不同潮气量机械通气对大鼠肺组织iNOS、NO的影响

目的 探讨诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及一氧化氮(NO)在不同潮气量机械通气致大鼠急性肺损伤(VILI)中的作用. 方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、小潮气量组和大潮气量组,每组各8只.用SABC免疫组化染色法检测肺组织iNOS蛋白表达,用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织iNOS mRNA表达,用硝酸还原酶法测定肺组织和血浆NO含量. 结果 与对照组和小潮气量组相比,大潮气量组大鼠肺组织iNOS mRNA及其蛋白表达水平以及肺组织和血浆NO含量均明显增JJU(均P<0.01);而小潮气量组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05). 结论 大潮气量机械通气可诱导肺组织iNOS mRNA及其蛋白高表达,产生大量内源性NO导致肺组织损伤,而小潮气量机械通气对正常肺组织无明显影响. 组化染色法检测肺组织iNOS蛋白表达,用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺组织iNOS mRNA表达,用硝酸还原酶法测定肺组织和血浆NO含量. 结果 与对照组和小潮气量组相比,大潮气量组大鼠肺组织iNOS mRNA及其蛋白表达水平以及肺组织和血浆NO含量均明显增JJU(均P<0.01) 而小潮气量组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P>0.05). 结论 大潮气量机械通气可诱导肺组织iNOS mRNA及其蛋白高表达,产生大量内源性NO导致肺组织损伤,而小潮气量机械通气对正常肺组织无     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织HMGB1表达的影响

目的观察不同潮气量机械通气大鼠肺组织高迁移率族蛋白1(HMGB1) mRNA及其蛋白的表达水平,探讨HMGB1在呼吸机相关性肺损伤(VILI)发病中的作用。方法24只雄性Wister大鼠随机分为对照组、小潮气量组和大潮气量组,分别采用原位分子杂交技术和免疫组织化学染色法检测肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白的表达水平。结果与对照组和小潮气量组比较,大潮气量组大鼠肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白表达水平明显升高(均P0.01),小潮气量组与对照组各项指标比较差异无统计学意义(P0.05)。结论大潮气量机械通气可诱导肺组织HMGB1 mRNA及其蛋白高表达;HMGB1分泌增多导致肺组织炎症反应扩大,可能是呼吸机相关性肺损伤(VILI)发生的重要因素之一。     

机械通气对大鼠肺组织中CC10表达的影响

目的探讨机械通气对大鼠肺组织中CC10蛋白表达的影响及CC10对肺炎症反应的影响。方法建立不同潮气量机械通气大鼠动物模型,分为对照组、小潮气量组和大潮气量组。通气4h后采用Western blot法测定肺组织CC10蛋白含量,计算细支气管上皮Clara细胞百分率;酶联免疫吸附法测定肺组织匀浆中TNF-α,MIP-2含量,对肺泡灌洗液行中性粒细胞计数。结果与对照组和小潮气量组相比,大潮气量组肺组织CC10表达降低,TNF-α、MIP-2升高,细支气管上皮Clara细胞百分率降低,差异均有统计学意义(P均<0.05);与对照组相比,小潮气量组上述指标无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论大潮气量机械通气引起肺组织中抗炎因子CC10表达减少,炎症因子TNF-α、MIP-2表达增加,肺损伤加重。     

呼吸机所致大鼠急性肺损伤病理学研究

目的 探讨不同潮气量机械通气大鼠肺组织的病理学变化。方法 32只Wistar大鼠随机分为对照组、小潮气量组、常规潮气量组和大潮气量组，分别在肉眼、光镜和电镜下观察各组大鼠肺组织的病理改变，测定肺湿／干重比值。结果 小潮气量组大鼠肺组织在肉眼、光镜和电镜下观察与对照组比较均无明显差别；常规潮气量组在光镜和电镜下可见肺问质水肿及炎性细胞浸润；大潮气量组肺组织不但在肉眼和光镜下有明显损伤表现，而且在超微结构上也有特殊改变。肺湿／于重比值测定结果显示，大潮气量组和常规潮气量组肺湿／干重比值与对照组和小潮气量组比较差异均有显著性（均P〈0．01）；小潮气量组与对照组比较差异无显著性（P〉0．05）。结论 小潮气量通气对正常肺组织结构无明显影响。     

