促黄体释放激素的抗生育作用

促黄体释放激素,也称为促黄体生成素释放激素(Luleinczing Hormone Releasing Hormone简写LH-RH),是目前已证明存在的几种下丘脑释放激素中的一种。LH-RH是一个十肽,其氨基酸组成为:(焦)谷氨酸-组氨酸-色氨酸-丝氨酸-酪氨酸-甘氨酸-亮氨酸-精氨酸-脯氨酸-甘氨酸-NH_2。LH-RH主要刺激腺垂体分泌黄体生成素(LH),同时也引起少量的卵泡刺激素(FSH)分泌。目前,LH-RH已人工合成,并已合成了100多种LH-RH的类似物。妇产科临床     

结核菌的代谢拮抗物的研究(Ⅰ) △~2-二氢噻唑-4-羟酸衍化物的制备

结核菌生长因素——Myoobaotin 的结构式经 Snow 氏于1954年暂定如下:次年 Sutton 氏从付结核分枝杆菌(Myoobacterium Paramberculosls)生长情况中观察到抗结核新药“圜丝氨酸”(Cycloserine)与该生长因素有代谢拮抗作用,并提出作用的机制可能是由于圜丝氨酸的结构与生长因素中的二氢噻唑圜相似所引起的代谢拮抗的结果,因此作者设计并合成了一些α-苯基-Δ~2-二氢噻唑4-羧酸的衍化物(即生长因素中虚线括出部分的同型物),以期找到新的抗结核药物。     

pFOXO1A与胃癌临床病理特征的关系分析

目的:分析胃癌组织中FOXO1A磷酸化位点丝氨酸-329与丝氨酸-256的表达情况及胃癌临床病理特征之间的关系。方法:使用免疫组化方式检测68例胃癌患者的丝氨酸-329与丝氨酸-256在胃癌组织中的表达情况以及与临床病理参数的关系。结果:在68例患者中,丝氨酸-256阳性率为88.24%,丝氨酸-329阳性率为82.35%;丝氨酸-329表达与患者年龄相关,在≥60岁患者中的阳性率明显高于<60岁患者,差异有统计学意义(P<0.05)。丝氨酸-256表达与病变位置相关,在病变位置为贲门的患者中阳性率明显高于胃体、胃窦患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在正常细胞癌变的过程中,FOXO1A磷酸化位点丝氨酸-329与丝氨酸-256可能发挥着重要作用。丝氨酸-329的磷酸化高表达和患者年龄相关,丝氨酸-256的磷酸化高表达可能在贲门部位病灶的发生与发展中发挥着重要作用。     

烟曲霉菌提取物对人支气管上皮细胞粒-巨噬细胞集落刺激因子表达的影响

目的:探讨烟曲霉菌对呼吸道上皮细胞的粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)表达的影响及其可能机制.方法:分别应用不同浓度(0、8、16、20 mg/L)的烟曲霉菌提取物(Aspergillus fumigatus extract,AFE)作用体外培养人支气管上皮细胞16HBE-14o不同的时间(12、24、48、72 h).同时还应用热处理的AFE(heat-treated AFE,HT-AFE)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(抑肽酶)、蛋白激酶激活受体-2(PAR-2)激动剂(SLIGLV-NH2)和PAR-2阻断剂(FSLLRY-NH2)作用16HBE-14o细胞.应用ELISA法检测细胞上清液GM-CSF含量,同时应用RT-PCR法检测GM-CSF mRNA的表达.结果:正常培养条件下的对照组细胞仅表达分泌少量GM-CSF,而给予不同浓度的AFE作用后,细胞合成和分泌GM-CSF的量较对照组明显增加(P＜0.05),并呈明显的时间和浓度依赖性.PAR-2激动剂同样可以促进细胞合成分泌GM-CSF.丝氨酸蛋白酶抑制剂和PAR-2阻断剂几乎完全抑制AFE的上述作用.HT-AFE的蛋白酶活性完全灭活,不能促进细胞GM-CSF表达增加.结论:AFE依赖其蛋白酶活性激活PAR-2受体,促进呼吸道上皮细胞GM-CSF合成和分泌,从而促进哮喘的发生和发展.     

