indapamide transdermal patch

The aim of the present study was to develop and evaluate a novel drug-in-adhesive transdermal patch system for indapamide. Initial in vitro experiments were conducted to optimize formulation parameters prior to transdermal delivery in rats. The effects of the type of adhesive and the content of permeation enhancers on indapamide transport across excised rat skin were evaluated. The results indicated that DURO-TAK^® adhesive 87-2852 is a suitable and compatible polymer for the development of transdermal drug delivery systems for indapamide. The final formulation contained 4% N-dodecylazepan-2-one, 6% l-menthol and 3% isopropyl myristate. For in vivo studies patch systems were administered transdermally to rats while orally administered indapamide in suspension was used as a control. The PK parameters, such as the maximum blood concentration (C_max), time to reach the peak blood concentration (T_max), mean residence time (MRT), area under the curve (AUC_0–t) and terminal elimination half-life (T_1/2) were significantly (p < 0.05) different following transdermal administration compared with oral administration. In contrast to oral delivery, a sustained activity was observed over a period of 48 h after transdermal administration. This sustained activity was due to the controlled release of drug into the systemic circulation following transdermal administration.     

光泽汀体内遗传毒性风险评价

目的 评价光泽汀小鼠体内的遗传毒性。方法 C57BL/6J小鼠分为溶剂对照（0.5% CMC-Na）组、茜草素（200 mg·kg^-1，结构对照）组、乙酰基亚硝基脲（ENU，40 mg·kg^-1，阳性对照）组、甲基磺酸乙酯（EMS，200 mg·kg^-1，阳性对照）组和光泽汀低、中、高剂量（100、200、300 mg·kg^-1）组，溶剂、光泽汀和茜草素连续7 d ig给予，给药第1天记为D1，阳性对照ENU和EMS分别连续3 d给予，均每天给药1次。于D7、D56采集约0.5 mL外周血用于血清生化检测；于D14、D28、D42、D56采集外周血开展Pig-a基因突变试验；末次给药后采集肝、肾细胞开展彗星试验，分析每只动物至少100个细胞的尾DNA百分含量；末次给药后制备骨髓细胞样本，计算嗜多染红细胞的微核发生率。解剖后取心、肝、脾、肺以及肾脏进行组织病理学检查。结果 试验期间所有动物一般症状未见明显异常，各组动物体质量未见明显差异，未见与给予受试物有关的组织病理学改变。光泽汀低、中、高剂量组及EMS组肾脏尾DNA百分率均显著高于溶剂对照组（P<0.05、0.001），光泽汀高剂量组及EMS组肝脏尾DNA百分率与溶剂对照组比较显著增加（P<0.05、0.001）。光泽汀与茜草素的小鼠骨髓微核试验、Pig-a基因突变试验均为阴性。结论 100～300 mg·kg^-1光泽汀未见对小鼠整体产生明显毒性。光泽汀可导致小鼠肝、肾细胞DNA损伤，肾细胞DNA损伤程度更为严重。