TNF-α和IL-8在幼兔机械通气肺损伤炎症反应中的作用

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)在幼兔机械通气肺损伤炎症反应中的作用.方法 27只健康幼兔随机等分为对照组、小潮气量组和大潮气量组,建立给予不同潮气量机械通气的动物模型.用RT-PCR和ELISA法观察肺组织匀浆中细胞因子(TNF-α、IL-8)的mRNA表达和蛋白含量变化,同时测定髓过氧化物酶(MPO)含量和肺湿/干重(W/D)比值,并观察肺组织病理改变.结果大潮气量组机械通气后肺组织TNF-α和IL-8的蛋白含量和mRNA表达较小潮气量组和对照组明显增高(P<0.01);通气4 h后, TNF-α蛋白含量和mRNA表达达高峰;6 h明显降低,继TNF-α后,IL-8在通气6 h达高峰.大潮气量组机械通气后MPO含量和肺W/D比值较小潮气量组和对照组明显增高(P<0.01).光镜下,大潮气量组有明显肺组织损伤,小潮气量组则较轻,而对照组无明显损伤表现.结论 TNF-α和IL-8在幼兔机械通气肺损伤炎症反应中可能发挥重要作用.     

TNF-α和IL-8在幼兔机械通气肺损伤炎症反应中的作用

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNFα)和白细胞介素-8(IL8)在幼兔机械通气肺损伤炎症反应中的作用。方法27只健康幼兔随机等分为对照组、小潮气量组和大潮气量组,建立给予不同潮气量机械通气的动物模型。用RTPCR和ELISA法观察肺组织匀浆中细胞因子(TNFα、IL8)的mRNA表达和蛋白含量变化,同时测定髓过氧化物酶(MPO)含量和肺湿/干重(W/D)比值,并观察肺组织病理改变。结果大潮气量组机械通气后肺组织TNFα和IL8的蛋白含量和mRNA表达较小潮气量组和对照组明显增高(P<0.01);通气4h后,TNFα蛋白含量和mRNA表达达高峰;6h明显降低,继TNFα后,IL8在通气6h达高峰。大潮气量组机械通气后MPO含量和肺W/D比值较小潮气量组和对照组明显增高(P<0.01)。光镜下,大潮气量组有明显肺组织损伤,小潮气量组则较轻,而对照组无明显损伤表现。结论TNFα和IL8在幼兔机械通气肺损伤炎症反应中可能发挥重要作用。     

VILI大鼠血清对内皮细胞通透性的影响及其作用机制的研究

目的 研究大潮气量机械通气后大鼠血清炎性介质对内皮细胞骨架及单层细胞通透性的影响及乌司他丁的治疗作用,探讨机械通气生物伤引起肺水肿的细胞和分子机制.方法 将30只SD大鼠分成3组:正常潮气量机械通气组;大潮气量机械通气组;大潮气量机械通气 乌司他丁组.收集机械通气后的3组大鼠的血清,并将这3组血清分别作用于ECV-304细胞,观察聚合型肌动蛋白的变化,并测定血清刺激后的单层内皮细胞通透性的变化.结果 和正常潮气量机械通气相比,大潮气量机械通气大鼠血清中的炎性介质可以导致内皮细胞周边肌动蛋白带消失,细胞中央出现明显应力纤维,细胞骨架重排,而大潮气量机械通气开始时注射乌司他丁的大鼠血清对内皮细胞骨架重排影响减轻,3组机械通气后的大鼠血清作用于单层内皮细胞后,内皮细胞通透系数变化百分比(Pa%)分别为(6.95±1.66)%,(27.50±7.77)%,(17.71±4.66)%.结论 大潮气量机械通气大鼠血清中的炎性介质可诱导内皮细胞骨架中重组,应力纤维形成,增加其通透性,而乌司他丁可减轻大潮气量大鼠血清中炎性介质对内皮细胞骨架的影响,应力纤维生成减少,改善了内皮细胞的通透性.     

不同潮气量机械通气对大鼠肺组织Bax和 Bcl-2表达及凋亡的影响

目的：探讨不同潮气量（tidal volume,Vt）机械通气对大鼠肺组织Bax和Bcl-2表达及凋亡的影响。方法：将24只健康SD大鼠随机分成4组：对照组、低潮气量组、中等潮气量组和大潮气量组。对照组保留自主呼吸,其余组分别以不同潮气量（10,20,40 mL/kg）机械通气2 h,通气结束后24 h观察大鼠肺组织病理学改变、肺湿干比（W/D）、肺泡灌洗液（BALF）中白细胞计数、免疫组织化学法观察肺组织Bax和Bcl-2蛋白表达及评分、TUNEL染色情况。结果：与对照组比较,大、中潮气量组W/D值、BALF中白细胞计数、病理学评分、Bax蛋白表达及凋亡率（AI）均显著增加,而Bcl-2表达明显减少（P＜0.05）。与对照组相比,低潮气量组以上指标无明显变化（P＞0.05）。结论：低潮气量机械通气不引起肺损伤;较大潮气量机械通气引起肺损伤,可能与增加肺组织Bax和减少Bcl-2的表达,促进靶细胞凋亡有关。     