妊娠期糖尿病患者胰岛素受体底物-1 1223丝氨酸位点基因突变的研究

目的 研究妊娠期糖尿病(GDM)患者胰岛素受体底物(IRS)-1 1223丝氨酸位点的基因突变,验证其与GDM之间的相关性.方法 提取32例GDM患者及20例正常孕产妇胎盘组织DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)产物直接测序法检测IRS-1 1223丝氨酸位点基因突变.结果 病例组及对照组所有受检样本均扩增出目的片段,但经测序未发现一例IRS-1 1223丝氨酸位点的基因突变.结论 IRS-1 1223丝氨酸位点的基因突变可能不是该地区GDM患者的主要发病机制.     

ASCT2靶向抑制剂的合成及抗肿瘤活性研究

目的 合成新型丙氨酸-丝氨酸-半胱氨酸转运体2(ASCT2)靶向抑制剂,考察其与ASCT2蛋白的结合性及其体外抗肿瘤活性.方法 通过酮与伯胺结构化学物反应生成目标化合物,采用核磁共振技术表征其结构;使用AutoDock软件计算化合物与ASCT2的对接能量,进行分子对接;采用CCK-8法分析目标化合物的抗肿瘤活性.结果 ...     

SHMT2在肿瘤中的研究进展

肿瘤细胞的异常增殖和转移都受到细胞代谢变化的支持,其中代谢酶已经被证明是治疗肿瘤的有效靶点,丝氨酸羟甲基转移酶2(SHMT2)是连接丝氨酸/甘氨酸合成途径和一碳代谢的关键酶,与肿瘤生长和转移密切相关。本文结合相关文献对SHMT2在肿瘤中的表达及作用机制进行综述。     

色氨酸酶基因工程菌酶法合成L-色氨酸

目的 :以Ｌ 丝氨酸和吲哚为底物 ,用色氨酸酶基因工程菌酶法合成Ｌ 色氨酸。方法 :以ＩＰＴＧ诱导工程菌色氨酸酶表达 ,将酶活最高时的工程菌游离细胞作为转化反应的酶源 ,通过纸层析分析并测定转化液中Ｌ 色氨酸的含量。结果 :10 0ｍｌ反应液 (Ｌ 丝氨酸 3ｇ ,吲哚 3ｇ) 37℃反应 48ｈ可积累Ｌ 色氨酸 4.9ｇ ,Ｌ 丝氨酸转化率为84 2 % ,吲哚转化率为 93 6 %。经分离纯化所得的Ｌ 色氨酸晶体 ,在熔点、旋光性和红外吸收光谱等方面与标准品完全一致。结论 :色氨酸酶基因工程菌能有效地催化Ｌ 丝氨酸和吲哚合成Ｌ 色氨酸 ,进一步证明了该酶在…     

抗血小板膜糖蛋白Ibα胞内段多肽多克隆抗体的制备及初步应用

目的 制备兔抗人血小板膜糖蛋白(GP)Ibα C端557～561氨基酸序列多肽的多克隆抗体,并初步用于人血小板GPIbα C端559位丝氨酸磷酸化状态的检测.方法 应用化学方法合成C-R-G-S-L-P(559位丝氨酸非磷酸化,Ser559)和C-R-G-s(p)-L-P(559位丝氨酸磷酸化,pSer559)多肽.将2种多肽分别与钥孔蜮血蓝蛋白交联后,以皮下注射法分别免疫新西兰大白兔,分离获得2种抗血清(抗Ser559多抗和抗pSer559多抗).应用斑点印迹和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法 对抗血清进行鉴定并检测效价.从人血小板裂解液中分离纯化血小板GPIbα,利用抗Ser559多抗和抗pSer559多抗、采用ELISA方法检测人血小板GPIbαC端559位丝氨酸磷酸化状况.结果 所制备的2种多抗分别特异性识别各自抗原,效价分别为1:32 000和1:64 000.2种多抗均可与纯化的人血小板GPIbα特异结合,表明人血小板GPIbα 559位点丝氨酸存在磷酸化与非磷酸化两种状态.结论 应用人工合成多肽成功制备出2种可特异性识别丝氨酸磷酸化状态的兔抗人血小板GPIbα胞内段多肽多抗,并证明人血小板GPIbαC端559位丝氨酸存在磷酸化状态.     