不同潮气量机械通气治疗小儿重症肺炎的临床观察

目的:探讨应用不同潮气量机械通气方式治疗重症肺炎患儿的临床效果。方法:将90例重症肺炎患儿随机分为对照组和治疗组,每组45例。采用小潮气量机械通气方式对对照组患儿实施治疗;采用大潮气量机械通气方式对治疗组患儿实施治疗,对比观察两组临床疗效。结果:治疗组肺功能复常时间和临床治疗总时间均较对照组短,总有效率明显较对照组高,不良反应发生率低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:应用大潮气量机械通气方式对重症肺炎患儿实施治疗可在短时间内改善肺功能,缩短住院时间,安全有效,值得临床推广。     

小潮气量通气治疗儿童呼吸道合胞病毒并发肺炎呼吸衰竭（附76例报道）

目的探讨小潮气量通气治疗儿童呼吸道合胞病毒并发肺炎呼吸衰竭的临床疗效及肺保护作用。方法选取儿童重症监护室2002年1月至2010年2月收治的小儿呼吸道合胞病毒并发肺炎呼吸衰竭需要机械通气治疗患儿。2002年1月至2005年1月采用大潮气量通气策略,共53例患儿（大潮气量组）;2005年2月至2010年2月采用小潮气量通气策略,共76例患儿（小潮气量组）。观察两组之间呼吸机参数、机械通气并发症及预后等指标。比较小潮气量组机械通气前、通气后6～8 h和通气后24 h的血气分析。结果小潮气量通气组的气漏发生率显著低于大潮气量通气组;小潮气量机械通气能明显改善低氧血症和二氧化碳潴留,同时避免过度通气。结论呼吸道合胞病毒并发肺炎呼吸衰竭患儿机械通气策略适宜于小潮气量,它能够降低气压伤发生。     

小潮气量通气联合允许性高碳酸血症治疗足月儿重症胎粪吸入综合征疗效分析

目的探究足月儿重症胎粪吸入综合征采用小潮气量通气联合允许性高碳酸血症的治疗效果。方法选取本院2012年2月至2015年4月收治的重症胎粪吸入综合征足月儿作为研究对象,并将选取患儿分为两组,观察组患儿实施小潮气量通气联合允许性高碳酸血症治疗,对照组患儿实施传统的大潮气量与保证正常的二氧化碳治疗。结果两组患儿通气1d后,两组患儿在PaO_2与SaO_2的对比差异不显著(P0.05);两组患儿在PH、OI、a/APO_2以及Pa CO_2的对比差异显著(P0.05);观察组患儿的氧暴露时间与机械通气时间明显少于对照组(P0.05)。结论与传统的大潮气量治疗相比,小潮气量通气联合允许性高碳酸血症对月儿重症胎粪吸入综合征的治疗效果显著,可使患儿的血气状况得到有效改善,使氧暴露时间与机械通气时间明显降低,是一种有效的治疗方法,在临床上值得进一步推广与应用。     

HMGB1/TLRs 信号通路在大鼠机械通气肺损伤中的作用

目的：探讨高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体(TLRs)信号通路在大鼠机械通气肺损伤(VILI)中的作用机制。方法32只健康SD大鼠随机分为4组：正常对照组( N组)不行机械通气,保留自主呼吸;高氧流量组( HN组)氧流量7 L/min;小潮气量机械通气组( LV组)潮气量7 ml/kg;大潮气量机械通气组( HV组)潮气量30 ml/kg。通气4 h后处死动物取肺组织,HE染色观察各组肺组织损伤情况,检测支气管肺泡灌洗液( BALF)中白细胞( WBC)计数、肺湿重干重比值( W/D);ELISA法检测BALF中IL-6、TNF-α、HMGB1水平;Western blot法检测肺组织HMGB1、TLR2、TLR4蛋白的表达。应用单因素方差分析及两样本均数t检验进行不同组间的比较。结果与N组相比,HV组及HN组大鼠肺W/D, BALF中WBC计数,BALF中HMGB1、TNF-α、IL-6水平以及HMGB1、TLR2、TLR4蛋白表达均显著增加,差异有统计学意义(P<0．05);LV组上述各指标与N组相比差异无统计学意义。结论大潮气量机械通气及高氧流量通气均可引起大鼠肺组织急性炎症反应,其机制可能与HMGB1/TLRs信号通路激活有关。     

抑制桩蛋白磷酸化对机械通气所致肺损伤的效应

目的研究抑制桩蛋白(Paxillin)磷酸化对机械通气相关性肺损伤的效应。方法60只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、保护性通气组、大潮气量通气组和PP2抑制剂组,每组15只。正常对照组仅做气管切开;保护性通气组进行保护性机械通气2 h,大潮气量通气组进行大潮气量机械通气2 h;PP2抑制剂组通气前1 h腹腔注射酪氨酸蛋白激酶抑制剂PP2并进行大潮气量机械通气2 h。正常对照组在自然吸气2 h,其余组在机械通气结束时处死,光镜观察肺组织病理学改变并进行弥漫性肺泡损伤(DAD)评分;测定髓过氧化物酶(MPO)活性;计算肺湿/干重比值(W/D);酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平;伊文思蓝法检测肺血管通透性;蛋白免疫印迹法检测磷酸化桩蛋白(p-Paxillin)和Paxillin表达情况;TUNEL法检测原位细胞凋亡。结果大潮气量通气组和PP2抑制剂组的DAD评分、伊文思蓝渗出量、W/D、MPO及TNF-α差异均有统计学意义(P0.05)。各组细胞原位凋亡率从高到低排序:大潮气量通气组PP2抑制剂组保护性通气组正常对照组。p-Paxillin的表达量在大潮气量通气组中最高,与其他组比较差异有统计学意义(P0.05)。保护性通气组、大潮气量通气组和PP2抑制剂组间Paxillin的表达量差异无统计学意义(P0.05)。结论抑制Paxillin磷酸化可以明显改善机械通气相关性肺损伤。     

乌司他丁对呼吸机所致肺损伤大鼠体内炎性因子的影响

目的观察乌司他丁对呼吸机所致肺损伤大鼠体内炎性因子的影响。方法24只SD大鼠随机分为对照组、大潮气量通气组和乌司他丁处理组，每组8只。大潮气量通气组和乌司他丁处理组接受机械通气，通气参数均设为：潮气量30ml／kg，呼吸频率40次／min，吸呼比1：3，吸入氧浓度21％。机械通气4h后分别测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中的蛋白含量、白细胞总数以及血清和BALF中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、IL-6和IL-10的水平。结果大潮气量通气组大鼠BALF中蛋白含量、白细胞总数以及血清和BALF中TNF-α、IL-1β、IL-6水平均显著高于对照组和乌司他丁处理组，但IL-10水平则显著降低。乌司他丁处理组与对照组比较上述指标差异无显著性。结论乌司他丁可以抑制大潮气量机械通气大鼠体内促炎因子的产生，对呼吸机所致的生物伤有预防作用。     

机械通气对大鼠肺泡巨噬细胞内毒素CD14受体表达的影响

目的：探讨机械通气对大鼠肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages，AM)内毒素受体CD14表达的影响。方法：清洁级成年雄性SD大鼠18只，随机分为自主呼吸组 （A组）、小潮气量机械通气组（S组）和大潮气量机械通气组（L组）3组，每组各6只。实验4?h结束，放血处死大鼠。测定大鼠肺病理形态学积分、肺组织湿/干重比（W/D）、支气管灌洗液（BALF）炎性细胞数和肺蛋白透性系数。RT PCR测AM上内毒素受体CD14的表达，免疫组化法测BALF里AM上的CD14表达。结果：与A组比较，L组肺病理形态学积分、W/D、WBC和肺蛋白透性系数、BALF里AM的CD14蛋白表达和CD14基因表达显著升高(P＜0.01)，S组改变差异无统计学意义(P＞0.05)。结论：大潮气量机械通气导致大鼠的肺部损伤，并使AM上CD14表达明显上调。小潮气量机械通气可避免上述改变的发生。     

小潮气量联合高水平呼气末正压通气治疗婴幼儿呼吸窘迫综合征效果观察

目的:分析小潮气量联合高水平呼气末正压通气治疗婴幼儿呼吸窘迫综合征的临床效果。方法:选取40例婴幼儿呼吸窘迫综合征患儿,按住院顺序分为治疗组和对照组,各20例。对照组患者采用大潮气量联合高水平呼气末正压通气治疗,治疗组患者采用小潮气量联合高水平呼气末正压通气治疗。对比分析两组患者临床治疗效果。结果:治疗组机械通气时间、住院时间较对照组短,死亡率较低,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后治疗组患者血气水平显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:小潮气量联合高水平呼气末正压通气治疗婴幼儿呼吸窘迫综合征临床效果显著,值得临床推广应用。     