6A8α-甘露糖甘酶的基因克隆、表达与功能研究

糖蛋白中的糖链在细胞-细胞、细胞-基质及细胞-分子间信息交通起重要作用。糖链可以N-连接方式(连接于蛋白质中由天冬酰氨酸、除脯氨酸外的任意氨基酸、丝氨酸/苏氨酸组成的序列子中的天冬酰胺)或O-连接方式(连接于蛋白质中的丝氨酸或苏氨酸)与蛋白质相连。N-连接与O-连接均需要一系列酶的催化。这些酶的识别与特性研究有助     

药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸的酶法合成

目的 利用在大肠杆菌中高效重组表达的O-乙酰丝氨酸(硫醇)裂解酶A(OASS-A)合成药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸,并对合成产物进行纯度及结构鉴定.方法 通过PCR扩增目的基因Cys K,并连接到pET-22b(+)载体上构建原核表达质粒,重组体转到感受态大肠杆菌BL21(DE3)中进行蛋白诱导表达,重组蛋白采用Ni2-树脂柱亲和层析纯化,利用SDS-PAGE鉴定表达纯化蛋白,通过HPLC对合成产物纯度进行检测,应用1H NMR技术对化合物进行结构鉴定.结果 成功构建了OASS-A原核表达载体,在IPTG诱导下获得了高效表达.重组酶高效合成非蛋白质氨基酸S-苯基-L-半胱氨酸.合成的化合物以晶体形式析出,采用HPLC和1HNMR技术对其结构进行了鉴定,合成产物的纯度为100％.结论 利用大肠杆菌中重组表达的OASS-A能够高效合成药物中间体S-苯基-L-半胱氨酸.     

蛋白Z的研究进展

1 概述 Prpwse 及 Eanouf 首次从牛血浆中提取出一种新的维生素 K 依赖性蛋白的糖蛋白,属于丝氨酸蛋白酶抑制物超家族成员,是由肝脏合成的一种维生素 K 依赖性 Ca~(2 )结合蛋白,命名的蛋白 z(PZ)。其相对分子质量62 ku,血浆 t 1/2约2.5 d。     

老年人皮肤局部应用17β-雌二醇可通过体内途径刺激TGF-β信号增加细胞外基质蛋白质合成

本文旨在研究老年人皮肤局部应用17β-雌二醇对细胞外基质蛋白质表达的影响。17β-雌二醇(0.01%)及其赋形剂(70%丙烯乙二醇,30%乙醇)外涂于老年人(68～82岁,8位女性和5位男性)臀部皮肤,封闭2周(3次/周)。结果发现老年人皮肤局部应用17β-雌二醇可通过体内途径显著增加I型前胶原m R NA和蛋白质的表达。另外,可引起M M P-1蛋白质水平降低,TG F-β1、TG F-βII型受体和苏/丝氨酸型受体相关Sm ad3的表达增加,而且抑制抗体产生的TGF-β1抑制了培养的成纤维细胞内17β-雌二醇诱导的前胶原合成。作者也发现弹性蛋白原、微纤维蛋白1的m R N…     

含RGDS的蜱抗凝血肽表达体系的构建

目的 人工合成含RGDS(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸)重组蜱抗凝血肽(tick anticoagulant peptide,TAP)基因,进行原核表达,获得融合蛋白,用表达的融合蛋白粗提取物进行凝血实验.方法 参照天然TAP的氨基酸序列.设计了含RGDS的编码63个氨基酸的213个碱基(含酶切位点所加的碱基),进行全基因合成后转导入大肠杆菌DH5α中.挑选阳性克隆,并进行诱导表达,检测产物的抗凝血性质.结果 PCR和核苷酸序列测定表明TAP-RGDS构建正确,在IPTG诱导下的表达产物有抗凝血活性.结论 构建了重组TAP-RGDS基因,该基凶能表达出有抗凝血活性的产物.     