十年循证与ARDS进展

循证医学与ARDS机械通气策略的进步 [潮气量的设置] 小潮气量通气降低ARDS患者病死率 大量肺泡塌陷是急性呼吸窘迫综合征( ARDS)特征性的病理生理改变,机械通气过程中常规或大潮气量通气易导致肺泡过度膨胀,加重肺及肺外器官损伤.Amato和ARDSnet完成的潮气量对ARDS患者预后影响的2项随机对照试验研究,对于ARDS机械通气具有里程碑式的意义,研究证实小潮气量通气可降低ARDS患者的病死率.基于此,中外指南均提出ARDS应采用小潮气量通气为基础的肺保护性通气策略.     

小潮气量联合肺复张在重症肺炎肺损伤患儿中的应用

目的:观察小潮气量联合肺复张策略(RM)治疗重症肺炎肺损伤患儿的临床有效性及安全性。方法:选取2013年5月-2015年7月本院PICU救治的接受机械通气的42例重症肺炎并肺损伤的患儿作为研究对象,按照随机数字表法将其分为试验组和对照组,每组21例。试验组在入院24 h内给予小潮气量(VT:6~8 m L/kg)机械通气并RM;对照组给予机械通气(VT:8~10 m L/kg)但不进行RM。比较分析两组患儿通气前后血流动力学、呼吸力学、血气变化、机械通气时间、吸氧时间、住院时间、撤机成功率及并发症发生率。结果:试验组21例患儿在小潮气量基础上共进行肺复张操作73例次,RM后5、15、60 min的PIP、R、PEEP、Fi O2、Paw均明显低于RM前水平(P0.05),VT、Sp O2均较RM前明显增高(P0.05);R、MAP在RM前后稳定(P0.05)。两组血气分析较通气前均明显改善(P0.05);两组通气后的Pa O2/Fi O2、Cdyn、Wobv比较差异均有统计学意义(P0.05)。试验组的机械通气时间、吸氧时间和住院时间均明显短于对照组,并发症发生率明显低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论:小潮气量联合RM治疗重症肺炎肺损伤患儿安全、有效,值得临床推广。     

慢性阻塞性肺疾病合并呼吸衰竭小潮气量机械通气治疗

目的 探讨小潮气量肺保护性机械通气治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)合并Ⅱ型呼吸衰竭的疗效和并发症.方法 将114例COPD合并呼吸衰竭患者在综合治疗的基础上分别给予小潮气量(57例)和常规潮气量通气(57例),观察两组患者机械通气期前后动脉血气分析pH、PaO2、PaCO2、SaO2及上机过程中出现的并发症.结果 两组患者在存活率方面差异无统计学意义,小潮气量组气压伤发生率、机械通气时间、住院时间明显少于常规通气组.结论 对于COPD合并呼吸衰竭患者,选用小潮气量进行机械通气,可以减轻机械通气相关性肺损伤,缩短机械通气时间和住院时间.     

不同潮气量通气对大鼠呼吸机相关性肺损伤模型的影响

目的通过建立过度通气导致呼吸机相关性肺损伤（VILI）大鼠模型，评估不同潮气量对肺损伤的影响。方法清洁级SD大鼠随机分成对照组（A组）、正常通气组（B组）、过度通气小潮气量[潮气量（VT）=20ml／kg]组（C组）和过度通气大潮气量（VT=40ml／kg）组（D组）。机械通气组中每只大鼠采用经口气管插管。观察各组通气1、2和4h肺病理学改变、肺含水量、肺泡灌洗液（BALF）中自细胞总数（WBC）、总蛋白（Tp）、乳酸脱氢酶（LDH）含量的变化，以及两组过度通气组大鼠不同时程机械通气后3d内的死亡率。结果与A组和B组相比，两组过度通气组大鼠的肺组织湿／干比值及肺损伤评分均明显升高，BALF中的WBC计数、LDH、Tp含量显著性增加，且D组BALF中WBC计数、LDH、Tp含量较C组更高，并随着通气时间延长而增加。两组过度通气组大鼠生存率无明显差异。结论过度通气会导致严重的VILI。潮气量40ml／kg通气4h更能可靠复制VILI大鼠模型。