酶法合成L—丝氨酸及反应液中氨基酸的分离

含ｇｌｙＡ的基因工程菌所表达的ＳＨＭＴ可催化甲醛和甘氨酸特异地合成Ｌ－丝氨酸。对酶法合成的部分条件进行了优化,并根据甲醛滴定的原理,确定了通过检测ｐＨ变化控制甲醛流加速度的方案,最终的反应液中Ｌ－丝氨酸浓度达０．２ｍｏｌ／Ｌ。反应结束后的酶反应液中同时含有甘氨酸和丝氨酸,利用国产７１７树脂获得较为理想的分离效果,丝氨酸的收率达７７％,高效液相分析表明其中不含甘氨酸等杂质。     

AcSDKP对大鼠活化HSCs增殖及分泌细胞外基质的影响

目的通过N-乙酰基-丝氨酸-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(AcSDKP)干预,观察其对活化肝星状细胞(HSCs)的增殖以及合成和分泌细胞外基质(ECM)的影响。方法大鼠原代HSCs分离、培养和鉴定后,分别给予0.01、0.1、1、10、100nmol/LAcSDKP进行干预,设立空白对照组。MTT法检测AcSDKP干预对HSCs增殖的影响;RT-PCR技术检测活化HSCsⅠ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)mRNA表达;酶联免疫法检测培养细胞上清液透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)含量。结果与空白对照组相比,1、10nmol/LAcSDKP干预显著抑制活化HSCs的增殖;1、10nmol/L及0.1～100nmol/LAcSDKP的干预,分别显著抑制HSCsColⅠmRNA和ColⅢmRNA表达;0.1、1、10nmol/L和0.1、1nmol/LAcSDKP干预可分别显著抑制培养上清液HA和LN的表达。结论本实验发现,AcSDKP可抑制活化HSCs合成和分泌ECM,并呈现一定的剂量依赖性,以浓度为1nmol/L时作用最为显著。其作用机制可能与抑制HSCs增殖而使合成和分泌ECM的HSCs数量减少有关。     

水杨酸钠对胰岛素抵抗大鼠胰岛素受体底物-1的影响

目的 探讨抗炎药水杨酸钠对胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性的影响及其作用机制.方法 分别给大鼠静脉输注脂肪乳+肝素,脂肪乳+肝素+水杨酸钠和生理盐水7 h,并在输注的最后2 h,行清醒状态高胰岛素-正血糖钳夹试验,测定血浆葡萄糖、游离脂肪酸(FFA)、胰岛素和C-肽水平,检测肝脏、肌肉中胰岛素受体底物-1(IRS-1)及307位丝氨酸磷酸化的IRS-1表达.结果 输注脂肪乳大鼠葡萄糖输注率(GIR)是输注生理盐水大鼠的45%,水杨酸钠可使GIR提高1.3倍(P<0.01).脂肪乳输注组大鼠肝脏及肌肉中307位丝氨酸磷酸化的IRS-1分别为生理盐水输注组大鼠的3倍和3.8倍(P<0.001),输注水杨酸钠,肝脏、肌肉307位丝氨酸磷酸化的IRS-1下降45%、20%(P<0.05).结论 FFA增高引起肝脏及肌肉中307位丝氨酸磷酸化的IRS.1水平增高.可能是导致胰岛素抵抗发生的机制之一,应用水杨酸钠,大鼠肝脏及肌肉组织中IRS.1丝氨酸磷酸化水平下降,胰岛素抵抗改善.抗炎药物水杨酸钠可能通过抑制FFA引起的IRS-1丝氨酸磷酸化,而发挥改善胰岛素抵抗的作用.     

慢性阻塞性肺疾患(COPD)病人血清α_1-抗胰蛋白酶含量测定

<正> α_1-抗胰蛋白酶(α_1-antitrypsin,简称α_1-AT)是由肝脏合成的一种分子量约为51000道尔顿的糖蛋白。分泌入血后,成为血浆α_1-球蛋白的主要部分。它是人血浆中最重要的蛋白酶抑制剂之一,能抑制弹性酶等多种丝氨酸蛋白酶的活性。1963年瑞典临床化学家 Laurell 和 Eriksson 等首先发现α_1—AT 缺乏与成年早期肺气肿有密切关     

PAI-1的研究进展

纤溶酶原激活物抑制物1型(Plasminogen Activator inhibitor type,PAI-1)是丝氨酸蛋白酶抑制物(serine protcase inhibitor,serpin)家族成员之一。PAI-1是血浆中主要的纤溶酶原激活物抑制物,主要由内皮细胞合成,在体内的半寿期约为7min,主要由肝脏清除。PAI-1是体内纤溶系统的主要调节因子。本文